炉甘石洗剂 高锰酸钾钾和利凡诺抑菌洗剂能一起用吗,包皮术后

·1032·HeraldofMedicineVol.34No.8August2015
参菊洗剂体外抑菌作用
刘文,谭璐,张为,王树平张广求,
(湖北省黄冈市中心医院药剂科,黄冈
摘用。结果
研究参菊洗剂的体外抑菌作用。方法
采用琼脂扩散纸片法测定抑菌圈直径,采用液体培养液连
续稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),采用琼脂培养液平板法测定最低杀菌浓度(MBC),并与市售某妇科洗液比较抑菌作
参菊洗剂对5种病原菌株的抑菌作用明显优于相同浓度的市售某妇科洗液,差异有统计学意义(P<0.05);参
67.50,67.50,菊洗剂对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白念珠菌的MIC分别为33.75,67.50,33.75mg·mL-1;参菊洗剂对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白念珠菌的MBC分别67.50,67.50,135.00,33.75mg·mL-1。结论为33.75,
关键词中图分类号
R286;R978
文献标识码
参菊洗剂具有较明显的抑菌和杀菌作用。
参菊洗剂;琼脂扩散纸片法;液体培养液连续稀释法;琼脂培养液平板法;抑菌作用,体外
AntibacterialEffectofShenjuLotioninVitro
ZHANGGuangqiu,LIUWen,TANLu,ZHANGWei,WANGShuping(DepartmentofPharmacy,Huanggang
CentralHospital,Huanggang438000,China)
ABSTRACTObjectiveTostudytheantibacterialeffectofShenjulotioninvitro.MethodsThediameterofinhibitionzonewasdeterminedbypaper-discagar-diffusionmethod.Minimuminhibitoryconcentration(MIC)andMinimumbactericidal
concentration(MBC)wasdeterminedbyculturemediumdilutionmethodandagarmediumplatemethod,respectively.AntibacterialeffectwascomparedbetweenShenjulotionandcitysaleofthegynecologicallotion.ResultsInhibitoryeffectsofShenjulotionon5pathogenicstrainsweresignificantlybetterthanthatofcitysaleofthegynecologicallotionatthesameconcentrations(P<0.05).MICofShenjulotiononStaphylococcusaureus,Pseudomonasaeruginosa,Escherichiacoli,BacillussubtilisandCandidaalbicanswas33.75,67.50,67.50,67.50and33.75mg·mL-1,respectively.MBCofShenjulotiononStaphylococcusaureus,Pseudomonasaeruginosa,Escherichiacoli,BacillussubtilisandCandidaalbicanswas33.75,67.50,67.50,135.00and33.75mg·mL-1,respectively.ConclusionShenjulotionhasobviousbacteriostasisandsterilizationeffect.
KEYWORDSSPaper-discagar-LiquidcultureAgarmedium
Antibacterialeffect,invitro
参菊洗剂是我院根据临床验方研制的中药制剂,主要由苦参、野菊花、黄柏、蛇床子等中药组成。具有消炎、止痒、除秽、杀菌功效,用于细菌性、真菌性、滴虫性阴道炎的治疗,具有较好的临床疗效。为了进一步
,证实其抗菌、消炎作用,笔者参考有关文献采用琼
脂扩散纸片法、液体培养液连续稀释法和琼脂培养液
压蒸汽灭菌器(上海三申医疗器械有限公司);(0~
150)mm×0.02mm游标卡尺(上海九量五金工具有限
100型电热干燥箱(武汉市武昌实验仪器公司);KWY-厂);打孔器(ф6mm)。
1.2培养液水解酪蛋白琼脂培养液(M-H琼脂培养H液)(批号:)、水解酪蛋白肉汤培养液(M-肉汤培养液)(批号:)、改良马丁琼脂培养液
(批号:)、改良马丁培养液(批号:)均由北京奥博星生物技术有限责任公司生产;蛋白胨(批号:)、营养琼脂培养液(批号:)、营养肉汤培养液(批号:)均由北京双旋微生物培养液制品厂生产;0.9%无菌氯化钠溶AR,液(上海化学试剂厂,批号:130622)。
1.3菌株金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、铜绿
