2017年5月，发表在《Am J Clin Nutr》的一项由加拿大科学家进行的研究，调查了加拿大女性乳汁中总叶酸和未代谢叶酸的含量，讨论合成叶酸摄入量增加对孕期、哺乳期女性的利弊。
背景：妊娠期和哺乳期的叶酸需求在增加。建议备孕、怀孕或正在哺乳的女性摄入含叶酸（FA）的补充剂。
目的：旨在入组到MIREC（产妇婴儿环境化学物质的研究）研究的加拿大母亲队列中，确定母乳中总叶酸和未代谢叶酸（UMFA）的含量，及其与叶酸补充剂的使用和剂量之间的相关性。
设计：使用液相质谱联的方法检测母乳四氢叶酸（THF）、5-甲基-THF（5-methyl-THF）、5-甲酰基-THF、5、10-甲叉亚甲基-THF和UMFA（n=561）。每日总补充叶酸的摄入基于自我报告的叶酸补充剂的使用。
结果：96.1%女性的乳汁中可检测到未代谢叶酸。每天从补充剂中FA的总摄入与乳汁叶酸浓度和种类相关。补充剂使用者（401人）比不使用者（160人）的乳汁总叶酸浓度高18%（P＜0.001），该差异由摄入＞400μg FA/d的女性造成（P≤0.004）。补充剂使用者比不使用者的5-甲基四氢叶酸低19%（P＜0.001），未代谢叶酸高126%（P＜0.001）。摄入＞400μg FA/d的女性比摄入≤400μg FA/d的女性的5-甲基四氢叶酸相应降低，未代谢叶酸相应升高。
叶酸补充剂使用者（A组）虽然比不使用者（B组）的乳汁总叶酸浓度高18%，但叶酸补充剂使用者并未因此获益：血液中可以进入叶酸循环的5-甲基四氢叶酸低于未使用者，且体内未代谢叶酸含量高于未使用者。未代谢代谢叶酸在血液中沉积，可能引发潜在毒性作用。
随着叶酸补充量的增加，孕期及哺乳期女性获益逐渐降低，甚至弊>利（血液中未代谢叶酸含量超过5-甲基四氢叶酸含量）
合成叶酸口服剂量达到260-280ug/d，就会使肝脏代谢能力饱和，使血液中出现未代谢叶酸（UMFA）
未代谢叶酸（UMFA）会通过竞争乳腺上皮性叶酸受体α，从而抑制5-甲基四氢叶酸进入母乳。
人体二氢叶酸还原酶活性较低，存在UMFA可导致二氢叶酸积累。二氢叶酸可以抑制亚甲基四氢叶酸还原酶和胸苷酸合成酶的活性，这两种酶是一碳代谢所必需的两种关键酶，从而导致功能性叶酸缺乏。
合成叶酸补充剂>400ug并不推荐。因为此剂量超过了叶酸的生理代谢能力，反而造成了母乳中5-甲基四氢叶酸的降低。
