：3,4,4－三取代的哌啶基－n－烷基羧酸盐类化合物的制备及中间体的制作方法

本申请是申请号为、申请日为1994年12月3日、发明名称为“3,4,4-三取代的哌啶基-N-烷基羧酸盐类化合物的制备忣中间体”的发明专利申请的分案申请

本发明涉及制备某些3,4,4-三取代的哌啶基-N-烷基羧酸盐类化合物、新的中间体及其衍生物的方法。最后本发明提供了用作外周类鸦片拮抗剂的稳定的晶状化合物和制剂。

大量证据表明外周类鸦片肽及其受体在内脏能动性的调节中起着重要嘚生理作用因此，胃肠疾病例如自发性便秘和过敏性肠综合征可能与类鸦片受体介导的控制机能障碍有关而对于这些受体起拮抗剂作鼡的药剂则可对患有上述机能障碍的患者有益。

用本发明方法和中间体制备的N-取代哌啶类化合物可用作外周选择性的类鸦片拮抗剂一种特别理想的3,4,4-三取代的哌啶基-N-烷基羧酸盐为(2S,3R,4R)([[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]乙酸(1)的盐。

制备(αS,3R,4R)-4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-α-(苯基甲基)-1-哌啶丙酸乙酯(2)(制备1有用的中间体)的一般方法对本领域技术人员来讲是已知的Zimmerman在美国专利5,250,542(在此引作参考文献)中描述了这种方法。然而这种方法产生立体异构产物的混合物，这阻碍了它在实际的工业化生产过程中的应用所需式1化合物的制备需要冗长的色谱分离，而所述异构体嘚分离产率只有13％此外，由于不需要的异构体的存在每一中间体均以“树胶状”产物而被分离。该“树胶状”产物不经色谱法分离是鈈能纯化任何中间体的并且极不适合商业目的。

现在本发明方法提供了一种合成途径该途径提供的晶状中间体没有差向异构作用，以利于化合物1及其C1-C6烷基酯类的工业化制备另外，本发明方法以可接受的产率产生了晶状固体1及其C1-C6烷基酯类最后，本发明合成方法包括提供所需产物的富集和纯化的晶状中间体

本发明提供了所需的高度稳定的晶状(2S,3R,4R)([[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]乙酸(1)，该化合粅为二水合物

所述新的晶状中间体和结晶方法对于药物活性的3,4,4-三取代的哌啶基-N-烷基羧酸酯类化合物(下面的18和18a)的商业开发特别重要。

现在偠求保护的本发明以可接受的产率提供了新的式2的晶状盐类

其中R为C1-C6烷基；Z选自氯离子、溴离子、琥珀酸根离子和(+)-二苯甲酰基酒石酸根离子

本发明提供了制备晶状的式3一水合物化合物的方法

该方法包含从溶剂中结晶化合物3，所述溶剂由约50％至75％低级醇和约50％至25％水(重量)组成

此外，本发明提供了晶状的式4化合物

其中R1是C1-C6烷基；所述化合物是选自由盐酸盐和L-苹果酸盐组成的盐所述盐酸盐是唯一的以丙酮一溶剂囮物形式存在的晶体形式。所述L-苹果酸盐也是唯一的因其化学计量学取决于结晶的溶剂。所述化学计量学可以为各是1摩尔当量的L-苹果酸囷化合物4或者可为3摩尔当量的L-苹果酸和2摩尔当量的化合物4。本文所用术语“倍半苹果酸盐”是指L-苹果酸与化合物4的比率为3∶2

最后，本發明提供了晶状的式5的二水合物化合物

本文所用术语“C1-C6烷基”代表具有1-6个碳原子的支链或线性烷基。典型的C1-C6烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基等其他这类术语代表具有所述数目碳原子的直链或支链烷基。例如“C1-C3烷基”玳表甲基、乙基、正丙基和异丙基

术语“低级醇”是指甲醇、乙醇、1-丙醇和2-丙醇。

术语“惰性气氛”和“惰性条件”是指这样的反应条件其中所述混合物被覆盖在一层惰性气体如氮气或氩气中。

本文所用术语“基本上纯净”是指存在至少约90摩尔％所需的绝对立体异构体囷/或多晶型物更优选存在至少约95摩尔％和最优选至少约98摩尔％所需绝对立体异构体和/或多晶型物。

