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北京的患者手淫肾虚怎么办
来源：本站
日期： 16:49:43
作者：本站
男性肾虚虽然不是什么大病、重病，但是对男性的影响却不小，危害甚大，导致男性肾虚的原因有很多。
主要有以下几点：
(1)、压力过大：随着人们生活水平的不断提高，男性肩头的压力也越来越大，这导致很多男性精神疲惫，食欲下降、睡眠不好、乏力、烦躁等肾虚症状。
(2)、不良生活习惯：吸烟、酗酒、没有规律的作息、过度劳累等不良生活习惯，都可导致男性肾虚的发生。
(3)、性生活过频：男性过度手淫、性生活过频可直接对男性体内的肾精造成影响，导致肾虚的发生。
(4)、环境恶化：现代社会，环境、空气、食品等环境中的大量有毒物质进入体内，而且辐射又过大，导致肾脏内的肾精受到杀害，出现肾虚。
男性肾虚的症状
中国人民解放军海军总医院泌尿外科专家说，男性肾虚在医学上被分为四个方面，一是肾气虚;二是肾经亏虚;三是肾阴虚;四是肾阳虚。男性肾虚的主要临床症状有以下几点：
(1)、阳痿早泄：男性肾虚患者，出现性功能降低，性兴趣降低，性欲降低，阳痿或阳物举而不坚，遗精、滑精、早泄等性功能衰退症状。显微镜检查可见精子减少或精子活动力减低，严重的话，导致不育。
(2)、脑力衰退：记忆力下降，记忆力减退，注意力不集中，精力不足，工作效率降低。
(3)、情志不佳：常常情绪不佳，情绪常难以自控，头晕，易怒，烦躁，焦虑，抑郁等。
(4)、意志薄弱：缺乏自信，信心不足，缺乏自信，工作没热情，生活没激情，没有目标和方向。
(5)、泌尿综合症：男性肾虚患者，出现尿频，尿等待，小便清长等症状。
过度手淫会造成不良后果：
1,在生理方面会造成泌尿生殖是前列腺液系(如慢性前列腺炎引起尿频、尿末滴白、下腹及会阴部不适、腰酸无力、性欲减退、阳痿、早泄、不射精)等疾病.
2,在心理方面会造成神经衰弱(如意志消沉，记忆力减退，注意力不集中，理解力下降，失眠，多梦，头昏，心悸)等疾病。而且,在心理上受到的伤害远比生理上的伤害大得多.建议一定要把握好"适度"的原则希望能够接受。
上是对“手淫肾虚”的介绍。相信通过我院专家的介绍，相信大家都明白了。如您有其他男科疾病方面的问题要咨询，点击在线咨询，随后就可与我院医生在线交流。最后祝您身健康!
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密 级: 单位代码: 84502 分类号: 学 号: 210 中国中医科学院2005级硕士研究生学位论文路氏滋燥汤对干燥综合征小鼠免疫病理的影响申 请 人: 孔 丽专 业: 中西医结合基础研究方向: 自身免疫病及中医药防治基础研究导 师: 徐世杰 研究员中国中医科学院中医基础理论研究所2008年5月 北京原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是在导师的指导下独立完成的,文中除注明引用的内容外,不包含任何其他已经发表的科研成果.对本文研究作出重要贡献者,已在文中以明确方式表明.本声明的法律责任完全由自己承担.论文作者签名_____________ 导师签名_____________ 日期_____________关于学位论文使用授权的声明 本人完全知道中国中医科学院有关保留使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅.本人授权中国中医科学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印,缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文. 保密论文在解密后应遵守此规定论文作者签名_____________ 日期_____________目 录英文缩写表干燥综合征中医药治疗概况摘 要一 目的: 从路氏滋燥汤对诱导型干燥综合征Sj gren\'s syndrome, SS小鼠免疫学,病理学影响的角度,探讨干燥综合征发病机理及路氏滋燥汤治疗干燥综合征的作用机制.二 方法: 选用C57小鼠为实验对象,用同种异体小鼠的颌下腺制备抗原,加CFA完全弗氏佐剂,加白百破疫苗给动物多点注射,诱导SS干燥综合征动物模型.造模第二天开始给治疗组小鼠以路氏滋燥汤治疗,每天一次,空白组和模型组给予等量蒸馏水灌胃.两周后处死动物,测量各组小鼠的体重,最后一周的饮水量;用流式细胞仪检测各组小鼠颌下腺细胞凋亡率,用免疫组化法测各组小鼠颌下腺白细胞介素-10interleukin-10,IL-10,干扰素-rinterferon-r,IFN-r ,Fas及Fasl 的含量;同时光镜下观察各组动物颌下腺的病理变化.