对不起，该类目不存在滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠Wnt信号传导的影响--《中国中医科学院》2009年博士论文
滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠Wnt信号传导的影响
【摘要】：
通过体内实验和体外实验,从对成骨细胞具有重要调控作用的Wnt信号通路传导的角度,揭示滋阴补肾法治疗糖皮质激素性骨质疏松症的作用机理,并为阐明中医“肾主骨”机理的科学内涵提供进一步的实验依据。
将55只雌性Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组12只、模型组15只、阳性对照组13只、滋补肾阴组15只。模型组大鼠肌注地塞米松0.1ml/100g体重,给药浓度为1mg/ml,给药剂量为1mg/kg体重,每周2次,连续8w;正常对照组则相应肌注等体积的生理盐水。阳性对照组及滋补肾阴组除按以上方法肌注地塞米松外,阳性对照组灌胃给予阿法骨化醇1ml/100g体重,给药浓度为0.005μg/ml,给药剂量为0.05μg/kg体重;滋补肾阴组灌胃给予左归丸水煎剂1ml/100g体重,给药浓度为0.952g生药/ml,给药剂量为9.52g生药/kg体重,以上给药每天1次,每周6天,连续8w。
各组大鼠于处死前16天和前3天分别腹腔注射盐酸四环素30mg/kg体重,以对骨进行荧光标记。给药结束后,采用大鼠麻醉后股动脉取血法,所取全血静置1h后,经2000rmp离心10 min后取血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中BGP、E_2、PTH、IGF-Ⅰ的水平。取血后将各组大鼠处死,取右侧胫骨近端1/3,制作不脱钙骨切片,采用骨组织形态计量学方法,检测各组大鼠胫骨骨小梁体积百分比(TBV%)、骨小梁吸收表面百分比(TRS%)、骨小梁形成表面百分比(TFS%)、骨小梁矿化率(MAR)、类皮质平均宽度(OSW)、骨皮质矿化率(mAR),以观察各组大鼠骨形成及骨吸收等骨代谢情况。取左侧胫骨近端1/3,制作大鼠胫骨脱钙骨的冰冻切片,分别采用免疫组化、原位杂交法检测各组大鼠胫骨成骨细胞及骨髓基质细胞中Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白及mRNA的表达。
2.1左归丸含药血清的制备
雌性Wistar大鼠20只,随机分为2组:正常对照组和左归丸治疗组,每组10只。左归丸治疗组大鼠:地塞米松0.1mg/100g肌注,每周2次,连续8w,然后灌服左归丸,一日2次,连续5次,于末次给药1h,乙醚麻醉,无菌条件下,经腹主动脉采血,冷置1h后,离心(2500r/min,25min),分离血清,是为左归丸含药血清,56℃灭活30min,-20℃冰箱保存备用。正常对照组按以上程序,灌服等容积的蒸馏水,所取血清即正常对照组血清。
2.2 MTT法测定不同实验条件对成骨细胞增殖的影响
本实验分为6组:成骨细胞(OB)+正常血清组,OB+10~(-7) mol/L地塞米松组,OB+10~(-8)mol/L地塞米松组,OB+5%左归丸含药血清组、OB+10%左归丸含药血清组、OB+15%左归丸含药血清组,每组8个样本。将成骨细胞悬液浓度调节至为1×10~4/ml,将其接种至96孔细胞培养板,每孔200μl,培养12h细胞贴壁后,分别用正常对照组血清、10~(-7)mol/L地塞米松、10~(-8)mol/L地塞米松、5%左归丸含药血清、10%左归丸含药血清、15%左归丸含药血清处理各组细胞,5%CO_2,37℃,继续培养96h,然后用MTT法于酶标仪上检测波长为570nm处各种细胞的OD值。
2.3左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin蛋白及mRNA表达的影响
本实验分为3组:正常血清组,地塞米松组,左归丸含药血清组。培养12h后,分别用正常对照组血清、10~(-7)mol/L地塞米松、15%左归丸含药血清处理各组细胞,继续培养96h。随后分别采用免疫印迹法及荧光实时定量PCR(Realtime PCR)技术检测各组细胞中Wnt3α、LRP-6、β-catenin蛋白及mRNA的表达。
3统计学分析
以上实验结果皆以均数±标准差((?)±s)表示,采用单因素方差分析(ANOVA)进行数据处理,组问两两比较,采用q检验。
1.1滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠骨组织形态计量学指标的影响
1.1.1滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨TBV%的影响
模型组大鼠胫骨TBV%显著低于正常对照组。阳性对照组及滋补肾阴组的TBV%均显著高于模型组,但与正常对照组相比仍有显著差异;与阳性对照组比较,滋补肾阴组的TBV%显著降低。见表1。
注:与正常对照组比较:*P0.05,**P0.01;与模型组比较:△P0.05,△△P0.01;与阳性对照组比较:▲P0.05,▲▲P0.01;下同。
1.1.2滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨TRS%的影响
与正常对照组比较,模型组大鼠胫骨TRS%显著增高。阳性对照组的TRS%明显高于正常对照组,但显著低于模型组。滋补肾阴组的TRS%与正常对照组及阳性对照组相比,显著增高;与模型组相比,没有差异,但有明显的降低趋势。见表2。
1.1.3滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨TFS%和MAR的影响
模型组大鼠胫骨TFS%和MAR较正常对照组皆显著降低。与模型组相比,阳性对照组的TFS%和MAR皆显著增高,而与正常对照组相比,TFS%仍显著降低,MAR则无显著差异。滋补肾阴组与模型组相比,TFS%和MAR均显著增高,与阳性对照组相比,无显著性差异;但与正常对照组相比,仍明显降低。见表3。
1.1.4滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨mAR和OSW的影响
模型组大鼠胫骨mAR和OSW显著低于正常对照组。阳性对照组及滋补肾阴组的mAR和OSW与模型组相比皆显著增高,但比正常对照组仍显著降低。与阳性对照组相比,滋补肾阴组的mAR和OSW无显著性差异。见表4。
1.2滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSC Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白和mRNA表达的影响
1.2.1滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSC Wnt1蛋白和mRNA表达的影响
模型组大鼠胫骨OB及MSC的Wnt1蛋白和mRNA表达阳性密度较正常对照组皆显著降低。阳性对照组及滋补肾阴组OB、MSC的Wnt1蛋白和mRNA表达阳性密度皆显著高于模型组;但与正常对照组相比,仍显著降低。滋补肾阴组OB及MSC Wnt1蛋白表达的阳性密度与阳性对照组相比,明显降低。见表5。
1.2.2滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSC LRP-5蛋白和LRP mRNA表达的影响
与正常对照组相比,模型组大鼠胫骨OB及MSC的LRP-5蛋白和LRP mRNA表达阳性密度皆显著降低。阳性对照组及滋补肾阴组OB及MSC的LRP-5蛋白和LRP mRNA表达阳性密度皆显著高于模型组;但与正常对照组相比,仍显著降低。与阳性对照组相比,滋补肾阴组LRP-5蛋白和LRP mRNA表达的阳性密度显著降低。见表6。
1.2.3滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSCβ-catenin蛋白和mRNA表达的影响
与正常对照组相比,模型组大鼠胫骨OB及MSC的β-catenin蛋白和mRNA表达阳性密度皆显著降低。阳性对照组OB及MSC的β-catenin蛋白和mRNA表达阳性密度皆显著高于模型组;但与正常对照组相比,仍显著降低。滋补肾阴组OB及MSCβ-catenin蛋白和mRNA表达的阳性密度与模型组相比,明显增高,但显著低于正常对照组;且与阳性对照组相比,β-catenin蛋白表达的阳性密度明显降低。见表7。
1.3滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中BGP、E_2、PTH、IGF-Ⅰ含量的影响
1.3.1滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中BGP含量的影响
模型组大鼠血清中BGP的含量比正常对照组显著降低。与模型组相比,阳性对照组大鼠血清中BGP的含量显著增高;且与正常对照组相比,无显著性差异。滋补肾阴组大鼠血清中BGP的含量与模型组相比明显增高,但仍明显低于正常对照组,而与阳性对照组相比,无显著差异。见表8。
1.3.2滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中E_2含量的影响
模型组大鼠血清中E_2的含量比正常对照组显著降低。滋补肾阴组大鼠血清中E_2的含量与模型组相比,显著增高;但较之正常对照组仍显著降低。与阳性对照组相比,滋补肾阴组大鼠血清中E_2的含量显著增高。见表9。
