血液血浓度高怎么办办?

提血液RNA浓度很低,如何使其浓度高从而用于反转录 - 实验交流 - 生物秀
标题: 提血液RNA浓度很低,如何使其浓度高从而用于反转录
摘要: [提血液RNA浓度很低,如何使其浓度高从而用于反转录] 请高手出手相救啊提取血液RNA的浓度很低,用于下面的20ul反转录体系(最大的rna量不能超过1ug),我是900ng的rna来反转录,提取rna浓度太低,加入的rna体积会超过20ul体系,怎么办。我也尝试过将2管获得的血液组织合并成一管,离心去上清,取下面的(应该含有很多血细胞),然后加1m 关键词:[血液 白细胞 全血 浓度 反转录 血浆 效率]……
请高手出手相救啊
提取血液RNA的浓度很低,用于下面的20ul反转录体系(最大的rna量不能超过1ug),我是900ng的rna来反转录,提取rna浓度太低,加入的rna体积会超过20ul体系,怎么办。
我也尝试过将2管获得的血液组织合并成一管,离心去上清,取下面的(应该含有很多血细胞),然后加1ml trizol提取rna,可是还是很低。
如果血液不离心的话那么我们用的一般的ep管里就盛不下1mltrizol和血液了,那如果血液很多,trizol很少(小于1ul)的话可能也提不好吧。
可不可以找一个大一点的ep管,然后将几管的血液合并在这个管子里,然后再加适量trizol来提取rna。
请各位高手哥哥姐姐指点一二,小弟不尽感激。回复多提几管之后用乙醇沉淀,加少量水溶解回复
多提几管之后用乙醇沉淀,加少量水溶解 我 的血液组织材料较少,分成好几管来提肯定会损失很多。我可以找一个大的ep管如2ml,把几管血液材料都并在这一个管里,只加很少的trizol来提取,这样就会损失少一些,可以吗?请问trizol加入少量如0.2ul,可以吧,谢谢 ,请指教回复RNA提的质量应该不好。RT对RNA质量要求还是挺高的回复做PCR的话,安啦~最后都放大几百万倍,能做出来的回复
RNA提的质量应该不好。RT对RNA质量要求还是挺高的 血液提取rna,用液氮研磨血液冷冻固态 是不是比直接在血液溶液中加trizol效果好啊谢谢回复RT产物做PCR的话没必要纠结RNA的量太少
只要提取、RT、PCR过程没问题的话,该有就会有的
只不过是一旦没有出现期望的结果时,会考虑到有可能是这方面的因素回复
RT产物做PCR的话没必要纠结RNA的量太少
只要提取、RT、PCR过程没问题的话,该有就会有的
只不过是一旦没有出现期望的结果时,会考虑到有可能是这方面的因素 好的 谢谢回复你提的是全血RNA?可是一般的都是替PBMC或白细胞的RNA啊。要是这样的话,你可以把红细胞裂解以后将白细胞收集到一个EP管中再提,Trizol的量不能太少,否则会影响RNA的提取效率的。如果是提取血浆中的病毒RNA,那你可以将血浆或血清单分出来再提啊。另外,象楼上所说,不要太计较总量的,因为还有反转录的步骤,所得产物足够你用了,还有就是找一个较高转录效率的反转录酶也就OK了回复你提的是全血RNA?可是一般的都是替PBMC或白细胞的RNA啊。要是这样的话,你可以把红细胞裂解以后将白细胞收集到一个EP管中再提,Trizol的量不能太少,否则会影响RNA的提取效率的。如果是提取血浆中的病毒RNA,那你可以将血浆或血清单分出来再提啊。另外,象楼上所说,不要太计较总量的,因为还有反转录的步骤,所得产物足够你用了,还有就是找一个较高转录效率的反转录酶也就OK了回复1,原料加量
2,rna样品浓缩回复
1,原料加量
2,rna样品浓缩 好的 谢谢指教 样品浓缩是指离心去上清,要下面的部分 是吧回复
你提的是全血RNA?可是一般的都是替PBMC或白细胞的RNA啊。要是这样的话,你可以把红细胞裂解以后将白细胞收集到一个EP管中再提,Trizol的量不能太少,否则会影响RNA的提取效率的。如果是提取血浆中的病毒RNA,那你 ... 我提的是全血RNA,没有白细胞,红细胞这么复杂,只要按照正常的提取就可以了,要求不高的。我想也按照正常组织那样液氮研磨提取,或许会好一些回复
好的 谢谢指教 样品浓缩是指离心去上清,要下面的部分 是吧 对,RNA可以用异丙醇或无水乙醇沉淀的,具体方法可见《分子克隆》,或者invitrogen 公司trizol试剂的说明书,都有操作步骤回复
对,RNA可以用异丙醇或无水乙醇沉淀的,具体方法可见《分子克隆》,或者invitrogen 公司trizol试剂的说明书,都有操作步骤 谢谢啊回复换份浓度高的样本去做呀回复博奥芯片北京国家工程研究中心:
我们比较了不同公司的产品后,认为北京百泰克公司生产的TRI pure LS Reagent用于全血有核细胞的RNA抽提效果较好,可以满足基因表达谱芯片的分析要求。一般1ml的全血可以得到10μg左右的total RNA,足够满足芯片分析的需要。
在临床上采血时,可以先把TRI pure LS Reagent分装750ul到1.5ml的离心管中。血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可),然后取250ul全血样品加入到750ul的TRI pure LS Reagent中,用移液枪反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液保存在-20℃下可达2个月,-80℃可达半年。在此期间,可以把该裂解液运输到博奥生物公司进行RNA的抽提,运输过程可以4℃ 1天,-20℃ 一周。
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电话:021-红细胞平均血红蛋白浓度偏高怎么办
08-10-20 &匿名提问
红细胞压积还有平均红细胞体积偏低说明你红细胞发育不成熟,或者是缺少促发育成熟的物质!你可以适当补充铁剂一到两周以后复查网织红细胞的数目。如果网织红有明显增高说明补充铁剂治疗有效! 平均红细胞血红蛋白含量和平均红细胞血红蛋白浓度偏高,这个是相对来说的,比如贫血的话,外周血容量少相对血红蛋白就多,平均血红蛋白浓度就高,这样结实你能理解吗?就像一个100米长的管子里面正常通过10个自由电子有8个可以带电,现在100米变成了50米还是有10个自由电子8个可以带电,检查的时候说带电的相对多了!
