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抗双链DNA抗体
目录1 拼音kàng shuāng liàn DNAkàng tǐ2 英文参考anti-distrand-DNA antibody anti-double-stranded DNA antibody anti-ds-DNA antibody3 概述抗双链DNA(抗ds DNA)是中的一种。其位点位于DNA磷酸框架上。抗ds DNA主要出现于SLE的中,对SLE患者的损伤有致病。在SLE患者血中,子的DNA浓度显著高于正常人,DNA还可与多种器官的包括肾基底膜上的乙酰(heparansulfate)结合,抗dsDNA抗体可与这些循环中的和器官原位的DNA反应,形成抗体复合物,激活如,导致组织损伤。也有人认为,致病性抗DNA抗体在中的沉积并非只取决于抗DNA抗体与DNA的结合,而是通过与基底膜上硫酸乙酰肝素、(laminin)、等非DNA抗原的交叉反应或静电引力作用固定于肾脏,诱导炎症反应。抗DNA中有的有致病性,有的没有致病性。致病性的抗DNA抗体具有以下特性:亲和性高,能与结合,能结合dsDNA,带正电荷,多反应性,为IgG类。近年来的研究发现,抗DNA抗体能穿入活的,干扰,引起,抗dsDNA抗体也能进入肾小球膜细胞,引起肾小球细胞增殖,促和蛋白尿形成。这可能是致病性抗DNA抗体的另一特征。4 别名,5 抗双链DNA抗体的医学检查5.1 检查名称抗双链DNA抗体5.2 分类检查 & 自身抗体测定5.3 抗双链DNA抗体的测定原理目前,测定抗dsDNA的常用有4种,它们的原理分述如下:
(1)绿蝇短膜虫(crithidia luciliae,CL)间接(IIF)或免疫酶染色(EIS)法:CL属于血属,它有一个大的含纯净dsDNA的即动(kinetoplast),其抗原浓度较Hep-2或肝细胞核中抗原浓度高10倍,待测血清中的抗dsDNA抗体可与之结合(抗ssDNA不能)。在分布有一定浓度CL的抗原片上,IIF法是依次稀释的待测血清,反应后洗片,滴加荧光标记的抗人IgG,反应后洗片,片干后于下观察。抗dsDNA阳性时,CL动基体处出现黄绿色荧光。EIS法原理与IIF法类似,仅以酶标记抗人IgG代替荧光素标记抗体,加酶底物呈色后于普通下观察,抗dsDNA阳性时,CL动基体被特异地染色。
(2)(Farr试验):用放射性(如125Ⅰ)标记dsDNA,加入待测血清后抗dsDNA可与标记dsDNA结合,经50%饱和度硫酸铵。将结合抗dsDNA的标记抗原与未结合的标记抗原分开(前者在沉淀中,后者在上中),再用γ计数仪分别测定放射性,计算出抗dsDNA结合率。并据此判定抗dsDNA的有无。
(3)酶联免疫试验(ELISA):基本原理是将dsDNA于聚等固相载体微孔中,依次加入待测血清、酶标记抗人IgG或酶标记金黄色A蛋白(SPA)、酶底物呈色。每种反应物加入后在一定温度下温育30~60min,彻底后再加下一反应物。呈色程度可用酶联检测仪测定吸光度(A)反映,并据此判定检样中有无抗dsDNA。此法的关键之处是dsDNA很难包被于固相载体上,必须将微孔反应板用、多聚、等做预处理。
(4)滴金免疫渗滤试验(dot immunogold filtration assay,DIG-FA):此法原理与酶免疫斑点试验大致,但以金标记的抗体代替酶标记抗体。预先用亲和素(avidin)或链亲和素(strep-tavidin)包被(NC)膜,再将化的dsDNA结合于其上,将此NC膜固定于渗滤盒中央的圆孔处,其下以填料充实。检测时依次滴加待检血清(如含抗dsDNA,则可与NC膜上dsDNA结合)、洗涤液、金标记SPA、,可在1~2min内完成全部操作。抗dsDNA阳性时,NC膜上包被dsDNA处可出现红色圆点。5.4 试剂同IIF法、EIS法、DIG-FA法。5.5 操作方法同IIF法、EIS法、DIG-FA法。5.6 正常值健康人血清1∶10稀释为阴性(绿蝇短膜虫法)。