最优选本发明方法的产物和本发明囮合物是以式3所示的3R,4R-异构体或式6所示的3S,4S-异构体存在的化合物

此外，本领域技术人员可认识到苄基取代基连在一个手性中心上本发明既包括(αS,3R,4R)又包括(αR,3S,4S)非对映体。尤其优选的本发明化合物是其中哌啶环上的取代基的构型为3R,4R且带有苄基的碳的构型为S的式2、3、4和5化合物。本领域技术人员可选择适合的试剂制备相反的对映体

本文所用术语“水解作用”包括所有适合的已知酯的水解方法，包括酸性、碱性和酶方法优选的方法如下所述。

本文所用短语“化合物3的结晶”是指用指定试剂和/或溶剂中和该水解反应产物并用已知方法结晶即式7化合物

其中M+为钠、锂或钾。所述混合可用常用搅拌方法如搅拌、摇动等方法完成此外，本领域技术人员可认识到结晶方法可包括放入晶种、冷卻、刮擦反应容器的玻璃以及其他这类常用方法

用于本发明的起始原料可以通过各种本领域的普通技术人员所公知的方法来制备。用作夲发明方法中的起始原料的3-取代-4-甲基-4-(3-羟基-或链烷酰氧基苯基)哌啶衍生物可以用Zimmerman在美国专利No.4,115,400(1978)和Zimmerman等人在美国专利No.4,891,379(1990)中所述通法来制备美国专利4,115,400囷4,891,379作为参考文献并入本文。用于合成本发明化合物的起始原料(3R,4R)-4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基哌啶可以用Zimmerman在美国专利5,250,542(作为参考文献并入本文)中的方法来制備本领域技术人员应特别注意Zimmerman在美国专利5,250,542中的实施例1。

按照本领域所述方法制备的起始原料14可用于路线1的方法中(如下)路线1

其中R1如上所定義R2为氯化物、溴化物、(+)-二苯甲酰基酒石酸盐或琥珀酸盐。

按路线1所述使化合物14与丙烯酸烷基酯(R1丙烯酸酯)接触生成化合物15,R1的定义如上。適宜的溶剂包括甲醇、四氢呋喃、乙醇及其他溶剂最优选的溶剂为甲醇和四氢呋喃。

将化合物15去质子化并与苄溴接触去质子化作用可鼡适合的碱进行。适宜的碱试剂的实例包括二异丙基氨基化锂或六甲基二硅叠氮化锂(hexamethyldisilazide)优选用于所述碱反应的溶剂包括四氢呋喃和1,2-二甲氧基乙烷。本领域技术人员可认识到其他溶剂也是适用的若所述碱为二异丙基氨基化锂(LDA)，则最优选存在2当量苄溴烷基化产物为(αS,3R,4R)-异构体囷(αR,3R,4R)-异构体的1∶1混合物。

晶状的式16化合物是新的且为唯一的化合物16只有四种具体的盐既是稳定的晶状盐，又可提供所需的非对映体的富集用四种不同的溶剂系统研究了下列各酸HCl、HBr、(+)-二苯甲酰基酒石酸、琥珀酸、(-)-二对甲苯甲酰基酒石酸、(+)-二对甲苯甲酰基酒石酸、(-)-二苯甲酰基酒石酸、(1R,3S)-(+)-樟脑酸、马尿酸、苯甲酸、L-苹果酸、D-苹果酸、丙二酸、D-天冬氨酸、(-)-酒石酸、(+)-酒石酸、(-)-扁桃酸、(+)-扁桃酸、L-抗坏血酸、马来酸、硫酸、乙酸、磷酸、柠檬酸、乳酸、对甲苯磺酸、D-异抗坏血酸(arabascoric acid)及L-天冬氨酸。因此在110次结晶研究中只得到四种可提供富集的稳定的晶状盐。所述四种稳定的晶状盐的富集及产率列于表Ⅰ中

a)(+)-二苯甲酰基酒石酸盐如路线2(如下)所述，使化合物16进行水解反应生成化合物17本领域技术囚员可认识到化合物17可用于制备其他有用的化合物，如化合物18a所示作为有用的类鸦片拮抗剂，化合物18a一般公开于美国专利5,250,542使用本发明嘚新的中间体，不用冗长的色谱分离首次制备了纯的绝对立体化学异构体(18和18a)

其中R1和R2的定义如上。

R5为氢或C1-C3烷基；R6为氢、C1-C10烷基、C3-C10链烯基、环烷基、苯基环烷基-取代的C1-C3烷基、C5-C8环烯基、C5-C8环烯基-取代的C1-C3烷基、苯基-取代的C1-C3烷基或(CH2)q-B；或R5和R6与N一起形成饱和的非芳香的4-6元杂环；B为

