怎么自测艾滋病自测纸 什么样的方法

艾滋病分期:一个艾滋病病人从感染艾滋病到因艾滋病而去世,通常可有3个过度时期。艾滋病急性期:通常在感人后2-6周赤露(这个时候做艾滋病检测为最佳),症状似感冒、咽炎、淋巴肿大等,但是能很快自愈。这个时期可以检测到艾滋病病毒抗原,也可以检测出艾滋病病毒抗体。自从感人上艾滋病病毒到进程成艾滋病病号,这一段时间成为潜在期,是最佳的艾滋病检测时间。潜在期长短个体分岐很大,短至不到一年,长至可达15年以上,平均是5-7年。在这个时期,艾滋病患者会跟正常人一样,无任何症状。当艾滋病病毒感人者体内免疫系统相遇严重破坏、避免维持最低的抗病力量时,便赤露很难治愈的多种症状,成为艾滋病人。
艾滋病检测分为初筛与确证实验,一般的二甲以上医院以及疾控中心都有开展HIV检测,如果要确证实验则只有疾控中心才有。
1、检测出是否感染艾滋病,没有感染艾滋病的可以排除恐惧,不在,感染艾滋病的按时进行治疗。
2、检测可以帮你减压,只有检测才是唯一的,最科学的,也是最可信的判断是否感染艾滋病的方法,只有通过科学的艾滋病检测才能逐步释放压力。
3、检测可以防御把艾滋病传染给家人、朋友等的可能性。
4、检测可以防御多次感染艾滋病,形成交叉感染的危险。
问:什么情况下需要检测,呼和浩特哪里可以检查艾滋病?
答:高危后,一般需要2周时间就可以检测出艾滋病HIV抗体。绝大多数被HIV感染的人,在4周后就能产生足够多的抗体,这个数量能够满足使用目前的HIV抗体测试方法检测出HIV阳性。
注意:艾滋病窗口期内的检测结果都不是最终的结果。目前国内认定的窗口期是高危后3个月。著名专家曹韵珍教授的最新研究成果表明窗口期是6周即42天。
本中心的建议是:高危后2-4周做初检,满4周结果是阴,则可排除感染率为98%左右;满6周后复检,结果是阴,可排除感染率99.99%;只有约万分之一的人窗口期在6周到3个月,为了100%排除感染的可能,最好满3个月做终检。
建议使用的试纸:(1)如果高危后2-4周,建议使用雅培或艾康的单人份HIV检测试纸;(2)高危6周后,以及满3个月终检时,建议采用组合套装测试;(3)唾液试纸适合小孩、妇女、怕血人士,或者是组合测试。详情见艾滋病试纸选购。
不错过艾滋病的最佳检测时间,对于感染艾滋病后的早期护理和治疗是非常有益的。
内蒙古自治区医院
内蒙古呼和浩特市昭乌达路20号
内蒙古医科大附属医院
呼和浩特市回民区通道北街1号
内蒙古医科大学附属人民医院
内蒙古呼和浩特市赛罕区昭乌达路42号
呼和浩特市第一医院
呼和浩特市玉泉区南二环150号
内蒙古妇幼保健院
内蒙古呼和浩特市公园东路6号
内蒙古医科大学第二附属医院
内蒙古呼和浩特市文化街营坊道
不论是医院或是疾控中心,爱兹检测方法主要是快速法,酶联法,HIV病毒直接检测法等;
快速法是全血检测,酶联法是血清检测,艾滋病检查费用在一百元不等,二者都是查抗体。
而HIV病毒直接检测要有实验条件的大型医院(具备初筛资格)才能做,艾滋病检查费用按情况不同而异。快速法与酶联法一般检测出结果的时间在4天左右,艾滋病检查费用可能会稍高一些,有的地方则需一周时间出结果。
呼和浩特艾滋病检测中心是一个以服务为主的公益性网站,聘请有着10年检验经验的陈医师为大家提供免费的艾滋病知识咨询服务。我们所有的爱滋病试纸都是厂家直接供货, 将爱滋病试纸的储藏运输进行严格的管理,每一个爱滋病试纸包装内都配有正规的说明书、国家审批证明,与医疗部门所使用的是相同的hiv试纸。我们的专职咨询医生会在9:00--23:00轮番为大家提供咨询和检测服务, 使大家不用去医院也能得到医学专家的在线会诊,我们本着尊重、保密、匿名、科学的服务原则为您提供可靠的服务。大家可以随时拨打网站上方的400电话或者加QQ进行咨询,以最快的速度了解自己的情况