三 结果: 一处死前动物体重测量结果:空白组体重和其他三组有明显差异P佐剂CTL Cytotoxic T lymphocytes 细胞毒性T细胞CD Cluster of differentiation 分化群 FCM Flow cytometry 流式细胞术IL Interleukin 白细胞介素IFN Interferon 干扰素PBS Phosphate-buffer saline 磷酸缓冲液溶液S Standard deviation 标准差SS Sj gren\'s syndrome 干燥综合征Th T helper cell T辅助细胞文献综述1:干燥综合征中医药治疗概况 干燥综合征Sj gren\'s syndrome,简称ss是一种以泪腺,唾液腺等外分泌腺为靶器官的慢性自身免疫疾病.目前一般认为由于自身免疫的过度应答反应,造成大量淋巴细胞,浆细胞浸润,使腺细胞破坏,功能丧失,并可累及其他多器官,多系统病变.近年来,本病发病率呈明显上升趋势,居自身免疫性疾病第二位,我国发病率为0.29%～0.77%[1].该病的发生以40岁以上女性居多,男女之比为1:9[2].本病临床表现复杂多样,其病因及发病机理尚不十分明确,西医治疗多采用免疫调节剂与糖皮质激素,疗效欠佳.中医药治疗本病,能有效改善症状体征且副作用少,具有明显的优势.本病在中医文献中无相应的病名记载,但就其临床表现可归属于\"燥证\",\"燥痹\",\"燥毒\",\"虚劳\"等范畴,现就近20年来有关中医药治疗干燥综合征的研究进展综述如下.病因病机 目前西医对SS的病理因素,发病机制尚不明确,现代医学一般认为与免疫反应,病毒感染及遗传易感三大因素有关.中医对本病的认识始于《内经》,有\"燥胜则干\",\"燥者濡之\"的论述.金元时期刘完素在《素问玄机原病式》中补充了\"诸涩枯涸,干劲皴揭,皆属于燥\"的病机.本病之病理机制错综复杂,常导致多脏器多系统损害,脏腑气血亏虚,然而究其根本,不外乎燥,瘀,虚三个方面. 潘氏[3]认为本病口眼干燥乃为表象,而阴虚津亏是其本质.马氏[4]认为阴虚津亏之源在于肾之精血不足.林氏等[5]报道本病的发病与遗传有关,而肾为先天之本,主藏精,调节一身之阴阳平衡,各脏腑之阴均赖其滋养.杨氏[6]认为此证除一派内燥证外,多兼神疲乏力,纳少便溏等脾气不足证.故究其根本当属气阴两虚之候.董氏[7]对此证患者进行血液流变学研究,测定结果表明,此证患者多存在着高免疫球蛋白血症,其全血黏度低切变率,血沉与红细胞聚集指数等各项指标高于健康组.徐氏等[8]研究发现此证患者存在微循环及不同程度血液浓,黏,凝,聚改变,即中医所说的血瘀证候.燥邪入客日久,灼伤津血而成瘀,瘀血阻滞气机,津液不能随气升发,燥象愈炽,如此循环反复,故成燥痹.马氏[4]认为外邪致燥,并非专指燥邪,五气均可致燥,乃正虚感邪致燥.杨氏[6]认为该病与\"春初温升\",\"夏日炎炎\"及\"秋深初凉,西风萧杀\",或\"久晴无雨,秋阳似曝\"等异常气候有关,为风热燥邪侵犯人体,肺多上受,津液耗损所致.傅氏[9]认为燥毒非外邪,多见于阴虚阳亢之质,可由金石药毒所伤而致.陈氏等[10]认为阴虚体质,饮食不节,烦劳伤阴,或外感病邪,热化伤阴,阴虚则燥,积燥成毒.俞氏等[11]认为本病的发病是由气阴两虚所致,脾气虚和肝肾阴虚引起的津液虚衰和输布异常是发病的关键.柯氏[12]否认内燥是致病因素,认为内燥就是对津亏血燥证的简要概括,故立\"内燥非邪论\".张氏[13]据40例干燥综合征患者的舌象以舌质红绛,干燥,苔少为主要表现,指出阴虚津亏为本病发病关键.赵氏等[14]认为本病是因虚劳致病,随着病情的发展,可由一脏虚损导致多脏的虚损.章氏[15]认为本病的致病因素为湿热及风热,此系热邪阻遏,气机不畅,津不上承所致,以舌苔白腻,薄黄腻或黄厚腻为舌象见征.辨证论治 遵《内经》\"燥者润之,濡之\"的法则,治疗多用甘润之品以缓其燥.孟氏[4]认为,若仅以润燥难以获效,只有气阴兼补,方可使燥证得缓而获得满意疗效,治拟养阴益气,生津润燥;同时,治燥尚须兼固脾肾,选用增液汤滋肾水,益胃阴及芪淮生脉饮用芪以补脾肺之气;山药既补脾肾之气,又益脾阴;生脉饮气阴双补加天花粉,玉竹,乌梅等.谭氏[16]根据其主症和兼症提出养胃生津,滋肝明目,益气养血,补肾填髓,活血化瘀润燥,及出现兼证可合用清热凉血,软坚散结,蠲痹通络法.杨氏[6]根据临床症状将本病分为三种证型:阴虚内燥证,方以一贯煎合六味地黄丸加减;气阴两虚证,以一贯煎合补中益气汤加减;脾阳虚损证,用附子理中汤合益胃汤.苑氏[17]用三段三方法,将疾病的治疗分三个阶段,第一阶段用导赤散和增液汤加减以清上焦,达到生津润燥的目的;第二阶段用益胃汤治疗中焦,以养胃阴和胃气,使津生热除;第三阶段用六味地黄丸加减调整下焦肾阴不足,使肾水蒸化,津液得以上承.