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还原型谷胱甘肽对移植肾功能早期恢复保护作用的临床观察高丈波，翁国斌，姚许平，唐莉，祁洪刚，张曙伟，楼江涌　　缺血-再灌注损伤(IRI)是影响移植肾早期功能恢复的关键因素之一，近年来受到越来越多的重视。目前有学者认为，IRI对移植肾的影响甚至超过人白细胞抗原(HLA)配型不合的影响，不仅会引起单纯的移植肾功能延迟恢复，而且还能通过影响免疫机制促进急性排斥反应。此外，作为一种非抗原依赖性因素,亦可直接导致慢性排斥反应。大量研究证明，氧自由基产生并介导细胞毒性和脂质过氧化损伤是导致移植肾组织和细胞损伤的重要因素，而还原型谷胱甘肽能清除有害的过氧化代谢产物，阻断脂质过氧化反应，从而起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。现对我院收治的应用还原型谷胱甘肽治疗的25例肾移植术患者的临床资料进行回顾性分析，报告如下。1　资料与方法1．1　一般资料　2006年6月至2008年1月，我院接受同种异体肾移植手术的尿毒症忠者50例，所有患者均为首次接受肾移植术，并排除合并有糖尿病、心脑血管疾病及肝脏疾病的患者。其中男33例，女17例：年龄18～56岁，平均34.9±12.2岁。原发病为：慢性肾小球肾炎36例，慢性肾盂肾炎8例，多囊肾病3例，糖尿病肾病3例。根据有无给予还原型谷胱甘肽分为2组：治疗组25例，男17例，女8例，年龄20～56岁，中位年龄35岁；对照组25例，男16例，女9例，年龄18～53岁，中位年龄34岁。1．2　主要药品及试剂　还原型谷胱甘肽由重庆药友制药有限公司提供。高渗枸橼酸腺嘌呤溶液(HC-A液)购自上海长征医院制剂室。红细胞超氧化物歧化酶(superoxidase，SOD)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1．3　患者处理　供肾均为尸体肾：采用肝肾联合切取方式，器官切取过程中均用HC-A液进行灌注并保存。供肾的热缺血时间为3～5min，冷缺血时间为5～10h。供受者的ABO血型均相同，淋巴细胞毒试验均小于10％。1．4　免疫抑制治疗方案　吻合血管开放前和手术后3d内，每天应用甲基强的松龙500nag和环磷酰胺200mg冲击治疗：术后第4天开始每天口服环孢霉素A(CsA)或他克莫司(商品名：普乐可复，FK506)，并调整CsA谷值浓度至250～300ng／mL、FK506谷值浓度至8～12ng／mL，同时服用霉酚酸酯2.0g／d,强的松80mg／d，逐日减10～20mg每日维持应用。对出现急性肾小管坏死的患者，停用CsA或FK506，改为抗胸腺细胞球蛋白(ATG)注射并常规利尿、血液透析等治疗；发生急性排斥的患者给予甲基强的松龙500mg冲击治疗3d。1．5　干预措施　治疗组于吻合血管开放前30min将还原型谷胱甘肽1200mg溶于100mL生理盐水中静脉滴注，术后每天应用1次，每次1200mg，共8次，对照组则不给予还原型谷胱甘肽。1．6　观察指标　两组患者每日检测血清肌酐水平(Cre)，分别计算两组肌酐降至正常范围(144μmol／L以下)的平均时间。并在术后第1、3、5、7天检查其血液中SOD水平。第7天时检测患者尿液中盼微球蛋白、晨尿比重、尿渗透压及尿溶菌酶，评估肾小管功能。术后1周时间，常规进行移植肾穿刺活检，穿刺出组织立刻以10％甲醛溶液固定，送病理检查。1．7　统计方法　用SPSS 12.0软件进行统计分析。数据用均数±标准差表示，两组间比较采用t检验，P＜0.05为差异有显著性。2　结　　果2．1　血肌酐恢复正常时间　治疗组血肌酐恢复正常的平均时间为5.3±1.4d，对照纽为6.5±1.1d，治疗组稍短于对照组，但差异无显著性(P＞0.05)。2．2　急性肾小管坏死发生情况　对照组有2例(8.0％)发生急性肾小管坏死，而治疗组未出现急性肾小管坏死。2．3　两组SOD值比较　术前两组SOD术后治疗组第1、3、5、7天SOD值均高于对照组检测值，两组比较差异有显著性(P＜0.05)。见表1。0 && image.height>0){if(image.width>=700){this.width=700;this.height=image.height*700/image.}}" src="/p/7083/b_vip_46E69DD93D78A20F252A.jpg" border="0" alt="查看更多精彩图片">2．4　肾小管功能的恢复情况　治疗第7天，治疗组肾小管功能好于对照组(P＜0.05)。见表2。0 && image.height>0){if(image.width>=700){this.width=700;this.height=image.height*700/image.}}" src="/p/7083/b_vip_2B0FA0D9DDA4EFC044A299A77838DF98.jpg" border="0" alt="查看更多精彩图片">2．