1.3.3滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中PTH含量的影响
模型组大鼠血清中PTH的含量比正常对照组显著增高。阳性对照组及滋补肾阴组大鼠血清中PTH的含量与模型组相比,显著降低;但较之正常对照组仍明显增高。滋补肾阴组大鼠血清中PTH的含量与阳性对照组相比仍明显增高。见表10。
1.3.4滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中IGF-Ⅰ含量的影响
模型组大鼠血清中IGF-Ⅰ的含量比正常对照组显著降低。与模型组相比,阳性对照组及滋补肾阴组大鼠血清中IGF-Ⅰ的含量皆显著增高;但较之正常对照组仍明显降低。滋补肾阴组大鼠血清中IGF-Ⅰ的含量与阳性对照组相比,无显著性差异。见表11。
2.1 MTT法测定不同实验条件对成骨细胞增殖的影响
OB+10~(-6)mol/L地塞米松组及OB+10~(-7)mol/L地塞米松组的OD值均显著低于OB+正常血清组,但两者之间无显著性差异。OB+5%左归丸含药血清组、OB+10%左归丸含药血清组及OB+15%左归丸含药血清组的OD值均显著高于OB+10~(-6)mol/L地塞米松组及OB+10~(-7)mol/L地塞米松组,其中以OB+15%左归丸含药血清组增高最为明显;但与正常血清组相比,仍明显降低。这一结果说明:10~(-6)mol/L地塞米松及10~(-7)mol/L地塞米松均对成骨细胞的增殖有明显的抑制作用,而5%、10%及15%的左归丸含药血清均可明显促进成骨细胞的增殖,其中,15%的左归丸含药血清促进成骨细胞增殖的作用最为明显。所以下一步的实验选用10~(-7)mol/L地塞米松以及15%左归丸含药血清作为干预条件。
注:与OB+正常血清组比较:*P0.05,**P0.01;与OB+10~(-6)mol/L地塞米松组比较:△P0.05,△△P0.01;与OB+5%左归丸含药血清组比较:▲P0.05,▲▲P0.01。
2.2左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin蛋白表达的影响
2.2.1左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α蛋白表达的影响
较之正常血清组,地塞米松组Wnt3α蛋白的表达显著下调。左归丸含药血清组Wnt3α蛋白的表达与地塞米松组相比明显上调,但与正常血清组相比,仍明显降低。见图1。
2.2.2左归丸含药血清对成骨细胞LRP-6蛋白表达的影响
与正常血清组相比,地塞米松组LRP-6蛋白的表达显著下调。左归丸含药血清组LRP-6蛋白的表达较之地塞米松组明显上调,但与正常血清组相比,仍明显降低。见图2。
2.2.3左归丸含药血清对成骨细胞β-catenin蛋白表达的影响
地塞米松组β-catenin蛋白的表达较之正常血清组明显下调。与地塞米松组比,左归丸含药血清组β-catenin蛋白的表达明显上调,且与正常血清组相比,无显著性差异。见图3。
2.3左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin mRNA表达的影响
2.3.1 RNA提取纯度的检测和质量鉴定
使用NanoDrop(?)ND-1000微量分光光度计测定RNA浓度及纯度,系统自动计算出A_(260/280),定量分析结果,见表13、图4。所有样本总RNA的A_(260/280)均在1.8-2.0之间,说明所提取的RNA纯度高,无蛋白质和DNA的污染。经琼脂糖电泳成像后可看到清楚的两条带(见图4):28S、18S,除此之外无其他杂带,且28S:18S≈2:1,证实所提总RNA完整,无异常断裂和丢失。
1、2、3:正常血清组样本;M:
4、5、6:地塞米松组样本;7、8、9:左归丸含药血清组样本
2.3.2扩增产物的溶解曲线
各样品扩增产物的溶解曲线如图5,均为单一吸收峰,说明产物专一,单一片段反应特异性合格,无二聚体等杂带样品,可进行下一步荧光定量PCR反应。
(a) Wnt3α(b) LRP-6(c)β-catenin(d)β-actin
2.3.3左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3αmRNA表达的影响
与正常血清组相比,地塞米松组芹归丸含药血清组Wnt3αmRNA的表达均明显下调;但左归丸含药血清组Wnt3αmRNA的表达较之地塞米松组显著上调。见图6。
1、2、3正常血清组样本;4、5、6地塞米松组样本;
7、8、9左归丸含药血清组样本;下同。
