【摘要】：背景和目的:移植肾小管间质纤维化(tubulointerstital fibrosis,TIF)是各类急、慢性移植肾肾病进展至移植肾功能衰竭的共同途径,其主要病理表现是移植肾小管扩张、萎缩及塌陷,细胞外基质(extraceller matrix,ECM)的过度聚集等。当今世界范围内以移植肾TIF为主要病理表现的CR而导致的移植肾失功仍是器官移植领域一个尚未攻克的难题,为避免肾移植患者再次重返透析或二次肾移植治疗,许多学者也都在改善移植肾TIF方面进行有意义的探索,但因其病变过程复杂,至今仍缺乏可靠、有效的治疗方案。我院肾移植科通过比较以免疫抑制剂方案(Cs A/FK506+MMF+Pred)为基础的三联免疫抑制方案与联合积雪草治疗对移植肾TIF的影响,探讨不同治疗靶点的药物联合应用来发挥减轻移植肾TIF的的影响,尝试提供一种切实有效的临床干预方案,形成一套具有中医药特色的移植肾TIF优化治疗方案。方法:观察病例来源于2014年6月至2016年12月河南中医药大学第一附属医院肾移植科行移植肾穿刺活检患者,病理诊断确诊为移植肾TIF为主要病理表现者,共纳入60例,参照随机数表随机分为治疗组(30例)和对照组(30例),对照组采取以免疫抑制剂(Cs A/FK506+MMF+Pred)为基础方案常规治疗,治疗组采取常规治疗方案联合积雪草治疗;观察时间均为6个月,分别记录两组患者治疗前及治疗后第1、3、6月三个治疗点的血常规、血脂、血糖、肝功能(ALT、AST)、肾功能(BUN、Scr)尿β_2-MG、尿α_1-MG、24小时尿蛋白定量(Upr)及移植肾彩超等,并计算内生肌酐清除率(Ccr),于观察6个月后行彩超引导下移植肾穿刺活检,分别记录两组患者各项指标的变化。结果:(1)两组疗效对比:治疗组总有效率73.33%,对照组总有效率56.67%,两组差异具有统计学意义(P0.05),提示治疗组疗效优于对照组;(2)两组血常规、血糖及肝功能相关指标在治疗后第1、3、6月各时点均未见明显变化,差异均无统计学意义(P0.05);(3)两组血常规、血糖及肝功能相关指标在治疗后第1、3、6月各时点均未见明显变化,差异均无统计学意义(P0.05);(4)治疗组尿β_2-MG、尿α_1-MG、24小时尿蛋白定量及、肾功能(BUN、Scr)及Ccr指标在治疗后第1、3、6月各时点较治疗前均有所降低,且差异具有统计学意义(P0.05);同时,两组治疗后各时点对比,差异均具有统计学意义(P0.05);治疗组与对照组对比,治疗3个月后移植肾血管阻力指数较治疗前有统计学意义(P0.05);(5)两组治疗后6个月,移植肾病理均有所改善,且两组差异具有统计学意义(P0.05)。结论:积雪草颗粒联合免疫抑制剂能减轻肾小管间质的损伤,抗肾间质纤维化;改善移植肾功能,降低尿蛋白;减低患者胆固醇、血小板水平的作用;可改善移植肾血液循环,增加血流灌注,降低移植肾血管阻力指数,是移植肾TIF多种治疗方案的有益补充,且无明显不良反应发生,安全性良好。

【学位授予单位】：河南中医药大学
【学位授予年份】：2017

TIF)中的作用,并进一步探讨积雪草对ILK及其mRNA表达的影响,明确积雪草缓解TIF的作用机制,为临床应用积雪草防治TIF提供理论依据。方法：采用结扎Sprague Dawley (SD)大鼠左侧输尿管的方法制备肾间质纤维化大鼠模型。将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、小剂量积雪草组(积小组)、中剂量积雪草组(积中组)、大剂量积雪草组(积大组)、福辛普利组(蒙诺组)、模型组,每组10只,除假手术组外均建立UUO大鼠模型。术后1天开始灌胃,各个药物治疗组每天以相应药物灌胃,模型组和假手术组以与药物治疗组等体积的生理盐水灌胃。U  (本文共41页)

