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霍华德霉菌计数板/郝氏计测玻片
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信息内容：3M酵母及霉菌计数板
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产品报价：2500元
更新时间： 9:27:49
产地：北京
品牌：轩泰仪
型号：XTY6103553
厂商性质：生产商
公司名称： 轩泰仪（北京）科技有限公司
产品关键词：
梁先生 : () (010-)
（联系我时，请说明是在来宝网上看到的，谢谢！）
该厂商其他产品
主要用于番茄厂化验室
常用的方法为郝氏霉菌计数法，或称霍华德（Howard）霉菌计数法。
1. 适用范围
本方法适用于各种加工的水果和蔬菜制品，如番茄酱、果酱和果汁等。霉菌可以作为一种指示菌，表明加工制品的原料有霉菌所致的腐烂存在。此法系在一个标准计数玻片上计数含有霉菌菌丝的显微镜视野。
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（联系我时，请说明是在上看到的，谢谢！）霉菌和酵母菌计数
来源/作者：中国标准物质网　　日期：
霉菌和酵母菌计数
霉菌和酵母菌计数可以反映食品被污染的程度。目前已有若干个国家制定了某些食品的霉菌和酵母限量标准。我国已制定了糕点和蜜饯食品中霉菌和酵母的限量标准，其他食品霉菌和的限量标准也在制定中。
一、霉菌和酵母计数（倾注法）
参照GB 0《食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数》，适用于测定各种粮食、食品和饮料中和的计数。
1、培养基的选择
(1)一一琼脂培养基（PDA）霉菌和酵母在PDA培养基上生长良好。用PDA做平板计数时，必须加入抗生素以抑制细菌。
(2)孟加拉红（虎红）培养基该培养基中的孟加拉红和抗生素具有抑制细菌的作用。孟加拉红还可抑制霉菌菌落的蔓延生长。在菌落背面由孟加拉红产生的红色有助于霉菌和酵母菌落的计数。
(3)高盐察氏培养基粮食和食品中常见的曲霉和青霉在该培养基上分离效果良好，它具有抑制细菌和减缓生长速度快的毛霉科菌种的作用。
2、操作方法
(1)检样稀释及培养为了准确测定霉菌和酵母数，真实反映被检食品的卫生质量，首先应注意样品的代表性。对大的固体食品样品，要用灭菌刀或镊子从不同部位采取试验材料，再混合磨碎。如样品不太大，最好把全部样品放到灭菌均质器杯内搅拌2min。液体或半固体样品可用迅速颠倒容器25次来混匀。有的规定在实际操作时，振摇时振幅要30cm,7s振摇25次。
①以无菌操作将检样（块状食品需剪碎后置灭菌乳钵磨碎）25g（或25mL)放入含有225mL灭菌蒸馏水带玻塞锥形瓶（液体样品瓶内需预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分振摇，做成1：10的均匀稀释液。
②吸取1:10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌水的试管中（注意吸管尖端不要触及试管内稀释液），另换一支1mL灭菌吸管吹吸稀释液使其充分混合均匀（使霉菌孢子充分散开），做成1：100的稀释液。
③吸取1mL 1：100稀释液于含有9mL灭菌水的试管中，按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每递增稀释一次，即换用一支吸管。