蒋氏[18]认为本病大抵以虚证常见,其中以阴虚或气阴两虚证最为常见,治以滋阴清热,生津润燥,或兼益气活血为主.脾胃阴虚者,可用益胃汤或玉女煎加减;肝阴虚者,可用一贯煎加减;肾阴虚者,可用知柏地黄汤加减;气虚明显者,治以健脾益气为主,方用补中益气汤或参苓白术散加减.兼血瘀者加桃红四物汤或其他活血化瘀药.痹证明显者,治以祛风除湿,活血通络为主,兼养阴,补血,益气以扶正.张氏等[19]认为本病的发病以燥毒为本,津亏为标,需标本兼顾,才能得到满意的疗效.治疗当遵循清热解毒治本重甘寒凉润,忌苦寒伤阴,滋阴润燥治标,并注意配合活血化瘀,有机调理脏腑多用黄连阿胶汤加减.吕氏[20]根据治病必求于本的原则,选用健脾益气生津之法治疗,以太子参,白术,茯苓,山药,白扁豆健脾益气为主,辅以石斛,黄精,玉竹滋养脾阴,益胃生津;天花粉生津止渴,降火润燥;甘草健脾养胃,调中解毒.谭晨[16]经长时间临床验证,归纳出八种相应疗法:①养胃生津润燥法是口干燥证的主要治法,常用沙参麦冬汤,增液汤加味;②滋肝明目润燥法是眼干燥证的主要治法,主方杞菊地黄丸等;③补肾填精润燥法适用于各型燥证,补肾阴多选用六味地黄丸,左归饮为基本方;④益气养血润燥法是燥证兼气血虚的治法,可于润燥方中加入甘平益气药,亦可选用气阴双补药;⑤活血化瘀润燥法适用于各型燥证,常用方如验方活血生津润燥汤,大黄虫丸等;⑥清热凉血润燥法用于燥证兼有热象者,可选用黄连解毒汤合沙参麦冬汤或用清营汤加减;⑦化痰软坚润燥法用于燥证而兼痹证者,方如加味消瘰丸等合用滋阴剂;⑧蠲痹通络润燥法适用于燥证而兼痹证者,早期用沙参麦冬汤或杞菊地黄丸加减,中晚期可合用益肾蠲痹丸.冯建华[21]将本病分为五型:①肺胃阴伤,方选桑杏汤加减;②肝肾阴虚,方选杞菊地黄丸,左归丸,一贯煎化裁;③脾肾阴虚,方选益胃汤,生脉散,六味地黄丸加减治之;④脾胃阳虚方选补中益气汤,理中汤,参苓白术散加减;⑤气滞血瘀,方选血府逐瘀汤,桃红四物汤加减.王鹏宇等[22]将SS分为内,外燥.内燥包括两型:津液气化,敷布失常,方用五苓散,半夏泻心汤或桂枝汤随证化裁;精血亏损,失于滋荣,方用自拟苁蓉龟杞汤或丸.外燥包括两型:外感燥邪,兼夹风热,方用自拟疏风解毒银翘汤;风寒湿痹,化燥伤阴,方用自拟除痹润燥汤.专方专药 秦氏[23]认为\"燥必入血\",故治疗时不能单纯强调滋阴生津,活血化瘀亦至关重要,采用院内自制\"润燥灵胶囊\",加活血养阴之中药加减治疗,取得满意疗效.胡氏[24]将本病患者60例分为两型,气阴两虚,燥毒内滞型用增液Ⅰ号黄芪,黄精,生地黄,葛根,玉竹,石斛,天冬,丹参;气血两虚,脉络失和型用增液Ⅱ号黄芪,黄精,山药,花粉,生地黄,鸡血藤,金刚刺,鹿衔草,治6个月,总有效率为96.7%.杜氏[25]用自拟益气养阴润燥汤加减方中重用黄芪,白术,山药,太子参获理想疗效.廖氏[26]以门冬清肺饮加减麦冬,沙参,玄参,生地黄各25g,黄芪,太子参各20g,葛根,乌梅,五味子,当归,知母各10g治疗32例干燥综合征,4周为一疗程.结果:治愈21例,好转9例,无效2例.张氏[27]用自拟益气养阴方治疗本病36例取得很好疗效,方中以黄芪,党参,白术,五味子以益气健脾,气充则津行;百合,生地黄,知母,天冬,麦冬,白术,枸杞,菊花,沙参,当归以养阴生津,津充则燥解;玉竹,石斛益肾润燥.赵氏等[28]用加味引火汤熟地黄30～120g,巴戟天9～30g,麦冬12～20g,茯苓,五味子各6～9g,石斛,沙参各15～30g随症加减治疗干燥综合征15例,每日1剂水煎服,1个月为一疗程.结果:显效6例,有效8例,无效1例.周氏[29]用甘温除热法治疗15例,方选桂附地黄丸加减,总有效率86.6%.陈氏等[30]以清燥救肺汤合大黄虫丸治疗本病26例,每日1例,总有效率为88.5%.陈一峰等[31]采用清燥救肺汤合大黄虫丸治疗26例患者,总有效率88.5%,亦明显高于对照组58.3%.王慧等[32]运用润燥合剂治疗30例患者,药物组成:生黄芪,当归,天花粉,石斛,麦冬,王不留行,炮穿山甲,漏芦,三棱,莪术等,服药20～40剂,病情控制后,改为丸剂长服;对照组10例,用人工泪液滴眼,同时服用左旋咪唑.结果治疗组治愈20例,好转9例,无效1例;对照组好转4例,无效6例.王心光等[33]采用养阴清肺汤和清开灵治疗20例,基本方剂:白芍,牡丹皮,甘草,薄荷,生地黄,玄参,麦冬等,阴虚或瘀血者服用以上药物的同时用清开灵液40ml入5%葡萄糖250ml中静脉点滴,日1次,15 d为1个疗程,总有效率达95%.廖承建[26]以麦冬清肺饮加减治疗32例患者,方药组成:麦冬,沙参,玄参,生地黄,黄芪,太子参,葛根,乌梅,五味子,当归,知母等,对照组用0.5%羧甲基纤维素液或金霉素眼膏点眼,口服必嗽平,生理盐水漱口.2周为1个疗程,连续用药2个疗程,结果治疗组治愈21例,好转9例,无效2例;对照组好转3例,无效8例.