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人促肾上腺皮质激素(ACTH)Elisa免费代测试剂盒
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使用96孔板的ELISA测定中,常发现有&边缘效应",即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除&边缘效应",并且可提高测定的重复性。&2.加样?在现在的ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
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&2008- Inc. All Rights Reserved 豆丁网细胞色素P11B_1、细胞色素P11B_2及促肾上腺皮质激素受体与肾上腺肿瘤--《北京协和医学院》2010年博士论文
细胞色素P11B_1、细胞色素P11B_2及促肾上腺皮质激素受体与肾上腺肿瘤
【摘要】:目的:
检测细胞色素P11B1(CYP11B1)、细胞色素P11B2(CYP11B2)及促肾上腺皮质激素受体(ACTH-R)在正常肾上腺皮质、醛固酮分泌腺瘤、皮质醇分泌腺瘤和嗜铬细胞瘤中的表达水平,初步探索此三种基因与上述肾上腺皮髓质肿瘤疾病的关系。
1.用Trizol试剂分别提取组织的总RNA,包括:正常肾上腺组织(n=6)、嗜铬细胞瘤(n=2)、醛固酮分泌腺瘤(n=18)、皮质醇分泌腺瘤(n=11)。
2.逆转录后扩增CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R和内参GAPDH的cDNA,产物电泳后测条带灰度,计算CYP11B1/GAPDH、CYP11B2/GAPDH和ACTH-R/GAPDH灰度的比值代表以上基因的相对表达量。
3.分别比较CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因在不同肾上腺组织中的表达差异:分别分析CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因的表达与肿瘤激素分泌水平等临床指标的关系;分析上述三种基因表达相互之间的联系。
1.在正常肾上腺皮质、醛固酮分泌腺瘤和皮质醇分泌腺瘤中均存在不同程度的CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R基因的表达,在嗜铬细胞瘤中未发现以上三种基因的表达。
2.醛固酮分泌腺瘤与CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R:
1) CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表达:CYP11B1在醛固酮分泌腺瘤中的表达(0.65±0.34)低于正常肾上腺组织(0.72±0.13,P0.01)和皮质醇分泌腺瘤(0.99±0.50,P0.01)。CYP11B2在醛固酮分泌腺瘤中的表达(1.55±0.43)高于正常肾上腺组织(1.25±0.75,P0.01)和皮质醇分泌腺瘤(1.24±0.52,P0.01)。ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表达(0.62±0.27)低于正常肾上腺组织(0.98±0.36,P0.01)和皮质醇分泌腺瘤(0.87±0.28,P0.01)。
2) CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R与醛固酮分泌腺瘤患者临床资料的相关性:醛固酮分泌腺瘤中CYP11B1mRNA的水平与患者血钾血钠水平、卧立位肾素活性、血管紧张素和醛固酮的水平及24h UFC无相关。ACTH-R表达阳性的醛固酮分泌瘤CYP11B1mRNA的水平与24h UFC无相关。
醛固酮分泌腺瘤伴低血钾的患者(n=8) CYP11B2mRNA水平与患者血钾水平负相关(r=-0.718,p=0.04),与立位醛固酮水平正相关(r=0.708,p=0.045),与其他临床指标无相关性。在血钾正常醛固酮分泌腺瘤中的患者中(n=10), CYP11B2mRNA水平与以上临床指标无相关性。
对肾素有反应的醛固酮分泌腺瘤患者(n=3) ACTH-R表达的平均水平为0.54±0.14,明显低于无反应的醛固酮分泌腺瘤患者(n=15)(0.64±0.25P0.01)。ACTH-R表达阳性的患者(n=11)醛固酮分泌腺瘤ACTH-R mRNA的水平与患者立位醛固酮水平正相关(r=0.845,P0.01),与患者血钠血钾水平、卧立位肾素活性、血管紧张素、及24h UFC水平无明显相关性。
3) CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中表达的相关性:CYP11B2和ACTH-R在醛固酮分泌腺瘤中的表达呈正相关。(r=0.662,p0.01)。CYP11B2和ACTH-R在ACTH-R表达阳性的醛固酮分泌腺瘤中的表达呈正相关(r=0.765,P0.01)。
3.皮质醇分泌腺瘤与CYP11Bi、CYP11B2和ACTH-R:
1) CYP11Bi、CYP11B2和ACTH-R在皮质醇分泌腺瘤中的表达:CYP11B1在皮质醇分泌腺瘤中的表达(0.99±0.50)高于正常肾上腺组织(0.72±0.13,P0.01)和醛固酮分泌腺瘤(0.65±0.34,P0.01)。CYP11B2在皮质醇分泌腺瘤中的表达(1.24±0.52)低于正常肾上腺组织(1.25±0.75,P=0.01)和醛固酮分泌腺瘤(1.55±0.43,P0.01)。ACTH-R在皮质醇分泌腺瘤中的表达(0.87±0.28)低于正常肾上腺组织(0.98±0.36,P0.01)但高于醛固酮分泌腺瘤(0.62±0.27,P0.01)。
2) CYP11B1、CYP11B2和ACTH-R与皮质醇分泌腺瘤患者临床资料的相关性皮质醇分泌腺瘤中CYP11B1mRNA的表达与24hUFC正相关(r=0.815,p=0.002),但与血F (r=0.537, p=0.068)及ACTH水平无明显相关性。
皮质醇分泌腺瘤中CYP11B2mRNA的水平与24hUFC、血F及ACTH水平无明显相关性。
皮质醇分泌腺瘤ACTH-R mRNA水平与24hUFC水平负相关(r=-0.629,p=0.038),与血总皮质醇含量ACTH值无明显相关性。
3) CYP11B1、CYP11B2及ACTH-R在正常肾上腺组织及皮质醇分泌腺瘤中表达的相关性:
正常组织和皮质醇分泌腺瘤CYP11B1、CYP11B2、ACTH-R基因表达没有相关性。
1. CYP11B1在皮质醇分泌腺瘤中高表达,其表达与患者24hUFC水平正相关,提示CYP11B1在皮质醇分泌腺瘤激素合成过程中可能存在重要的作用。
2. CYP11B2在醛固酮分泌腺瘤中高表达,其表达与伴低钾的患者血钾水平负相关,立位醛固酮水平正相关,提示CYP11B2在醛固酮分泌腺瘤激素合成过程中可能存在重要的作用。
3. ACTH-R在皮质醇分泌腺瘤中表达减少,提示ACTH在皮质醇分泌腺瘤中受到了抑制。ACTH-R在对肾素有反应的醛固酮分泌腺瘤患者中的表达明显低于无反应的患者,提示ACTH可能影响醛固酮分泌腺瘤患者对RAS系统的反应。醛固酮分泌腺瘤ACTH-R的表达与患者CYP11B2的表达患者以及立位醛固酮水平正相关,提示ACTH可能通过ACTH-R影响CYP11B2的水平进而调控腺瘤激素的合成。
4. CYP11Bi、CYP11B2和ACTH-R在嗜铬细胞瘤中的无表达提示以上基因可能与嗜铬细胞瘤的发生无关。
5.经MEDLINE检索,上述结论未见国内外文献报道。
【关键词】:
【学位授予单位】:北京协和医学院【学位级别】:博士【学位授予年份】:2010【分类号】:R736.6【目录】:
中文摘要4-7ABSTRACT7-11英文缩略词11-12前言12-14材料与方法14-21结果21-42讨论42-46结论46-48参考文献48-51附录51-52致谢52-53综述53-63 参考文献59-63
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京公网安备74号促肾上腺皮质激素(ACTH)治疗慢性湿疹的临床分析--《当代医学》2014年16期
促肾上腺皮质激素(ACTH)治疗慢性湿疹的临床分析
【摘要】:目的观察促肾上腺皮质激素治疗慢性湿疹的临床疗效。方法选取河南省商丘市第四人民医院收治的94例慢性湿疹患者作为研究对象,随机将其均分为试验组与对照组(n=47),试验组患者在盐酸依匹斯汀治疗的基础上给予促肾上腺皮质激素静滴,对照组患者仅予以盐酸依匹斯汀治疗,治疗4个月后,比较2组患者的疗效。结果试验组患者有效率为74.5%,对照组患者有效率为44.7%,2组比较差异显著(P0.05);治疗4个月后患者回访发现,试验组患者复发率为22.6%,对照组患者复发率为42.8%,2组比较差异显著,有统计学意义(P0.05)。结论对慢性湿疹患者行促肾上腺皮质激素治疗疗效可靠,复发率低,利于改善患者生活质量。
【作者单位】:
【关键词】:
【分类号】:R758.23【正文快照】:
慢性湿疹作为一种常见慢性皮肤病,常反复发作、剧烈瘙痒,临床上难以治愈,严重影响患者的正常生活和工作,其发病的具体原因尚不明确,多与遗传及环境因素有关[1]。慢性湿疹具有多发性,临床治疗主要是对症治疗,应用广泛的是糖皮激素[2],但患者往往容易形成激素依赖。本文选取94例
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