(2)倾注培养根据食品卫生标准要求或对样品污染的情况估计，选择2-3个适宜的稀释度（液体样品可以包括原液），在做10倍递增稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度作两个平皿。稀释液移入平皿后，应立即将晾至46℃左右的马铃薯-一琼脂培养基或孟加拉红培养基15-20mL注入平皿中，立即倾注并旋转混匀，先向一个方向旋转，再转向相反方向，充分混合均匀。待琼脂凝固后，翻转平板，置25-28℃温箱中，培养5d，观察并记录结果。
3、菌落计数方法
做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。记录稀释倍数和相应的平板菌落数。
4、霉菌和计数的报告
选取菌落数在10-150 CFU的平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记为多不可计。菌落应采用两个平板的平均数乘以相应稀释倍数，即为每克或每毫升检样中所含霉菌和酵母计数，以CFU/g（或CFU/mL)表示。
二、霉菌直接镜检计数法
常用的方法为郝氏霉菌计数法或称霍华德（Howard)霉菌计数法。本方法适用于各种加工的水果和蔬菜制品，如番茄酱、果酱和果汁等。可以作为一种指示菌，表明加工制品的原料有霉菌所致的腐烂存在。此法系在一个标准计数玻片上计数含有霉菌菌丝的显微镜视野。
2.1设备和材料
(1)显微镜霉菌直接计数用的双筒显微镜一定要有标准化视野，在90-125倍时视野直径为1.382mm。同时在一个目镜中装配有一个特制的测微玻璃圆盘，其上刻有每边长度相当于视野直径1/6的36个小方格。
(2）郝氏计测玻片系特制的玻璃载片，带有一个20mm×15mm的长方形平面，即计测室，其周围有沟，两侧各有一条高出长方形平面0.lmm的肩堤，盖片放在肩堤上面，盖片和长方形平面之间相距0.lmm。中央长方形平面，肩堤和盖片共同形成一个光学工作面。为了便于校正显微镜，计测玻片上刻有两条相距1.382mm的平行线，作为校正显微镜视野的标准线。
(3)稳定液0.5 %溶液。在高速搅拌器的杯中加入500mL沸水，加2.5g纤维素胶和lOmL约为37％的甲醛，混合约I min，也可用3％-5％果胶或1％藻胶代替。用真空或加热的方法去除溶液中的气泡，调节pH至7.0-7.5。如无搅拌器，则可将干燥的稳定剂与混合，以促进其在水中的溶解。
(4）其他折光仪、烧杯、玻璃棒、盖玻片等。
2.2操作方法
(1)样品制备
①番茄酱：用小烧杯称取约l0g样品，加蒸馏水稀释至约30mL，用折光仪测定其折光指数为1.0，即浓度为7.9％-8.8％。
②苹果酱：用小烧杯称取一定量的样品，加等量的稳定液制成样液。
(2）涂片用蒸馏水清洗郝氏计测玻片和盖片，擦干后，将盖片压在计测玻片的肩堤上，观察玻片和盖片之间形成的牛顿环，如无牛顿环，说明玻片和盖片不清洁，应重新清洗。用玻璃棒将制好的样液均匀涂布于计测玻片中央平面计测室上，盖上盖片。
(3)观测采用8-12.5倍目镜和10倍物镜，用刻有间距1.382mm平行线的计测玻片调节视野为1.382mm。将特制测微圆盘放入目镜中，使其上方格每边为视野直径的1/60将计测玻片置显微镜下，用90-125倍的放大倍数检查每个视野。每个样品应检查2个玻片，每个玻片至少检查25视野，即一共应观测50个视野，同一检样应该由2个入观察。
2.3霉菌菌丝的特征
(1)平行壁霉菌菌丝呈管状，多数情况下，整个菌丝体的直径是一致的。因此在显微镜下菌丝壁看起来像两条平行的线。这是区别霉菌菌丝和其他纤维时最有用的特征之一。
(2)横隔许多霉菌的菌丝具有横隔，毛霉、根霉等少数霉菌的菌丝没有横隔。
(3)菌丝内呈粒状薄壁、呈管状的菌丝含有原生质，在高倍显微镜下透过细胞壁可见其呈粒状或点状。
(4)分支如菌丝不太短，则多数呈分支状，分支与主干的直径几乎相同，有分支是鉴定霉菌最可靠的特征之一。
(5)菌丝的顶端常呈钝圆形。
(6)无折射现象凡有以上特征之一的丝状体均可判定为霉菌菌丝。
观察视野中有无菌丝，凡符合下列情况之一者为阳性视野。
①一根菌丝长度超过视野直径1/6;
