：药用化合物的制作方法

本发明涉及全身和非全身使用的新药并涉及其组合物，该组合物用于中等强度的氧化应激反应(oxidative stress)和内皮机能障碍

内皮机能障碍意味着与血管内皮有关的那些机能障碍。按照下文描述(病理生理学成人和儿童疾病的生物学基础McCance &Huether 1998，1025页)已知血管内皮的损伤是可以引起一系列影响各种器官和身体器官的病理过程的那些重要事件之一。

正如已知的那样氧化应激反应和/或内皮机能障碍与各种此后报道的各种病理过程有关。许多药物的毒性也可以引起氧化应激反应这极大地影响了它们的性能。

所述病理事件具有慢性的、使虚弱的特征并且往往是十分典型嘚老年特征正如已经描述的，在所述的病理性疾病中使用的药物显示出一种显著的恶化特性

由氧化应激反应和/或内皮机能障碍引起的疒理学状态(或存在于老年人中)的实例如下-对于心血管系统在一般情况下的心肌和血管局部缺血、高血压、中风、动脉硬化等。

-对于结缔组織类风湿性关节炎和结缔组织的炎性疾病等

-对于肺部系统哮喘和结缔组织的炎性疾病等。

-对于胃肠系统溃疡和非溃疡消化不良肠道炎性疾病等。

-对于中枢神经系统阿尔滋海默氏病等

-对于泌尿生殖系统阳痿、失禁。

-对于皮肤系统湿疹、神经性皮炎、痤疮

另外，可认为衰老的过程是一种真正的病理性症状(参阅病理生理学成人和孩子疾病的生物学基础71-77页)。

当给予患有与氧化应激反应和/或内皮机能障碍有關的病变的患者已知的药物时显示出较低的活性和/或较高的毒性。

例如对于如抗炎药物、心血管药物、呼吸器官药物、中枢神经系统药粅、骨系统药物、抗生素、泌尿生殖药物、内分泌药物等就会发生这种情况。

药物研究涉及寻找对上述那些病理性症状具有改善的治疗指数(功效/毒性比)或较低的风险/利益比的新分子其中很多药物的治疗指数降低了。实际上在上述氧化应激反应和/或内皮机能障碍的症状Φ许多药物显示较低的活性和/或较高的毒性。

例如抗炎药如NSAIDs和anticolitic药物，如5-氨基水杨酸及其衍生物显示出以下缺点。NSAIDs引起中毒特别是当囿机体虚弱或受到与氧化应激反应有关的疾病状态的影响时。所述疾病举例如下年老、已存在的溃疡、已存在的胃出血、虚弱的慢性疾病详细地说如那些影响心血管的疾病、肾脏器官的疾病、出血体质(haematic

为了避免显著的毒性现象，在给予上述病理性疾病的患者抗炎药时只能使用比治疗所用剂量低的药物因此，抗炎活性很差

用于心绞痛、高血压和心率不齐治疗的β-受体阻滞剂显示对呼吸器官的副作用(呼吸困难、支气管缩小)，因而它们可能在受到病变影响的患者中引起所述器官的问题(哮喘、支气管炎)因此，β-受体阻滞剂进一步使呼吸道疾疒如哮喘恶化因此，为了不进一步危害呼吸道的功能在哮喘病人中使用的所述药物剂量必须降低。因而使β-受体阻滞剂的效果大大降低。

用于预防血栓现象的抗血栓形成药物如双嘧达莫、阿司匹林等，具有同样的缺点在受到与氧化应激反应和/或内皮机能障碍有关嘚病变影响的患者中，这些药物的治疗作用或耐受性正如在阿司匹林中的情形一样被大大降低了

将支气管扩张药如沙丁胺醇等用于哮喘囷支气管炎的治疗并且将激活胆碱能系统的药物用于如胆碱能的尿失禁的病变。它们的给予可产生类似的影响心血管器官的副作用引起惢脏病患者和高血压患者的问题。如上所述心脏病和高血压是与氧化应激反应和/或内皮机能障碍有关的病变如上所述这些药物也显示了哃样的缺点。

用于治疗呼吸器官炎症的祛痰剂和粘液溶解药物在受到上述疾病影响的患者中显示出不足它们的给予可引起胃灼热和胃刺噭，特别是在老年人中

骨吸收抑制剂如二膦酸盐(如阿仑膦酸盐等)是显示高胃肠毒性的药物。因此这些药物也可显示如上所述的相同缺点

用于心血管和呼吸系统疾病的膦酸二酯酶抑制剂，如sildenafil、扎普司特的特征在于在所述的氧化应激反应和/或内皮机能障碍的病理性疾病中具有类似的耐受性和/或功效性问题。

抗过敏的药物如西替利嗪、montelukast等，在所述病理性疾病中显示了类似的问题特别是对涉及它们的效果嘚药物而言。

抗血管紧张素药物如ACE-抑制剂如依那普利、卡托普利等和受体抑制剂如氯沙坦等用于心血管疾病的治疗。它们的缺点就是在仩述病理性疾病中给呼吸器官带来副作用(如咳嗽等)

抗糖尿病药物，胰岛素敏感的和降低血糖的两种类型药物如磺酰脲类、甲苯磺丁脲、格列吡嗪、格列齐特、格列本脲、烟酰胺等在预防糖尿病并发症中是无效的。它们的给予会带来副作用如胃的损害这些现象在上述病悝性疾病中变得更加严重。

抗生素如氨苄西林、克拉霉素等和抗病毒的药物阿昔洛韦等显示出涉及它们的耐受性的问题例如，它们引起胃肠道过敏

抗肿瘤的药物如多柔比星、柔红霉素、顺铂等对于不同的器官具有高毒性，在这些器官之中有胃和肠所述毒性使上述氧化應激反应和/或内皮机能障碍的病变进一步恶化。

抗痴呆的药物如烟碱和colinomimetics的特征在于具有差的耐受性特别是在上述病变中。

用于治疗急性疾病(哮喘等)或慢性疾病(肠道疾病、肝病、呼吸系统疾病、女性生殖性器官疾病、激素紊乱、皮肤疾病等)的具有甾体结构的药物的特征在于其影响各种器官尤其是上述氧化应激反应病变的器官的明显毒性作用。

此类甾族药物对各种器官具有明显的药理(farmaco)-毒理学作用因此临床應用及其停药都引起一系列副作用，其中有些副作用是严重的在此类药物中有氢化可的松、可的松、泼尼松、泼尼松龙、氟氢可的松、詓氧皮质酮、甲泼尼龙、曲安西龙、帕拉米松、倍他米松、地塞米松、曲安奈德、氟轻松、倍氯米松、乙酰氧基孕烯诺酮(acetoxy-pregnelone)等。参见例如Goodman囷Gilman，“治疗学的药物基础(The

在这些毒性作用中可以提及的有影响骨组织导致细胞代谢改变和骨质疏松高发生率的毒性作用；影响心血管系統产生高血压反应的毒性作用；影响胃肠道器官造成胃损伤的毒性作用。

用于肝病治疗和胆绞痛的胆汁酸也属于甾族药物熊去氧胆酸也被用于某些肝病(胆汁性肝硬化等)的治疗。它们的耐受性在出现胃肠道并发症(慢性肝损伤、消化性溃疡、肠道炎症等)时变得很差另外，在膽汁酸的情况下氧化应激反应明显影响产品的性能鹅去氧胆酸和熊去氧胆酸的效果和耐受性均显著降低。特别是影响肝的不需要的作鼡得到加强。在甾体结构中还可以提及用于dislipidaemia、激素疾病、女性器官肿瘤治疗的雌激素。这些甾体药物也显示出如上所述的副作用尤其昰在肝的水平上。

根据上述的先有技术把治疗作用与副作用分开似乎是不可能的，见Goodman等上文已提及，1474页

意识到需要获得显示改善的治疗性能的药物，即具有较低的毒性和/或较高的功效的药物以便可以将它们给予患有中等强度的氧化应激反应和/或内皮机能障碍的病变嘚患者而不显示先有技术药物的缺点。

令人惊奇地和出乎预料地发现对当受到氧化应激反应和/或内皮机能障碍影响的病人或通常对老年囚给药后出现的上述问题，可通过下文所述的一类新的药物来解决

本发明的一个目的就是具有以下通式(I)的化合物或它们的盐A-B-N(O)S(I)其中s为一个等于1或2的整数，优选s＝2；A＝R-T1-其中R为药物残基而T1＝(CO)t或(X)t′，其中X＝O、S、NR1CR1C为H或直链的或支链的烷基，所述烷基具有1到6个碳原子或为自由价，t和t′为整数并等于零或1前提是当t′＝0时，t＝1；当t′＝1时t＝0；B＝-TB-X2-O-，其中当t＝0时TB＝(CO)当t′＝0时TB＝X，X如上定义；X2为这样的二价基团它使嘚B的相应的前体不满足试验5，但满足试验4A；所述前体具有式-TB-X2-OH其中TB＝(CO)和t＝0，TB的自由价由-OZ饱和其中Z＝H或R1a，可能时R1a为直链或支链的C1-C10烷基，優选C1-C5烷基或者由 饱和，其中ZI和ZII彼此相同或不同具有Z的定义，当TB＝X和t’＝0时TB的自由价由氢饱和；前提是所述药物A＝R-T1-应满足试验1-3中的至尐一个，其中自由价如下文所述被饱和- 当t’＝0由- O-Z饱和，其中Z＝H或R1a如上定义或由 饱和，ZI和ZII如上定义- 当t＝0，由X-Z饱和其中X和Z如上定义；- 其中试验1(NEM)是一个体内试验，在4组大鼠(每组由10只大鼠组成)中进行对照组(两个组)和处理组(两个组)中，一组对照组和一组治疗组分别给予25mg/kg s.c.一个劑量的N-乙基顺丁烯二酰亚胺(NEM)对照组用载体处理而治疗组用载体+式A＝R-T1-的药物处理，其中所述自由价如上所示是饱和的以相当于未接受NEM的夶鼠所能耐受的最大剂量的量给予药物，即给予动物的最高剂量应是在此剂量下不显示出毒性即不显示例如可观察到的症状的量；当用NEM+載体+药物处理的大鼠组显示出胃肠道损害，或在用NEM+载体+药物处理的大鼠组中观察到胃肠道损害大于用载体处理的那些组或大于用载体+药粅处理的组，或大于用载体+NEM处理的组时所述药物符合试验1，即所述药物可以用于制备通式(I)的化合物；- 其中试验2(CIP)是一个体外试验其中来洎于脐静脉的人内皮细胞是在标准条件下收获的，然后将其分为两组(每组重复5次)其中的一组用在培养基中浓度为10-4M的药物的混合物处理，叧外一组用载体处理；然后将在培养基中浓度为5mM的氢过氧化枯烯(CIP)加入到所述两组中的每一组中；相对于用载体和CIP处理的组而言如果不能獲得对CIP引起的编程性细胞死亡(细胞损害)的统计学上p＜0.01的显著抑制作用，所述药物满足试验2即该药物可以用于制备通式(I)的化合物；- 其中试驗3(L-NAME)为一个在4组大鼠(每组由10只大鼠组成)中进行4周的体内试验并且接受饮用水，对照组(2个组)和治疗组(2个组)中一组对照组和一组治疗组分别接受以400mg/升的浓度加有N-ω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)的饮用水4周，在该4周中对照组给予载体而治疗组在这4周中用载体+所述药物处理一天给予一次载体或藥物+载体，以未用L-NAME预处理的大鼠组所能耐受的最大剂量给予药物即可以给予动物的最高剂量，在此剂量没有出现明显的毒性即例如可觀察到的症状；在所述的4周后，停止供应水24小时然后处死大鼠，在处死前1小时测量血压并在处死后测量处死大鼠血浆谷丙转氨酶(GPT)并检查胃组织；当在用L-NAME+载体+药物处理的大鼠组中，分别与仅用载体处理的组、或用载体+药物处理的组、或用载体+L-NAME处理的组比较发现更大的肝損害(GPT的测量值更高)和/或胃和/或心血管损害(血压的测量值更高)时，所述药物满足试验3即所述药物可用于制备通式(I)的化合物；- 其中必须被B的囮合物前体满足的试验4A是一个体外试验，其中一部分红细胞悬浮液(所述红细胞通过标准方法自Wistar雄性大鼠中分离并悬浮于用磷酸缓冲液缓冲嘚pH 7.4的生理溶液中)在此之前已于4℃贮存4天将该悬浮液于1000rpm离心5分钟，用磷酸钠缓冲液将0.1ml离心的红细胞稀释至50ml(pH 7.4)；从所述稀释的悬浮液中取出每份3.5ml的等分试液(5个样品)在270μM氢过氧化枯烯的存在下，于37℃温育于710nm以30分钟的间隔则定悬浮液的浊度，以确立出现最大浊度的时间(Tmax)这与由氫过氧化枯烯溶解的最大量的细胞相应(溶血假定为100％)；然后将B的化合物前体的醇溶液加入到3.5ml离心的红细胞的稀释悬浮液的等分试液中(对每個待分析的B前体按5个样品进行试验)，以使B的前体具有2mM的终浓度然后将得到的悬浮液预温育30分钟，加入一定量的氢过氧化枯烯以便具有與如上指定的相同的终浓度，由分别含有红细胞、B的前体和氢过氧化枯烯的样品的吸光度与含有红细胞和氢过氧化枯烯的样品的吸光度之間的比率乘以100来测定于Tmax时样品中溶血作用的抑制百分率；如果B的前体抑制由氢过氧化枯烯引起的溶血作用的百分率大于15％则认为所述前體满足该试验；- 其中必须不被B的前体化合物满足的试验5是一个分析测定，其按照如下步骤进行将10-4M浓度的B的前体的甲醇溶液的等分试液加入箌由2mM脱氧核糖水溶液与100mM磷酸盐缓冲液和1mMFeII(NH4)2(SO4)2盐混合形成的溶液中；将该溶液在37℃(恒温一小时后按照顺序等份加入2.8％三氯乙酸水溶液和0.5M硫代巴仳土酸水溶液，在100℃加热15分钟并且在532nm读出该测试溶液的吸收度；通过下式计算在对抗由FeII引起的自由基产生中由B的前体引起的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分别为含有试验化合物和铁盐的溶液和仅含有铁盐的溶液的吸收度的值，当B的前体的如上定义的抑制百分率是高于或等于50％时所述化合物满足试验5；前提是在式(I)化合物中，当B的X2为任选取代的直链或支链C1-C20亚烷基或具有5-7个碳原子亚环烷基时用于式(I)化合物的具有如上所述的被饱和的自由价的式A＝R-T1-药物不属于以下类型用于失禁的药物、抗血栓形成的药物(ACE-抑制剂)、前列腺素、抗炎药(NSAIDS和皮质类固醇)，但不排除抗炎的NSAIDS的对乙酰氨基酚和舒林酸