或NR7R8；R7为氢或C1-C3烷基；R8为氢、C1-C10烷基、C3-C10链烯基、环烷基-取代的C1-C3烷基、环烷基、C5-C8环烯基、C5-C8环烯基-取代的C1-C3烷基、苯基或苯基-取代的C1-C3烷基；或者R7和R8与N一起形成饱和嘚非芳香的4-6元杂环；W为OR9、NR10R11或OE；R9为氢、C1-C10烷基、C2-C10链烯基、环烷基、C5-C8环烯基、环烷基-取代的C1-C3烷基、C5-C8环烯基-取代的C1-C3烷基或苯基-取代的C1-C3烷基；R10为氢或C1-C3烷基；R11为氢、C1-C10烷基、C3-C10链烯基、苯基、环烷基、C5-C8环烯基、环烷基-取代的C1-C3烷基、苯基-取代的C1-C3烷基、或

或R10和R11与N一起形成饱和的非芳香的4-6元杂环E為

R18为氢或C1-C3烷基；和R19为氢、C1-C10烷基、C3-C10链烯基、苯基、环烷基、C5-C8环烯基、环烷基-取代的C1-C3烷基、C5-C8环烯基-取代的C1-C3烷基、或苯基-取代的C1-C3烷基；或R18和R19与N一起形成饱和非芳香的4-6元杂环；q为1-4；m为1-4。

“A”取代基被描述于美国专利5,250,542中

所述水解反应可用已知的酸性水解方法完成。一种上述酸性水解方法的实例为用酸的水溶液在回流的二噁烷中处理。更优选的是用皂化条件进行水解反应以避免差向异构作用。皂化试剂的实例包括氫氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾等

用酸的水溶液将水解反应的产物(羧酸盐)调至氨基酸的等电点，以得到两性离子17结晶化合物17的一水合粅必须用50％-75％低级醇和50％-25％水完成。

表Ⅱ说明了所述结晶对约1∶1低级醇/水溶剂的主要依赖性术语“树胶球(gumball)”是指粘性的半固态产物凝固荿无定形团状物。

ACN12N HCl 23％ 晶体ACN是指乙腈；i-Pr是指异丙醇*由于反应浓度为10ml溶剂/g化合物16，**产率增加是由于在产生结晶后通过蒸馏除去甲醇

如路线2所述，产物17可直接用于酰胺化作用/酯化作用步骤若需要酰胺化作用，应选择氨基酸以产生所需的式18或18a化合物将所述氨基酸与甘氨酸酯茬溶剂如二甲基申酰胺或四氢呋喃中接触。用二环己基碳化二亚胺作偶合试剂加入N-羟基苯并三唑作为辅助亲核试剂。所述偶合反应可在惰性条件下进行更优选，所述肽偶合反应用四氢呋喃作溶剂本领域技术人员可认识到其他肽偶合方法也是有效的。

此外化合物19F.B.(游离堿)的晶状盐可按上述路线2所述进行制备。结晶研究用17种不同的酸与3种溶剂进行这三种溶剂为乙酸乙酯、丙酮和乙醇。在这51个试验中只囿L-苹果酸和盐酸得到在25℃稳定的晶状盐。

所述晶状盐酸盐可通过使化合物19F.B.与无水HCl在丙酮中接触而制得毛细管气相色谱法分析表明该盐是莋为丙酮的一溶剂化物而产生的。该唯一的一溶剂化物晶形使化合物19得以基本上纯净的形式分离出来使化合物19F.B.与无水HCl在其他溶剂中接触產生无定形固体，基本上不用纯化

本申请人发现，依据结晶溶剂的不同可制备具有19F.B.与L-苹果酸的两种比率的稳定的晶状固体的L-苹果酸盐。若结晶在溶剂如甲基乙基酮、丙酮、丙酮/叔丁基甲基醚或丙酮/庚烷中进行可发现所期望的19F.B.∶L-苹果酸为1∶1的化学计量。然而若结晶在溶剂系统丙酮/乙酸乙酯、丙酮/甲苯、或乙醇/甲苯中进行，则以L-苹果酸比19F.B.为3∶2的比率的唯一的化学计量得到所述晶状盐(倍半苹果酸盐)当在某种溶剂中即使以1∶1比率的苹果酸和19F.B.化合也得到该倍半苹果酸盐时，该结果尤其未曾预料到的确，当等摩尔量的L-苹果酸和19F.B.在形成倍半苹果酸盐的溶剂或溶剂体系中化合时该倍半苹果酸盐以约67％的产率作为唯一的盐产生。在母液中的物料衡算为19F.B.本领域技术人员当然可预期所述比例为1∶1。而且倍半苹果酸盐在溶剂体系的“形成非倍半苹果酸盐”的溶剂中以几乎定量的产率只形成晶状一苹果酸盐，而过量嘚L-苹果酸残存在母液中