患者常有病毒性疾病的全身不适,肌肉疼痛等症状。约50%的患者有疲倦无力及周期性低热,常持续数月。夜间盗汗,1月内多于5次。约1/3的患者体重减轻10%以上,这种体重减轻不能单纯用发热解释,补充足够的热量也不能控制这种体重减轻。有的患者头疼、抑郁焦虑,有的出现感觉神经末梢病变,可能与病毒侵犯神经系统有关。有的可出现反应性精神紊乱。3/4的患者可出现脾肿大。
常见的艾滋病自测方法是使用艾滋病检测试纸条(即HIV试纸),HIV试纸是使用胶体金免疫层析科技研发的新一代检测试剂。它可检测血清或血浆标本中的HⅣ-1/2特有性抗体。所有操作时间共是15分钟,动作简便、迅速、准确、自带质控对照、无需所有附加药剂。适合个人在家自测,也适合各大医院,疾控中心检测。
在欧美国家,艾滋病试纸更是家庭常备的检测工具。HIV试纸具有准确率高、敏感性好、操作简单方便、保护隐私等特点,对于操作环境的要求不高,一般在室温下就可以操作。另外,试纸还可以长期保存,一般在2度-30度的温度环境下,可以保存有效期达1年以上。按照艾滋病试纸的操作说明书,正确操作,就可以完成整个检测过程,并不需要很高的专业知识。
一、雅培艾滋病检测试纸真伪检测方法
1、首先登录国家药监局进口医疗器械注册批号查询页面: http://app1./datasearch/face3/base.jsp?tableId=27&tableName=TABLE27&title=进口器械&bcId=953610
2、然后在左侧快速查询中输入:6号  可以查到该产品注册信息。
二、艾康艾滋病检测试纸真伪检测方法
1、首先登录国家药监局国产医疗器械注册批号查询页面: http://app1./datasearch/face3/base.jsp?tableId=26&tableName=TABLE26&title=国产器械&bcId=701567
2、然后在左侧快速查询中输入:0号  可以查到该产品注册信息。
三、艾威尔艾滋病检测试纸真伪检测方法
1、首先登录国家药监局国产医疗器械注册批号查询页面: http://app1./datasearch/face3/base.jsp?tableId=26&tableName=TABLE26&title=国产器械&bcId=701567
2、然后在左侧快速查询中输入:4号  可以查到该产品注册信息。
“不管异性还是同性接触,只要发生不安全性行为,就可能感染艾滋病。”专家表示,目前虽然艾滋病无法治愈,但完全可以预防,关键在于要注意个人的行为,洁身自好,保持单一的、相互忠诚的性伴侣,发生性行为时,要正确使用质量合格的安全套。
艾博+雅培试纸组合
艾博+雅培+爱卫三合一
艾博(艾康)+爱卫(国产组合)
雅培+爱卫(进口+国产组合)
雅培试纸2份
爱卫试纸2份
内蒙古自治区疾控中心
呼和浩特市鄂尔多斯大街50号
呼和浩特市和林县防疫站
和林格尔县城关镇呼清路东交警队南
呼和浩特疾控中心
回民区贝尔路68号
呼和浩特市回民区防疫站
回民区通道南街58号
呼和浩特市清水河县防疫站
清水河县永安街
呼和浩特市赛罕区防疫站
赛罕区支农巷62号
内蒙古疾控中心
呼市锡林南路136号
呼和浩特市武川县疾控中心
武川县健康西街
呼和浩特市新城区防疫站
新城区新城北街128号
呼和浩特市玉泉区防疫站
玉泉区南茶房鄂尔多斯路永安巷1
本站提供呼和浩特疾控中心与医院常用的HIV试纸
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呼和浩特艾滋病试纸常见问答
带套性交,生殖器有溃疡,艾滋病和梅毒都是阴,还需要检测吗
匿名网友@呼和浩特和林格尔县:你好,我在2006年的12月份与小姐发生了戴套性交,之后在2007年的9月份发现生殖器有二个溃疡,月末去检测艾滋与梅毒,都是阴性,还需要检测吗?在检测后我又担心抽血时感染,因为进出的人都是有病的呀,有可能吗?在溃疡没好时泡温泉,接触了不干净的睡衣,会感染吗?问了这么多,有原于不洁性交,以后再也不做哪样的事了,谢谢医生.