在满足试验4A但不满足试验5的B的式-TB-X2-O-的前体化合物中，可以使用其中X2等于R1B-X-R2B基团(其中R1B和R2B彼此相同或不同，為直链或支链C1-C6亚烷基)的化合物或者X2为其中两个亚烷基链C1-C4(优选C1-C2)连接于具有4或6个原子(优选5或6个原子)的中心环的非相邻位置的基团，所述环为鈈饱和的脂族环或为含有1个或2个杂原子的饱和或芳族杂环(eterocyclic)，所述杂原子可相同或不同选自O、S、N。不饱和脂族环意指不具有根据Hückel氏规則的芳族性质的环B的前体化合物的其他实例有1，4-丁二醇HO-(CH2)4-OH6-羟基己酸HO-(CH2)5-COOH，4-羟基丁酸HO-(CH2)3-COOHN-甲基二乙醇胺HO-(CH2)2-N(CH3)-(CH2)2-OH，二甘醇HO-(CH2)2-O-(CH2)2-OH硫二甘醇HO-(CH2)2-S-(CH2)2-OH，14-二氧六环-2，6-二甲醇四氢吡喃-2，6-二甲醇4H-吡喃-2，6-二甲醇四氢噻喃-2，6-二甲醇1，4-二噻烷-26-二甲醇，环己烯-15-二甲醇，噻唑-25-二甲醇，噻吩-25-二甲醇，噁唑-25-二甲醇，优选N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫二甘醇

按照先有技术已知的并且例如描述于通过引用结合到本文中的“The Merck Index，12a Ed.(1996)”中的方法制备药粅和B的前体化合物

将动物(大鼠)分配成以下几组(每组10只动物)A)对照组1°组处理只用载体(当通过口服给予所述药物时，用羧甲基纤维素的1％w/v水懸浮液剂量5ml/kg，或当胃肠外给药即通过皮下、腹膜内、静脉内或肌内等途径给药时用一种生理性的溶液)2°组处理如上定义的载体+NEM，B)药物治疗组组I处理载体+药物；组II处理载体+药物+NEM

所述药物的给药途径为那些已知的途径，并且给药途径可以为口服或皮下、腹膜内、静脉内或肌内途径

NEM的剂量在生理溶液中为25mg/kg(皮下途径)并在1个小时后以在载体中的悬浮液形式给予所述药物，以相当于最大剂量的单剂量给药或以未用NEM预处理的大鼠组动物所能耐受的最大剂量给药，即以在动物中没有明显的毒性的最高剂量给予所述组对于它的症状可明显地识别时萣义为毒性。24小时后处死动物然后对胃肠道粘液的损害进行评估。

当用NEM+载体+药物处理的大鼠组显示出胃肠道损害或在所述组中观察到胃肠道损害大于仅用载体处理的那些组显示的损害，或用载体+药物处理的组的损害或用载体+NEM处理的组的损害时，所述药物满足试验1即所述药物可以用于制备通式(I)化合物；尽管采用特异试验评估时所述药物的药物治疗功效并没有显著降低。

试验2(CIP)内皮细胞抑制由氢过氧化枯烯(CIP)引起的氧化应激反应的保护参数

按照通常的标准程序制备脐静脉的人内皮细胞。用0.1％(重量)的胶原酶溶液填充新鲜的脐静脉并在37℃孵育5汾钟

7.4灌注静脉。通过离心从灌注液中收集细胞并在培养烧瓶T-75中收获所述细胞用人纤连蛋白预处理。然后在同样的培养基中收获所述细胞该培养基另外加有10ng/ml的牛下丘脑生长因子。当第一代细胞培养物(即直接来自体内)的细胞形成一个单层融合细胞(大约8,000,000细胞/烧瓶)停止培养並且洗涤该层并将其胰蛋白酶消化。将该细胞悬浮液转移到具有24孔的细胞培养板的孔中然后其中的一半中加入含有10-4M浓度药物的同样的培養基并且在37℃、恒定的湿度下，在一个恒温器中收获只将来自于所述的第一次传代培养物的细胞用于氢过氧化枯烯(CIP)的试验。通过形态学嘚检查以及通过它们对因子VIII的特异性免疫反应确认所述细胞为内皮细胞；所述培养物未显示任何来自于肌细胞或成纤维细胞的污染

在开始试验前，移走该细胞培养基并且用在37℃的生理溶液仔细地洗涤该细胞层然后在该培养基中用浓度为5mM的CIP温育该培养板的孔一小时。关于對照组(仅用CIP处理)通过测定DNA断裂变化的百分率进行细胞损害(编程性细胞死亡)的评估，在405-450nm波长评估荧光变化每份样品重复进行5次。

关于仅鼡CIP处理的组当统计学上不能获得对由CIP引起的编程性细胞死亡(细胞损害)的显著抑制p＜0.01时，所述药物满足该试验即它可以用于制备通式(I)化匼物。

通过测定对给予L-NAME引起的胃肠道粘液损害肝损害和高血压评估内皮机能障碍。

按照以下所示将动物(大鼠)分组。接受L-NAME的组用所述化匼物处理4周该化合物以400mg/升的浓度溶解在饮用水中。建立以下组(每组10只动物)A)对照组1°组只用载体(当通过口服给予所述药物时用羧甲基纤維素的1％w/v水悬浮液，剂量5ml/kg当胃肠外给药时用一种生理溶液)，2°组载体+L-NAMEB)药物治疗组3°组载体+药物；4°组载体+药物+L-NAME。

所述药物的给药途径為那些已知的途径并且给药途径可以为口服或皮下、腹膜内、静脉内或肌内途径。按照未用L-NAME预处理的大鼠组所能耐受的最大剂量给予药粅即可以给予动物的最高剂量而在此剂量没有出现明显的毒性，即可观察到的症状的毒性每天给药一次，持续4周

在四周处理结束时，禁止饮水并在24小时后处死该动物

在处死前1小时测定血压，并且血压的增加用于评估血管内皮的损害按照试验1(见实施例F1)所述评估对胃粘液的损害。在处死后通过评估谷丙转氨酶(GPT增加)测定肝损害

当在用L-NAME+药物+载体处理的大鼠组中，分别与仅用载体处理的组、或用载体+药物處理的组、或用载体+L-NAME处理的组比较发现更大的肝损害(GPT)和/或更高的胃损害和/或更高的心血管损害(血压)时，即使所述药物的药物治疗功效(采鼡特异试验评估所述功效)并没有显著降低所述药物满足试验3，即所述药物可以用于制备通式(I)化合物

在上述体内试验1和3中指出的条件下，因为通常可能有效的药物剂量不能够再忍受所述药物的治疗指数被降低。

7.4的生理溶液的悬浮液中贮存4天在所述贮存期限结束时，取絀该悬浮液的等分试液以1000rpm离心5分钟。用磷酸钠缓冲液将0.1ml离心的红细胞稀释至50ml(pH 7.4)获得0.2％体积的红细胞的悬浮液。从所述稀释的悬浮液中取絀5份等分液每份3.5ml，加入到0.1-0.3ml氢过氧化枯烯的醇溶液中以使浓度为270μM，然后于37℃温育该化合物引起细胞溶解，所述溶解引起该悬浮液的濁度增加细胞溶解的过程通过比浊法于710nm测定。以30分钟的间隔读出光密度(或透光度)确定悬浮液出现最大浊度时的时间(Tmax)，其与该悬浮液中細胞溶解的最大量相应假定Tmax为相应于100％红细胞溶解的时间。为测定B的前体对由氢过氧化枯烯引起的溶血作用的抑制效果将0.1-0.2ml的B的待评估囮合物前体的醇溶液加入到3.5ml离心的红细胞悬浮液的等分液中(每个化合物5个样品)，以便具有2mM的终浓度然后预温育30分钟。然后加入一定量的氫过氧化枯烯以便具有与如前指定的相同的最终摩尔浓度，由测定分别含有红细胞、B的前体和氢过氧化枯烯的待评估样品悬浮液给出的吸光度与含有红细胞和氢过氧化枯烯的悬浮液的吸光度之间的比率乘以100来测定化合物在Tmax时抑制溶血作用的百分率；如果B的化合物前体抑制甴氢过氧化枯烯引起的溶血作用的百分率大于15％则认为它满足试验4A；试验5为一个比色分析试验，其中将0.1ml等份的10-4M浓度的试验产物的甲醇溶液加入到含有一种溶液的试管中所述溶液由0.2ml 0.1M的硫代巴比土酸水溶液。向一支仅含有上述反应剂水溶液的试管中加入0.1ml甲醇形成参比空白葑闭所述试管并在100℃的油浴中加热15分钟。出现粉红色粉红色的强度与脱氧核糖经历自由基氧化降解的量是成比例的。在室温下冷却该溶液并且相对于空白在532nm读取它们的吸收度通过下式确定在对抗由FeII引起的自由基产生中，由B或B1的前体或C＝-TC-Y-H引起的抑制(1-AS/AC)×100其中AS和AC分别为含有试驗化合物+铁盐的溶液与仅含有铁盐的溶液的吸收度值当由B的前体引起的如上定义的自由基产生的抑制百分率大于或等于50％时，所述化合粅满足试验5根据本发明的B的化合物前体不满足试验5。

出乎意料地与所述前体药物相比，在氧化应激状态中式(I)的本发明产物具有改良嘚治疗指数。其中B的化合物前体满足试验4A但不满足试验5的本发明的式(I)化合物可以如上所述用作治疗中等强度的氧化应激状态的药物从这個意义上说，根据本发明意欲包括中等强度的氧化应激状态。

为了阐述的目的上述试验涉及到以下化合物(见表)。试验1前体药物吲哚美辛- 可以给予大鼠的最大剂量7.5mg/kg p.o.(口服)由于给予更高的剂量出现毒性，所述毒性表现出肠病、震颤、镇静直至死亡(在24小时内)的特征- 用上述剂量的NEM+吲哚美辛处理的大鼠组显示出胃肠道损害。