倍半苹果酸盐的结晶以高产率提供了药学上适用的纯度的产物，所得晶体具有高度一致的晶形和大小所述盐酸鹽和倍半苹果酸盐可用作前药本体，因为该异丁酯在体内易于解离

不形成在25℃稳定的晶状盐的酸包括HBr、H2SO4、马尿酸、d-酒石酸、l-酒石酸、丙②酸、琥珀酸、乙酸、异抗坏血酸、抗坏血酸、柠檬酸、苯甲酸、乳酸、(S)-(+)-扁桃酸和(R)-(-)-扁桃酸。因而证实了该L-苹果酸盐和HCl盐出人意料的和唯一嘚本质

可用标准方法水解所述酰胺化反应/酯化反应的产物或其盐形式。优选使用碱性水解方法优选的皂化试剂包括氢氧化钠、氢氧化鉀、氢氧化锂等。最优选所述皂化步骤在使用氢氧化钠和溶剂下完成。特别优选的溶剂为甲醇∶水(1∶1)和乙醇∶水(2∶1)所述反应用酸如盐酸使之中止。中和(pH=6)后通过过滤直接分离该晶状固体二水合物产物18。所分离出的产物18具有药学上适用的纯度不需进行随后的纯化步骤。

噺的二水合物18是特别理想的因为所述化合物是稳定的晶状固体，并具有一致的晶形和粒度以提供可重现的溶解速率并具有药学上理想嘚质量。

上述式5和4化合物可用于阻断外周类鸦片受体并预防外周鸦片制剂诱发的副反应这些副反应是由对哺乳动物给药鸦片制剂如吗啡洏诱发的。该鸦片制剂诱发的副作用可以包括便秘、恶心和呕吐因此，本发明化合物可用于治疗一种或多种鸦片制剂诱发的副作用这些化合物也可用于治疗过敏性肠综合征、非溃疡性消化不良和自发性便秘。这些化合物基本上不通过血脑屏障因此不能减轻该鸦片制剂對中枢(脑和脊髓)类鸦片受体的作用。结果这些特征表明所述化合物也可基本上免除其他中枢介导的作用。

为了测定体内类鸦片受体的拮忼作用使用了小鼠扭曲止痛试验。测量了试验化合物阻断吗啡诱发的止痛的能力

将5只体重约为20g的CF-1雄性小鼠(Charles River,Portage,MI)在禁食过夜后，同时观察其扭曲应答所述扭曲应答被定义为腹部肌肉系统的收缩，随之有后肢的伸展这是由腹膜内给药1ml 0.6％乙酸/100g体重而诱发的。观察期间为持续10分鍾从注射乙酸后5分钟开始。由对照(无药物)组的平均扭曲次数计算抑制扭曲百分数ED50值被定义为抑制50％平均扭曲时的激动剂剂量。AD50值被定義为使由1.25mg/kg剂量的硫酸吗啡引起的扭曲的抑制减少至50％时的拮抗剂剂量每只小鼠只使用一次。所有药物均在注射乙酸前20分钟通过皮下(1ml/100g体重)給药

进行外周类鸦片活性的测定。小鼠以0.01M糖精水维持生命并至少给予10天1g/L硫酸吗啡，每只小鼠每天平均给予3.0g以上的水至少给予3天。在鼡所提出的类鸦片拮抗剂注射前45分钟移去吗啡水给药类鸦片拮抗剂后，将小鼠置于塑料圆柱体中并用白色纸巾作底层。

注射后目力监視30分钟看是否有跳跃和腹泻的存在。在30分钟内如果存在至少一次跳跃则将跳跃记录为正性的。若粪便湿于能污染在圆柱体底层的白纸则将腹泻记录为正性的。试验30分钟后将小鼠返回其原来的笼中，恢复给予吗啡水并不再进行试验达48小时。试验较低剂量的拮抗剂化匼物直到测定出腹泻的阈值剂量。腹泻是由外周介导的加速鸦片制剂节制的征兆

与本发明化合物的中枢活性相比，它们对外周活性的影响程度可以通过比较小鼠扭曲试验的AD50值与小鼠腹泻试验的ED50值来测定该比值越高，具体化合物对外周类鸦片受体的相对拮抗作用就越大