周小平[34]报道,采用桂附地黄丸加减治疗15例患者,药用:肉桂,附子,熟地黄,泽泻,牡丹皮,山药,茯苓,山茱萸,随证加减,15次为1个疗程,总治愈率86.6%.赵振兴等[35]采用加味引火汤治疗15例,基本方:熟地黄,巴戟天,麦冬,茯苓,石斛,沙参,五味子等,30d为1个疗程,总有效率93.3%.王慕虹等[36]运用自拟益气生津汤治疗12例患者,基本方为黄芪,党参,白术,麦冬,生地黄,玄参,石斛,沙参,当归,白芍,熟地黄,女贞子等,随证加减,30剂为1个疗程,总有效率83.3%.中西医结合治疗 向氏等[37]以雷公藤糖浆或片剂及红藤糖浆口服,同时配以丹参针剂肌肉注射治疗19例,观察期半年～2年.结果显效9例,好转10例.唐氏等[38]用自拟方沙参,玄参,天门冬,麦门冬,天花粉,茯苓,甘草,鲜石斛外加左旋咪唑治疗36例患者,疗程为3个月,结果总有效率为86.11%.赵氏等[39]用左归饮化裁配合更年康,维生素C,复合维生素B治疗24例,经治4～6个月,显效8例,有效13例,无效3例.马氏等[40]采用养阴生津液花粉,茯苓,党参,沙参,玄参,天麦冬,石斛治疗20例患者,水煎服,每日2次,3个月为1疗程;同时配合西药左旋咪唑,浓维生素AD或浓鱼肝油滴剂口服,并对症抗风湿治疗.结果治愈1例,好转13例,无效6例,总有效率70%.邱承林[41]用杞菊地黄丸,雷公藤片,部分重症患者配合丹参液静滴,西药用螺旋霉素,泼尼松口服,局部对症治疗用1%甲基纤维素与氯霉素合剂滴眼,庆大霉素腮腺注入,治疗SS18例,总有效率94.4%.李慧等[42]用自拟方玉竹,天冬,麦冬,桃仁,石斛,枸杞子,生地黄,熟地黄,太子参,黄芪配合胸腺肽4mg肌注,隔日1次,3个月为1个疗程.治疗SS10例,总有效率90%,随访2年未发现明显不良反应者.唐云平等[43]亦用自拟方沙参,玄参,天冬,麦冬,天花粉,茯苓,党参,甘草,鲜石斛配左旋咪唑口服,疗程3个月,总有效率为86.11%.赵东鹰等[44]用杞菊地黄汤加石斛随证加减,急性发作阶段采用口服泼尼松,氢化可的松眼药水点眼,硫酸软膏素保护角膜,含漱1%～2%枸橼酸或2%甲基纤维素.治疗SS28例,总有效率89.3%.赵敦友等[45]用左归饮化裁治疗以肝肾阴虚为主,兼有他症的SS24例,合服更年康,西药给以维生素C及复合维生素B,所有患者在开始治疗前7～10 d均用0.2%洗必泰溶液,2%碳酸氢钠溶液交替含漱,疗程4～6个月,显效8例,有效13例,无效3例.针灸治疗 韩氏等[46]采用针刺督脉十穴和肾经二穴的方法取穴:大椎,陶道,身柱,四椎下,神道,灵台,至阳,八椎下,筋缩,中枢,涌泉,太溪,治疗原发性干燥综合征6例,旨在调理督脉之气上承肾水,共达濡润脏腑之功,结果获效良好.黄氏等[47]将胸腺肽5mg加入注射用水2ml,每次取双侧足三里穴进行穴位注射,每穴推入药液1ml,每周1次,10次为1个疗程.共治24例,显效12例,有效7例,无效5例,总有效率79.17%.此法通过经络发挥药物的免疫调节作用,可以有效的提高药物利用率.肖氏[48]采用针药结合法治疗干燥综合征1针灸处方:方用滋阴降火生津止渴方加减.穴取大椎,风池,百会,上星,迎香,阙上,攒竹,四白,颊车,下关,廉泉透海泉,金津,玉液,合谷,液门,足三里,三阴交,照海,太溪.针用平补平泻法,留针30 min,每隔10 min行凤凰展翅手法1次,每日针治2次,以8日16次为1个疗程.2穴位推拿:风池,攒竹,四白,太阳,阙上,迎香,下关,颊车,颧髎,承浆,廉泉诸穴,以推拿,按摩,揉压等手法为主,每次施术15 min,1日2次.经针药并用结合推拿,按摩,心理疏导等综合施治1个疗程后,症状显著好转,患者的眼泪,鼻涕,唾液,均有分泌,随之其口渴,咽干等症状亦有所改善.经治第2个疗程后,症情更有起色,腮腺,舌下腺等腺体分泌功能日趋复常,食欲倍增,心胸舒畅,面容红润,展现笑颜,按脉有力舌红润有津.为了巩固疗效,又治1个疗程,以善其后.共治疗25 d,计针灸48次,服中药汤剂23帖,六神丸25支,而诸症消失,霍然痊愈.临床,实验研究 董振华等[49]通过对60例SS患者血液流变学检测及养阴生津中药治疗效果观察,结果表明,原发性干燥综合征PSS患者的全血黏度低切变率,血沉与红细胞聚集指数各项指标,均明显高于健康对照组,说明本病血液黏滞性升高主要是由于红细胞聚集性增强所致.而采用养阴生津中药对其中22例PSS患者治疗后,血浆黏度明显下降,提示养阴生津中药具有纠正血浆黏度异常的作用.施荣山等[50]运用津血源胶囊对治疗SS进行了实验研究,结果显示,津血源胶囊可明显改善阴虚小鼠的虚弱症状,保护阴虚小鼠免于死亡.同时使阴虚小鼠体重,进食量和进水量较模型对照组明显改善;还可使家兔的唾液分泌有显著增加,泪流量明显增多,气管内酚红含量明显增加,说明津血源胶囊具有显著的养阴生津作用.