2.3.4左归丸含药血清对成骨细胞LRP-6 mRNA表达的影响
地塞米松组LRP-6 mRNA的表达较之正常血清组显著下调。与地塞米松组比,左归丸含药血清组LRP-6 mRNA的表达明显上调,但与正常血清组相比,仍明显下调。见图7。
对文献中较多的10个证候,应用方剂树形分析算法进行分析,对获得的计算结果总结如下。
【关键词】：
【学位授予单位】：中国中医科学院【学位级别】：博士【学位授予年份】：2009【分类号】：R259【目录】：
中文摘要5-21
ABSTRACT21-26
英文缩略表26-27
综述一 Wnt信号转导通路研究进展27-53
综述二 糖皮质激素性骨质疏松症的发病机制及中药对其的影响53-64
第一部分 体内实验66-90
材料方法66-74
1 材料66-68
2 方法68-74
1 滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠骨组织形态计量学指标的影响74-76
2 滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSC Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白和mRNA表达的影响76-78
3 滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠外周血血清中BGP、E2、PTH、IGF-Ⅰ含量的影响78-80
1 糖皮质激素性骨质疏松症的中医机理探讨80-81
2 滋阴补肾法对糖皮质激素性骨质疏松症的治疗作用81-82
3 滋阴补肾法治疗糖皮质激素性骨质疏松症的作用机理82-89
第二部分 体外实验90-112
材料方法90-99
1 材料90-91
2 方法91-99
结果99-108
1 MTT法测定不同实验条件对成骨细胞增殖的影响99-100
2 左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin蛋白表达的影响100-104
3 左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin mRNA表达的影响104-108
讨论108-111
1 Wnt信号传导通路与成骨细胞108
2 糖皮质激素(GC)对成骨细胞的抑制作用及滋阴补肾法对其的调节108-109
3 糖皮质激素(GC)对Wnt信号传导通路的影响及滋阴补肾法对其的调节109-111
小结111-112
结论112-113
参考文献113-116
致谢116-117
个人简历117-119
附图119-126
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式
【引证文献】
中国期刊全文数据库
王剑;郑洪新;刘瑞辉;张锦萍;;[J];实用中医内科杂志;2012年01期
尤煜棋;赵华;谢英才;庒日喜;;[J];齐鲁药事;2012年08期
何淼泉;徐莉;范永升;;[J];浙江中西医结合杂志;2012年04期
中国博士学位论文全文数据库
王剑;[D];辽宁中医药大学;2011年
【参考文献】
中国期刊全文数据库
张彦骅,陈广生,李青;[J];第四军医大学学报;2005年17期
张建;胡远兵;杨忠;蔡文琴;;[J];中国组织化学与细胞化学杂志;2006年02期
刘尚全;陈名道;;[J];国际内分泌代谢杂志;2006年02期
许勇,王铸钢;[J];国外医学.骨科学分册;2004年06期
余亚莉;[J];国外医学.遗传学分册;2003年04期
刘素彩,杨学辉,李恩;[J];河北医科大学学报;2001年02期
廖进民,李青南,黄莲芳,谢华,刘郴淑;[J];解剖学杂志;1994年04期
韩大成;张柳;曲强;;[J];华北煤炭医学院学报;2007年01期
陈秋霞;史建强;李常兴;周斌;覃冬梅;吴铁;吴志华;;[J];中国热带医学;2006年06期
史传道;汶勇军;贾文鹏;段永峰;;[J];陕西中医学院学报;2007年05期
【共引文献】
中国期刊全文数据库
杨志刚;沈宗根;顾振纶;张燕萍;谢梅林;;[J];安徽农业科学;2008年29期
詹红生,石印玉,赵咏芳,谢远军,褚海林;[J];浙江中医学院学报;2001年03期
李毅;蔡文品;胡永文;徐仲翔;安漫红;;[J];浙江中医药大学学报;2009年01期
王栋;何建平;李金钢;申小蕾;;[J];动物学杂志;2006年03期
黎劲红,傅明,廖威明,周肇平;[J];北京体育大学学报;1999年04期
陈玉凤,陆一帆,刘少英,熊鹰,李丽;[J];北京体育大学学报;2003年04期
张红梅;[J];北京中医;2001年02期
宫琳;周延民;李春艳;王林;张玉凤;杨炎忠;;[J];吉林大学学报(医学版);2008年05期