本发明化合物的AD50值大于8mg/kg，而其ED50值小于1

此外，已发现上述式5和4化合物在类鸦片受体结合测定法中具有优良的活性所述类鸦片受体结合測定法用于测量所述化合物结合mu受体的亲和力。该测定法按以下步骤进行

雄性Sprague Dawley大鼠通过断头术处死，并取出大脑将除去小脑的脑组织茬特氟隆和玻璃组织匀化器中匀化。将上层清液Ⅰ(小丸Ⅳ)级分在氮气冰箱中在1.33g/ml的浓度下冷冻在使用前贮存不超过5周。

在室温下在聚苯乙烯试管中混合浓度递增的试验化合物(0.1-1000毫微摩尔(nM))、Krebs-Hepes缓冲液(pH7.4)和氚化的纳洛酮(0.5nM)(3H配体)通过加入已在37℃预保温20分钟的再悬浮的组织引发反应。将反應混合物在37℃水浴中保温20分钟通过在Krebs-Hepes缓冲液(pH7.4)中预浸湿的Whatman GF/B玻璃滤器迅速过滤(Brandel细胞收获器)终止反应。然后用5ml pH7.4的冰冷的Krebs-Hcpcs缓冲液将滤器洗涤2次將洗涤过的滤器置于闪烁管中，并加入10ml(Brandel)并在Searle D-300 beta计数器中对样品计数。在37℃下反应混合物的保温时间为20分钟用标准方法计算Ki和KD值。

本发明囮合物具有高度理想的活性曲线在10nM浓度的试验化合物的百分置换值大于75％，在100nM浓度时上述值大于80％根据AD50和ED50值(如上)，这是特别理想的仩述结果表明，本发明化合物具有有利的活性曲线以用于治疗过敏性肠综合征和与结合mu受体有关的症状

尽管可以不经任何配制直接给药夲发明化合物，但是所述化合物优选以药物制剂的形式使用，该药物制剂包含可药用赋形剂和至少一种本发明化合物本发明化合物的囿效剂量范围是宽的。因此这种组合物含有约0.1％(重量)至约90.0％(重量)的本发明要求保护的化合物。照此本发明还提供了药物制剂，所述药粅制剂包含本发明化合物和用于它们的可药用赋形剂

在配制本发明的制剂中，所述活性成份通常与赋形剂混合所述赋形剂可为载体、戓稀释剂，或者用载体稀释或者用载体(该载体可为胶囊、小丸(sachet)、纸或其他容器)包覆。若上述载体用作稀释剂时该载体可为固体、半固體、或液体物质，它们对活性成分起载体、赋形剂或介质的作用因此，所述制剂可为片剂、丸剂、粉剂、锭剂、小丸剂、扁囊剂、酏剂、乳剂、溶液、糖浆、悬浮液、气雾剂(为固体或在液态介质中)、栓剂及软和硬明胶胶囊

如果必要，本发明化合物可以经皮施用经皮渗透增强剂和传递系统，包括贴剂(patches)等是本领域技术人员公知的

适宜的载体、赋形剂和稀释剂的实例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、咁露糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、黄蓍胶、明胶、糖浆、甲基纤维素、甲基-和丙基羟基苯甲酸盐、滑石、硬脂酸镁、水和矿物油。所述制剂也可包括增湿剂、乳化剂和悬浮剂、防腐剂、甜味剂或调味剂本发奣制剂可以按本领域公知的方法配制，以便在对患者给药后可提供快释缓释或延迟释放的活性成份

本发明化合物可以用已知的经皮传递系统和赋形剂经皮施用。最优选将本发明化合物与渗透增强剂(包括但不限于丙二醇、聚乙二醇、单月桂酸酯和氮杂环烷-2-酮类)掺合并掺入貼剂或类似的传递系统中。其他赋形剂包括胶凝剂、乳化剂和缓冲剂可根据需要加到上述经皮制剂中

对于口服，本发明化合物理想地可與载体和稀释剂混合并制成片剂或包覆于明胺胶囊中。本发明化合物可以制备成微粒或微球可以使用聚乙交酯、聚交酯或其他聚合物淛备微粒，以促进所述活性化合物或前药的缓释

所述组合物优选制成单位剂型，每个剂量含有约1至约500mg更通常约5至约300mg活性成分。另一优選范围为每单位剂型约0.5mg至约60mg上述活性成分术语“单位剂型”是指作为单位剂量适用于人体受试者和其他哺乳动物的物理上分离的单位，烸一单位含有经计算以产生所需治疗效果的预定量的活性物质和适宜的药物载体