赵瑞芳等[51]使用中药加转移因子治疗SS20例,约70%病例有效,除实验室免疫指标外,用99m锝腮腺功能检查对比治疗前后图形变化,随访5个月～13年.结果显示,有效病例在腮腺浓集指标,特别是排泌指标有改善.而99m锝的吸收率反映了唾液腺的功能状态,故99m锝腮腺功能检查可作为SS的重要疗效指标,并能提示患者的预后.孙晓平等[52]观察了用中药活血生津丸治疗38例SS患者T细胞亚群的变化,结果表明,用活血化津丸治疗后,T8水平及T4T8比例恢复正常.推论该病的自身免疫状态与T4T8比例失衡有关,提示该药的治疗作用在于调整了这种失衡状态. 三,结语中医治疗干燥综合征有很大的优势,其通过辨证施治调节机体免疫力及各脏腑间的功能,有效防治并发症;与西药合用可增加疗效并降低副作用;治疗方法多样,可改善局部及全身症状,并取得稳定的远期疗效.但目前的临床和科研还缺乏大样本的研究,且各医家诊断入选和疗效标准不一致,有待进一步深入研究和规范操作.此外,临床,实验研究非常有限,对细胞因子TNFα,IL-6等及其受体表达的动态变化以及新近认为对SS较为敏感的黏附分子ICAM-1等[33]方面的研究尚未涉及或涉及不够;传统的中医针灸,外治等方法的临床研究亦少见报道.因此,应该制定统一的分型方案和标准,选择有效方药,进一步从细胞和分子免疫学角度探讨中医治疗SS的机制,为SS的发病机制提出合理的解答,并为寻求中医药治疗SS的新途径和研制新药提供理论基础和科学依据.参考文献[1] 蒋明,朱立平,林孝义,主编.风湿病学[M].北京:科学出版社,[2] 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Immunol,～574 前 言干燥综合征Sj\' gren Syndrome, SS是一种以侵犯唾液腺,泪腺等外分泌腺体为主的慢性炎症性自身免疫疾病.因其表现以干燥为主故命名为干燥综合征.患者常以明显的口眼干燥,反复发作的腮腺肿大及关节疼痛等为主要临床表现.同时病变可以扩展到腺体外的各个系统及内脏如大脑,肌肉,肺,肾,神经,皮肤,血液系统,消化系统等,造成全身性损害,危害人体健康,甚至危及生命.据报道[1],本病在西方国家发病率占风湿病中第2位,可达0.5%;在我国虽没有完整的统计学资料,但据北京协和医院在对万余人群的临床调查中发现,本病的患病率为0.77%~0.29%[2].该病的发生以30~60岁女性居多,男女之比1:9[3].西医学对其病因及发病机理尚不清楚,无根治方法,主要采用替代和对症处理皮质类固醇激素和免疫调节剂,但其副作用多且疗效不肯定.目前通过中医药治疗,对缓解病人症状,提高患者生活质量有着重要意义.中医学中尚无与之相对应的病名,大多数医家根据该病\"燥像丛生\"的临床表现将其归入\"燥证\"范畴.本病的病因尚不十分明确,现代医学认为本病发病与遗传因素,免疫学异常,内分泌改变及病毒感染等因素有关,认为主要有以下两方面[4]:1在易感基因的背景下,外部因素如病毒等的参与导致外分泌腺上皮细胞过度凋亡并表达自身抗原;2自身抗原吸引淋巴细胞侵入靶器官导致第二阶段器官明显和持久的损伤.其中趋化因子在外分泌腺的高表达引起淋巴细胞的侵入,直接损伤外分泌腺使其总体功能低下,或因肿瘤坏死因子α,白细胞介素,MMP,自身抗体等阻断乙酰胆碱对腺体分泌信息的传递而引起单个外分泌腺上皮细胞的功能损伤,导致唾液分泌减少.治疗上,目前对于单纯的干燥症状多采用对症治疗的方法,当合并有内脏损害时采用激素及免疫抑制剂治疗,其他药物如羟氯喹以及新研发的口服胆碱酯酶受体激动剂等药物的疗效尚不肯定[4]. 在古代的中医学文献中虽无明确的病名提出,但在20世纪80年代初,当代著名的中医药学家路志正教授就依据其临床表现和病机特点而最早提出了\"燥痹\"的命名,认为本病病因与传统所倡的\"风寒湿三邪合而为痹\"有所不同,而主要系燥邪外燥,内燥损伤气血律液而使阴津耗损,气血亏虚,血行失畅,瘀血痹阻,痰凝聚结,脉络不通所致的机体多系统,多脏器损害之病证.同时期治疗也与以往的辛温发散法不同,而是有着其自身的特点[5,14,15].此后,诸多医家也对此进行了不断的探索和临床实践,并不断地总结其内在的规律.1.主要病因病机 目前认为SS的病因病机复杂,非单一因素所致,但总不越外感,内伤两方面:其内因于本虚,与素体之禀赋和脏腑阴阳盛衰如阴虚津亏,精血耗伤等密切相关;其外因于感受风,热,燥,毒之邪,或有湿热困结,痰瘀内阻等,大凡任何影响机体阴津亏虚和正常输布的因素,均可相因为患[6].而其病机则是以气阴两虚为主,关键在于阴虚,轻则肺胃阴伤,重则肝肾阴虚[7].其中肺脾虚弱和肝肾阴虚是影响机体津液盛衰和敷布异常而发病的主要环节,血瘀在本病的发生发展中也起着重要的作用. 2.主要证候和治则治法本病因病变所及脏腑组织广泛,呈多系统,多脏器的损害.