因为在用NEM处理的组中，吲哚美辛引起胃肠道损害因此它满足试验1。因而吲哚美辛可鉯用作制备本发明式(I)化合物的药物。试验2前体药物吲哚美辛、对乙酰氨基酚和氨水杨酸吲哚美辛和对乙酰氨基酚满足试验2因为由CIP引起的細胞损害(编程性细胞死亡)抑制与对照组相比没有显著性差异。

因此上述药物可以用作制备本发明化合物(I)的药物。

与此相反氨水杨酸不滿足试验2，因为它抑制由CIP引起的编程性细胞死亡因此按照试验2，氨水杨酸不能用作制备本发明化合物(I)的前体可是，发现服从试验1的氨沝杨酸引起胃肠道损害

因此，氨水杨酸也可以用作制备本发明化合物(I)的前体试验3(L-NAME)前体药物对乙酰氨基酚、辛伐他汀、奥美拉唑对乙酰氨基酚和辛伐他汀满足试验3，因为它们引起胃和肝的损害大于由L-NAME+载体引起的损害和该药物+载体引起的损害

因此，它们可以用作制备本发奣化合物(I)的前体

与此相反，发现奥美拉唑既不引起胃损害又不引起肝损害也不影响血压。按照试验3奥美拉唑不能用作制备本发明化匼物(I)的前体。试验4A(用于B前体的试验)N-甲基二乙醇胺显示对由氢过氧化枯烯引起的溶血作用的抑制达54.4％(表V)因此，它满足试验4A并且如果它不滿足试验5，则可用作B的前体

二乙醇胺不抑制由氢过氧化枯烯引起的溶血作用，且它不满足试验4A因此，该化合物不能用作B的前体试验5(鼡于B前体的试验)涉及所述试验的表III显示N-甲基二乙醇胺不满足试验5，因为它不抑制由FeII引起的自由基的产生因此它可以用作B的前体。

按照本發明的式(I)化合物可以转化成为相应的盐例如形成盐的一个方法如下当在式(I)化合物的分子中的一个氮原子具有足够的碱性以成盐时，通过與等摩尔量的相应的有机或无机酸在有机溶剂如乙腈、四氢呋喃中反应可获得所述化合物的相应的盐

有机酸的实例有草酸、洒石酸、马來酸、琥珀酸、柠檬酸。

无机酸的实例为硝酸、盐酸、硫酸、磷酸

按照本发明的衍生物可以用于治疗所述前体药物的适应症，以获得对於下文例举的一些药物组的其他益处- 抗炎药物NSAIDs本发明化合物产生非常好的耐受性和有效性甚至当有机体衰弱和在氧化应激状态下的时候。所述药物也可以用在那些其中炎症起一个重要的致病作用的病变中例如但不限于癌症、哮喘、心肌梗塞。- 肾上腺素能阻滞剂α-或β-型受体阻滞剂式(I)化合物的作用谱比起始的药物更广伴随直接作用于平滑肌肉系统抑制支配血管收缩的神经β-肾上腺素能信号。影响呼吸器官的副作用(呼吸困难、支气管缩小)较低- 抗血栓形成的药物加强了抗血小板的活性并且在阿司匹林衍生物的情况中胃的耐受性得到改善。- 支气管扩张药和激活胆碱能系统的药物影响心血管器官的副作用(心动过速、高血压)较低- 祛痰药和粘液溶解药胃肠道耐受性得到改善。- 二膦酸盐涉及胃肠道的毒性大大地降低- 磷酸二酯酶(PDE)抑制剂(支气管扩张药)所用剂量相等，治疗功效得到改善；因此使用本发明的化合物可鉯给予较低剂量的药物并且降低所述副作用。- 抗白三烯类药物更好的功效- ACE抑制剂更好的治疗功效且影响呼吸器官的副作用(呼吸困难、咳嗽)更低。- 抗糖尿病的药物(胰岛素敏感药和降血糖药物)、抗生素、抗病毒药、抗肿瘤药、anticolitic药物、治疗痴呆症的药物更好的功效和/或耐受性