肾间质纤维化(RIF)是各种原因的慢性肾脏病进展到终末期肾病(ESRD)的最终共同病理过程,其发病机制复杂,其中促纤维化与抑制纤维化因子失衡在RIF起了重要作用。单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是重要的促纤维化因子,体内及体外实验均证明MCP-1在肾组织中产生增加是单核细胞浸润并加速肾小球硬化及肾间质纤维化发生的重要原因。本研究通过单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型观察积雪草颗粒对梗阻侧肾组织MCP-1及MCP-1 mRNA的影响,旨在探讨积雪草颗粒对抗肾间质纤维化的部分作用机制及作用靶点。1材料与方法1.1实验动物60只SD雄性鼠,周龄6~8周,体重(200±20)g,由河南省动物实验中心提供。1.2药物与试剂积雪草颗粒、白芍颗粒及川芎由江阴天江药业有限公司提供。福辛普利片(上海中美施贵宝公司),RNAis o

目的：1.采用单侧输尿管结扎(UUO)方法复制大鼠肾间质纤维化模型,以尿毒清颗粒为对照,动态观察真武汤对UUO模型大鼠肾功、肾脏形态的变化以及肾小管损害和肾间质纤维化的程度。2.动态观察UUO模型大鼠纤维连接蛋白(FN)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)和整合素链激酶(ILK)蛋白表达情况,探讨其与大鼠肾间质纤维化的关系。3.探讨真武汤拮抗大鼠肾间质纤维化的作用机制,以期有助于临床。方法：将150只SPF级健康雄性wistar大鼠,体重(180-200)g,随机分为假手术组和造模组,其中假手术组21只,造模组129只；造模组大鼠分为五组,即为模型组、真武汤低剂量组、中剂量组、高剂量组和尿毒清对照组；采用单侧输尿管结扎的方法复制大鼠肾间质纤维化模型,假手术组仅切开腹腔并游离左侧输尿管,不做输尿管结扎,从术后第一天开始给药,每天灌服一次,分别连续灌服2周、3周和4周；假手术组和模型组灌服5ml蒸馏水,真武汤... 

肾小管间质的纤维化是各种慢性肾脏进展到终末期肾病的重要病理改变,其病理特点是小管间质区域以单核/巨噬细胞为主的炎症细胞浸润和细胞外基质的大量聚积。如何有效阻止肾间质纤维化的发生、发展,是治疗慢性肾脏病的关键。已有多项研究发现〔1-4〕,大豆异黄酮能通过抗氧化、减少蛋白尿、降血糖、降血脂等途径,对肾脏有良好的保护作用。也有动物实验发现,大豆异黄酮能通过减少转化生长因子-β1(TGF-β1)生成,改善梗阻大鼠的肾间质纤维化。但众所周知,TGF-β1是一把双刃剑。以往的研究已证明〔5〕,整合素连接激酶(integrin-linkedkinase,ILK)作为TGF-β1的下游因子,参与TGF-β1诱导的人近端肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化(epithelial-myofibroblast

肾小管间质纤维化(R IF)是各种肾脏疾病进展为终末期肾功能衰竭的最终共同通路[1]。肌成纤维细胞(MyoF)与R IF的发生关系密切,是R IF发生的关键效应细胞,而α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)作为MyoF的特异性标志物在R IF中的重要性日益受到人们的关注,并可能成为治疗肾间质纤维化的新靶标。近年来,积雪草颗粒(CTA)被广泛应用于慢性肾脏病的治疗,但其作用机制尚不清楚。本研究采用单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型,通过观察积雪草颗粒对肾组织α-SMA表达的影响,探讨积雪草颗粒的抗肾间质纤维化作用,并为临床慢性肾脏疾病的治疗寻找新的有效药物。1材料与方法1.1动物成年雄性SD大鼠60只,体质量为(200±20)g,8周龄,购自河南省实验动物中心,医动字:19-022。喂以标准大鼠食物,饲养在清洁级标准动物房,动物室温控制在21~25℃,湿度为65?~69?,12 h昼夜循环,大鼠自由饮水、进食,每笼10只,保持笼内清洁。1...  (本文共4页)

肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)是所有慢性肾脏疾病进展为慢性肾衰竭的共同通路和病理改变,其主要病理表现成纤维细胞增殖造成的大量基质蛋白积聚。肾小管上皮-间质转化(epithelial mesenchymal F分泌大量的胶原沉积于肾间质,导致纤维化的发生。钙依赖性跨膜糖蛋白(E-cadherin,E-cad)是上皮细胞标志物,在肾小管上皮细胞转分化过程中,主要就是E-cad代表的肾小管上皮细胞减少,而α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth mus-cle actin,α-SMA)标志的间质细胞增加[1]。整合素连接激酶(integrin linked

Fibrosis, TIF)中的作用,并进一步探讨积雪草对ILK及其mRNA表达的影响,明确积雪草缓解TIF的作用机制,为临床应用积雪草防治TIF提供理论依据。方法：采用结扎Sprague Dawley (SD)大鼠左侧输尿管的方法制备肾间质纤维化大鼠模型。将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、小剂量积雪草组(积小组)、中剂量积雪草组(积中组)、大剂量积雪草组(积大组)、福辛普利组(蒙诺组)、模型组,每组10只,除假手术组外均建立UUO大鼠模型。术后1天开始灌胃,各个药物治疗组每天以相应药物灌胃,模型组和假手术组以与药物治疗组等体积的生理盐水灌胃。UUO术后第14天处死所有大鼠,做如下检测：1,取腹主动脉血,检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCR)的变化。2,取梗阻侧肾脏组织做HE染色,观察梗阻侧肾脏肾小管损伤、变形、扩张,萎缩程度等；Masson染色评价肾间质纤维化的程度；免疫组化染色检测肾组织ILK的定位及表达情况。3,取梗阻侧肾脏组织,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测组织ILK-mRNA的含量。结果：1,大鼠UUO术后情况：术后第2天模型组大鼠死亡一只,术后第4天积小组死亡一只,术后5天各组大鼠伤口逐渐愈合,建立UUO模型的各组大鼠活动度、毛发光泽较之假手术组有所下降。2,血生化指标比较：建立UUO模型的各组大鼠之间血生化指标比较差异无统计学意义(P0.05),各UUO组大鼠SCR、BUN结果均高于假手术组,差异有统计学意义(P0.05)。3,HE和Masson染色：假手术组无明显病理变化；UUO组大鼠组织染色显示肾小管明显扩张、变形,大量肾小管上皮细胞萎缩、脱落,肾间质细胞增生,胶原纤维渗出增多。建立UUO模型各组大鼠胶原渗出量大于假手术组(P0.05),各药物干预组胶原含量少于假手术组(P0.05),各积雪草组胶原含量变化呈剂量依赖模式,积大组含量最少(P0.05),蒙诺组检测结果小于积大组(P0.05)4,免疫组化检测肾脏ILK蛋白表达结果：ILK正常表达主要在肾小管上皮细胞的胞浆与胞核,肾小球血管内皮细胞少量表达,肾间质几乎不表达。建立UUO模型的各组大鼠ILK蛋白含量高于假手术组(P0.05)；各药物干预组ILK蛋白含量低于模型组(P0.05)；积小组与积中组ILK蛋白含量差异无统计学意义(P0.05)；积大组和蒙诺组ILK蛋白含量小于积中组与积小组(P0.05)；积大组与蒙诺组ILK蛋白含量差异无统计学意义(P0.05)。6, RT-PCR检测肾组织ILK-mRNA含量：建立UUO模型的各组大鼠肾组织ILK-mRNA含量均高于假手术组(P0.05),各药物干预组大鼠组织ILK-mRNA含量均低于模型组(P0.05),积小组与积大组ILK-mRNA含量大致相同(P0.05),积大组与蒙诺组ILK-mRNA含量大致相同(P0.05),积大组与蒙诺组ILK-mRNA含量均低于积小组与积中组(P0.05)结论：1,UUO大鼠肾组织ILK蛋白和ILK-mRNA水平较正常情况明显升高,可见ILK在TIF的过程中发挥重要作用。2,积雪草很可能通过调节ILK的表达,促进的细胞外基质(Extracellular Matrix, ECM)降解以缓解TIF,其作用呈明显剂量依赖关系,且大剂量组与福辛普利组疗效相当。3,积雪草无明显的肾毒性,应用安全。

【学位授予单位】：河南中医药大学
【学位授予年份】：2016