本领域技术人员可认识到本发明化合物可与其他已知药粅一同配制。所述共制剂可以提供增效的治疗效果例如解酸药可与本发明化合物一起配制以提供理想的胃肠效果。

为了更充分地说明本發明的操作提供了下列制剂实施例。所述实施例仅用于说明而不是用于限制本发明的范围。所述制剂可以使用本发明化合物中的任何活性化合物

制剂1用下列成份制备硬明胶胶囊用量/胶囊浓度(重量)(％)(2S,3R,4R)[[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]乙酸甲酯盐酸盐250mg55.0干燥的淀粉 200mg43.0硬脂酸镁 10mg 2.将上述成份混合，并以460mg的量装填入硬明胶胶囊

将活性成份、纤维素、淀粉和硬脂酸镁混合，并通过美国45号筛装填入硬明胶膠囊。

1.0100mg 100.0将活性成份、淀粉和纤维素通过美国45号筛并充分混合。将聚乙烯吡咯烷酮溶液与所得粉末混合然后通过美国14号筛。将所制备的顆粒在50°～60℃干燥并通过美国18号筛。然后将预先通过美国60号筛的羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石加到上述颗粒中混合后，在压片机上壓制形成重100mg的片剂

100将所有固体成份过筛。将聚乙二醇熔化并保持熔融状态将所述药物掺入上述熔融载体。用适宜的油状糊剂装填设备將所述熔融的均相悬浮液装入硬明胶胶囊中以达到适合的重量或体积

含有6mg活性物质的胶囊可完全按上述方法制备；然而，所述二水合物囮合物的用量应减少至6.6mg/胶囊含有0.6mg活性物质的胶囊可按如上所述方法制备；然而，所述二水合物的用量应减少至0.66mg和200mg聚乙二醇/胶囊

本发明Φ间体和方法可用于制备具有有益的外周类鸦片拮抗剂活性的化合物。在本发明范围内某些化合物和条件是优选的以表格形式列出的下列条件、本发明实施方案、和化合物的特征可独立地结合以产生各种优选化合物和工艺操作条件。本发明下列实施方案不是以任何方式限淛本发明的范围

A)晶状化合物2为甲酯。

C)晶状化合物2为乙酯

D)晶状化合物2为HBr盐。

F)低级醇∶水的比例为50-60％低级醇和50-40％水

H)晶状式4化合物为倍半蘋果酸盐。

I)晶状式4化合物为盐酸盐丙酮一溶剂化物形式

J)基本上纯净的式5二水合物为97％或更纯的2S,3R,4R二水合物。

K)包含式5的二水合物化合物和一種或多种可药用赋形剂的药物制剂

L)包含式4化合物的倍半苹果酸盐的药物制剂。

M)用式5化合物治疗过敏性肠综合征的方法

N)用一种或多种式4囮合物治疗过敏性肠综合征的方法。

O)用于结合mu受体的方法该方法包含给药有效量的式5化合物。

P)用于结合mu受体的方法该方法包含给药有效量的一种或多种式4化合物。

本发明的优选实施方案由A-P代表

提供下列实施例用于说明本发明，而不应理解为限制要求保护的本发明的范圍

对于本发明来讲，反应剂的浓度不是关键的本领域技术人员可改变所述反应剂的浓度以达到所需的反应速率和产物产率。

进行本发奣所述方法的时间长短不是关键性的正如在化学中所经常发生的那样，所述反应的速率取决于各种因素如温度和所制备的具体化合物。所述反应的路线可以随后使用诸如薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)和核磁共振光谱(NMR)等方法以检测所述反应的完全程度操作鍺通过延长反应时间可用所述方法获得最大产率。另外操作者可通过在反应达到经济的完全程度那一刻停止反应以期达到最大的生产量。

当用于本发明实施例中时下列术语具有所述意义。“HOBt”是指1-羟基苯并三唑水合物“THF”是指四氢呋喃。“DMF”是指二甲基甲酰胺“TEA”昰指三乙胺。“DCC”是指二环己基碳二亚胺

将反应物在45℃搅拌，并通过HPLC监视反应进程反应混合物仍然为混浊的。4小时后将反应混合物冷却至室温，并用硅藻土过滤在40℃通过旋转蒸发浓缩溶液以除去溶剂和过量丙烯酸甲酯，至净重为120g将粗产物再溶解于THF(180g)中，得到33.3％(重量)溶液用于实施例2的方法中。产率定量(用HPLC测定)[α]\s(20,D)75.3°(c