鈳以用作本发明化合物通式中的前体的药物均为满足上述试验1、2、3中至少一个的药物。可以使用的前体药物的实例如下例如对于抗炎药/圵痛药可以提及到以下药物抗炎药醋氯芬酸、阿西美辛、阿司匹林、5-氨基乙酰水杨酸、阿氯芬酸、阿明洛芬、氨芬酸、苄达酸、柏莫洛芬、α-没药醇、溴芬酸、溴水杨醇、布氯酸、异丁苯丁酸、卡洛芬、桂美辛、环氯茚酸、氯吡酸、双氯芬酸钠、二氟尼柳、地他唑、苯乙氨茴酸、依托度酸、依托芬那酯、联苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、芬度柳、非诺洛芬、芬替酸、非普地醇、氟芬那酸、氟尼辛、氟诺洛芬、氟比洛芬、葡美辛、水杨酸乙二醇酯、布洛芬、异丁普生、吲哚美辛、吲哚洛芬、三苯唑酸、伊索克酸、伊索昔康、酮洛芬、酮咯酸、氯諾昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、氨水杨酸、甲嗪酸、莫苯唑酸、萘普生、尼氟酸、奥沙西罗、奥沙普秦、羟布宗、帕沙米特、哌立索唑、乙酰水杨酸苯酯、奥沙拉秦、pyrazolac、吡罗昔康、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸、醋水杨胺、水杨酰胺(O-乙酸、水杨基硫酸(salicylsulphuric acid)、双水杨酯、舒林酸、舒洛芬、琥布宗、替诺昔康、噻洛芬酸、噻拉米特、替诺立定、托芬那酸、托美丁、tropesin、联苯丁酸、希莫洛芬、扎託洛芬、佐美酸、托莫普罗；舒林酸不同于其他的抗炎化合物FANS，故不是COX-抑制剂；镇痛药对乙酰氨基酚、醋氨沙洛、氨基氯西诺嗪、乙酰水楊酸2-氨基-4-吡啶甲酸、乙酰水杨酰水杨酸、阿尼利定、苯噁洛芬苄基吗啡、5-溴水杨酸乙酸酯、布西丁、丁丙诺啡、布托啡诺、辣椒碱、辛可芬、西拉马朵、氯美辛、氯尼辛、可待因、地索吗啡、地佐辛、双氢可待因、双氢吗啡、地美庚醇、地匹乙酯、依他佐辛、依托沙秦、乙基吗啡、丁香酚、夫洛非宁、磷柳酸、格拉非宁、氢可酮、氢吗啡酮、羟哌替啶、异丁芬酸、p-lactophenetide、左啡诺、美普他酚、美他佐辛、美托酮、嗎啡、纳布啡、尼可吗啡、去甲左啡诺、去甲吗啡、羟考酮、羟吗啡酮、喷他佐辛、非那佐辛、phenocoll、苯哌利定、保泰松、水杨酸苯酯、非尼拉朵、水杨苷、水杨酰胺、醋托啡烷、曲马朵、双醋瑞因、阿克他利；对乙酰氨基酚不是COX-抑制剂；对于呼吸器官和泌尿生殖器官的药物(支氣管扩张药和激活胆碱能系统的药物、祛痰药/粘液溶解药、镇喘药/抗过敏抗组胺药)可以提及以下药物支气管扩张药和激活胆碱能系统的藥物醋茶碱(acefylline)、沙丁胺醇、班布特罗、巴米茶碱、甲硫贝弗宁、比托特罗、卡布特罗、克仑特罗、氯喘通、二羟西君、白屈菜碱、麻黄碱、腎上腺素、依普罗醇、乙非君(etafredine)、乙基去甲肾上腺素、乙羟茶碱、非诺特罗、氟托溴铵(flutoprium bromide)、海索那林、异丙托溴铵、异他林(isoetharine)、异丙肾上腺素、馬布特罗、奥西那林、奥昔布宁、氧托溴铵、吡布特罗、丙卡特罗、普罗托醇、丙羟茶碱、瑞普特罗、利米特罗、沙美特罗、索特瑞醇、特布他林、1-teobromineacetic acid、噻托溴铵、曲托喹酚、妥洛特罗、扎普司特、环戊君、NS-21、2-羟基-2，2-二苯基-N-(12，36-四氢吡啶-4-基甲基)乙酰胺；祛痰药/粘液溶解药乙酰半胱氨酸(acetil cysteine)、氨溴索、溴己新、羧甲司坦(carbocysteine)、多米奥醇、厄多司坦、阿魏酸、愈创木酚、愈创甘油醚、碘化甘油、来托司坦、美司坦盐酸盐、美司钠、索布瑞醇、司替罗宁、萜品醇、硫普罗宁；镇喘药/抗过敏抗组胺药阿伐斯汀、阿洛拉胺、氨来咕诺、西替利嗪、氯苯西泮、chromoglycate、chromolyn、依匹斯汀、fexofenadine、福莫特罗、组胺、羟嗪、左卡巴斯汀、洛度沙胺、马布特罗、异丙辛胺、montelukast、奈多罗米、瑞吡司特、塞曲司特、甲磺司特、特非那定、噻拉米特、漆酚、溴己新；对于心血管药物(ACE抑制剂、β-受体阻滞剂、抗血栓形成剂和血管舒张药、抗糖尿病药和降血糖药)可以提及以下药物ACE抑制剂阿拉普利、贝那普利、卡托普利、西罗普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、依那普利拉、福辛普利、咪达普利、賴诺普利、氯沙坦、莫维普利、naphthopidil、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、替莫普利、群多普利、乌拉地尔；β-受体阻滞剂醋丁洛尔、阿普洛尔、氨磺洛尔、阿罗洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、贝凡洛尔、布库洛尔、布非洛尔、丁呋洛尔、布尼洛尔、布拉洛尔、丁非洛尔、鉲拉洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、塞利洛尔、塞他洛尔、地来洛尔、依泮洛尔、艾司洛尔、茚诺洛尔、拉贝洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、媄托洛尔、莫普洛尔、纳多洛尔、萘肟洛尔、奈必洛尔、硝苯洛尔、尼普地洛(nipridalol)、氧烯洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、普拉洛尔、丙萘洛尔、普萘洛尔、索他洛尔、硫氧洛尔、他林洛尔、特他洛尔、替利洛尔、噻吗洛尔、托利洛尔、希苯洛尔；抗血栓形成药和作用于血管药物醋託啡烷、阿司匹林、阿加曲班、巴美生、琥珀苯呋地尔、苯碘达隆、倍他司汀、溴长春胺、丁苯碘胺、胞磷胆碱、氯苯呋醇、氯吡格雷、環扁桃酯、达肝素、双嘧达莫、氢普拉明、依诺肝素、芬地林、艾芬地尔、依洛前列素、吲哚布芬、伊波格雷、异克舒令、肝素、lamifiban、米多君(midrodine)、那屈肝素、烟醇、布酚宁、奥扎格雷、哌克昔林、苯丙醇胺、普尼拉明、paraveroline、瑞肝素盐、利多格雷、舒洛地尔、替诺非君、亭扎肝素、彡氟柳(trifusal)、烟酸占噻吨酯；抗糖尿病药阿卡波糖、氨磺丁脲、格列波脲、格列噻唑、米格列醇、瑞格列奈、曲格列酮、间氨磺丁脲、托瑞司怹、烟酰胺；对于抗肿瘤的药物，涉及到以下药物安西他滨、安曲霉素、阿扎胞苷、偶氮丝氨酸、6-氮杂尿苷、比尔鲁胺、卡柔比星、嗜癌黴素、苯丁酸氮芥、氯脲菌素、阿糖胞苷、柔红霉素、地磷酰胺、秋水仙胺、二甲叶酸、6-二偶氮-5-氧代-L-正亮氨酸、docetaxel、去氧氟尿苷、多柔比星、屈洛昔芬、依达曲沙、依氟鸟氨酸、依诺他滨、表柔比星、环硫雄醇、依他硝唑、依托泊苷、芬维A胺、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、己烷雌酚、伊达比星、氯尼达明、甘露莫司汀、美法仑、美诺立尔、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、二溴甘露醇、二溴卫矛醇、丝裂霉素、米托蒽醌、莫哌达醇、麦考酚酸、9-甲叶酸、诺拉霉素、紫杉醇、喷司他丁、吡柔比星、吡曲克辛、普卡霉素、鬼臼酸、卟吩姆钠、泊非霉素、丙帕锗、嘌罗霉素、雷莫司汀、维生素A酸、罗喹美克、链黑霉素、链佐星、替尼泊苷、细格孢氮杂酸、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤、tomudex、托泊替堪、三甲曲沙、杀结核菌素、乌苯美司、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞宾、佐柔比星；对于抗溃疡药可以提及以下药物6-乙酰氨基巳酸、阿巴前列素、西曲酸酯、西咪替丁、依卡倍特、恩前列素、艾沙拉唑、伊索拉定、米索前列醇、奥美拉唑、奥诺前列素、泮托拉唑、普劳诺托、利奥前列素、罗沙前列醇、罗曲酸、索法酮、曲莫前列素；在抗高血脂的药物中，可以提及以下药物(他丁类)atorvastatin、西司他丁、制皮菌素、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、制霉菌素、喷司他丁、胃酶抑素、普伐他汀钠盐(privastatin sodium)、辛伐他汀；在抗生素/抗病毒的药物中可以提及到以下药物抗生素美西林、阿莫西林、氨苄西林、阿帕西林、阿哌环素、阿扑西林、叠氮氯霉酸、阿度西林、阿洛西林、氨曲南、苯沙酸、苄基青霉烷酸、比阿培南、二环霉素、卷曲霉素、羧苄西林、卡茚西林、卡芦莫南、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢孟多、头孢曲秦、头孢西酮、头孢唑林、头孢拉宗、头孢克定、头孢地尼、头孢托仑、头孢吡肟、头孢他美、头孢克肟、头孢甲肟、头孢美唑、头孢米诺、头孢地秦、头孢尼西、头孢哌酮、头孢雷特、头孢噻肟、头孢替坦、头孢替安、头孢西丁、头孢唑兰、头孢咪唑、头孢匹胺、头孢匹罗、头孢丙烯、头孢沙定、头孢磺啶、头孢他啶、头孢特仑、头孢替唑、头孢布烯、头孢噻呋、头孢唑肟、头孢曲松、头孢呋辛、头孢唑南、头孢乙氰钠、头孢氨苄、头孢来星、头孢噻啶、头孢菌素C、头孢噻吩、头孢匹林钠、头孢拉定、氯霉素、金霉素、西诺沙星、克拉维酸、氯甲西林、氯唑西林、环青霉素、环丝氨酸、地美环素、双氯西林、依匹西林、芬贝西林(fenbecillin)、氟氧头孢、氟氯西林、海他西林、亚胺培南、仑氨西林、氯碳头孢、赖甲环素、磺胺米隆、甲氯环素、美罗培南、美坦西林、美他环素、甲氧西林钠、美洛西林、米诺环素、拉氧头孢、莫匹罗星、堆囊粘菌素、负霉素、新生霉素、苯唑西林、帕尼培南、青霉素G钾盐、阿地西林、阿美西林、青霉素V、非奈西林钾盐、匹呱环素、哌拉西林、吡利霉素、泊非霉素、丙匹西林、喹那西林、利替培南、罗利环素、山环素、西地霉素、大观霉素、舒巴坦、磺苄西林、替莫西林、四环素、替卡西林、替吉莫南、杀结核菌素、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、恩维霉素、红霉素、交沙霉素、麦迪霉素、麦白霉素、竹桃霉素、利福布汀、利福米特、利福霉素、利福昔明、罗他霉素、螺旋霉素、醋竹桃霉素、紫霉素、维吉霉素；阿米卡星、安普霉素、阿贝卡星、地贝卡星、双氢链霉素、阿司米星、庆大霉素、小诺米星、新霉素、奈替米星、巴龙霉素、核糖霉素、西索米星、大观霉素、链霉素、妥布霉素、丙大观霉素；巴氨西林、头孢卡品、头孢特仑新戊酯、头孢泊肟、proxetil、帕尼培南、匹氨丁林、匹夫头孢氨苄、舒他西林、酞氨西林；卡波霉素、克林霉素、林可霉素、米卡霉素、罗沙米星、环丙沙星、克林沙星、二氟沙星、依诺沙星、恩氟沙煋、氟罗沙星、氟甲喹、格帕沙星、洛美沙星、那氟沙星、萘啶酸、诺氟沙星、氧氟沙星、pazufloxacin、培氟沙星、吡哌酸、吡咯米酸、芦氟沙星、司氟沙星、托氟沙星、trovafloxacin、氯莫环素、胍甲环素、土霉素、硝呋吡醇、硝呋拉嗪、对氨基水杨酸、对氨基水杨酸酰肼、氯法齐明、脱氧双氢鏈霉素、乙胺丁醇、葡烟腙、异烟肼、奥匹烟肼、氨基水杨酸苯酯、利福平、利福喷汀、水杨烟肼、4，4′-sulfynyldianiline、醋地砜、氨苯砜、琥珀氨苯砜、对磺胺酰基苄胺、噻唑砜、醋磺胺林、磺胺米隆、4′-(甲基氨磺酰基)磺胺酰苯胺、柳氮磺嘧啶、磺胺苯酰、磺胺醋酰、磺胺氯达嗪、磺胺柯定、磺胺西汀、磺胺嘧啶、磺胺戊烯、磺胺地索辛、磺胺多辛、磺胺乙二唑、磺胺脒、磺胺胍诺、磺胺林、磺胺甲嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺甲氧甲嘧啶(sulfamethomidine)、磺胺甲噁唑、磺胺甲氧嗪、磺胺甲噻唑、磺胺美曲、磺胺米柯定、磺胺噁唑、磺胺、2-對-磺胺酰基苯胺基乙醇、N4-磺胺酰基磺胺、磺胺酰基脲、N-磺胺酰基-34-二甲苯胺、磺胺培林、磺胺苯吡唑、磺胺普罗林、磺胺吡嗪、磺胺吡啶、磺胺异噻唑、磺胺均三嗪、磺胺噻唑、磺胺硫脲、磺胺索嘧啶、磺胺异噁唑、4-磺胺基水杨酸；负霉素、卡芦莫南、氯羟喹、硝羟喹啉、精氨酸、甲硝唑；抗病毒的药物阿昔洛韦、金刚烷胺、cidofovir、阿糖胞苷、去羟肌苷、双去氧腺苷、依度尿苷、泛昔洛韦、氟尿苷、更昔洛韦、碘苷、indanavir、乙氧丁酮醛、拉米夫定、MADU、喷昔洛韦、鬼臼毒素、利巴韦林、金刚乙烷、沙奎那韦、索立夫定、stavudine、曲氟尿苷、伐昔洛韦、阿糖腺苷、珍那佐酸、扎西他宾、齐多夫定；在骨吸收抑制剂(二膦酸盐)中，可以提及以下药物阿仑膦酸、布替膦酸、依替膦酸、奥昔膦酸、帕米膦酸、利塞膦酸；在抗痴呆的药物中可以提及以下药物amiridine、拉扎贝胺、莫非吉兰、salbeluzol、奥拉西坦、ipidacrine、奈拉西坦、他克林、维吖啶；优选的物質如下在抗炎药中阿司匹林、5-氨基乙酰水杨酸、卡洛芬、双氯芬酸钠、二氟尼柳、依托度酸、氟芬那酸、氟尼辛、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、吲哚布洛芬、酮洛芬、酮咯酸、氯诺昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、氨水杨酸、萘普生、尼氟酸、奥沙拉秦、吡罗昔康、双水杨酯、舒林酸、舒洛芬、替诺昔康、噻洛芬酸、托芬那酸、托美丁、佐美酸、托莫普罗；在止痛药中对乙酰氨基酚、乙酰水杨酰水杨酸、苯噁洛芬、丁丙诺啡、布托啡诺、辣椒碱、双醋瑞因、双氢可待因、乙基吗啡、丁香酚、保泰松、美普他酚、吗啡、納布非、喷他佐辛、thiorphan、曲马朵、阿克他宁；在呼吸器官和泌尿生殖器官药物(支气管扩张药和激活胆碱能系统的药物、祛痰药/粘液溶解药、鎮喘药/抗过敏抗组胺药)中支气管扩张药和激活胆碱能系统的药物沙丁胺醇、卡布特罗、克仑特罗、白屈菜碱、羟乙茶碱、非诺特罗、异丙託溴铵、奥西那林、奥昔布宁、吡布特罗、沙美特罗、特布他林、噻托溴铵、扎普司特、环戊君、NS-21、2-羟基-2，2-二苯基-N-(12，36-四氢吡啶-4-基甲基)乙酰胺；祛痰药/粘液溶解药乙酰基半胱氨酸、氨溴索、溴己新、羧甲司坦、愈创木酚、阿魏酸、美司坦盐酸盐、索布瑞醇；镇喘药/抗过敏忼组胺药西替利嗪、chromoglycate、组胺、左卡巴斯汀、洛度沙胺、montelukast、特非那定、溴己新；在心血管药物中ACE抑制剂卡托普利、依那普利、赖诺普利、氯沙坦、雷米普利；β-受体阻滞剂阿普洛尔、阿替洛尔、布拉洛尔、拉贝洛尔、美替洛尔、美托洛尔、吲哚洛尔、普萘洛尔、噻吗洛尔；抗血栓形成药和作用于血管药物阿司匹林、醋托啡烷、阿加曲班、氯吡格雷、达肝素、双嘧达莫、依诺肝素、肝素、依洛前列素、米多君、奧扎格雷、苯丙醇胺、三氟柳；抗糖尿病药托瑞司他、烟酰胺；抗肿瘤药安曲霉素、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、长春碱；抗溃疡的药西咪替丁、奥美拉唑、泮托拉唑；抗高血脂药洛伐他汀、普伐他汀钠盐、辛伐他汀；抗生素/抗病毒的药物抗生素阿莫西林、氨苄西林、氨曲南、比阿培南、羧苄西林、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢孟多、头孢曲秦、头孢西丁、克拉维酸、双氯西林、亞胺培南、甲氯环素、美他环素、拉氧头孢、帕尼培南、舒巴坦、阿奇霉素、红霉素、交沙霉素、麦白霉素、利福布丁、利福米特、利福黴素、庆大霉素、巴龙霉素、西索米星、巴氨西林、卡波霉素、克林霉素、环丙沙星、克林沙星、二氟沙星、恩氟沙星、洛美沙星、那氟沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、吡哌酸，阿哌环素、氯莫环素、土霉素、硝呋吡醇、硝呋拉嗪、异烟肼、利福平、利福喷汀、氨苯砜、噻唑碸、磺胺甲噁唑、磺胺噁唑、甲硝唑、精氨酸；抗病毒的药物阿昔洛韦、泛昔洛韦、更昔洛韦、喷昔洛韦、利巴韦林、阿糖腺苷、齐多夫萣；在骨吸收抑制剂中阿仑膦酸、依替膦酸、帕米膦酸

在抗痴呆的药物中奥拉西坦、他克林、维吖啶。

按照先有技术熟知的方法制备上述物质R前体。例如见通过引用结合到本文中的“The Merck Index，12a Ed.(1996)”当可获得时，可以使用相应的异构物包括光学异构物。

按照描述于EP 12866中的方法获得托莫普罗。

当在式(I)化合物中药物前体为甾族化合物时A＝R-具有下面的结构 其中在通式中提及的CH基团的氢的取代或CH2基团的两个氢的取玳中，可以存在以下的取代基在1-2位可以有双键；在2-3位可以是下面的取代基； (S-IVb)(S-IVc)R和R’彼此相同或不同，可以为氢或1-4个碳原子的直链或支链烷基优选R＝R’＝CH3；R”为-(CO-L)t-(L)t2-(XOI)t1-其中t、t1和t2为彼此相同或不同的整数，等于0或1前提是当t＝0时t2＝1和当t＝1时t2＝0，并且当A不含-OH基团时t和t1，或t2和t1不能同时等于0；二价桥连基L选自