②一根菌丝长度加上分支的长度超过视野直径1/6;
③两根菌丝总长度超过视野直径1/6;
④三根菌丝总长度超过视野直径1/6;
⑤一丛菌丝可视为一个菌丝，所有菌丝（包括分支）总长度超过视野直径1/6。
根据对所有视野的观察结果，计算阳性视野所占比例，并以阳性视野百分数（％）报告结果。
计算公式：（阳性的可视划区／镜检的总可视划区数）× 100＝阳性比率％
【关键词】羧甲基纤维素钠 酒精 霉菌 酵母君，已阅读到文档的结尾了呢~~
1适用范围本方法适用于清汁、浊汁、水、浓缩果汁中霍华德霉菌直接镜检计数。2设备和材料2.1烧杯2.2玻璃棒2.3折光仪2.4显微镜2.5郝氏计测玻片3 流程 取样→称样→稀释→调节视野→涂片→观察→记录→计算
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霍华德霉菌直接镜检计数法
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3秒自动关闭窗口实验八食品中霉菌计数法；1目的；1.1了解霍华德（howard）霉菌计测装置；1.2初步掌握番茄酱的霉菌计测方法；2原理；各种加工的水果和蔬菜制品，如番茄酱原料、果酱和果；3材料；3.1样品；番茄酱；3.2计测装置和器具；计测装置、显微镜、折光仪或糖度计、烧杯、量筒、托；取样→称样→稀释→调节视野→涂片→观察→记录→计；5步骤；5.1取样；抽样数量按每班成品
实验八 食品中霉菌计数法
1.1 了解霍华德（howard）霉菌计测装置
1.2 初步掌握番茄酱的霉菌计测方法
各种加工的水果和蔬菜制品，如番茄酱原料、果酱和果汁等易受霉菌的污染，适宜条件下霉菌不仅能生长，还能繁殖。以番茄制品为例，在加工中若原料处理不当，产品中就会有霉菌残留。因此，利用霍华德霉菌计数法，可通过在一个标准计数玻片上计数含有霉菌菌丝的显微视野，知道番茄酱中霉菌残留的多少，对番茄制品质量的评定，具有一定参考价值。番茄制品中霉菌数的多少，可以反映原料番茄的新鲜度、生产车间的卫生状况、生产过程中是否有变质发生。因此控制原料番茄的新鲜度以降低产品中霉菌含量是非常必要的。番茄酱霉菌数的部颁标准为阳性视野不超过40%。
3.2 计测装置和器具
计测装置、显微镜、折光仪或糖度计、烧杯、量筒、托盘天平等。计测装置（包括载玻片、盖玻片、测微计）结构如图8-1、图8-2图和8-3所示。
取样→称样→稀释→调节视野→涂片→观察→记录→计算
抽样数量按每班成品五吨以下取样一罐，产量每增加五吨，取样量增加一罐。不同浓度和规格可以混合计算，不足五吨按每班取样一罐。
5.2 检样制备
番茄汁和调味番茄酱可直接取样；番茄酱或番茄糊须加水稀释为固形物含量相当于20°C下折光指数为1.0（即浓度为7.9％～8.8％）的标准样液。
5.2.1 称样
用小烧杯在托盘天平上称取10g（浓度约28.5％）番茄酱。
5.2.2 稀释
向小烧杯中加入26ml蒸馏水，用玻棒搅拌均匀，即为折光指数1.0（或浓度为7.9％～8.8％）的标准样液。用糖度计或折光仪测定折光指数或浓度，如果折光指数过大或过小，须加水或样品，直至配成标准样液，才能进行检验。
5.3 标准视野的调节
霍德华霉菌计测用的显微镜，要求物镜放大倍数为90～125倍，其视野直径的实际长度为1.382mm，则该视野为标准视野。
检查标准视野：将载玻片放在载物台上，配片置于目镜的光栏孔上，然后观察。标准视野要具备两个条件：载玻片上相距1.382mm的两条平行线与视野相切；配片（测微器）的大方格四边也与视野相切。如果发现上述两个条件，其中有一条不符合，须经校正后再使用。
如图8-4所示。
5.4.1 检查玻片
首先用擦镜纸或绸布沾酒精将载玻片和盖玻片擦净。检查是否擦干净，可将盖盖玻片置于载玻片的两条突肩上观察盖玻片与载玻片突肩的接触处是否产生牛顿环，如果没有产生牛顿环，表明没有擦净，必须重新擦，直至产生牛顿环，方可使用。