故证候特点也较复杂.临证时,各家的主要论治法则如下:一是针对本虚为主施治:主要结合脏腑气血阴阳虚衰的不同辨证施治.凡阴虚内热型治以滋阴生津,清热润燥;气阴两虚型治以补中益气,生津润燥;气血不足型治以益气养血;血瘀痹阻型治以活血化瘀,养血润燥.阴虚尚需分脏腑病位之不同而分为肺胃阴虚,脾胃阴虚,肝肾阴虚,脾肾阴虚等治之[8].二是结合病邪的盛衰和性质用药:主要分为外燥,内燥论治.因外感燥邪,兼夹风热,则疏风解毒化燥;如因于风寒湿痹,化燥伤阴,则治以祛风散寒,除痹润燥;如是内燥阴伤,精血亏损,失于滋荣,则治以养精补血,滋阴除燥[7].另有脾胃湿热者,治以健脾化湿,清热除燥[10].兼夹瘀血阻络则活血化瘀,通脉润燥;兼有热毒内蕴则治以清热解毒,凉血润燥;兼有痰核结聚则化痰散结,软坚润燥.三是根据病程的不同阶段和证候特点[11]分阶段治疗.早期即第1阶段治在上焦心肺,用导赤散和增液汤加减,清心利气,生津润燥;中期即第2阶段治在中焦, 用益胃汤以养阴和胃,生津除燥;后期即第3个阶段重点在调补下焦之肾阴不足,以六味地黄汤化裁,以滋补肾阴,壮水之主以制阳光,驱除燥热之邪,使肾水蒸化,津液上承. 基于以上认识,本实验在以往研究工作的基础上通过检测颌下腺淋巴细胞浸润程度,细胞凋亡程度及IL-10,IFN-r,Fas,Fasl细胞因子表达角度,部分揭示路氏滋燥汤从提高机体免疫能力,活血化瘀,改善微循环功能和抗炎,抗变态反应,消除组织水肿而改变局部组织理化状态等角度治疗干燥综合征的作用机制.材料与方法1材料1.1实验动物 选用C57品系小鼠,8周龄,体重20± 2g左右,80只,雌性,均为SPF级,购自中国医学科学院实验动物中心.1.2主要试剂百白破疫苗百日咳死菌体浓度为1.1×1011个ml,卫生部成都生物制品研究所完全弗氏佐剂,Sigma公司批号:057k8614路氏滋燥汤路志正教授治疗干燥综合征的代表方,广安门医院制剂中心 制备Anexin V-FITC凋亡检测试剂盒,北京宝赛公司生产即用型SABC免疫组化试剂盒,武汉博士德生物工程有限公司生产1.3 主要仪器光学显微镜:奥林巴斯公司产品;电子天平:美国Satorus公司产品; 水浴箱:北京长安科学仪器厂;离心机:美国Beckman公司产品;紫外分光光度计:Model 200-20,HITACHI公司产品.2方法2.1实验分组:清洁级C57小鼠80只,随机分成空白对照组,模型组,低剂量实验组和高剂量实验组四组,每组20只.2.2造模方法2.2.1颌下腺抗原制备方法:用同种鼠在超净工作台上,常规手术方法取出颌下腺,除去包膜和结缔组织,用含0.5gL叠氮钠NaN3的生理盐水洗净血迹和污物,用显微剪剪碎后放入生理盐水中,在高速粉碎机上将颌下腺打成匀浆,保持4℃,再放入离心机离心3000rmin×15min,取上清液,用分光光度计测定蛋白抗原的含量.抗原浓度稀释:将上清液用0.1M PBS液稀释成1000μgml,将颌下腺抗原与等体积的完全弗氏佐剂混匀,形成油包水溶剂,浓度即为500μgml.2.2.2 造模给药方法 空白对照组:空白对照组背部以生理盐水0.3ml只假免疫,造模第二天开始给予生理盐水0.5ml天灌胃,两周结束时处死.模型组:模型组给予生理盐水0.5ml天灌胃两周,颌下腺抗原+完全弗氏佐剂形成的浓度为500μgml的抗原多点注射于动物的背部皮下,总量为0.25ml,头部皮下注射百白破疫苗百日咳死菌体浓度为1.1×1011个ml0.05ml.一周后同样剂量百白破疫苗在背部注射加强免疫. 低剂量治疗组:低剂量组给药剂量按人用药量的5倍 ,换算后得 27gkg 天,灌胃剂量为0.5ml天,两周后处死.免疫法同模型组. 高剂量治疗对照组:高剂量治疗对照组给药剂量按人用药量的10倍,换算后得 54 gkg 天,灌胃剂量为0.5ml天,灌胃两周后处死.免疫法同模型组. 2.3取材各组于给药后第2周处死动物,立刻低温摘除新鲜颌下腺组织,一部分置于低温环境中备用,用于流式细胞仪检测;余者用40%多聚甲醛固定,用于制作石蜡切片,观察组织病理变化和做免疫组化分析.2.4观察,检测项目与方法2.4.1 动物一般情况: 每日给药前仔细观察小鼠的精神状态,体毛色泽,活动度,大便等情况.2.4.2 动物体重测量: 从造模第一天起测量动物体重,每周一次,共三次,比较各组小鼠体重增长情况.2.4.3 处死前一周饮水量测量 处死前一周,每天固定时间测各组动物24小时饮水量,进行对比观察.2.4.4 动物颌下腺的光镜观察 取动物新鲜颌下腺组织,40%多聚甲醛固定,酒精逐级脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,切成6um厚的切片,苏木素—伊红Homatoxylin and eosin,HE常规染色.