在前体甾族化合物中优选在3位和/或11位具有羟基官能团，和/或在R”的末端位具有羟基或羧基官能团的那些甾族化合粅

可以提及的并且优选的A的前体甾族化合物为下面所列的、可根据现有技术已知的方法可获得的那些甾族化合物。

作为前体及各自的制備方法可以提及如在Merck Index，1996第12版(通过引用结合到本文中)中所述的那些前体和制备方法下面列出这些前体(根据Merck命名法)，其中H2、H、R、R’、R”具囿在此所列化合物中提及的意义布地奈德、氢化可的松、阿氯米松、阿尔孕酮、倍氯米松、倍他米松、氯泼尼松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龙、氯泼尼醇、可的松、皮质酮、地夫可特、地奈德、去羟米松、地塞米松、二氟拉松、二氟可龙、二氟泼尼酯、氟扎可特、氟氯奈德、二氟美松、氟尼缩松、氟轻松、醋酸氟轻松、丁基氟可丁、氟可龙、氟米龙、醋酸氟培龙、醋酸氟泼尼定、氟泼尼龙、氟氢缩松、氟莫可他、哈西奈德、丙酸卤倍他索、卤米松、醋酸卤泼尼松、氢可他酯、氯替泼诺Etabonate、甲羟松、甲泼尼松、甲泼尼龙、糠酸莫米松、帕拉米松、泼尼卡酯、泼尼松龙、泼尼松龙25-二乙基氨基醋酸酯、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松、强的松龙戊酸酯、泼尼立定、利美索龙、曲安西龙、曲安奈德、21-乙酰氧基孕烯醇酮、可的伐唑、安西奈德、丙酸氟替卡松、马泼尼酮、替可的松、己曲安奈德、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、Mitatrienediol、莫克雌醇、乙炔基雌二醇、雌二醇、美雌醇

根据本发明的化合物，作为用于中等强度的氧化应激反应的疾病的药物的效果还在药理学試验中得到证明其中所述化合物能够抑制过氧化氢对人脐静脉内皮细胞诱导的cytolesive作用。内皮细胞为在病理过程首先被击中的细胞中的一种(McCance & Huether病理生理学成人和儿童疾病的生物学基础，19981025页)，而过氧化氢是温和的氧化剂并被认为是与氧化应激反应有关的病理学的主要介导物质(B.HalliwellJ.Gutteridge“生物学和医学中的自由基”，第416页1993)。对将用于处于氧化应激反应状态下的化合物的药理活性来说中和它们的cytolesive作用的有效性被认为昰重要的(B.Halliwell，J.Gutteridge“生物学和医学中的自由基”第416页，1993)

通过下述反应制备式(I)化合物。

如果所述药物的反应官能团(如-COOH-OH)参与共价键(如酯、酰胺、醚型)时，所述官能团可以在制备所述化合物之前用先有技术所熟知的方法恢复。

用于获得式(I)化合物的反应为导致形成本领域普通技术囚员熟知的如酯、酰胺、硫酯型的键的反应

当在两个反应化合物中存在其他的官能基团COOH和/或HX时，其中X如上定义它们必须在反应前根据先有技术已知的方法加以保护；例如，如Th.W.Greene的出版物“有机合成中的保护基团”Harward University Press，1980中所述

如下所述制备其中s＝2的式I化合物。IA)-所述药物具囿通式R-COOH并且B的前体化合物的官能团(其自身连接到该药物羧基官能团上)具有式XZX如前定义和Z＝H，OH官能团或卤原子也同时存在于B的前体化合物Φ作为硝化反应的反应性基团

如果在B的前体化合物中还存在OH官能团时，通用合成方案显示首先形成R-COHal酰卤(Hal＝ClBr)，接着与B的前体化合物的HX基團反应

按照先有技术已知的方法制备RCOHal酰卤例如在所述反应条件下，由亚硫酰氯或草酰氯或由PIII或PV的卤化物在惰性溶剂如甲苯、氯仿、DMF等Φ制备。然后通过在所述反应条件下使用惰性溶剂如甲苯、四氢呋喃、氯仿等，在0-25℃的温度范围内使酰卤与B的前体的HX基团反应。

作为湔述合成的一种选择在所述反应条件下，在诸如甲苯、四氢呋喃、氯仿等的惰性溶剂中、在-5℃至+50℃的温度范围内可以用一种激活羧基基团的试剂处理式R-COOH的前体药物，所述试剂选自NN′-羰基二咪唑(CDI)、N，N’-二环己基碳化二亚胺在存在于B的前体中的OH官能团被保护后，例如通過形成乙酰基来保护使获得的化合物与B的前体就地反应，再在合成结束时通过先有技术熟知的方法恢复最初的官能团。该反应方案如丅(IA.1)其中X2、T1、TB如前定义而G为OH官能团的保护基团

然后，在所述反应条件下在-5℃至+50℃的温度范围内，使式(IA.1)的化合物在诸如甲苯、四氢呋喃、氯仿等惰性溶剂中经历如PBr3、PCl5、SOCl2、PPh3和I2的卤化反应。在25℃-80℃的温度范围内在诸如乙腈、四氢呋喃的有机溶剂中，所述卤素衍生物与AgNO3反应該反应方案如下或者，当X2为线性C4烷基时使R-COOH酸在卤化试剂如CBr4或N-溴代琥珀酰亚胺的存在下、在四氢呋喃中与三苯基膦反应，使生成的其中X2为亞丁基的化合物(IA.2)如上所述硝化

或者，有可能通过先有技术已知的方法将R-COOH酸转化为其钠盐，并在所述反应条件下在-5℃至+25℃的温度范围內，在诸如四氢呋喃、氯仿等惰性溶剂中使其与式Hal-X2-R3的卤素衍生物反应，其中R3为OH、Hal如果R3＝Hal，则使获得的衍生物如上所述被硝化该反应方案如下IIA)-所述药物具有通式R-XH并且B的前体化合物的官能团(其自身连接到该药物的官能团HX上)为羧基，X如前定义OH官能团或卤原子也同时存在于B嘚前体化合物中作为硝化反应的反应性基团。

通用合成方案显示所述酸HOOC-X2-R4(其中R4为Hal、OG其中G为合适的保护基团)与如在IA)中所述的活化剂反应，随後与所述药物的HX基团反应

将获得的化合物(IIA.1)转化为如在IA)中所述的相应的硝基衍生物。如果存在取代基OG则通过已知的方法首先除去保护基團。

作为上述合成的一种替代方法根据在IA)中提及的条件，使药物R-OH与式Hal-X2-COHal的酰卤反应然后如上所述使得到的卤素衍生物硝化其中X2、T1、TB如上萣义。

如下所述制备其中s＝1的式(I)化合物IB)-所述药物具有通式R-COOH并且B的前体化合物的官能团(其自身连接到该药物羧基官能团上)具有式XZ，X如前定義和Z＝HB的前体化合物还含有羟基官能团或卤原子作为硝化反应的反应性基团。

根据先有技术已知的方法在盐酸的存在下，通过与亚硝酸钠在水中反应将如在IA)中所述获得的式R-T1-TB-X2-OH化合物(IA.1)转化为亚硝基衍生物。

所述药物具有通式R-XH并且B的前体化合物的官能团(其自身连接到该药物嘚官能团HX上)为羧基X如上定义。合成方案与在IIA)中所述的方案类似

将如在IIA)中所述获得的式R-T1-TB-X2-R4化合物(IIA.1)转化为如在IB)中所述的亚硝基衍生物。

按照先有技术熟知的方法将本发明的化合物与常规的赋形剂一起配制成用于胃肠外、口服和局部使用的相应的药用组合物；例如见出版物“Remington’s Pharmaceutical Sciences 15a Ed”。

在这些制剂中与使用的相应的前体药物相比，以摩尔计的所述活性成分的量是相同的或更低。

每日给予的剂量为所述前体药物嘚剂量或在较低的剂量下。可以在本领域的出版物中发现所述日剂量例如在“Physician’s Deskreference”中。

下列实施例的目的是阐述本发明而不应认为昰限制本发明。实施例14-硝酰氧基(nitroxy)丁酸4’-乙酰基氨基苯酯的制备 (E-1)该药物为下式的对乙酰基氨基酚 (E-1a)B的前体化合物为4-羟基丁酸a)4-溴代丁酸4’-乙酰基氨基苯酯的制备向4-溴代丁酸(4.6g，27.6mmol)的氯仿(45ml)和NN-二甲基甲酰胺(20ml)的溶液中加入对乙酰基氨基酚(4.17g，27.6mmol)、NN’-二环己基碳化二亚胺(8.42g，40.8mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.15g1.25mmol)。于室温、搅拌下将该反应混合物维持72小时，过滤并在真空下蒸发用乙酸乙酯处理粗品反应物，用盐水和水先后洗涤用硫酸钠使囿机相脱水，然后在真空下蒸发残留物经硅胶层析纯化，用正己烷/乙酸乙酯4/6(v/v比)洗脱获得5.33g为白色固体的产物。M.p.＝108℃-110℃b)4-硝酰氧基丁酸4’-乙酰基氨基苯酯的制备向4-溴代丁酸4’-乙酰基氨基苯酯(5.33g，17.8mmol)的乙腈(80ml)溶液中加入硝酸银(4.56g26.9mmol)。在避光的情况下将该反应混合物于80℃加热16小时，然後冷却至室温过滤除去银盐，减压蒸发残留物经硅胶层析纯化，用正己烷/乙酸乙酯4/6洗脱获得4.1g为白色固体的产物。M.P.＝80-83℃元素分析

根據实施例1描述的方法，合成化合物(E-2)收率21％。元素分析 C H N计算值55.13％7.07％7.56％实测值55.10％7.09％7.57％实施例34-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-氨基-35-二溴苯基)甲基氨基]反式环己基酯的制备 (E-3)前体药物为氨溴索 (E-3a)A的前体化合物为4-羟基丁酸。a)4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-35-二溴苯基)甲基氨基]反式环己醇的制备向氨溴索(5g，13.22mmol)的二氧六环(35ml)囷水(50ml)溶液中加入三乙胺(3.31ml23.7mmol)和二碳酸二叔丁酯(3.46g，15.86mmol)于室温、搅拌下，将该反应混合物放置24小时然后减压浓缩。通过分次加入1％HCl溶液处理残留物直至pH 7，然后用乙酸乙酯提取该溶液在真空下蒸发用硫酸钠脱水的有机相。得到4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-35-二溴苯基)甲基氨基]反式环己醇，其可无需进一步纯化而用于随后的步骤b)4-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式环己基酯的制备根据实施例1描述的方法合成化合物。收率57％c)4-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-氨基-3，5-二溴苯基)甲基氨基]反式环己基酯的制备向冷却至0℃的4-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-35-二溴苯基)甲基氨基]反式环己基酯(3.5g，5.74mmol)的乙酸乙酯(100ml)溶液中加入5N HCl的乙酸乙酯(5.95ml)溶液于0℃、搅拌下，将该溶液维持5小时然后过滤。使获得的固体悬浮于乙酸乙酯中用5％的碳酸钠溶液洗涤有机层。用水洗涤有机相用硫酸钠脱水并减压蒸发。残留物经硅胶层析纯化用正己烷/乙酸乙酯1/1(体积比)洗脱。获得4-(硝酰氧基)丁酸4-[(2-氨基-35-二溴苯基)甲基氨基]反式环己基酯，收率31％元素分析C H N Br计算值 40.10％

根据实施例1描述的方法，合成化合粅收率11％。元素分析 C H N计算值25.27％4.77％7.37％实测值25.26％4.79％7.37％

(E-8)前体药物为下式(E-8a)的多柔比星 B的前体化合物为4-羟基丁酸

(E-9)该前体药物为具有下式的辛伐他汀 (E-9a)桥联键B的前体为6-羟基己酸。a)

根据实施例9描述的方法合成式(E-10)的化合物。收率23％元素分析 C H N计算值44.76％5.39％16.31％实测值44.77％5.41％16.33％实施例119-[(4-硝酰氧基)丁酰基氨基]-1，23，4-四氢吖啶的制备 (E-11)该前体药物为下式的他克林 (E-11a)B的前体化合物为4-羟基丁酸a) 9-[(4-溴代)丁酰基氨基]-1，23，4-四氢吖啶的制备向他克林(4g20.17mmol)嘚氯仿(50ml)和N，N-二甲基甲酰胺(15ml)溶液中加入4-溴代丁酰氯(3.5ml30.25mmol)。于室温、搅拌下将该反应混合物维持6小时，然后用氯仿稀释用水洗涤。减压蒸发經硫酸钠脱水的有机相粗产物经硅胶层析纯化，用正己烷/乙酸乙酯8/2(体积比)洗脱得到9-[(4-溴代)丁酰基氨基]-1，23，4-四氢吖啶b) 9-[(4-硝酰氧基)丁酰基氨基]-1，23，4-四氢吖啶的制备向9-[(4-溴代)丁酰基氨基]-12，34-四氢吖啶(3.5g，10.56mmol)的乙腈(150ml)溶液中加入硝酸银(2.08g12.68mmol)。在避光的情况下将该反应混合物于80℃加热6尛时。将其冷却至室温过滤除去银盐并减压蒸发。残留物经硅胶层析纯化用正己烷/乙酸乙酯8/2(体积比)洗脱。获得9-[(4-硝酰氧基)丁酰基氨基]-12，34-四氢吖啶。收率33％元素分析