呼和浩特艾滋病检测中心:艾滋病与梅毒的检测可以排除了的,不用再测.抽血用的都是一次性针具的,是没必要担心感染问题的.
ytxj&wtkj射入小姐口中,4周多感冒的厉害,是艾滋病症状表...
匿名网友@呼和浩特赛罕区:请问高危(带套性交&&&&&无套口交射入小姐口中)4周多感冒的厉害&&&症状吗&&就是开始咽喉痛&&然后咳嗽的厉害痰多没有其他症状&&&到门诊去看了&&&打了针&&好点了&&&这是4周多了&&&请问我要紧吗?这个是症状吗?
呼和浩特艾滋病检测中心:带套性交与被动口交一般是不会构成感染的,症状是不能作为艾滋病判断标准的,不适去门诊看就行了,担心的话就到时去做个HIV检测来脱恐吧。
西葫的刺在3分钟前就扎破过一个爱滋病人的手指再扎我,会不会...
匿名网友@呼和浩特和林格尔县:4.09我和性交发生关系,带套口交&ml。。。。4.12做的检查hiv&梅毒和其他性病检查全是阴,5.03又去疾病防控中心做了检查~~也是阴,我还需要继续检查嘛?要到什么时候?还有什么叫高危?定义?
呼和浩特HIV检测咨询:对艾滋病来说,在没有绝对安全保证的情况下发生的行为才是高危行为,如妓女无保护性交,共用注射器吸毒等,如没有这些情况发生,完全不必考虑感染的可能.带套性交与口交套没脱落没破损是不会感染的,一个月的结果基本上是没问题了的,&不担心不复检也是没事的。
检测了3个月的检测是阴&而后来转阳了&是什么原因
匿名网友@呼和浩特新城区:目前3个月检测为阴的&后来又转阳的从未出现过。那有没有可能是很多人检测了3个月的检测是阴&而后来转阳了&他们也没去检查&以为自己安全了&直到发病&&有没有这样的可能啊?、
呼和浩特HIV检测咨询:其间没有高危行为发生,三个月的结果是不会变了的。
同性恋者拥抱,手淫,对方有艾滋病,这样有传染可能么?
匿名网友@呼和浩特托克托县:先生,您好!我和一个男同性恋者有过一次接触,看到他后背有带状疱疹的疤痕,和他拥抱,他帮我手淫射精,如果他有艾滋病,这样有传染的可能么?焦急等待您的回复!
呼和浩特检测艾滋病咨询:拥抱与手淫是不会感染的。
被陌生人抓伤后,颈部出了血,多次检测HIV阴性,淋巴还没退
匿名网友@呼和浩特新城区:你好,医生分析,我女儿在09年6月份被陌生人抓伤后,颈部出了血,当时是两岁,分别在两个月,97天,今年3月份在当地镇区乙级医检测hiv,三次为阴性,没问医生用什么方法检测.我小孩自从被人抓伤后-直许多症状,09年,10年,12年时出现过皮疹,经常感冒发烧,按蔚矫耪羁床《家匆涣街懿藕,今年6月2日因发烧不退住院了12天,6月24日早上看见小孩耳朵下面有淋巴肿大,跟手指头这么大,坚硬的,一边一个,对称的,右边液下一个,耳朵后面一个,带小孩到医院看,医生开了些消炎药,25日带小孩到市儿童医院检测hiv,早上10点钟抽血,26日下午出报告,结果为阴,到现在一个多月了,耳朵右边还有个淋巴还没退,比开始肿大时好了些.心里很担心,有没有因为她是小孩检查不出来的事?请问我小孩这情况要怎样处理?谢
呼和浩特检测艾滋病咨询:二岁的小孩子感染了的话可以检测出来的,况且过了窗口期多为阴排除艾滋病了的,症状最多跟艾是没关的,淋巴肿在的原因有很多,淋巴炎,肿瘤,白血病,淋巴结核等,那要看医生才能知道的.
带套性交,带套被动口交,事后41天去区的疾控中心快速检测法三...