陈一冰,熊正英,周勇,李靖;[J];首都体育学院学报;2002年04期
赵恒侠;[J];中国医药学报;2001年02期
中国重要会议论文全文数据库
鞠大宏;;[A];首届中国中医药实验动物科技交流会论文汇编[C];2002年
赵钢;王立恒;;[A];第十三届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文集[C];2005年
沈培芝;徐宇;赵咏芳;石印玉;;[A];全国老年骨质疏松专题学术研讨会论文汇编[C];2000年
谢晓芳;彭成;;[A];'2008临床中药学学术研讨会论文集[C];2008年
韩丽萍;王小宁;;[A];中华中医药学会中医诊断学分会第十次学术研讨会论文集[C];2009年
祝勇;许昕;王莒生;李萍;刘欣;唐勇;;[A];全国中医药研究生专辑[C];2005年
艾双春;路雪婧;廖方正;陈晓莉;;[A];2002中医药博士论坛——中医药的继承、创新与发展[C];2002年
中国博士学位论文全文数据库
廉瑞青;[D];北京协和医学院;2010年
吴薇;[D];华中科技大学;2011年
危玲;[D];湖南中医药大学;2011年
张国民;[D];湖南中医药大学;2011年
钟小文;[D];广州中医药大学;2011年
万雷;[D];广州中医药大学;2011年
王剑;[D];辽宁中医药大学;2011年
朱舜明;[D];第四军医大学;2011年
吴薇;[D];华中科技大学;2011年
胡娅;[D];湖北中医药大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库
王衍彪;[D];泰山医学院;2010年
王丛丛;[D];山东农业大学;2011年
谢红志;[D];北京体育大学;2011年
梁晓霞;[D];华东师范大学;2011年
王广伟;[D];广州中医药大学;2011年
陈小峻;[D];广州中医药大学;2011年
张波;[D];华中师范大学;2011年
韩俊柱;[D];安徽医科大学;2011年
翟旭;[D];北京协和医学院;2011年
张爱丽;[D];南京理工大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库
江润祥,高锦明,叶大同,曹世华;[J];动物学报;1987年04期
唐井钢;李娟;吴贺勇;相锋;;[J];白求恩军医学院学报;2006年02期
陈晓东;林建华;;[J];包头医学院学报;2008年02期
范永升,温成平,吴国琳,李学铭;[J];中华中医药杂志;2005年11期
李楠;王和鸣;郭素华;郑良朴;王力;;[J];中华中医药杂志;2007年08期
王剑;郑洪新;宗志宏;李可强;杨芳;朱辉;张国哲;;[J];中华中医药杂志;2011年04期
何伟;李自力;崔元璐;伊彪;梁成;王晓霞;李阳;王兴;;[J];北京大学学报(医学版);2009年06期
苏友新,乔永平,郑良朴,林久茂,张安桢;[J];福建中医药;2001年03期
苏友新,乔永平,刘献祥,张安桢;[J];福建中医学院学报;2001年02期
王和鸣,王力,李楠;[J];福建中医学院学报;2004年03期
中国博士学位论文全文数据库
张军;[D];成都中医药大学;2006年
高曦;[D];黑龙江中医药大学;2007年
夏雄智;[D];广州中医药大学;2007年
金明柱;[D];辽宁中医药大学;2007年
李福春;[D];吉林大学;2008年
黎波;[D];暨南大学;2008年
刘宏磊;[D];复旦大学;2008年
吴涛;[D];南方医科大学;2009年
孙冬梅;[D];东北师范大学;2009年
孙平;[D];南方医科大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库
乔永平;[D];福建中医学院;2001年
唐井钢;[D];第一军医大学;2005年
王娉;[D];新疆大学;2007年
丁鑫;[D];第四军医大学;2007年
张丽娜;[D];河北医科大学;2008年
赵媛媛;[D];华中科技大学;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库
许传芳;顾筱英;洪颖;胡志沁;;[J];放射免疫学杂志;1993年05期
廖进民,李青南,吴铁,黄莲芳,梁念慈;[J];广东解剖学通报;1996年01期
,徐隆绍;[J];国外医学.内分泌学分册;1990年01期
张建,胡远兵,杨忠,蔡文琴;[J];解剖科学进展;2005年03期
廖进民,李青南,黄莲芳,谢华,刘郴淑;[J];解剖学杂志;1994年04期
万学峰,牛文光,惠艳;[J];临床荟萃;2004年18期
史传道,汶勇军;[J];陕西中医学院学报;1999年02期