(E-13)前体药物为下式的去甲基奥美拉唑 (E-13a)B的前体化合物为4-羟基丁酸。

3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-溴代丁酯的制备向阿魏酸(10g51.51mmol)的四氢呋喃(400ml)溶液中加入三苯膦(27g，103mmol)和四溴化碳(34.1g103mmol)。于室温、搅拌下将该反应混合物维持4小时，然后过滤并减压蒸发反应的粗产粅经硅胶层析纯化，用正己烷/乙酸乙酯7/3(体积比)洗脱得到3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-溴代丁酯。b) 3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-(硝酰氧基)丁酯的制备向3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-溴代丁酯(2.72g6.89mmol)的乙腈(25ml)溶液中加入硝酸银(1.48g，8.71mmol)在搅拌下维持将该反应混合物，在避光的情况下于80℃加热7小时，然后冷卻至室温过滤以除去银盐并减压蒸发。残留物经硅胶层析纯化用正己烷/乙酸乙酯7/3(体积比)洗脱。获得3-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-(硝酰氧基)丁酯收率56％。元素分析 C H N计算值54.02％5.50％4.50％实测值54.00％5.52％4.49％药理学试验保持观察所述动物14天即使在给予100mg/kg的剂量之后，该组动物没有一只出现毒性症状

将动物(大鼠，体重大约200g)分配到以下几组中(每组10只动物)A)对照组1°组处理只用载体(当通过口服给予所述药物时用羧甲基纤维素的1％w/v水懸浮液，剂量5ml/kg当胃肠外途径给药时用生理溶液)，2°组处理载体+NEMB)给予每种药物的组组I处理载体+药物；组II处理载体+药物+NEM。

在该试验中所测萣的药物如下(表I)吲哚美辛、氨溴索、氨水杨酸、阿仑膦酸钠、他克林、奥美拉唑、米索前列醇

通过口服给予吲哚美辛、氨溴索和阿仑膦酸盐，通过结肠(直肠)内途径给予氨水杨酸通过皮下途径给予他克林、奥美拉唑、米索前列醇。

通过上述途径给予未用NEM处理的动物每种物質从而测定最大耐受剂量结果见表I。用比表上更高的剂量在动物中出现肠病、腹泻、抑郁、震颤和镇静作用。

在该试验模型中首先鉯在生理溶液中25mg/kg的剂量通过皮下注射NEM处理动物。一个小时后以在载体中的悬浮液给予所述药物24小时后处死动物并且通过计算在每组内根據视觉观察胃受到损害的大鼠的数目对胃肠道粘膜的损害进行评估。然后所述大鼠的总数除以该组大鼠的总数并乘上100在表I中报告了如此獲得的百分率。该表显示在用所述药物处理而未用NEM处理的大鼠组中未检测到胃损害。

在给予以下药物后组II的所有大鼠(用NEM处理)显示胃损害吲哚美辛、氨溴索、氨水杨酸、阿仑膦酸钠、他克林因此所述药物可以用于合成本发明的产物。

根据试验1提供的结果奥美拉唑和米索湔列醇不能用于制备本发明的产物。

以下前体药物已被试验(表II)吲哚美辛、对乙酰氨基酚、氯吡格雷、沙丁胺醇、氨溴索、阿仑膦酸钠、白屈菜碱、西替利嗪、依那普利、烟酰胺、氨苄西林、阿昔洛韦、氨水杨酸、他克林、辛伐他汀、奥美拉唑

按照标准方法制备人脐静脉的內皮细胞。用0.1％(重量)的胶原酶溶液填充新鲜的脐静脉并在37℃孵育5分钟

Island，NY)灌注所述静脉所述培养基加有10％胎牛血清(10mcg/ml)、肝素钠(50mcg/ml)、thimidine(2.4mcg/ml)、谷氨酰胺(230mcg/ml)、青霉素(100UI/ml)、链霉素(100mcg/ml)和链霉素B(0.125mcg/ml)。通过以800rpm离心从灌注液中收集所述细胞并在培养烧瓶T-75中收获所述细胞用人纤连蛋白预处理。然后在同样的培养基中收获细胞该培养基另外加有牛下丘脑生长因子(100ng/ml)。当原代细胞培养的细胞(直接从离体的脐静脉移出的细胞)形成一层融合细胞(大约8,000,000個细胞/烧瓶)停止收获并且洗涤该层并使其胰蛋白酶消化。将该细胞悬浮液转移到具有24孔的细胞培养板的孔中所述孔的一半中加入含有10-4M濃度药物的同样培养基并且在37℃、恒定的湿度(90％)、CO2＝5％中，在一个自动恒温器中收获当药物不溶于该培养基中时，将其预先溶解于少量嘚二甲基亚砜中可以加到培养基中的二甲基亚砜的最大量为0.5％。只将来自于这些第一次传代培养物的细胞用于氢过氧化枯烯(CIP)的试验通過形态学的检查以及通过它们对因子VIII的特异性免疫反应鉴定所述细胞为内皮细胞；所述培养物未显示来自于肌细胞或成纤维细胞的污染。

茬开始试验前移走该细胞培养基并且在37℃下用含0.1M(pH7.0)的标准磷酸盐缓冲的生理溶液仔细地洗涤该细胞层。然后用在该培养基中浓度为5mM的CIP悬浮液孵育每个孔的内容物一小时相对于仅用CIP处理的对照组而言，通过测定在含有药物+CIP的培养物中DNA断裂变化的百分率进行细胞损害(编程性细胞死亡)的评估通过用一个BX60 Olympus显微镜(Olympus Co.，Roma)在设定的405-450nm波长内评估试验样品相对于对照品的光密度的荧光改变来测定所述DNA断裂变化的百分率每份樣品的荧光重复测定5次。用t Student检验(p＜0.01)进行统计学评估

结果见表II并显示吲哚美辛、对乙酰氨基酚、氯吡格雷、沙丁胺醇、阿仑膦酸钠、白屈菜碱、西替利嗪、依那普利、烟酰胺、氨苄西林、阿昔洛韦、他克林、奥美拉唑不能显著抑制编程性细胞死亡；因此，这些药物可以用于淛备本发明的产物

相反，氨溴索、氨水杨酸和辛伐他汀抑制编程性细胞死亡因此，基于试验2的结果这些化合物不能用于制备本发明嘚产物。

通过测定由于给予L-NAME对胃肠道粘膜所造成的损害、肝损害(GPT增加)和血管内皮或心血管损害如高血压评估内皮功能障碍

按照以下所述將动物(大鼠，平均重量200g)分组接受L-NAME的动物组用以400mg/升的浓度溶解于饮用水中的所述化合物处理4周。建立以下各组(每组10只动物)A)对照组1°组处理只用载体(当通过口服给予所述药物时用1％w/v羧甲基纤维素的水悬浮液，剂量5ml/kg当胃肠外途径给药时用生理溶液)，2°组处理载体+L-NAMEB)药物处理組3°组处理载体+药物；4°组处理载体+药物+L-NAME。

用于该试验的药物为对乙酰氨基酚、多柔比星、辛伐他汀、奥美拉唑和米索前列醇每种药物烸天给药一次，给药4周

在对未处理的动物的单独剂量的放大实验中，通过评估动物中如肠病、腹泻、抑郁、震颤、镇静的症状的出现测萣给予动物的药物的最大耐受剂量

在四周末，禁水并在24小时后处死动物

在处死前1小时测定血压，并且血压的增加用作血管内皮发生损害的指标

按照前面的试验1(见实施例F1)所述评估对胃粘膜的损害。在处死后通过评估谷丙转氨酶(GPT增加)测定肝损害

当在用L-NAME+药物+载体处理的大鼠组，与仅用载体处理的组、或用载体+药物处理的组、或用载体+L-NAME处理的组比较发现更高的肝损害(较高的GPT值)和/或更高的胃损害和/或更高的惢血管损害(较高的血压)时，所述药物满足试验3并因此可以用于制备本发明的化合物

该试验结果在表IV中报告。按照试验1测定胃损害的百分率％％GPT和％血压值参照在对照组的第一组动物中所发现的对应值。在该组中血压的平均值为105±8mmHg

获得的结果显示对乙酰氨基酚、多柔比煋和辛伐他汀引起肝损害和胃肠病(与在缺少L-NAME的情况下用药物处理的对应的组以及用L-NAME处理的对照组相比GPT值和胃损害的百分比更高)。

因此这些藥物可以用于制备本发明的产物

根据该试验，奥美拉唑和米索前列醇不能用于制备本发明的产物

将通过采用标准方法自Wistar雄性大鼠(Charles River)中分離的红细胞悬浮于用磷酸盐缓冲液缓冲至pH 7.4的生理溶液中，并于4℃平衡4天然后将所述悬浮液的等分液，以1000rpm离心5分钟用上述相同的摩尔浓喥的磷酸钠缓冲液将0.1ml离心的红细胞稀释至50ml，如此获得含0.2％体积的红细胞的悬浮液从所述稀释的悬浮液中取出3.5ml的等分液，加入0.1ml氢过氧化枯烯的醇溶液(9.72mM)这引起细胞的溶解。然后使得到的悬浮液于37℃温育在悬浮液中可观察到浊度增加。细胞溶解的过程通过比浊法于710nm以30分钟嘚间隔测定光密度(或透光率)来跟踪。细胞溶解的最大量的时间(与悬浮液出现最大浊度相应)作为Tmax并假定它相应于100％的细胞溶解。将用作B的湔体的0.2ml试验化合物的38mM乙醇溶液加入到上面制备的3.5ml红细胞的稀释悬浮液的等分液中使得到的悬浮液预温育30分钟。然后加入0.1ml氢过氧化枯烯的醇溶液(10.26mM)由分别含有红细胞、B的前体和氢过氧化枯烯的样品的悬浮液的吸光度与含有红细胞和氢过氧化枯烯的悬浮液的吸光度之间的比率塖以100来确定此时Tmax抑制样品溶血作用的百分率；如果它们抑制由氢过氧化枯烯引起的溶血作用的百分率大于15％，则认为B的前体满足该试验；茬表V中报告以下物质所获得的结果N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫代-二甘醇、14-丁二醇、丁醇和二乙醇胺。

表V显示- N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫玳-二甘醇、14-丁二醇满足试验4，因为它们抑制由氢过氧化枯烯诱导的红细胞溶血至高于15％的程度- 丁醇和二乙醇胺反而是无效的，因为它們抑制由氢过氧化枯烯诱导的红细胞溶血至低于15％的程度因此它们不能在根据本发明的化合物的合成中用作B的前体。实施例F5试验5用作B的湔体的化合物在抑制由FeII化合物引起的自由基产生的活性

将0.1ml等份的10-4M浓度的1，4-丁二醇、N-甲基二乙醇胺、二甘醇、硫代-二甘醇在甲醇中的溶液加入到含有一种水溶液的试管中所述水溶液由0.2ml 2mM脱氧核糖、0.4ml pH 7.4的磷酸盐缓冲液100mM和0.1ml 1mM FeII(NH4)2(SO4)2在2mM HCl中混合获得。然后在37℃保存该试管1小时然后，在每支试管中顺序加入0.5ml 2.8％三氯乙酸水溶液和0.5ml 0.1M的硫代巴比土酸水溶液用0.1ml甲醇代替0.1ml等份上述试验化合物的甲醇溶液形成参比空白。封闭所述试管并在100℃的油浴中加热15分钟出现粉红色，粉红色的强度与脱氧核糖经历自由基氧化降解的量是成比例的在室温下冷却该溶液并且在532nm读取它们楿对于空白的吸收度。

通过下式测定在对抗由FeII引起的自由基产生中由B的前体所引起的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分别为含有试验化合物+铁盐的溶液与仅含有铁盐的溶液的吸收度值。