匿名网友@呼和浩特托克托县:带套性交,带套被动口交,事后41天去区的疾控中心快速检测法三代试剂,艾滋梅毒全是阴性,这种发法可靠吗,我是不是需要12周时去检测吗
呼和浩特艾滋病检测试纸咨询:可靠的,不用再测.
二甲检测梅毒和hiv&高危后12周(88天),检测为阴性,可...
匿名网友@呼和浩特玉泉区:今天在一家医院二甲检测梅毒和hiv&高危后12周(88天),检测为阴性,我问检测人员用什么方法,说用elisa。请问医生是酶联法吗?我还问这个检测人员可以排除了吗?他说:不好说这个,一般要半年,这个潜伏期很长,有的人要一两年,还有和感染的量有关以及病毒复制的速度有关。要我半年的时候再测一次。请问曹医生我还要半年测一次吗,我可以排除了吗,是不是潜伏期很长,要等好长时间才能测出来?
呼和浩特艾滋病检测试纸咨询:,以目前的检测水平来讲二个月是足可以了的,说三个月已经是最保守说法了.你的情况排除艾与梅毒了的,不用再测.
三次性关系带磋,六周检测HIV抗体是阴
匿名网友@呼和浩特托克托县:医生您好,我在论坛上看了很多,现在我十分害怕和恐惧。我打算实话实说,希望您能够不要嘲笑我的过去并告诉我该怎么做。因为我现在早已不这样了,并且我早就深刻的认识到我的错误。 &&&我和我的女朋友于2009年的某月某日因为我的感情和生理出轨被发现而发生争执,之后她选择了生理出轨的方法来回应我。找了一个陌生人发生了三次性关系(带套)。事后,我很担心安全问题,想办法联系上了那个陌生人,并在他们发生关系的六周后陪同那个陌生人让他检测了hiv抗体,是阴性。 &&&现在过了一年半了大概,过去的事情都过去了。以前不成熟的事情我们也都不提了。我们感情现在非常的好,准备结婚。最近我女友嘴边上老是有蜕皮还是皮炎的症状,去医院医生说抹一点药膏就好了,可是也没用。并且有点扩大面积的样子。鼻子下面也有一点。后来她自己用了补水的面膜天天用,现在好了很多。我看了很多关于症状的描述,算了一下她脸上有这种症状持续了大概3个多月。又回想起她和陌生人发生那三次关系之后的一段时间里经常胳膊酸,腿酸(她自己说是走路走的),我不知道这个算不算症状。我现在老是会乱想她会不会被传染hiv,可是那个人以前又测过。但现在让我的女友去检测。她不去,说我在乱想,怎么可能。我只能自己经常做检测,我觉得我没有我女友应该就没有。 &&&&医生,您以您的专业知识能不能帮我判断一下?我女友危险性大不大?毕竟我们要结婚了。还是我真的在恐艾么?谢谢您了
呼和浩特艾滋试纸检测咨询:带套性交套没脱落没破损是不会感染的,况且事后对方六周检测为阴性基本上是可以确定了的,至于症状艾感染的话早期是没症状表现的,你检测没事,并不能代表对方也是健康的,要脱恐唯一的办法就是女方去检测一下来确定,婚检是有艾滋病这一项检测的。
高危后四周hiv试纸检测为阴可以排除吗?
匿名网友@呼和浩特玉泉区:高危后四周hiv试纸检测为阴可以排除吗?另外,急性期多少度算发烧?是持续发烧吗?
呼和浩特HIV试纸购买中心:四周为阴能确定95%左右.急性期低烧37.5-38度,症状一般持续一至二周可自愈.
呼和浩特艾滋病检测网上咨询服务中心(http://www./)保证顾客和产品信息严格保密。所有艾滋病试纸/HIV试纸都是使用高级密封袋严密包装,快递单上统一打印“办公用品”,收货地址可以填写大致地址,如“呼和浩特土默特左旗xxx路xxx号(电话联系),高先生/女士”,我们会在客户收到货后删除客户信息,确保客户的合法隐私权益得到保障!HIV检测方法详细总结 - 中国艾滋病咨询自检中心
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HIV检测方法详细总结:
HIV抗体检测
HIV抗体检测试">
艾滋病试纸
特异性:99.9% 价格:170元/1套,320元/2套 经中国疾病预防控制中心、北京地坛医院、解放军302医院临床验证,灵敏度为99.3%,特异性为99
灵敏度:100% 价格:100元/1套,170元/2套 艾康HIV(1/2/O)快速艾滋病自测试剂基于免疫层析法的原理,采用双抗原夹心法来定性检测全血/血清/血浆...