光镜下观察颌下腺病理改变.2.4.5 流式细胞仪检测颌下腺组织细胞凋亡:将留取的颌下腺组织除去包膜和结缔组织,用含0.5gL叠氮钠NaN3的生理盐水洗净血迹和污物,用显微剪剪碎后放入生理盐水中,过300目筛网,形成单细胞悬液.调整细胞浓度为5×105-1×106个细胞取1ml单细胞悬液,1000rpm,4℃离心10分钟,弃上清;加入1ml冷的PBS,轻轻震荡使细胞悬浮;1000rpm,4℃离心10分钟,弃上清;重复步骤3,4两次;对于贴壁细胞,先用胰酶消化,再用PBS洗涤;将细胞重悬于200ulBinding B加入10ulAnnexin V-FITC和5ulPI,轻轻混匀,避光反应15分钟,加入300ulBinding Buffer,在一小时内上机检测. 2.4.6 IFN-r, IL-10, Fas, Fasl测定免疫组化法用防脱载玻片制作石蜡切片,方法同2.4.4;切片常规脱蜡至水;30%H2O21份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶.蒸馏水洗3次.热修复抗原:将切片浸入0.01M枸橼酸盐缓冲液PH6.0,电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次.冷却后PBSpH7.2-7.6洗涤1-2次.滴加5%BSA封闭液,室温20分钟.甩去多余液体,不洗.滴加适当稀释的一抗小鼠或兔IgG,37℃1小时.PBSpH7.2-7.6洗2分钟×3次.滴加生物素化山羊抗小鼠IgG,20-37℃ 20分钟.PBSpH7.2-7.6洗2分钟×3次.滴加试剂SABC,20-37℃ 20分钟.PBSpH7.2-7.6洗5分钟×4次.DBA显色:使用DBA显色试剂盒.取1ml蒸馏水,加试剂盒中A,B,C试剂各1滴,混匀后加至切片上.室温显色,镜下控制反应时间,一般在5-30min之间,蒸馏水洗涤.苏木素轻度复染.脱水,透明,封片.光学显微镜观察.结果判断:IFN-r, IL-10, Fas, Fasl阳性反应区着色呈棕黄色,胞核阴性.形态计量学分析:所有标本经苏木素轻度复染后,每个标本随机取5个视野光镜下放大×400,用Leica图像分析系统检测IFN-r, IL-10, Fas, Fasl在每张切片上表达的面积百分比.2.4.7统计学分析 实验结果皆以均数±标准差±s 表示,采用单因素方差分析one-way ANOVAZ.结 果1.动物一般情况观察: 空白对照组小鼠表现:假免疫当天背部有包块,第3天包块消退. 模型组,大剂量对照组,小剂量治疗组:造模后开始出现懒动,倦怠,扎堆.第四天起大部分动物背部出现不同程度的溃烂,掉毛,十天时大部分自愈,部分还有小面积溃烂,到造模结束全部自愈;造模两天后和空白对照组相比饮食量下降 ,饮水量稍多,但最后一周饮水量区别不大. 2. 动物体重的测量 模型组,剂量治疗组,小剂量治疗组和空白对照组体重相比,体重增长速度明显降低,两周后处死时,空白组体重比其他三组明显增加P佐剂诱导型动物模型的淋巴细胞浸润程度与动物年龄和性别有关.二周后发现在颌下腺腺泡和导管周围出现淋巴细胞浸润,但淋巴细胞的浸润程度不一,雌性鼠较为严重.1984 年Dean[7]运用Wister鼠的颌下腺和舌下腺匀浆加完全弗氏佐剂加百日咳杆菌分别注射Lewis鼠的足背和足底.二周后发现唾液腺和泪腺中淋巴细胞浸润,正常的腺泡和导管结构被破坏.并有抗唾液腺和抗泪腺导管上皮抗体,但与淋巴细胞浸润程度无关.Mccabe[8]给猫注射猫的腮腺均浆加完全弗氏佐剂,在腮腺中诱导出灶性淋巴细胞浸润并出现肌上皮岛,浸润程度与注射抗原次数和量有关,但未测到有关的循环抗体.俞创奇等[9]用C57小鼠的颌下腺匀浆加完全弗氏佐剂加白百破疫苗多点注射于鼠的足垫,背部.四周后发现不同剂量组出现不同程度的淋巴细胞浸润, 导管,血管扩张, 腺泡萎缩.实验诱导的唾液腺淋巴细胞浸润是否与自身免疫反应过程有关,目前尚未明确,这类动物模型仅是从局部模拟了人类SS的表现,为疾病的发生和治疗提供了实验研究模型.在预试验的研究中发现, 影响唾液腺淋巴细胞浸润程度的因素有多种, 例如鼠品系的选择, 抗原的制备过程,免疫增强剂的选用, 观察时间等.为了制备较理想的动物模型, 我们进行了反复的探索, 获得了一些宝贵的经验, 例如鼠种的选择, 从SD 到Balbc, 再到C57品系, 发现C57 品系鼠较适合于SS 动物模型的建立.另外抗原制备也是至关重要的, 蛋白抗原的浓度和纯度与实验结果密切相关. 2.2 佐剂诱导型动物模型发病机理实验研究2.2.1 小鼠颌下腺病理变化 病理切片显示: C57 品系小鼠模型组,给药组均出现不同程度的腺体间淋巴细胞浸润见图5,较大灶性淋巴细胞浸润中可见生发中心,淋巴细胞浸润灶内常见浆细胞,而间质中极少;导管上皮过度增生见图6,7,管腔扩张或完全闭锁见图8,9,10,形成所谓的肌上皮岛.部分血管扩张;大量腺实质破坏. 淋巴结大小正常,基本无肿大见图11,12. 2.2.2 对颌下腺细胞因子的影响IFN-r和IL-10