5.4.2 加样
用滴管或玻棒取一大滴混合均匀的样液，均匀地摊布于载玻片中央的平坦面上，盖上盖玻片（盖玻片可直接盖上去，也可以从突肩边沿处吻合切入）。
如果发现样液涂布不均匀、有气泡、或样液流入沟内、从盖玻片与突肩处流出、盖玻片与载玻片的突肩处不产生牛顿环等，应弃去不用，重新制作。
涂好的制片，在计测室内，每个标准视野的样液体积为：
πr2×0.1＝3.1416×（1.382/2）2×0.1＝0.15mm3
5.5 观察记录
5.5.1 观察视野数及分布
对一般样品，每个涂片均检查50个视野（每一个样品至少应测25个视野，才能代表样品的各个部分。如果检查结果阳性视野低于30％，则检查25个视野即可；如果在30～40％之间，须检查50个视野；如果在40～50％之间，须检查100个视野；如果在50％以上或超过更多，则要继续检查，直至检查25个视野的结果与一系列计算结果无差异为止）。所检查的50个视野要均匀地分布在计测室上（图8-5），可用显微镜载物台上带有标尺的推进器来控制，从上到下，或从
左到右一行行有规律地进行观察。
5.5.2 霉菌菌丝的鉴别
菌菌丝往往与番茄组织难以区别，但能够很有把握地加以区别，这是保证计测结果准确的重要环节之一。在同一视野内霉菌菌丝的特征是：
5.5.2.1 霉菌菌丝一般粗细均匀
5.5.2.2 霉菌菌丝体内含有颗粒，具有一定的透明度
5.5.2.3 有的霉菌菌丝有横隔
5.5.2.4 有的霉菌菌丝有分支
而番茄组织的细胞壁大多呈环状，粗细不均匀，细胞壁较厚，且透明度不一致。当在标准视野下不能确认为霉菌菌丝时，可放大200倍或400倍上下调节视野，观察不同平面的菌丝。
5.5.3 记录结果
5.5.3.1 阳性视野与阴性视野的判断：在标准视野下，上下调节焦距发现有霉菌菌丝，其长度超过标准视野直径（1.382mm）的1/6（即一个小方格的边长）或三根菌丝总长度超过标准视野直径的1/6，这个视野称为阳性视野，否则称为阴性视野。有时在标准视野中出现极细的菌丝丛或小菌落，则以其直径来计算，超过视野直径1/6为阳性视野，否则为阴性视野。阳性视野用“＋”表示；阴性视野用“－”表示之。
5.5.3.2 对初次学习霍德华霉菌计测法者，作记录前，先在记录纸上划出计测室上50视野均匀分布的小格，观察一个标准视野，立即在相应的方格内作“＋”或“－”的记录，或“－”以空格表示之（如图8-6）。
这种记录方法，在计测过程中，可减少重复或遗漏计数的现象，也可以从记录表格上“＋”、“－”视野的分布，了解涂片是否均匀。
如果一个样品做两个片子，观察结果误差较大（超过6％），则另取样涂片，观察测定至误差＜6％时为止。
霍德华霉菌计测数值，又称霉菌数，用百分比表示。其含义如下：
将0.15mm3标准样液，均匀地摊布成厚0.1mm，直径为1.382mm，其面积为1.5mm2的标准视野，在显微镜下检查。按100个视野数计算，其中发现有霉菌菌丝存在的视野数（即阳性视野数）。
根据霉菌数含义，其计算公式如下：
阳性视野数
霉菌数（％）＝
举例如图18-6：记录的阳性视野数，片1为15，片2为16，则样品的霉菌数为：
（15＋16）
样品霉菌数（％）＝
×1/2×100％＝31％
6.2 注意事项
部颁标准为阳性视野不超过40％，在国际贸易中，合同上无要求时按部颁标准执行，合同上有要求时按合同执行;每抽取一罐样品制两个片子，每片观察50个视野，如果超过标准指标，应该继续制片，但片子数量不得少于3片即150个视野，如果计测结果相近时，可取其平均值;如对抽样结果有异议，应加倍抽样。全部合格，作为合格处理，其中有一罐不合格，该批作为不合格处理。
作好计测记录，按记录计算计测结果并作报告。
7.1 霍华德霉菌计测装置的构造？
7.2 霍华德霉菌计测过程中要注意什么？
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