CMCC(B)10104]、CMCC(B)假单胞菌[大肠埃希菌[
44102]、CMCC(B)63501]、枯草芽孢杆菌[白念珠菌[CMCC(F)98001]均为第0代冷冻保藏菌株,购自湖北省食品药品监督检验研究院。
1.4稀释液及样品0.9%无菌氯化钠溶液、pH7.0无
平板法对参菊洗剂的体外抗菌活性进行了实验研究,
为临床应用提供科学依据,现报道如下。1
实验材料1.1仪器YC-875S医用净化工作台(苏州净化设备
厂);SZK202净化工作台(蚌埠净化设备厂);HHB11420电热恒温培养箱(湖北省黄石市医疗器械
1多功能恒温箱(上海医疗器械修理厂);高厂);DG-收稿日期基金项目76号)
张广求(1964-),副主任药师,男,湖北黄梅人,
E-mail:研究方向:医院药学、药物分析。电话:2,
作者简介ccnpa@163.com。
2013]湖北省黄冈市科技计划项目(黄科字[
医药导报2015年8月第34卷第8期
菌氯化钠-蛋白胨缓冲液(均按《中华人民共和国药[4]
典》方法配制);市售某妇科洗液(含生药量为1g·mL-1);参菊洗剂(含生药量为0.54g·mL-1,黄冈市中心医院自制,批准文号:鄂药制字Z)。规格:每瓶250mL,批号:方法与结果2.1
采用比浊法控制菌液的
浓度。量取1.175%氯化钡(BaCl2·H2O)溶液0.5mL,置100mL量瓶中,加1%硫酸至刻度,充分摇匀,分装于试管中,每管5mL,其浊度相当于菌液浓度
,为1.5×10CFU·mL置室温、暗处保存,用前摇匀。
2.2菌液的制备按无菌操作法,将菌株金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌解冻H琼脂培养液斜面上,后,转种至M-经35℃培养18~24h,使菌株复壮和纯化;再用接种环挑起复壮并纯化H肉汤培养液中,35℃培养的菌株适量于5mL的M-16~18h[4]。将菌株白念珠菌解冻后,转种至改良马丁琼脂培养液斜面上,经25℃培养24~48h,使菌株复壮和纯化;再用接种环挑起复壮并纯化的菌株适量25℃培养24h。取上于5mL的改良马丁培养液中,
述培养物,分别置15mm×175mm的灭菌试管中,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液5mL,摇匀,以黑衬纸为背景,调节浊度至0.5麦氏比浊标准,使菌液浓度
为1.5×10CFU·mL,备用。2.3
药敏纸片的制备选用吸水力强且质地均匀的滤纸,用打孔器制成直径6mm的圆纸片,分装于西林瓶中,其中,每瓶30片×12瓶,每瓶90片×5瓶,用棉115℃热压灭菌30min后,60℃干塞和牛皮纸封口,
燥。取参菊洗剂3批或市售某妇科洗液,以无菌操作200,用无菌0.9%氯化钠溶液,分别稀释成含生药400,100mg·mL-1的溶液。取滤纸片,分别浸泡上述参菊洗剂3批或市售某妇科洗液原液及其含生药400,200,100mg·mL-1的溶液30min。参菊洗剂每一批、12瓶共360片;市售某妇科洗液每每一浓度组30片,
4瓶共360片。另取滤纸片1瓶90一浓度组90片,
片,浸泡于无菌0.9%氯化钠溶液30min,作为阴性对照。置60℃温箱干燥后,备用。
2.4琼脂扩散纸片法药敏实验按无菌操作法,分别
H琼脂培养液或改良取已融化并冷却至约50℃的M-马丁琼脂培养液,倾入内径为9cm的无菌平皿中,每
平皿25mL,使琼脂培养液平板厚度为4mm,冷却至“2.2”凝固。用无菌棉拭子蘸取项下制备的菌液,在试管内壁液面上方挤去多余的菌液,从3个不同方向均
0.5麦氏比浊管的制备
匀涂布于上述琼脂培养液平板表面。金黄色葡萄球
菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌菌液各H琼脂培养液平板27个,涂布于M-共108个,白念珠菌菌液涂布于改良马丁琼脂培养液平板27个。并将各实验菌均分为5组,即参菊洗剂或市售某妇科洗液
100,50mg·mL-1的溶液组、原液组及含生药200,无菌0.9%氯化钠溶液组。用无菌小镊子夹取“2.3”项下
制备的药敏纸片,按顺时针方向,每平板等距均匀贴6片,各纸片中心距离相距>25mm,同时纸片距平板内
M-H琼脂培养液平板缘>15mm,盖上平皿盖。倒置,置35℃培养24h,改良马丁琼脂培养液平板置25℃
培养48h。取出平板,在透射光上用游标卡尺量取各纸片的抑菌圈直径,包括完全抑菌带和迟生长带的直径,抑菌圈边缘以肉眼不可见细菌或真菌明显生长为限。结果显示,不同浓度的参菊洗剂在体外对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌和白念珠菌等5种菌株的抑菌圈直径,与相同浓度的市售某妇科洗液比较,差异有统计学意义(P<0.05),差异有统计学意义与无菌0.9%氯化钠溶液组比较,(P<0.01),提示参菊洗剂具有较好的体外抑菌作用。见表1。
2.5最低抑菌浓度(minimuminhibitoryconcentration,MIC)的测定采用液体培养液连续稀释法,以市售某妇科洗液作为阳性对照药。按无菌操作法,取13mm×100mm的灭菌带棉塞的试管11支,编号,排列在试管架
H肉汤培养液(白念珠菌用改良上。于每管中先加入M-马丁培养液)2.0mL。于第1管中加入参菊洗剂或市售某
妇科洗液原液2.0mL,混匀后吸取2.0mL加入第2管中,混匀后再吸取2.0mL加入第3管中,如此连续倍比稀释