小鼠T辅助细胞Th分为两组:Th1和Th2.Th1产生IL-2,IFN-r,TNF;Th2细胞分泌IL-4,IL-5,IL-10,IL-13.Th1介导细胞免疫,细胞毒性T细胞CTL和巨噬细胞活化以及迟发型超敏反应DTH,以及IgG的生成;Th2介导体液免疫,B细胞和嗜酸性粒细胞活化以及IgE的生成.Th1和Th2细胞分泌的细胞因子不仅决定了每个亚群的免疫效应功能,还调控各亚群的形成和扩增.如Th1分泌的IFN-r可促进Th1细胞的进一步分化,形成更多的Th1细胞,同时还能抑制Th2细胞的增殖.相反,Th2细胞分泌的IL-4,IL-10可促进Th2细胞的分化,同时抑制Th1细胞的增殖. 在本实验中利用免疫法建立了SS小鼠模型,做颌下腺病理学检查发现其颌下腺腺体中存在大量的淋巴细胞浸润,为了观察这些浸润淋巴细胞中以何种Th1细胞为主,我们采用免疫组化法测定了小鼠颌下腺中Th1样细胞因子IFN-γ及Th2样细胞因子IL-10水平.我们的结果发现,模型组小鼠颌下腺中IFN-γ表达水平与正常组相比有显著增高,而IL-10水平非常低,且在各组之间无明显差异.因此我们认为,在我们所建立的SS模型小鼠颌下腺中浸润的淋巴细胞主要是识别自身颌下腺组织的Th1细胞,Th1细胞分泌IFN-γ等细胞因子,这些细胞因子又发挥正反馈的作用,进一步刺激Th细胞增殖并向Th1细胞分化,Th1细胞发挥辅助作用,促使CTL细胞增殖并特异识别杀伤颌下腺组织细胞,从而导致模型小鼠颌下腺中浸润淋巴细胞增多,病变逐渐加重.IFN-γ同时抑制了Th2分泌IL-10.SS小鼠颌下腺凋亡相关基因Fas和Fasl免疫组化分析 近年来,大量文献显示SS可能与细胞凋亡有关,Manganelli等[10]报道,唇腺和泪腺的腺泡及导管上皮细胞的凋亡可能是导致分泌功能损伤的机制,凋亡细胞的死亡可能由细胞毒T细胞释放蛋白酶所诱导,凋亡细胞的凋亡率由凋亡促进因素和凋亡抑制因素的平衡决定.本试验研究结果SS小鼠的腺泡和导管上皮细胞却是呈现出凋亡细胞特点.我们采用免疫组化法测定了SS小鼠颌下腺Fas和FasL在各组的表达率.实验结果显示,造模的三个小组Fas和FasL表达率显著增高,且有统计学意义P0.01.Fas介导的细胞凋亡是TNF受体家族介导的细胞凋亡信号转导途径中的一种[11],机制[12]主要是通过与其胞浆区相关的死亡结构域蛋白FADDMORT-1 208 aa,分子质量23 kD介导的.当Fas与其受体FasL结合后,受体发生多聚化,胞浆区的DD死亡结构域death domain也发生多聚化,使得位于胞浆中的FADD可以通过其羧基端的DD与受体胞浆区的DD结合.FADD一方面通过羧基端的DD结合Fas,另一方面通过其氨基端的DED死亡效应结构域与caspase-8MACHFLICE氨基端的DED结合,通过caspase-8诱导效应性其它caspase家族蛋白酶及caspase-3级联激活,并最终导致细胞凋亡的发生.总之,导致细胞凋亡的途径信号传递过程是很复杂的,中间有很多问题还未搞清楚.也许存在不止一条途径,这些途径之间可能存在某种联系,而且有些caspase家族蛋白酶的细胞定位和在信号转导中的次序以及是否还有其他成员,还有导致SS的其他方面机理还有待于进一步研究.3.路氏滋燥汤对SS的作用机理 近年来,路志正教授对此进行了更深入的临床实践和理论探讨,认为本病因系燥邪外燥,内燥损伤气血律液而使阴津耗损,气血亏虚,血行失畅,瘀血痹阻,痰凝聚结,脉络不通所致的机体多系统,多脏器损害之病证,具有特殊的辨证治疗规律.大凡燥邪致病,其因有三:1气运太过,燥气横逆,感而受之,燥痹乃成;2风寒湿痹症者过用大热辛燥之品,耗伤津液.筋脉失濡;3素体肝肾亏虚,阴津不足,筋脉关节失于濡养,气血运行受阻,不荣而痛.其临床表现大多与阴津亏乏有关,如口,舌,鼻干燥,肌肤干涩,烦渴欲饮,肌肉关节伸屈不利,潮热盗汗,失眠多梦,舌红少苔,脉细数等.燥邪致病范围广泛,可涉及心肝脾肺肾各脏及其互为表里的六腑,九窍等.病机特点上有阴伤液亏与痹阻不通的双重性,故不宜单纯按\"燥者濡之\"而治.3.1 从方药组成分析路氏滋燥汤的功效 路氏滋燥汤所用中草药的主要成分为麦门冬,赤白芍,生白术,山药,乌蛇肉,甘草,太子参,五味子.主要功效是滋阴润燥,补中益气,活血化瘀.现结合古今医家对上述诸品的认识,阐述其组方大意如次: 太子参:《江苏药材志》:\"补肺阴,健脾胃.……\"本品能补脾肺之气,兼能养阴生津,属补气药中的清补之品.治疗脾气虚弱,胃阴不足所致食少倦怠,口干舌燥,常与山药等益脾气,养胃阴之品同用.现代药理研究证明:太子参对淋巴细胞有明