灵敏度:100% 价格:120元/1套,200元/2套
美国雅培艾滋病检测试纸灵敏度100%;特异性99.8%。能检测出所有的HIV-1型、HIV-2和O亚型的样本
人体感染HIV后,一般需要2-4周,最多8周左右血液中才可检测到HIV抗体或者HIV抗原。因为从感染HIV到机体产生抗体的这一段时间检测不到HIV抗体或者HIV抗原,故称之为窗口期,又叫做空窗期,是英
艾滋病自测
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HIV检测方法详细总结
日期: 1:09:55&&点击数:362&&
HIV检测方法详细总结:
HIV抗体检测
HIV抗体检测试验分为筛查试验(包括初筛和复检)和确认试验。
检测抗-HIV抗体是HIV/AIDS诊断的一项重要指标,也是控制HIV传播和AIDS流行的重要手段。抗-HIV抗体测定作为血清学诊断要求准确、可靠,故必须经筛查、复检试验和确认实验三个步骤。
初筛实验方法主要有:
酶联免疫试验(ELISA)、化学发光试验、明胶颗粒凝集试验(PA)、免疫层析试验、核酸检测等。确认试验主要有:
免疫印迹试验(Western blot, WB)、免疫荧光试验(IFA)。
快速检测试验(RT)
明胶颗粒凝集 (Particle Agglutination, PA)
免疫渗漏 (Immunoconcentration, Flow through, FT)
免疫层析 (Immunochromatograpy, lateral flow, IF)
* 用最新快速HIV试剂检测HIV抗体比第三代EIA晚2-8天
目前在国内批准注册的国外进口试剂有:Determine HIV1/2(ABBOTT,雅培)、韩国SD、麦美华、中新科炬等。
一般10-30min内出结果,超过60min判断结果无效。
2003年国内已有产品被批准,万泰、科华、艾康等
明胶颗粒凝集试验(PA)
PA是一种简便的HIV血清抗体检测方法。先将样品稀释,然后分别加入经抗原致敏的和未致敏的明胶颗粒,混匀后保温(一般为室温)2H,观察结果。
操作简便,无需特殊仪器设备,适合对少量标本的检测。血清中有HIV抗体存在时,经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应,根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。
HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA试剂(AFD HIV 1/2 PA),可用于HIV1/2的筛查.
HIV-1、HIV-2抗原分别致敏的PA试剂(AERODIA-HIV-1/2)可用于区分HIV-1型和HIV-2型。
缺点:判定结果用肉眼观察,结果无法保存。
目前为了保存试验结果,有条件的实验室可配备数码相机,记录每次试验结果。
胶体硒法(免疫层析法)
在使用试剂前必须仔细阅读说明书,需严格按照说明书执行,否则无法保证可靠的结果
原理:以硝酸纤维膜(玻璃纤维膜)为载体。
是一种用免疫层析法定性测定血样中HIV1/2抗体,加样本入反应条,当样品迁移通过结合物包被处,与硒胶体-抗原结合物重组结合,此混合物继续迁移通过固相包被的合成肽和重组抗原的病人结果窗口。
如果样品中含有HIV1/2抗体,抗体将会与硒胶体-抗原结合,并在病人窗口处被固相包被的合成肽和重组抗原所捕捉固定,形成一条红线;
如果样品中不含有HIV1/2抗体,硒胶体-抗原结合物将会通过病人窗口而不与固相包被的合
样品垫: 加入血浆,血清或全血样品.红细胞在此迁移过程中被去除
接物垫:含分析特异性试剂结合的硒标,为一种肉眼可见的红色信号,被分析物和硒标特异性试剂在此反应结合
病人条:固定的含特异性分析试剂,任何与硒标特异性试剂结合的分析复合物在此被结合固定,形成三文治结合物,肉眼可见的红色线条说明有阳性反应
质控条:固定的含捕捉硒标物的特异性试剂,不管样品中有无被检测物都应出现红色线条.控制测试结果的有效性
对筛查试验结果的解释
筛查实验的目的是检出所有的阳性者,在得到一个筛查试验阳性结果时,要想到它极有可能是真正的阳性,但也有假阳性的可能
出现假阳性的原因很多,如风湿病、病毒性肝炎、大量溶血的样品、不用EDTA抗凝的全血血浆样品等
筛查试验结果的报告
呈阴性反应者可出具“HIV抗体阴性”报告
所有筛查试验阳性的标都应进行复检
的样品,需填写“HIV抗体复检检测单”,必须有检测人,一名具有中级以上技术职称的复核人审核签字,送当地艾滋病筛查中心实验室复检,再转送艾滋病确证实验室。