5　组织学观察　术后1周移植肾穿刺活检，对照组光镜检查有典型的肾脏缺血性损伤的特点，包括广泛性肾小管变性、刷状缘消失、小管上皮细胞脱落、小管细胞坏死、小管内管型形成，尤其是在外髓部分(图1)。其病变以出现急性肾小管坏死的患者为重。治疗组移植肾的损伤程度显著低于对照组。其主要病理表现为轻度的小管坏死，呈局灶性(图2)。0 && image.height>0){if(image.width>=700){this.width=700;this.height=image.height*700/image.}}" src="/p/7083/b_vip_95D730C65AA9B963AD17D7EE7B6BD287.jpg" border="0" alt="查看更多精彩图片">3　讨　　论　　移植肾IRI是同种异体肾移植术后移植肾功能延迟恢复(delayed graft funcfion，DGF)的最主要原因。在器官切取、保存过程中，缺血使组织含氧量减少，可造成组织自身抗氧化能力降低，所引起肾脏组织学改变相对较小。再灌注时富含氧分子的血液重新灌注缺血组织，同时提供了大量电子受体，可导致组织内大量超氧阴离子自由基在短时问内爆发性增多并堆积，具有高度反应活性的氧自由基与含有丰宿不饱和脂肪酸的细胞膜系统发生脂质过氧化反应。造成细胞形态及功能的损宅}Ⅲ。因此，在再灌注阶段所引起的细胞损害是严重的。　　氧自由基，包括超氧阴离子自由基、羟自由基、过氧化氢等，能导致脂质过氧化反应，表现为细胞内抗氧化酶(过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱苷肽还原酶、谷胱苷肽过氧化物酶)活性抑制、溶酶体酶(β-葡糖醛酸糖苷酶和酸性磷酸酶)活性升高，引起膜磷脂降解。随之膜的流动性下降，抑制酶的活性，破坏蛋白质结构，引起线粒体、内质网和细胞骨架系统及其功能的破坏。膜磷脂降解后还使血管收缩因子(如血栓素A2)生成增多。在肾脏组织中，则会引起肾脏血管收缩因子和舒张因子之问的不平衡，入球小动脉收缩，从而促发肾小球硬化、小管萎缩，间质纤维化等一系列病理性损伤。过多的自由基亦可直接损害肾小球细血管内皮细胞，使肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞变性、坏死，最终使肾小球滤过率下降，导致肾功能衰竭。SOD是反映机体缺血性和再灌注损伤的重要指标。通过检测血液红细胞SOD水平可以了解氧自山基清除情况，其活性在肾组织复正常。本文治疗组的SOD值均显著高于对照组，提示还原型谷胱甘肽可以明显减少氧自由基的产生，使SOD消耗减少。　　谷胱甘肽(glutathione，GSH)是细胞抗氧化防御系统中的主要非蛋白质性硫醇(thiol)。它是由半胱氨酸、甘氨酸和谷氨酸构成的一种三肽，可在机体几乎所有的器官中产生，尤其是肝脏。细胞内，谷胱甘肽以游离态和结合态两种形式存在。游离型谷胱甘肽主要以还原形式存在，在机体的氧化过程中转化为氧化形式。研究发现，还原型谷胱甘肽的活性基团为半胱氮酸残基的巯基(-SH)和γ-谷氨酰键。巯基是GSH墁重要的功能基团，能参与机体内多种重要生化反应，与过氧化物及自由基相结合，保护体内含巯基的蛋白质和含巯基的酶蛋白不被氧化、灭活而保证能量代谢、细胞利用。GSH代谢途径中，在GSH转移酶(GST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GTP)、GSH-过氧化物酶-还原酶(GSH-Px-re)的参与下，可清除细胞内自发或酶促反应所产生的活性中间产物，从而在细胞抗氧化物过程中起重要保护作用。　　本研究显示，应用还原型谷胱甘肽组在术后1、3、5、7d时SOD活性显著高于对照组，且移植肾功能恢复正常的时间较对照组短，无一例出现急性肾小管坏死，间接反映机体清除氧自由基的能力增强。治疗第7天时，治疗组肾小管功能的指标显著低于对照组，说明其近端肾小管的重吸收功能和远端肾小管的浓缩功能恢复较好。移植肾活检病理结果也表明应用还原型谷胱甘肽对移植肾缺血再灌注损伤有明显的保护作用。【作者单位】宁波市泌尿肾病医院，浙江 宁波 315100【来源】《现代实用医学》2009年4月第21卷第4期
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查看原帖&&gt、功能恢复。从而让肌酐高的患者依靠自身肾脏功能增多尿量、口中氨味，使血肌酐从体内排出，其早期最常见并发症状是消化道症状、呕吐，增多受损肾脏有效血液灌注，缓解病人中毒症状，出现恶心，饥不欲食或食而不下、受损病变组织结构改变，改善肾脏微循环，增多对肾脏供氧，促进肾小球受损固有细胞的修复，降低肾小球内压。长期的肌酐升高会使人的心脑肾等器官相继受到损害微化中药是从根本上修复受损肾功能，扩张肾动脉
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