1/至第9管,混匀后自第9管吸取2.0mL弃去,使成1/2,4,1/8,1/16,1/32,1/64,1/128,1/256,1/512的各种药液浓135.00,67.50,度。此时,各管参菊洗剂浓度依次为270.00,
33.75,16.88,8.44,4.22,2.11,1.06mg·mL-1,市售某妇科洗250.00,125.00,62.50,31.25,15.62,液浓度依次为500.00,7.81,3.91,1.95mg·mL-1。第10管不加受试药液作为阳性对照,以便观察培养液是否适合细菌或真菌生长;第11管加受试药液2.0mL,混匀后吸取2.0mL弃去,不加菌液,作为阴性对照,以便观察受试药液是否被污染。分别取“2.2”项下制备的细菌或真菌菌液50μL,依次加入到上述第1~10管中。充分混匀后,置35或25℃培养24h,观察有无细菌或真菌生长,如无法判断,则将可疑管接种到相应琼脂培养液上,置35或25℃培养24h,以受试药液最低浓度管中无细菌或真菌生长者,为该试验菌的最低抑菌浓度。每菌株2管,平行操作3次,以2或3次相同结
果为准。结果显示,参菊洗剂对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、白念珠菌均有抑菌活性,其中,对金黄色葡萄球菌和白念珠菌的MIC均为33.75mg·mL-1,对铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和枯草芽
孢杆菌的MIC均为67.50mg·mL。市售某妇科洗液对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌的MIC均为-1125mg·mL-1,对枯草芽孢杆菌的MIC为250mg·mL,-1
对白念珠菌的MIC为62.50mg·mL。提示参菊洗剂对
HeraldofMedicineVol.34No.8August2015
上述5种致病菌均有较强的抑制作用,且效果优于市售
3。某妇科洗液。见表2,2.6
最低杀菌浓度(minimumbactericidalconcen-tration,MBC)的测定从MIC测定中未生长细菌或真
H琼脂培养液菌的试管,分别吸取0.1mL接种于M-或改良马丁琼脂培养液平皿上,置35或25℃培养
24~48h,观察结果,以无菌生长的最小稀释度的药物浓度,为该药的最低杀菌浓度。每菌株2管,平行操作
kindsofpathogenicstrains
无菌0.9%氯化钠溶液市售某妇科洗液
不同浓度参菊洗剂和市售某妇科洗液对5种病原菌株的抑菌圈直径
mm±s,n=18
金黄色葡萄球菌0.00±0..028.72±0.147.33±0.656.81±0..169.53±0.428.27±0.207.74±0.30表2
铜绿假单胞菌0.00±0..198.93±0.288.38±0.367.02±0...069.44±0.568.55±0.11
大肠埃希菌0.00±0...109.95±0.208.80±0....719.70±0.52
枯草芽孢杆菌0.00±0..188.39±0.057.79±0.436.93±0..458.56±0.488.09±0.487.26±0.61
白念珠菌0.00±0.........43
DiameterofinhibitionzoneofShenjulotionandcitysaleofthegynecologicallotionatdifferentconcentrationsonfive
含生药量/(mg·mL-1)
参菊洗剂540.0.00100.00
不同浓度参菊洗剂对5种病原菌株的MIC
4.22+++++
2.11+++++
1.06+++++
阴性对照-----
Tab.2菌株
MICofcitysaleofthegynecologicallotionatdifferentconcentrationsonfivekindsofpathogenicstrains
270.00-----
135.00-----
参菊洗剂浓度/(mg·mL)
67..888.44--++
金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白念珠菌
;“+”“-”表示有细菌或真菌生长表示无细菌或真菌生长
“-”meansnobac“+”meansbacterialorfungalgrowth
Tab.3菌株
金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白念珠菌
不同浓度市售某妇科洗液对5种病原菌株的MIC
-1市售某妇科洗液浓度/(mg·mL)125...81-++++
MICofcitysaleofthegynecologicallotionatdifferentconcentrationsonfivekindsofpathogenicstrains
1.95+++++
阴性对照-----
500.00-----
250.00-----
;“+”“-”表示有细菌或真菌生长表示无细菌或真菌生长
“-”meansnobac“+”meansbacterialorfungalgrowth
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