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平均红细胞血红蛋白浓度偏高是血细胞浓缩的一种表现,常见于从高原回来的人员。正常人出现这种情况一般不需要特殊处理。建议多喝水,多锻炼。
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平均红细胞血红蛋白含量(MCH),MCV下降-----------小细胞低色素性贫血-------多见于缺铁性贫血
1,铁剂治疗:口服铁剂可以用硫酸亚铁,每日三次,每次0.2-0.3g。 2,辅助治疗:加强营养,增加含铁丰富的食品:如肝、腰、肾、瘦肉、血、蛋奶、干果(枣、杏干)、木耳、蘑菇、绿叶蔬菜等。
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贫血是指全身循环血液中红细胞总量减少至正常值以下。但由于全身循环血液中红细胞总量的测定技术比较复杂,所以临床上一般指外周血中血红蛋白的浓度低于患者同年龄组、同性别和同地区的正常标准。 国内的正常标准比国外的标准略低。沿海和平原地区,成年男子的血红蛋白如低于12.5g/dl,成年女子的血红蛋白低于11.0g/dl,可以认为有贫血。12岁以下儿童比成年男子的血红蛋白正常值约低15%左右,男孩和女孩无明显差别。海拔高的地区一般要高些。 贫血患者红细胞计数的降低与血红蛋白浓度的降低一般是成比例的,但是小细胞低色素型贫血的红细胞计数减少比血红蛋白的减少相对的较少,以致贫血较轻时红细胞计数可以不低于正常。相反,大红细胞型贫血时,血红蛋白浓度相对地偏高,而红细胞计数偏低。当失水、水滞留或急性大量失血后血液总量尚未恢复到正常时,血红蛋白的浓度不能准确反映贫血的真实程度,因此临床上要考虑这些因素对贫血的影响。此外,在急性大量血管内溶血时,血浆内含有较高浓度的游离血红蛋白,这时血红蛋白测定的结果高于贫血的实际程度。在这种特殊情况下,红细胞压积和红细胞计数更能反映贫血的程度。
请登录后再发表评论!老年人血浓度高怎么办?老年人血浓度高吃
老年人血浓度高怎么办?老年人血浓度高吃
基本信息:女&&
发病时间:不清楚
病情描述及疑问:老年人血浓度高怎么办?老年人血浓度高吃什么?补充提问: 09:49:59血液过于黏稠的人,日常饮食宜清淡,少吃高脂肪、高糖饮食,多吃些鱼类、新鲜蔬菜和瓜果、豆类及豆制品。另外可以补充酵素来降低血液粘稠,佰@纳@吉@酵@素就很好。“佰@纳@吉@酵@素@原液”是采取150多种原材料取自79种水果、蔬菜菌类等经过545天以上发酵螯合制成,绝无任何的化学添加成分,美国FDA标准认证,具有净化血液、降低血液粘稠度、降低血压、排出体内毒素等作用。可以促进细胞新生的作用,所以可以有助于血液流通。酵素可以把血液中的废物排出体外,分解发炎病毒,分解造成酸性血液的胆固醇,使血液呈弱碱性,永保血液循环畅通。
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擅长:擅长消化、心血管内科疾病的治疗。
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四川省二级综合性医院&&&内科
建议:病情分析:你好,这可能与血稠有关的。血液过于黏稠的人,日常饮食宜清淡,少吃高脂肪、高糖饮食,多吃些鱼类、新鲜蔬菜和瓜果、豆类及豆制品。指导意见:必要时可以用一些药物如阿司匹林等。提问者对于答案的评价:askJPDAK:谢谢
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