史传道,张快强,贾文鹏,杨晓航;[J];陕西中医;2005年08期
田成功;[J];实用老年医学;2000年03期
吴铁,崔燎,陈志东,张志平,廖进民,李青南,黄连芳;[J];中国中医药科技;1996年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库
蒋天骄;;[J];临床合理用药杂志;2011年07期
赵宏艳,刘红,刘梅洁,鞠大宏;[J];中国中医基础医学杂志;2005年11期
邹军;吕爽;屠嘉衡;董苗淼;张丽;林菲;;[J];中国中医基础医学杂志;2009年04期
赵宏艳;鞠大宏;刘梅洁;于智敏;张立石;赵林华;于福禄;李艳;滕静如;刘红;;[J];中国中医基础医学杂志;2006年09期
姜文雄;孟国林;刘建;杨鹏;李强;;[J];科学技术与工程;2006年21期
李俊岩;董进;;[J];中国骨质疏松杂志;2007年12期
杨召;马信龙;马剑雄;;[J];中国骨与关节外科;2009年04期
孙海涛;丁仁;尹宏;钱卫庆;;[J];医学综述;2010年24期
蒋谊;魏启幼;;[J];国外医学.老年医学分册;2004年04期
隋福革,张达,符强,汪群,藤家松,刘玉槐,李建军,徐莘香;[J];中国骨肿瘤骨病;2005年04期
中国重要会议论文全文数据库
梁瑛琳;;[A];中华护理学会第11届全国骨科护理学术交流暨专题讲座会议论文汇编[C];2009年
庞小芬;王培霞;;[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
梁春蕊;王茜;;[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
周君;郭华;夏璐;陈世菊;覃渝茜;刘慧芳;何成奇;;[A];中国康复医学会运动疗法分会第十一届全国康复学术大会学术会议论文摘要汇编[C];2011年
吴江平;;[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
吴何嘉;刘斯润;弓健;;[A];2009中华医学会影像技术分会第十七次全国学术大会论文集[C];2009年
王晓东;邓伟民;洪曼杰;刘丰;王青;孙平;;[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
朱伟民;阎华;朱东;赵双龙;;[A];2008年全国生物流变学与生物力学学术会议论文摘要集[C];2008年
刘忠厚;;[A];中国老年学学会2006年老年学学术高峰论坛论文集[C];2006年
宁魏青;杨玲;吴洁;沈彩娥;殷华芬;;[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年
中国重要报纸全文数据库
张松伟;[N];中国消费者报;2007年
孟刚;[N];中国消费者报;2007年
王金山;[N];中国医药报;2007年
熊迎;[N];中国医药报;2007年
蒲昭和;[N];卫生与生活报;2008年
李涛;[N];中国食品质量报;2009年
吴晓静;[N];山西科技报;2004年
蒲昭和;[N];民族医药报;2002年
健康时报记者　　赵晴晴;[N];健康时报;2006年
叶哲伟;[N];家庭医生报;2006年
中国博士学位论文全文数据库
刘梅洁;[D];中国中医科学院;2009年
裴育;[D];中国协和医科大学;2003年
郭帮富;[D];广州中医药大学;2008年
周亚娜;[D];湖北中医学院;2008年
鲍圣涌;[D];湖北中医学院;2005年
王建;[D];第三军医大学;2009年
王燕;[D];河北医科大学;2011年
邵敏;[D];广州中医药大学;2001年
韩利华;[D];第四军医大学;2004年
傅德皓;[D];华中科技大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库
颜春鲁;[D];兰州大学;2008年
张丽娜;[D];河北医科大学;2008年
杨巍;[D];武汉体育学院;2007年
徐凌霄;[D];南京中医药大学;2010年
郁晖晖;[D];江西师范大学;2009年
马金;[D];辽宁中医学院;2002年
彭柯萍;[D];暨南大学;2003年
倪圣陶;[D];广州中医药大学;2009年
汤群芳;[D];苏州大学;2006年
林新富;[D];福建医科大学;2007年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 知识超市公司
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
同方知网数字出版技术股份有限公司
订购热线：400-819-82499
在线咨询：
传真：010-
京公网安备74号对不起，该类目不存在