免疫胶体硒快速试验特点
1.稳定,可室温长期保存。试验不需任何设备,迅速、简便、特异性较好,敏感性约相当于中度敏感的ELISA,适用于应急检测、门诊急诊个体检测。
2.已有被SFDA批准注册的进口试剂和国内产品。一般可在10-30min内判读结果。
化学发光法:
化学发光法检测的是抗原(p24)+抗体联合检测。化学发光现象是一种常见的自然现象,利用化学发光测定化学发光反应反应物、催化剂、增敏剂、抑制剂,偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂的方法叫做化学发光法。
免疫学检测主要是利用抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段由于其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对检测信号进行放大和显示因此常被用于检测蛋白质、激素等微量物质。化学发光免疫分析方法是在放射免疫分析Radioimmunoassay RIA和酶联免疫分析enzymeimm
unoassayEIA两种方法基础上改进的一种新方法无放射性和致畸物质兼具有以上两种方法的优点且产品有效期长、对环境无污染、对人体无毒无害是目前体外诊断试剂检测方法中的佼佼者在技术上具有明显的优势。
化学发光免疫分析法的优点
1、灵敏度高 灵敏度高是化学发光免疫分析关键的优越性其灵敏度可达 10-22 mol/L RIA 为 10 -12 mol/L
。化学发光免疫分析能够检出放射免疫分析和酶联免疫分析等方法无法检出的物质对疾病的早期诊断具有十分重要的意义。
2、宽的线性动力学范围 发光强度在 4 - 6 个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度 OD 值为 2.0 的范围相比优势明显。虽然 RIA 也有较宽的线性动力学范围但放射性限制了其应用。
3、光信号持续时间长 辉光型的 CLIA 产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。
4、分析方法简便快速 绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂或复合试剂的一步模式
5、结果稳定、误差小样品系直接自己发光不需要任何光源照射免除了各种可能因素光源稳定性、光散射、光波选择器等给分析带来的影响使分析结果灵敏稳定可靠。
6、安全性好及使用期长 免除了使用放射性物质。到目前为止还未发现其危害性试剂稳定保存期可达六个月至一年以上。
化学发光免疫分析法试剂盒与同类免疫分析产品的异同:
酶联免疫试验(ELISA)
即酶联免疫吸附试验是检测艾滋病的一种固相免疫测定技术,其先将抗体或抗原包被到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。这种方法简称ELISA。酶联免疫吸附试验是一种固相免疫测定技术,其先将抗体或抗原包被到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
测定时,将待检样本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应,后加入酶标抗体与免疫复合物结合,用洗涤的方法分离抗原抗体复合物和游离的未结合成分,最后加入酶反应底物,根据底物被酶催化产生的颜色及其吸光度(A)值的大小进行定性或定量分析的方法, 步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清。
将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品,这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内。
经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。由数值来判断结果的阴性或阳性。
严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的艾滋病操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送确认实验室确认。有的医院很不负责,将初筛阳性的报告发出后就不管了,这是不对的。
酶标现在分四代:
第一代试剂 1985 ELISA 间接法 培养纯化抗原 51 ~ 55 天