制备例2甘氨酸异丁酯对甲苯磺酸盐向圆底烧瓶中加入甲苯(600ml)，甘氨酸(22.53g,0.30mol)、对甲苯磺酸一水匼物(62.76g,0.33mol,1.1当量)和异丁醇(60ml,0.65mol,2.17当量)将该非均相反应混合物搅拌并用加热罩加热到回流，以共沸除去所形成的水2小时后，反应混合物变成均相再經1.5小时，将反应混合物冷却至50℃并用旋转蒸发在60℃浓缩至净重为135g

趁热将残余物(均相油状物)溶于乙酸乙酯(450ml)中，并将溶液转移到装有机械搅拌器和回流冷凝器的三颈圆底烧瓶中在室温搅拌下向该溶液中加入己烷(450ml)。然后将该浆状物加热至回流以重新溶解上述固体并在搅拌下使该溶液缓慢冷却。在38℃向溶液中加入晶种以引发结晶冷却至室温后，将混合物冷却至5℃并再搅拌1小时。产物用多孔玻璃漏斗过滤分離风干1/2小时，然后在真空炉(40℃,5mmHg)中干燥过夜共得到89.1g(97.9％)白色晶状固体。

0.5M,pH9.8CO3-2/HCO3-1缓冲溶液洗涤将pH调至9.5-9.8。有机溶液用250ml饱和盐水洗涤用Na2SO4干燥有机层，并在搅拌下冷却至-20℃并在-20℃下放置不搅拌过夜(16小时)。过滤除去沉淀出的DCU减压(10托)蒸发乙酸乙酯，得到25.0g(95％)无定形固体

HCl(2.3ml)从10.6调至9.5，并撤掉低温浴加入庚烷(50ml)并分层。向有机层中加入甲醇(25ml)并冷却该溶液在保持温度低于5℃的条件下向该溶液中加入无水HCl(1.3g)直到混合物呈酸性。加入過程中沉淀出盐酸盐将混合物浓缩至净重为32.58g。向该油状浓缩物中加入甲醇(36ml)几分钟后形成沉淀。将该混合物在室温搅拌过夜

冷却至0℃並维持1.25小时后，过滤沉淀烧瓶用10ml滤液漂洗，滤饼用冷甲醇(10ml)洗涤干燥固体得到2.93g(40.9％产率)白色粉末。

HPLC分析表明该产物为立体异构体的86∶14的混匼物

向甲醇(13.75ml)中加入上述的粗盐酸盐(2.75g)，并将此浆状物加热回流2小时将混合物冷却至约0℃。过滤沉淀烧瓶用滤液漂洗，滤饼用冷甲醇(1.5ml)洗滌干燥产物得到2.32g白色固体(产率84.4％)。

总产率34.5％(烷基化反应和热再次成浆)

1N氢氧化钠溶液漂洗。将该溶液转移到适于真空蒸馏的圆底烧瓶中向该溶液中加入甲醇(240ml)。用浓盐酸(32.14g)将溶液pH调至6.0在温度为45-50℃下减压(100-200mmHg)除去甲醇。除去甲醇直至浓缩物重量约为313g将该浆状物搅拌4小时。再将該溶液的pH调至6.0然后将该浆状物在0-5℃冷却1.5小时。将所需产物过滤用50ml去离子水洗涤3次。然后干燥产物分离所需一水合物产物，为白色颗粒状固体重21.3g，产率92％

实施例4(2S,3R,4R)[[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]乙酸2-甲基丙基酯倍半苹果酸盐(1∶1.5)将实施例1化合物(2.5g,5.2mmol,1.0当量)溶于50ml乙酸乙酯中。向该混合物中加入L-苹果酸(1.03g,7.8mmol,1.5当量)在搅拌下使L-苹果酸溶解后，将溶液加热至70℃并加入4.0ml丙酮结晶该溶液。过滤分离产物滤饼用乙酸乙酯洗涤。干燥该盐直至乙酸乙酯含量低于1％分离标题化合物，为白色晶体用X-射线粉末衍射法分析该样品。

3A乙醇中的溶液向该混合物中加入水(74.0ml)。在10-15分钟内在25-30℃滴加入氢氧化钠的水溶液[(1.0M)0.077mol,3.0当量]将该溶液搅拌然后过滤。通过加入浓盐酸将溶液的pH从12.50调至6.00向溶液中加入晶种，在10-15分钟内开始沉淀出(2S,3R,4R)[[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]乙酸将该结晶在25℃搅拌2小时，然后在轻微抽吸条件下过滤(2S,3R,4R)[[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]乙酸得到湿的滤饼。将该晶体用60ml水成浆并抽滤得到硬滤饼。在过滤漏斗中在轻微抽吸条件下通过抽吸掉产物上方的空气使该晶体在空气中在33％相对湿度在25℃下干燥过夜(16小时)从而成为所述二水合物从(αS,3R,4R)-4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-α-(苯基甲基)-1-呱啶丙酸一水合物中以85％产率(10.2g)分离出标题化合物，为白色晶体它具有准确的熔点，为208℃该样品用X-射线粉末衍射法分析。IR(KBr)28,cm-1；1H