健康人结合率≤20%(放射免疫分析法Farr试验)。
一般以待测血清A值/阴性对照A值(P/N)≥2.1为阳性,正常人P/N值<2.1(ELISA法)。
正常人为阴性(NC膜上不出现着色点)(滴金免疫渗滤试验)。5.7 化验结果临床意义抗dsDNA自身抗体是SLE的最重要的自身抗体,检出率40%~70%。高滴度抗dsDNA的存在是SLE诊断的重要依据,也是疾病性特别是肾脏损伤的标志。除用于SLE的诊断外,也可用于临床病程和治疗效果的,对预后也有一定价值。但也有人报道在疾病、青少年型,乃至正常发现低滴度抗dsDNA。5.8 附注上述几种检测技术的特异性都不是100%的。例如,绿蝇短膜虫动基体中虽不含ssDNA,但可能含少量,放免法、ELISA法、滴金渗滤法等用作抗原的dsDNA,也常常含有ssDNA,而即使污染的ssDNA不足1%,引起的假阳性即可高达6%。因此,对抗dsDNA的检测结果应结合临床,必要时应动态观察。此外,鉴于检测试剂中DNA抗原的来源不同,组成和顺序可能有一定差异,使抗体结合的表位变化。5.9 相关疾病类风湿性关节炎相关文献
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&&&&&&&&&抗双链DNA抗体(ani-DNA)
抗双链DNA抗体(ani-DNA)
抗双链DNA抗体(ani-DNA)介绍:
抗DNA抗体包括抗双链DNA抗体、抗单链DNA抗体和抗zDNA抗体。 检验中一般是指与双链DNA和单链DNA都反应的抗双链DNA抗体。 抗双链DNA抗体阳性是系统性红斑狼疮的标志,阳性率达90%以上,有...[查看详细]
抗双链DNA抗体(ani-DNA)正常值:
Farr法:结合活性小于或等于20%。 间接免疫荧光法:阴性。 斑点免疫结合试验:小于1:40(阴性)。 (注:具体参考值请根据各实验室而定。)[查看详细]
抗双链DNA抗体(ani-DNA)临床意义:
阳性或增高: 可能为系统性红斑狼疮,还可见于其他结缔组织病、慢性活动性肝炎等。[查看详细]
抗双链DNA抗体(ani-DNA)相关疾病:
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抗双链DNA抗体测定是对抗双链DNA抗体的测定。抗双链DNA抗体又称为抗天然DNA抗体,是抗核抗体的一种类型,几乎所有红斑狼疮病人都有该抗体的升高。目前认为,它在红斑狼疮的发病中起一定的作用,在一些病人中,DNA的大分子可存在于循环血液中或者粘附于多种器官的微血管上,如肾脏、肺和脑组织,与血液中的自身抗体结合,形成循环免疫复合物,导致组织损伤。 临床意义
系统性红斑狼疮是一种自身免疫性疾病,最重要的表现是全身各个系统、各脏器的损害。所以在这种疾病患者体内存在象抗核抗体一类的多种自身抗体。而抗双链DNA抗体又是抗核抗体的一种类型。人们通常还把它称为抗天然DNA抗体。临床免疫学检查证明,几乎在所有的狼疮性肾炎患者的血清中都能检测出抗双链DNA抗体。目前认为,抗双链DNA抗体能与肾小球的DNA相结合而生成免疫复合物。这些免疫复合物沉积在肾小球毛细血管壁或血管外,在那里固定并活化补体,所释放的趋化因子吸引中性粒细胞,当中性粒细胞脱颗粒时,又释放炎症介质而导致肾小球肾炎。因此约有50%以上的狼疮性肾炎病人循环血液中DNA浓度远较正常健康人为高。但为什么会增高,如何增高,目前人们还不得而知,不过随着医学科学的发展,这些难题一定会得到解决。
一般认为抗双链DNA与系统性红斑狼疮密切相关。临床观察发现抗双链DNA的效价与病情相平行,即病情活动时,抗DNA抗体效价增高,病情缓解时,其效价降低。因此,测定患者血清中抗双链DNA的效价,不但是诊断系统性红斑狼疮的一条重要依据,还是判断疾病活动度和治疗效果的极为重要的指标。
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