人脊柱韧带撕裂细胞体外培养的方法和注意事项是什么?求教高手!勿粘贴

成纤维细胞体外培养几种方法的比较--《医学信息(中旬刊)》2011年05期
成纤维细胞体外培养几种方法的比较
【摘要】:本研究采用组织块培养法和消化培养法,对10-13日龄鹅胚原代和传代成纤维细胞进行培养,探讨鹅胚成纤维细胞适宜的培养模式。结果表明:血清浓度在10%、pH6·8-7·2时,细胞生长良好;细胞呈梭形,星形等典型特征,且消化培养法培养出的成纤维细胞优于组织块培养法培养的细胞,采用组织块培养法培养的细胞主要分布在组织块周围,而用消化法培养的细胞则均匀地分布在培养瓶底壁,经过分析、综合摸索出一种比较经济实用的培养方法。
【作者单位】:
【关键词】:
【分类号】:R329【正文快照】:
1·材料与方法1·1材料:①实验动物:10-13日龄的鹅胚:购自绍兴咸亨育鹅厂,人工孵化。②实验药品和试剂:DMEM、小牛血清、PBS、Hank s液、0·4%酚红液、D-Hank s、胰蛋白酶、碘酒等。③实验仪器:BB5060UV型贺氏二氧化碳培养箱、LG16-W高速微量离心机、Leica DMIRB型倒置显微镜
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成人黄韧带细胞的体外培养
摘 要:目的:探讨成人黄韧带细胞的体外培养方法.为研究黄韧带退变的发病机制奠定基础。方法:采集成年胸腰椎骨折患者后路减压术中的黄韧带,应用胶原酶预消化组织块培养法分离黄韧带细胞,并传代培养;倒置相差显微镜下观察细胞从组织块内迁出时间、细胞形态和生长状态;传1、3、5代细胞培养1-8d.用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定其吸比度(OD)值,评价细胞增殖状况,并绘制细胞生长曲线:用免疫荧光染色法检测传3代细胞的波形蛋白和I型胶原的表达。结果:存原代培养第10~14天,黄韧带细胞开始从组织块迁出.细胞呈多种形态,主要为梭形和多角形,细胞接近融合时呈涡流状生长。传1、3、5代细胞生长曲线呈S形.同一代细胞在不同时间点的OD值差异有统计学意义(P〈0.001),同~时间点不同代次细胞的OD值无统计学差异(P〉0.05),细胞代次与时间点间无交互效应,各代细胞增殖状况无统计学差异(F=0.283.P=0.957)。传3代细胞的波形蛋白和I型胶原免疫荧光染色呈阳性、结论:胶原酶预消化组织块培养法能有效分离成人黄韧带细胞:体外培养的黄韧带细胞呈成纤维细胞样表型,细胞在传5代以内生物学特性稳定。
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成人黄韧带细胞的体外培养
发布时间:
【题 名】成人黄韧带细胞的体外培养
【作 者】钟招明 张宇 查丁胜 赵成毅 徐俊昌 陈建庭
【机 构】南方医科大学南方医院脊往骨病外科,广州市510515
【刊 名】《中国脊柱脊髓杂志》 2010年第1期,62-65页
【关键词】黄韧带 细胞培养 退行性变
【文 摘】目的:探讨成人黄韧带细胞的体外培养方法.为研究黄韧带退变的发病机制奠定基础。方法:采集成年胸腰椎骨折患者后路减压术中的黄韧带,应用胶原酶预消化组织块培养法分离黄韧带细胞,并传代培养;倒置相差显微镜下观察细胞从组织块内迁出时间、细胞形态和生长状态;传1、3、5代细胞培养1-8d.用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定其吸比度(OD)值,评价细胞增殖状况,并绘制细胞生长曲线:用免疫荧光染色法检测传3代细胞的波形蛋白和I型胶原的表达。结果:存原代培养第10~14天,黄韧带细胞开始从组织块迁出.细胞呈多种形态,主要为梭形和多角形,细胞接近融合时呈涡流状生长。传1、3、5代细胞生长曲线呈S形.同一代细胞在不同时间点的OD值差异有统计学意义(P〈0.001),同~时间点不同代次细胞的OD值无统计学差异(P〉0.05),细胞代次与时间点间无交互效应,各代细胞增殖状况无统计学差异(F=0.283.P=0.957)。传3代细胞的波形蛋白和I型胶原免疫荧光染色呈阳性、结论:胶原酶预消化组织块培养法能有效分离成人黄韧带细胞:体外培养的黄韧带细胞呈成纤维细胞样表型,细胞在传5代以内生物学特性稳定。
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