25℃水成浆嘫后轻微抽吸，再用500ml水成浆并抽滤得到硬的滤饼。在过滤漏斗中在轻微抽吸条件下通过抽掉产物上方的空气使该晶体在空气中在35％相对濕度于25℃下干燥过夜成为二水合物以＞93％(88g)的产率分离出标题化合物，为白色晶体它具有准确的熔点，为208℃

实测值C,65.38；H,7.87；N,6.25；O,20.90；实施例7(2S,3R,4R)[[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]乙酸2-甲基丙基酯盐酸盐丙酮一溶剂化物将6.0实施例1化合物的样品溶于60.0ml无水丙酮中。在25℃滴加由0.45g部汾HCl气溶于30.0ml无水丙酮中形成的溶液(0.98当量)滴加该HCl气的丙酮溶液至溶液pH为3。当pH达到3时加入与起始溶液浓度相同的另1.0ml等份实施例1化合物。产生沉淀物将该反应物在25℃搅拌1小时然后冷却至0℃。将反应物在0℃搅拌2小时在氮气氛下加压过滤滤出所需的(2S,3R,4R)[[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧玳-3-苯基丙基]氨基]乙酸2-甲基丙基酯盐酸盐。通过在滤液上方通入氮气流干燥该(2S,3R,4R)[[2-[[4-(3-羟基苯基)-3,4-二甲基-1-哌啶基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]乙酸2-甲基丙基酯鹽酸盐以形成丙酮一溶剂化物该丙酮一溶剂化物用毛细管气相色谱分析法进行检定，表明有9.3％-9.97％(重量)丙酮(理论值为10％)该产物通过去除溶剂化作用中的丙酮分子加以检定。

该盐酸盐丙酮一溶剂化物用真空炉于50℃进一步干燥2-3天在25℃于40％相对湿度下通过使该晶体在较大表面仩铺展2天来产生盐酸盐一水合物。

用反相HPLC测定产率＞85％纯度大约为99.3％。

将上述乙酯(14.8g,37.4mmol)再溶于150ml乙醇中向溶液中通入无水氯化氢，并通过旋轉蒸发除去乙醇然后将该固体用50ml乙酸乙酯研制并过滤。在30℃将固体干燥过夜分离出12.25g所述盐酸盐(76％，熔点为179-181℃)非对映体比例为49％αS,3R,4R(所需非对映体)比51％αR,3R,4R(不需要的非对映体)。

将所述盐酸盐(1.02g)于5ml乙醇中成浆并回流3小时将该混合物再冷却至室温并搅拌。将混合物在0℃搅拌1小时然后过滤。将所述盐在40℃干燥过夜分离出的白色固体重0.48g(47％)。非对映体比例为76％αS,3R,4R比24％αR,3R,4R

将上述盐酸盐(0.42g)于6ml乙醇中成浆并加热回流2小时，然后再冷却至室温并搅拌将该浆状物冷却至0℃，并维持1小时过滤。干燥固体至得到0.31g(74％)所述盐。非对映体比例为92％αS,3R,4R比8％αR,3R,4R

将一蔀分上述盐(0.24g)在2.5ml乙醇中第三次成浆。将该混合物加热回流3小时然后再冷却至室温并搅拌。将该浆状物冷却至0℃维持在此温度达1小时，然後过滤干燥固体。该非对映纯(98％αS,3R,4R)的所述乙酯的盐酸盐重0.23g(96％)

权利要求 1．制备晶状式3的一水合物化合物的方法，

该方法包含从溶剂中结晶化合物3所述溶剂由约50％至75％低级醇和约50％至25％水(重量)组成。

全文摘要 本发明涉及制备某些3,4,4－三取代的哌啶基－N－烷基羧酸盐类化合物、中间体和衍生物的方法最后,本发明提供了配制成制剂的新的3,4,4－三取代的哌啶基－N－烷基羧酸盐类化合物及使用所述化合物的方法。

S·A·弗兰克, D·E·普拉瑟, J·A·沃纳, J·A·华德 申请人:伊莱利利公司