第二代试剂 1990 ELISA 间接法 重组表达抗原 42 ~ 45 天
第三代试剂 1994 ELISA 双抗原夹心法 重组表达抗原 22 天
使用合成多肽HIV抗原(少数用重组抗原),应用双抗原(或双抗体)夹心法原理检测HIV抗体(或抗原)。由于标记HIV抗原可同时检测血清中HIV-1 IgG、IgM、 IgA抗体,此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。
第四代试剂 1998 ELISA 夹心法 检测抗原和抗体 16 天
此类试剂在第三代试剂盒基础上,将针对P24抗原的抗体与HIV-1抗原一起包被固相载体,可同时检测HIV-1 IgG、IgM、IgA抗体和P24抗原。
很多艾滋病病友问,现在使用的是几代试剂,现在大多是3代,有用到4代的(二代早就停产了,现在没有二代试剂)。
免疫荧光试验(IFA)
免疫萤光法首先将将萤光物质标记在抗原(或抗体)上,通过免疫反应检测抗体(或抗原),如果二者对应,形成带有萤光物质的免疫复合物不被水冲掉,在萤光显微镜下可见萤光。如果二者不对应,不形成免疫复合,萤光物质被水冲掉,在显微镜下不显萤光。
由于一般荧光测定中的本底较高等问题,荧光免疫技术用于定量测定有一定困难。近年来发展了几种特殊的荧光免疫测定,与酶免疫测定和放射免疫分析一样,在临床检验中应用
具有特异性强,灵敏度高,标准曲线范围宽,分析速度快,标记物制备较简便、有效使用期长,无放射性污染等优点
免疫印迹试验(Western blot, WB)
免疫印迹(immunoblotting)又称蛋白质印迹(Western blotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。免疫印迹常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。结合化学发光检测,可以同时比较多个样品同种蛋白的表达量差异。
将混合抗原样品在凝胶板上进行单向或双向电泳分离, 然后取固定化基质膜与凝胶相贴。在印迹纸的自然吸附力、电场力或其它外力作用下, 使凝胶中的单一抗原组份转移到印迹纸上, 并且固相化。最后应用免疫覆盖液技术如免疫同位素探针或免疫酶探针等, 对抗原固定化基质膜进行检测和分析。
免疫印迹法是一项分析抗原、抗体的技术。它具有下列优点:
1、 湿的固定化基质膜柔韧, 易于操作;
2 、固定化的生物大分子可均一的与各种免疫探针接近, 不会象凝胶那样受孔径阻隔;
3、 免疫印迹分析只需少量试剂;
4、 孵育、洗涤的时间明显减短;
5、可同时制作多个拷贝, 用于多种分析和鉴定;
6、结果以图谱形式可长期保存;
7、免疫探针可通过降低PH值等方法, 象抹去录音磁带一样将探针抹掉, 再换用第二探针进行分析检测。免疫印迹法的应用范围及优点不仅局限于此, 它必将随着这一方法的深入研究而不断发展和完善。
[测定方法] 免疫印迹法(或蛋白印迹法)
[方法学原理] 将纯化的确诊HIV蛋白抗原裂解,然后通过SDS-PAGE按分子量大小将其分离,再转印至硝酸纤维素薄膜上,并保存于4℃干燥试管内,测定时将割成膜条的硝酸纤维素薄膜与待检样品反应,使其充分接触。若样品中含有HIV抗体,将会与膜条上的抗原区带结合,再加上酶标抗人IgG抗体,经过与底物反应显色,即可形成肉眼可见的不同区带。
[标本准备] 静脉抽血2ml,不抗凝。
1.转印有HIV I型和Ⅱ型抗原的硝酸纤维素薄膜
2.酶联结合物
3.底物及底物缓冲液
[测定步骤]
1.在免疫印迹法反应槽内,加入3ml洗涤液。加入待测样品ul,混匀。
2.在反应槽内加入含HIV抗原的硝酸纤维素薄膜液,在室温环境中振摇2h,每份样品为l条。每次测定需附阴性对照、阳性对照。在振摇过程中,应使膜条带有号码的一面始终保持向上。
3.倾去槽内的反应液,用洗涤液将各膜条洗5次,每次3min。
4.在各反应槽内加酶联试剂,于室温环境中再振摇lh,用洗涤液洗4次,最后用底物缓冲液洗1次。
5.将底物溶液配好后,加入反应槽内并振摇数分钟,待阳性对照出现典型的HIV抗体阳性区带后,迅速倾去底物溶液,并加入稳定液继续振摇30min。然后将膜条取出,避光晾干,判断结果。
6.结果判断:确认试验的结果判定可根据世界卫生组织推荐的标准,即阳性至少1条env带和1条pol带;或至少1条env带和1条、gag带;或至少1条env带、1条gag带和1条pol带;或至少2条env带;阴性:无病毒特异带。可疑:1条gag带和1条pol带,或只有gag带或poi带。
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