大家对乙肝病毒 基因分型图基因检测怎么看

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我国的乙肝病毒感染率约60%-70%;乙肝表面抗原携带率约占总人口的7.18%,以此计算,全国约有9300万人携带乙肝病毒,其中乙肝患者大约有3000万。那么如何准确地检测是否携带乙肝病毒呢?现在市面上有哪些产品?或者已经正在审批的产品?
常用的HBV-DNA检测方法有斑点杂交法和PCR法:
乙肝HBV-DNA检测方法一是斑点杂交法:此方法是传统的方法,成本比较低,但是灵敏度和精准度不高,出现假阳性的几率比较高,只能做定性检测,不能做乙肝定量检测,即只能检测DNA是阳性还是阴性,不能检测出乙肝病毒在身体内的含量。
乙肝HBV-DNA检测方法二是PCR法:PCR法是基因检测中使用最多的方法,是聚合酶链式反应的简称,是一种酶促反应。此方法可以在短时间内将待测基因扩增到上百万倍,这样可以大大提高基因诊断的准确度,保证此检查方法的灵敏度。PCR法分为三步,第一是对待测的基因进行PCR,然后电泳此结果,接下来就是对此结果进行分析。这样不仅可以定性乙肝病毒DNA检测,还可以定量检测,而且也可以判断基因段是否有缺失或者变异,这样可以准确判断病情。
HBV-DNA检测于患者意义重大,而且做HBV-DNA检测对医疗水平要求较高,因此为了保证检测结果的准确性,患者做HBV-DNA检测时一定要去大型医院。
乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒携带者的常规检查包括乙肝(乙型病毒性肝炎)两对半、乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒DNA、肝功能、B超、甲胎蛋白等等。
1、乙肝(乙型病毒性肝炎)两对半检查。第一对就是指表面抗原和表面抗体。第二对就是e抗原和e抗体。“半”指的是核心抗体。是诊断乙肝(乙型病毒性肝炎)感染的基本依据,HBsAg(+)提示感染了乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒,但不提示病毒复制及传染性;抗HBs(+)表示有保护性抗体,对乙肝(乙型病毒性肝炎)有免疫力,注射乙肝(乙型病毒性肝炎)疫苗及自然感染康复后都可产生抗HBs;HBeAg(+)是乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒复制的指标,提示有传染性;抗HBe(+),一般情况下提示乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒低复制或不复制,少数情况下结合DNA检测明确是否存在病毒变异;抗HBc提示感染过乙肝(乙型病毒性肝炎);抗HBc-IgM(+)提示病毒复制。
  2、乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒DNA检测。是最新乙型肝炎检测手段,它的临床意义是要了解乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒在体内存在的数目;乙肝(乙型病毒性肝炎)病毒是否在复制;患者是否会传染给他人、传染性有多强;是否有必要服药控制;肝功能异常改变是否由病毒引起,以及判定病人适适用哪类抗病毒药物并判定药物治疗的疗效等等。
  3、肝功能:转氨酶尤其是ALT是乙肝(乙型病毒性肝炎)患者肝细胞损伤的敏感标志;血清总蛋白分白蛋白和球蛋白,白蛋白下降提示肝细胞损害,慢性肝炎、肝硬化(liver时常出现白蛋白减少而球蛋白增加,A/G比例颠倒。
  4、B超:肝脏影像学检查,对乙肝(乙型病毒性肝炎)、肝硬化(liver、脂肪肝、腹水、肝癌都有一定的提示和诊断作用。
  5、甲胎蛋白(AFP)。此项是检查乙肝(乙型病毒性肝炎)患者是否肝癌的标志物。AFP在B超、CT、磁共振成像没发现肝脏肿块之前就可以明显升高,可以超早期发现原发性肝癌,这是医学界目前公认超早期发现原发性肝癌最有效的方法,也是一项成熟的技术。
HBV检测方法主要有:荧光定量PCR技术、竞争PCR技术、PCR酶联免疫吸附法、荧光标记引物法和PCR酶联化学发光法。
临床上最先进的乙肝病毒DNA检测方法是实时荧光定量PCR方法,由于此技术要求较高,目前只有少数大型医院有条件使用实时荧光定量PCR方法。
HBV—DNA定量检测指标降低在乙肝治疗中有着非常重要的意义,是乙肝转阴的前奏,也是康复最为关键的一步,只有体内的HBV—DNA定量指标降低,病毒的复制繁殖才会停止,乙肝的彻底治愈才有希望。
乙肝病毒DNA检测的临床意义有:
一、对医生的诊断和用药非常重要。通过乙肝病毒DNA检测能够判定判断乙肝患者适合用哪类抗病毒药物;乙肝病毒DNA检测对用药的剂量、用药时间、是否需要联合用药以及用药的效果等提供重要的参考依据,也是临床上评价抗病毒或免疫增强药物疗效的最客观的指标。
二、能够直接反映乙肝病毒复制状态及传染性的最佳指标,通过乙肝病毒DNA的含量能直接反映病毒在体内存在的数量、是否传染,传染性有多强。但是需要说明的一点是:乙肝病毒载量的多少并不代表肝脏的损伤程度,也无法判断病情的严重程度。
三、反映病毒复制的活跃程度,间接地反映机体的免疫应答水平。
乙肝病毒的诊断主要有两类:血清特异性抗原抗体(ELISA)检测和乙肝病毒基因(HBV-DNA)检测。
1. 血清特异性抗原抗体(ELISA)检测一直是临床诊断HBV感染的传统手段,反映机体HBV感染的免疫状态。
2. HBV-DNA检测则是采用聚合酶链反应(PCR)技术,特异性扩增乙肝病毒基因组保守的C基因区上270bp基因片段,以近于2n的指数(n为循环次数),在数小时内可将极微量的HBV-DNA特定的分子片断扩增至1x107~1x108倍,大大提高了HBV的检出率,为临床诊断是否为HBV感染提供了一种强有力的手段。 最先进的乙肝病毒DNA检测方法是实时荧光定量PCR方法,由于此技术要求较高,目前只有少数大型医院有条件使用实时荧光定量PCR方法。
虽然基因芯片和测序技术都有能力对HBV进行检测,但国内仍没看到相应的产品。
李松在2007年对264例HBV的两种检测方法(酶联免疫法检测HBeAg,用荧光定量PCR法检测HBV-DNA)进行了比较,结果显示,264例乙肝患者HBeAg、HBV-DNA阳性检出率分别为40.15%、72.35%;HBeAg阳性和阴性标本的HBV-DNA阳性率分别为96.23%和48.10%。得出的结论:HBV-DNA阳性检出率高,比HBeAg更有意义,两种检测方法相互补充,联合运用对HBV感染的诊治有更大作用。
参考文献:264例HBV的两种检测方法比较
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【求助】血清中提取乙肝病毒DNA
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这个帖子发布于3年零0天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
大家帮个忙,看我问题出在哪里?