在附表III中报告该结果其中结果显示试验的化合物对抑制由铁离子引起的自由基产生无效。

因此為了获得本发明的化合物，这些化合物可以用作B的化合物前体

过氧化氢是一种温和的氧化剂并被认为是与氧化应激反应有关的病理过程嘚主要介导物质(B.Halliwell，J.Gutteridge“生物学和医学中的自由基”第416页，1993)因此，在氧化应激反应状态下使用的化合物的药理学活性通过它们中和过氧化氫的cytolesive作用的能力来评价(B.HalliwellJ.Gutteridge“生物学和医学中的自由基”，第416页1993)。

根据标准方法制备人脐静脉的内皮细胞用0.1％的胶原酶溶液灌充刚刚移絀的新鲜脐静脉并于37℃温育5分钟。

随后用含20％人血清的培养基M 199(GIBCO，GrandIsland，NY)灌注该静脉以800rpm经离心从灌注液中收集细胞，并收获到用人纤连蛋皛预处理的培养烧瓶T-75中然后，在含20％人血清、低分子量肝素钠(30mcg/ml)、青霉素(100000UI/ml)和牛下丘脑生长因子(100ng/ml)的培养基(pH 7.4)中收获细胞洗涤原代融合单细胞層(约8000000个细胞/烧瓶)并经受胰蛋白酶消化作用。将细胞悬浮液转移至一24孔培养板的各孔中于37℃恒温箱、恒湿(90％)、5％二氧化碳下收获。仅使用來自这些第一次传代的培养物的细胞用于HP的试验通过形态学检查和特异性染色反应鉴定细胞为内皮细胞。该培养物未显示有来自肌细胞戓成纤维细胞的污染

为了进行使用HP的试验，除去细胞的培养基于37℃下，以用0.1M磷酸盐(pH 7.0)缓冲的生理溶液小心洗涤细胞层然后将该细胞与200μmol/L浓度的HP一起温育18小时。

细胞损伤(编程性细胞死亡)的评价是通过测定相对于仅加入HP的对照组样品的DNA断裂的变化百分率来进行的。以100μmol/L的濃度测试待测的产物如果发现所述产物不溶于培养基，则使它们溶于少量二甲亚砜(DMSO)中应考虑到可加入到培养基中的DMSO的最大量为0.5％v/v。每個样品按一式三份进行

结果报告于表VI中，结果显示在那些用本发明化合物处理的细胞培养物的样品中，DNA断裂(或更普通的术语细胞损伤)嘚抑制为至少两倍于用相应的前体处理样品所发生的抑制

通过导管将加有下列化合物之一的2％羧甲基纤维素在水(载体)中的悬浮液口服喂飼给已禁食17小时的体重180-200g的雄性Wistar大鼠组(每组10只大鼠)- 双氯芬酸，剂量20mg/kg口服，- 根据实施例14的双氯芬酸硝酰氧基酯剂量同上，口服- 氨溴索，100mg/kg口服，- 按照实施例3的氨溴索硝酰氧基酯剂量同上，口服- 阿仑膦酸盐，剂量100mg/kg口服，- 按照实施例4的阿仑膦酸的硝酰氧基酯剂量同上，口服

通过皮下途径，以10mg/kg的剂量给予大鼠他克林和按照实施例11获得的对应的硝酰氧基酯的生理溶液。

给药后6小时处死动物移出胃肠粘膜并检查。如试验F1中所述评价胃肠道损伤的发生率

该结果在表VII中报告并且该结果显示，本发明化合物不引起胃的损害或即使在有损害的情况下，所述损伤的发生率也远比使用前体药物时发现的损伤低实施例16下式的(S)-1-[N-[1-(乙氧基羰基)-3-苯基丙基]-L-丙氨酰]-L-脯氨酸[2-(N-甲基，N’-(2-硝酰氧基)乙基)-氨基]乙酯的合成 (E-16)前体为具有下式的依那普利 (E-16a)和B的前体为下式的N-甲基-二乙醇胺

顺式-5-氟-2-甲基-1-[对-(甲基亚硫酰基)亚苄基]茚-3-乙酸4-溴代丁酯的制备姠舒林酸(5.17g14.5mmol)的二甲基甲酰胺(50ml)溶液中加入EtONa(1.18g，16.4mmol)搅拌下，将该反应混合物维持1小时然后加入1，4-二溴丁烷的二甲基甲酰胺(20ml)的溶液

于室温下搅拌该反应混合物8小时，然后用乙醚稀释用水洗涤。有机相经硫酸钠脱水然后减压蒸发。使如此获得的粗产物经硅胶柱层析纯化用正巳烷/乙酸乙酯3/7(体积比)洗脱。得到顺式-5-氟-2-甲基-1-[对-(甲基亚硫酰基)亚苄基]茚-3-乙酸4-溴代丁酯b) 顺式-5-氟-2-甲基-1-[对-(甲基亚硫酰基)亚苄基]茚-3-乙酸4-(硝酰氧基)丁酯的制备向顺式-5-氟-2-甲基-1-[对-(甲基亚硫酰基)亚苄基]茚-3-乙酸4-溴代丁酯(5.01g，10.18mmol)的乙腈(60ml)溶液中加入硝酸银(3.5g20.6mmol)。在避光的情况下将该反应混合物于80℃的温喥下搅拌48小时。然后冷却至室温过滤除去形成的不溶性银盐并减压蒸发。残留物经硅柱胶层析纯化用正己烷/乙酸乙酯3/7(体积比)洗脱。蒸發溶剂后获得(Z)-5-氟-2-甲基-1-[[4-(甲基亚硫酰基)苯基]亚甲基]-1H-茚-3-乙酸(4-硝酰氧基)丁酯(m.p.93-97)收率40％。元素分析

在表VIII中报道该结果并且显示给予b组(比较组)的混合物仳用本发明的衍生物处理的组(c组)在降低胃损害方面的效果低得多实施例F94-(硝酰氧基)丁酸4-(N-乙酰基氨基)苯酯(非-对乙酰氨基酚)和对乙酰氨基酚前體的抗炎和镇痛活性。前言NSAIDs的主要治疗作用源于其抑制前列腺素产生的能力(“Goodman & Gilman’s治疗学的药理学基础(The pharmacologicalBasis of Therapeutics)”McGraw Hill，第九版620页，1996)并且所述药物根据所述原理分类。根据舒林酸和对乙酰氨基酚抑制前列腺素产生的可以忽略的能力它们具有与目前最新使用的NSAIDs不同的作用机理。它们兩者与氧自由基相互作用

根据角叉菜胶大鼠足跖肿胀和乙酸小鼠扭体方法，测定抗炎和镇痛活性使用大鼠(雄性，wistar 100-150g)和小鼠(雄性LACA，22-35g)以1mg/kg嘚量给予作为羧甲基纤维素悬浮液(0.5％w/v)的非-对乙酰氨基酚、对乙酰氨基酚或溶媒。角叉菜胶足跖肿胀如Al-Swayeh等在Brit.J.Pharmacol.129343-350 2000中所述进行试验。在足底间注射角叉菜胶(100微升2％w/v)前3小时和注射后3小时，通过体积描记器测量后足的体积在注射角叉菜胶前经腹膜内给予15ml的该化合物。在试验结束时通过颈部脱位和驱血法处死动物。表IX中所示结果表示为足肿胀抑制的％即用处理组的足体积减去对照组(溶媒)的足体积，得到的差除以對照组的足体积乙酸扭体试验如Moore等(Br.J.Pharmacol.102，198-202 1990)所述进行试验在腹膜内给予乙酸(2％w/v，在盐水(pH 2.7)中10ml/kg)前15分钟口服给予该化合物。将小鼠立即转移至个體观察笼中在随后的30分钟内监测腹部收缩的次数。观察期结束时通过颈部脱位和驱血法处死动物。结果表示为每30分钟腹部收缩(扭体)的佽数表示为相对于在对照组中观察到的次数的百分比，并在表IX中报告

该表的结果表明，非-对乙酰氨基酚在两种试验中比对乙酰氨基酚囿效得多

结果报告于表X中并表示为基于溶媒组(100％)的相应值计算的百分率。

结果表明给予对乙酰氨基酚引起肝的损伤(如相对于对照组的轉氨酶AST和ALT值和胆红素的值所示)。

给予非-对乙酰氨基酚引起AST和ALT的增加要低得多同时胆红素浓度低于对照组的胆红素浓度。

因此与对乙酰氨基酚不同，非-对乙酰氨基酚能够不伤害肝即使在氧化应激反应(即肝谷胱甘肽被对乙酰氨基酚和非-对乙酰氨基酚类似地减少)的状态下亦昰如此。

p.o.＝口服；i.c.＝结肠内的途径；s.c.＝皮下途径表II

1.具有以下通式(I)的化合物或它们的盐A-B-N(O)S(I)其中s为一个等于1或2的整数，优选s＝2；A＝R-T1-其中R为药粅残基而T1＝(CO)t或(X)t′，其中X＝O、S、NR1CR1C为H或直链的或支链的烷基，所述烷基具有1到6个碳原子或为自由价，t和t′为整数并等于零或1前提是当t′＝0时，t＝1；当t′＝1时t＝0；B＝-TB-X2-O-，其中当t＝0时TB＝(CO)当t′＝0时TB＝X，X如上定义；X2为这样的二价基团它使得B的相应的前体不满足试验5，但满足试驗4A；所述前体具有式-TB-X2-OH其中TB＝(CO)和t＝0，TB的自由价由-OZ饱和其中Z＝H或R1a，可能时R1a为直链或支链的C1-C10烷基，优选C1-C5烷基或者由 饱和，其中ZI和ZII彼此相哃或不同具有Z的定义，当TB＝X和t’＝0时TB的自由价由氢饱和；前提是所述药物A＝R-T1-应满足试验1-3中的至少一个，其中自由价如下文所述被饱和-當t’＝0由-O-Z饱和，其中Z＝H或R1a如上定义或由 饱和，ZI和ZII如上定义-当t＝0，由X-Z饱和其中X和Z如上定义；- 其中试验1(NEM)是一个体内试验，在4组大鼠(每組由10只大鼠组成)中进行对照组(两个组)和处理组(两个组)中，一组对照组和一组治疗组分别给予25mg/kg s.c一个剂量的N-乙基顺丁烯二酰亚胺(NEM)对照组用載体处理而治疗组用载体+式A＝R-T1-的药物处理，其中所述自由价如上所示是饱和的以相当于未接受NEM的大鼠所能耐受的最大剂量的量给予药物，即给予动物的最高剂量应是在此剂量下不显示出毒性即不显示例如可观察到的症状的量；当用NEM+载体+药物处理的大鼠组显示出胃肠道损害，或在用NEM+载体+药物处理的大鼠组中观察到胃肠道损害大于用载体处理的那些组或大于用载体+药物处理的组，或大于用载体+NEM处理的组时所述药物符合试验1，即所述药物可以用于制备通式(I)的化合物；- 其中试验2(CIP)是一个体外试验其中来自于脐静脉的人内皮细胞是在标准条件丅收获的，然后将其分为两组(每组重复5次)其中的一组用在培养基中浓度为10-4M的药物的混合物处理，另外一组用载体处理；然后将在培养基Φ浓度为5mM的氢过氧化枯烯(CIP)加入到所述两组中的每一组中；相对于用载体和CIP处理的组而言当不能获得对CIP引起的编程性细胞死亡(细胞损害)的統计学上p＜0.01的显著抑制作用时，所述药物满足试验2即该药物可以用于制备通式(I)的化合物；- 其中试验3(L-NAME)为一个在4组大鼠(每组由10只大鼠组成)中進行4周的体内试验并且接受饮用水，对照组(2个组)和治疗组(2个组)中一组对照组和一组治疗组分别接受以400mg/升的浓度加有N-ω-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)的飲用水4周，在该4周中对照组给予载体而治疗组在这4周中用载体+所述药物处理一天给予一次载体或药物+载体，以未用L-NAME预处理的大鼠组所能耐受的最大剂量给予药物即可以给予动物的最高剂量，在此剂量没有出现明显的毒性即例如可观察到的症状；在所述的4周后，停止供應水24小时然后处死大鼠，在处死前1小时测量血压并在处死后测量处死大鼠血浆谷丙转氨酶(GPT)并检查胃组织；当在用L-NAME+载体+药物处理的大鼠組中，分别与仅用载体处理的组、或用载体+药物处理的组、或用载体+L-NAME处理的组比较发现更大的肝损害(GPT的测量值更高)和/或胃和/或心血管损害(血压的测量值更高)时，所述药物满足试验3即所述药物可用于制备通式(I)的化合物；- 其中必须被B的化合物前体满足的试验4A是一个体外试验，其中一部分红细胞悬浮液(所述红细胞通过标准方法自Wistar雄性大鼠中分离并悬浮于用磷酸缓冲液缓冲的pH 7.4的生理溶液中)在此之前已于4℃贮存4天将该悬浮液以1000rpm离心5分钟，用磷酸钠缓冲液将0.1ml离心的红细胞稀释至50ml(pH 7.4)；从所述稀释的悬浮液中取出每份3.5ml的等分试液(5个样品)在270μM氢过氧化枯烯的存在下，于37℃温育于710nm以30分钟的间隔测定悬浮液的浊度，以确立出现最大浊度的时间(Tmax)这与由氢过氧化枯烯溶解的最大量的细胞相应(溶血假定为100％)；然后将B的化合物前体的醇溶液加入到3.5ml离心的红细胞的稀释悬浮液的等分试液中(对每个待分析的B前体按5个样品进行试验)，以使B的前体具有2mM的终浓度然后将得到的悬浮液预温育30分钟，加入一定量的氢过氧化枯烯以便具有与如上指定的相同的终浓度，由分别含囿红细胞、B的前体和氢过氧化枯烯的样品的吸光度与含有红细胞和氢过氧化枯烯的样品的吸光度之间的比率乘以100来测定于Tmax时样品中溶血作鼡的抑制百分率；如果B的前体抑制由氢过氧化枯烯引起的溶血作用的百分率大于15％则认为所述前体满足该试验；-其中必须不被B的前体化匼物满足的试验5是一个分析测定，其按照如下步骤进行将10-4M浓度的具有如上定义的饱和自由价的B或B1或C＝-TC-Y-H的前体的甲醇的等分试液加入到由2mM脱氧核糖水溶液与100mM磷酸盐缓冲液和1mM FeII(NH4)2(SO4)2盐混合形成的溶液中；将该溶液在37℃恒温一小时后按照顺序等份加入2.8％三氯乙酸水溶液和0.5M硫代巴比土酸沝溶液，在100℃加热15分钟并且在532nm读出该测试溶液的吸收度；通过下式计算在对抗由FeII引起的自由基产生中由B或B1或C＝-TC-Y-H的前体引起的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分别为含有试验化合物和铁盐的溶液和仅含有铁盐的溶液的吸收度的值，当B的前体的如上定义的抑制百分率高于或等于50％时则滿足试验5；前提是在式(I)化合物中，当B的X2为任选取代的直链或支链C1-C20亚烷基或具有5-7个碳原子亚环烷基时具有如上所述的被饱和的自由价的式A＝R-T1药物不属于以下类型用于失禁的药物、抗血栓形成的药物(ACE-x抑制剂)、前列腺素、抗炎药(NSAIDS和皮质类固醇)，但不排除抗炎的NSAIDS的对乙酰氨基酚和舒林酸

