MasterMix反复冻融试验箱会导致什么

A-G这五个步骤简单设置好可以保存,修改反应程序或者立刻进行反应

需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料,默认的是ROX有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面;也有的是單独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择BioTeke的MasterMix里没有参比染料,所以选择“none”

设置好之后,就可以把配置好的PCR管放进仪器點击RUN!

通常是3-15个循环的荧光信号

同一次反应中针对不同的基因需单独设置基线

自动设置是3-15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍

手动设置:置於指数扩增期,刚好可以清楚地看到荧光信号明显增强

同一次反应中针对不同的基因可单独设置阈值,但对于同一个基因扩增一定要用哃一个阈值

Ct值:与起始浓度的对数成线性关系。

分析定量时候一般取Ct:15-35太大或者太小都会导致定量的不准确。

Rn(Normalized reporter)是荧光报告基团的荧光發射强度与参比染料的荧光发射强度的比值

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