我用DNA提取试剂盒,提取血清中乙肝病毒DNA,患者的病毒定量是10的6-8次方 copies/ml,提取后开始用150ul的洗脱液,测浓度0.5-13.3ng/ul,考虑因洗脱液太多导致浓度太低,改用30、50ul分别洗脱后,浓度无提高,大家有这方面心得的话,请高手指点迷津,还有一般提取的浓度可以的话,范围应该是多少呢?万分感谢!
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请高手指点迷津
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1 减少洗脱体积有时得率更低,2 OD值用不着测的,测了也不准确;3 你那个浓度做一般实验足够,
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guoxingzhong 1 减少洗脱体积有时得率更低,2 OD值用不着测的,测了也不准确;3 你那个浓度做一般实验足够,谢谢啦,这样我心里就有底了,我直接PCR后再电泳,看结果吧
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你好 我想请问你是用的什么试剂盒提取血清HBV-DNA了?
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你好我用QIAGEN的mini DNA 提取试剂盒从血清中提取DNA,也出现同样的问题,DNA纯度可以,但浓度太低,不知道楼主这个问题是否已解决。谢谢答复~
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血清中的DNA含量本来就少,提取的浓度低很正常,只要PCR之后检测目的基因结果正常就可以。楼上用Qiagen的试剂盒成本太高了吧,国产的几款试剂盒也很好用啊,价格便宜,性价比高。我做血清样本就是用的国产试剂盒,常州百代生物的BIOG血清血浆DNA提取试剂盒,操作简单,只用了30分钟左右就提取完了,做PCR的CT值在23左右,效果还是不错的,推荐给大家。但是有些国产的品牌提取效果就不敢恭维了,有些牌子的我做的CT值36,40的都有,这就需要大家甄别了。
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血清中的DNA含量很少,要做微量提取的话还是建议用试剂盒。我用过天根和常州百代生物这两家的血清游离DNA提取试剂盒,对比下来常州百代生物的BIOG病毒DNA提取试剂盒纯度和提取量要略好一点,后续检测的PCR结果也好一点,CT值比天根的要早3个循环左右,而且,常州百代生物的试剂盒提取耗时短,比较适合样本多的用户。这款试剂盒价格也不贵,50T才五百多,楼主可以试一下。
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关于丁香园乙肝基因检测(PCR)是什么?我们都知道,乙肝患者一般要做乙肝两对半、乙肝病毒DNA等检查,那么是用什么方法做这些检查的呢?什么是乙肝基因检测(PCR)呢?& & & &乙肝基因检测(PCR)是什么?我们都知道,乙肝患者一般要做乙肝两对半、乙肝病毒DNA等检查,那么是用什么方法做这些检查的呢?什么是乙肝基因检测(PCR)呢?
& & &云南肝病医院肝病专家翟淑贤教授指出,病毒性肝炎是感染病毒引起的,病毒通常由蛋白质和核酸两部分组成。 & & &以乙肝病毒为例,它由几种不同的蛋白质和核酸组成,其中的核酸也就是病毒的遗传物质,我们称之为乙肝病毒DNA。临床上想要检查是否患有乙肝,一般要做乙肝两对半检查,也就是检查血液中有没有乙肝病毒的蛋白质(抗原或抗体)。 & & &除此之外,还需要检查乙肝病毒DNA,而乙肝病毒DNA的检查也可以称作基因诊断,目前最常用的是“PCR法”。 & & & & & &翟淑贤教授指出,PCR是一种分子生物学方法,它的全称为:聚合酶链反应。这种方法是用一些特殊的仪器,将非常微量的DNA扩大百万倍,因此,灵敏度非常高。目前很多大医院都有这类检测仪器设备。
& & &可能很多患者还会有疑问,为什么做了乙肝两对半检查还要做乙肝病毒DNA检查呢?翟教授表示,检测乙肝病毒DNA的主要目的是观察治疗的效果、病毒的数量以及传染性大小。 & & &乙肝病毒DNA的水平越高,提示患者体内的病毒量越多,病毒可能正在繁殖复制,其传染性就越强。反之,乙肝病毒被抑制或被清除,传染性也相对较小。而乙肝两对半检查只是初步判断是否感染乙肝病毒,以及区分乙肝大小三阳等,不能对病情做出诊断,因此,乙肝病毒DNA检查具有很重要的作用。长按关注汉龙生物基因汉龙生物基因(gh_92feb924408c) 
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