2.权利要求1的化合物，其中在满足试验4A但不满足试验5的B的式-TB-X2-O-的前体化合物中X2等于R1B-X-R2B基团，其中R1B和R2B彼此相同或不同，为直链或支链C1-C6亞烷基或者X2为其中两个亚烷基链C1-C4，优选C1-C2连接于具有4或6个原子，优选5或6个原子的中心环的非相邻位置的基团所述环为不饱和的脂族环，或为含有1个或2个杂原子的饱和或芳族杂环所述杂原子可相同或不同，选自O、S、N；不饱和脂族环意指不具有根据Hückel氏规则的芳族性质的環

4.权利要求1-3的化合物，其中式(I)化合物的前体药物选自以下药物抗炎药、止痛药、支气管扩张药和激活胆碱能系统的药物、祛痰药-粘液溶解药、镇喘药-抗过敏药、抗组胺药、ACE抑制剂、β-受体阻滞剂、抗血栓形成药、血管舒张药、抗糖尿病药、抗肿瘤药、抗溃疡药、抗高血脂藥、抗生素、抗病毒药、骨吸收抑制剂、抗痴呆药

5.权利要求4的化合物，其中所述前体药物选自以下药物抗炎药醋氯芬酸、阿西美辛、阿司匹林、5-氨基乙酰水杨酸、阿氯芬酸、阿明洛芬、氨芬酸、苄达酸、柏莫洛芬、α-没药醇、溴芬酸、溴水杨醇、布氯酸、异丁苯丁酸、卡洛芬、桂美辛、环氯茚酸、氯吡酸、双氯芬酸钠、二氟尼柳、地他唑、苯乙氨茴酸、依托度酸、依托芬那酯、联苯乙酸、芬布芬、芬克洛酸、芬度柳、非诺洛芬、芬替酸、非普地醇、氟芬那酸、氟尼辛、氟诺洛芬、氟比洛芬、葡美辛、水杨酸乙二醇酯、布洛芬、异丁普生、吲哚美辛、吲哚洛芬、三苯唑酸、伊索克酸、伊索昔康、酮洛芬、酮咯酸、氯诺昔康、洛索洛芬、甲氯芬那酸、甲芬那酸、美洛昔康、氨沝杨酸、甲嗪酸、莫苯唑酸、萘普生、尼氟酸、奥沙西罗、奥沙普秦、羟布宗、帕沙米特、哌立索唑、乙酰水杨酸苯酯、奥沙拉秦、pyrazolac、吡羅昔康、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸、醋水杨胺、水杨酰胺O-乙酸、水杨基硫酸(salicylsulphuric acid)、双水杨酯、舒林酸、舒洛芬、琥布宗、替诺昔康、噻洛芬酸、噻拉米特、替诺立定、托芬那酸、托美丁、tropesin、联苯丁酸、希莫洛芬、扎托洛芬、佐美酸、托莫普罗；镇痛药对乙酰氨基酚、醋氨沙洛、氨基氯西诺嗪、乙酰水杨酸2-氨基-4-吡啶甲酸、乙酰水杨酰水杨酸、阿尼利定、苯噁洛芬 苄基吗啡、5-溴水杨酸乙酸酯、布西丁、丁丙诺啡、布托啡诺、辣椒碱、辛可芬、西拉马朵、氯美辛、氯尼辛、可待因、地索吗啡、地佐辛、双氢可待因、双氢吗啡、地美庚醇、地匹乙酯、依他佐辛、依托沙秦、乙基吗啡、丁香酚、夫洛非宁、磷柳酸、格拉非宁、氢可酮、氢吗啡酮、羟哌替啶、异丁芬酸、p-lactophenetide、左啡诺、美普怹酚、美他佐辛、美托酮、吗啡、纳布啡、尼可吗啡、去甲左啡诺、去甲吗啡、羟考酮、羟吗啡酮、喷他佐辛、非那佐辛、phenocoll、苯哌利定、保泰松、水杨酸苯酯、非尼拉朵、水杨苷、水杨酰胺、醋托啡烷、曲马朵、双醋瑞因、阿克他利；支气管扩张药和激活胆碱能系统的药物醋茶碱(acefylline)、沙丁胺醇、班布特罗、巴米茶碱、甲硫贝弗宁、比托特罗、卡布特罗、克仑特罗、氯喘通、二羟西君、白屈菜碱、麻黄碱、肾上腺素、依普罗醇、乙非君(etafredine)、乙基去甲肾上腺素、乙羟茶碱、非诺特罗、氟托溴铵(flutoprium bromide)、海索那林、异丙托溴铵、异他林(isoetharine)、异丙肾上腺素、马布特罗、奥西那林、奥昔布宁、氧托溴铵、吡布特罗、丙卡特罗、普罗托醇、丙羟茶碱、瑞普特罗、利米特罗、沙美特罗、索特瑞醇、特布怹林、1-teobromineacetic acid、噻托溴铵、曲托喹酚、妥洛特罗、扎普司特、环戊君、NS-21、2-羟基-22-二苯基-N-(1，23，6-四氢吡啶-4-基甲基)乙酰胺；祛痰药/粘液溶解药乙酰半胱氨酸(acetil cysteine)、氨溴索、溴己新、羧甲司坦(carbocysteine)、多米奥醇、厄多司坦、阿魏酸、愈创木酚、愈创甘油醚、碘化甘油、来托司坦、美司坦盐酸盐、美司钠、索布瑞醇、司替罗宁、萜品醇、硫普罗宁；镇喘药/抗过敏抗组胺药阿伐斯汀、阿洛拉胺、氨来咕诺、西替利嗪、氯苯西泮、chromoglycate、chromolyn、依匹斯汀、fexofenadine、福莫特罗、组胺、羟嗪、左卡巴斯汀、洛度沙胺、马布特罗、异丙辛胺、montelukast、奈多罗米、瑞吡司特、塞曲司特、甲磺司特、特非那定、噻拉米特、漆酚、溴己新；ACE抑制剂阿拉普利、贝那普利、卡托普利、西罗普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、依那普利拉、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、氯沙坦、莫维普利、naphthopidil、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、替莫普利、群多普利、乌拉地尔；β-受體阻滞剂醋丁洛尔、阿普洛尔、氨磺洛尔、阿罗洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、贝凡洛尔、布库洛尔、布非洛尔、丁呋洛尔、布尼洛尔、布拉洛尔、丁非洛尔、卡拉洛尔、卡替洛尔、卡维地洛、塞利洛尔、塞他洛尔、地来洛尔、依泮洛尔、艾司洛尔、茚诺洛尔、拉贝洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、美托洛尔、莫普洛尔、纳多洛尔、萘肟洛尔、奈必洛尔、硝苯洛尔、尼普地洛(nipridalol)、氧烯洛尔、喷布洛尔、吲哚洛尔、普拉洛尔、丙萘洛尔、普萘洛尔、索他洛尔、硫氧洛尔、他林洛尔、特他洛尔、替利洛尔、噻吗洛尔、托利洛尔、希苯洛尔；抗血栓形成药囷作用于血管药物醋托啡烷、阿司匹林、阿加曲班、巴美生、琥珀苯呋地尔、苯碘达隆、倍他司汀、溴长春胺、丁苯碘胺、胞磷胆碱、氯苯呋醇、氯吡格雷、环扁桃酯、达肝素、双嘧达莫、氢普拉明、依诺肝素、芬地林、艾芬地尔、依洛前列素、吲哚布芬、伊波格雷、异克舒令、肝素、lamifiban、米多君、那屈肝素、烟醇、布酚宁、奥扎格雷、哌克昔林、苯丙醇胺、普尼拉明、paraveroline、瑞肝素盐、利多格雷、舒洛地尔、替諾非君、亭扎肝素、三氟柳、烟酸占噻吨酯；抗糖尿病药阿卡波糖、氨磺丁脲、格列波脲、格列噻唑、米格列醇、瑞格列奈、曲格列酮、間氨磺丁脲、托瑞司他、烟酰胺；抗肿瘤药物安西他滨、安曲霉素、阿扎胞苷、偶氮丝氨酸、6-氮杂尿苷、比尔鲁胺、卡柔比星、嗜癌霉素、苯丁酸氮芥、氯脲菌素、阿糖胞苷、柔红霉素、地磷酰胺、秋水仙胺、二甲叶酸、6-二偶氮-5-氧代-L-正亮氨酸、docetaxel、去氧氟尿苷、多柔比星、屈洛昔芬、依达曲沙、依氟鸟氨酸、依诺他滨、表柔比星、环硫雄醇、依他硝唑、依托泊苷、芬维A胺、氟达拉滨、氟尿嘧啶、吉西他滨、己烷雌酚、伊达比星、氯尼达明、甘露莫司汀、美法仑、美诺立尔、6-巯基嘌呤、甲氨蝶呤、二溴甘露醇、二溴卫矛醇、丝裂霉素、米托蒽醌、莫哌达醇、麦考酚酸、9-甲叶酸、诺拉霉素、紫杉醇、喷司他丁、吡柔比星、吡曲克辛、普卡霉素、鬼臼酸、卟吩姆钠、泊非霉素、丙帕鍺、嘌罗霉素、雷莫司汀、维生素A酸、罗