rwpe-1上皮细胞酒精消化时间间需要5分钟吗

人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1价格
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上海研生实业有限公司
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人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1价格冷冻保存方法一:冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。 冷冻保存方法二:冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时,以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1价 详细信息
细胞名称 &人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1价格形态特性 &&上皮细胞生长特性 &贴壁生长特征特性 &&肿瘤抑制基因: p53 + [PubMed: 9214605] pRB + [PubMed: 9214605] 一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的人瘤病毒的18(HPV-18)进行转化,建立了RWPE-1 (ATCC CRL-11609) 细胞株 [PubMed: 9214605]. 在三维Matrigel培养时,在雄激素作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。[PubMed: ]. 当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时,RWPE&培养条件 &&&这株细胞的基本培养基作为Invitrogen (GIBCO)提供的kit的部分: 角化细胞无血清培养基K-SFM,kit目录号。随kit提供这株细胞生长所需的两种添加剂(牛垂体提取物BPE及人重组表皮生长因子EGF)。 配制完全生长培养基,需添加以下成分: 0.05 mg/ml BPE & 随K-SFM提供 5 ng/ml EGF -随K-SFM提供。传代方法 &&消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。传代情况 &P(52+5)冻存条件 &&完全培养基+8%DMSO支原体检测 &阴性STR &同工酶 &染色体 &使用权限 &A类人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1价格冻存过程:将贴壁细胞消化后离心收集,悬浮细胞直接离心收集,以完全培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml,加入10%的DMSO。以每管1~2ml分装至冻存管中,用绝热材料包裹置-70摄氏度冰箱冷冻过夜,次日保存到液氮中。公司出售细胞培养、人细胞培养、小鼠细胞培养、大鼠细胞培养等动物细胞,几乎能满足多数客户的实验要求。公司是广大顾客细胞购买理想的单位之一。细胞详细参数如下:1) 用途:提供用于科研的稳定细胞系2) 包装规格:25cm*cm(&1000000个细胞)3) 保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存4) 细胞生长:贴壁生长人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1价格细胞株培养的具体无菌技术要点:1. 实验开始前,无菌室和无菌操作台需要紫外光照射30到60分钟完全灭菌,用70%ethanol擦拭无菌操作台面,并且打开无菌操作台风扇运行10分钟之后,才可以进行实验操作。每次操作只能处理一株细胞株,即使培养基完全相同也不可共用培养基,以避免细胞间污染或失误混淆。实验完成后,请将实验物品拿出工作台,用70%ethanol再次擦拭无菌操作台面。操作间隔应该让无菌操作台运转10分钟到15分钟后,才能进行下一个细胞株的操作。2. 无菌操作工作的区域应保持清洁和宽敞,必要物品(试管架、吸管、吸取器或吸管盒等)可以暂时放置,其它实验用品使用完毕后应移出,有利于空气流通。实验用品需70%ethanol擦拭后方可带入无菌操作台内。实验操作过程应在台面的中央无菌区域内完成,请勿在边缘非无菌区域进行操作。3. 小心取用无菌实验物品,避免细菌污染。请勿触碰吸管尖头部和容器瓶口处,也不要在打开的容器正上方进行操作。容器打开后,请用手夹住瓶盖并轻握瓶身,倾斜大约45&角取用,尽量不要将瓶盖口朝上放置于桌面。4. 工作人员应当首先注意自身安全,必须穿戴齐实验衣和实验手套后才能进行实验。对于病毒感染或是来自人类的细胞株应当特别小心操作,并选择适当等级的无菌操作台进行(至少是Class II)。操作过程中,应避免引起aerosol的产生,小心有毒性药品,例如DMSO和TPA等,并避免针头的伤害等等。5. 定期检测下列项目:5.1. CO2钢瓶的CO2压力5.2. CO2培养箱的CO2浓度、温度、和水盘是否有污染(水盘的水需用无菌水,每周定时更换)。5.3. 无菌操作台内的airflow压力,定期更换紫外线灯管和HEPA过滤膜,预滤网(300小时/预滤网,3000小时/HEPA)。6. 水槽内可添加消毒剂(Zephrin 1:750),需定期更换水槽中的水。&& &规格:100mg&& &英文名称:Progesterone&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Sulfadiazine&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Sulfamethoxazole&& &保存:-20℃,避光&& &规格:50mg&& &英文名称:Glutamic acid&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Gan Luobromide&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Diatrizoic acid&& &保存:-20℃,避光&& &规格:30mg&& &英文名称:2,3- two-6- phenylimidazo 2,1-bthiazolehydrogen&& &保存:-20℃,避光&& &规格:50mg&& &英文名称:Twophenyl(2 chlorophenyl)methanol&& &保存:-20℃,避光&& &规格:1000mg&& &英文名称:Paracetamol&& &保存:-20℃,避光人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1价格规格:100mg&& &英文名称:P-aminobenzoic acid&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Dexamethasone sodium phosphate&& &保存:-20℃,避光&& &规格:30mg&& &英文名称:Digoxin&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Hydrocortisone acetate&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Prednisone acetate&& &保存:-20℃,避光&& &规格:50mg&& &英文名称:Chlormadinone acetate&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Fluocinonide acetate&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Fludrocortisone acetate&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Testosterone propionate&& &保存:-20℃,避光&& &规格:100mg&& &英文名称:Bendroflumethiazide&& &保存:-20℃,避光5-溴-2-甲氧基烟酸&& &N-[5-(二苯基膦酰甲基)-4-(4-氟苯基)-6-异丙基嘧啶-2-基]-N-甲基甲磺酰胺&& &四氟硼酸亚硝3-氨基-5-溴三氟甲苯&& &瑞舒伐他汀钙&& &2,6-二溴甲苯6-氯-1H-吡咯并[2,3-B]吡啶&& &3,5-二溴三氟甲苯&& &3-氯-2,5-二氟吡啶&& &氯吡格雷&& &3,4-二氟苯甲酰氯邻甲基氯化苄&& &左西孟旦&& &(1R,2R)-(-)-N,N'-二甲基-1,2-环己二胺4-氯-3-氟苯甲醛&& &甲磺酸帕珠沙星&& &2-甲氧羰基-5-碘苯磺酰胺2-溴-6-硝基甲苯&& &氯雷他定&& &盐酸金刚乙胺3,4-二氢-2(1H)-喹啉酮&& &米屈肼&& &2-庚基苯并咪唑1-(3-吡啶基)-3-(二甲氨基)-2-丙烯-1-酮&& &盐酸特比萘芬&& &2-甲酸乙酯苯磺酰胺3-羟基吡嗪-2-酰胺&& &4-哌啶基哌啶&& &3-羟基-4,4,4-三氟丁酸乙酯9-溴-1-壬醇&& &氰基联苯酚&& &3-甲氧基-4-硝基苯酚甲基苯醌&& &盐酸雷莫司琼&& &盐酸莫西沙星3,4-二甲基苯硼酸&& &多尼培南(一水合物)&& &N,O-1,3-二乙酰基吲哚2,4-二甲基苯硼酸&& &7-乙基喜树碱&& &3-溴苯2-氯-3-氰基吡嗪&& &盐酸拓扑替康&& &烯丙基硼酸频哪醇酯3-甲氧基&& &9-氨基喜树碱&& &1,4-二甲基二甲醚五氟苯甲酰氯&& &7-乙基-10-羟基喜树碱&& &苯并咪唑-5-甲酸甲酯间硝基肉桂酸&& &鲁比特康&& &2,6-二溴人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1价格售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时传真或E-mail致销售人员,我们将尽快为您解决。&&
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电话:021-
传真:021-
主营产品:elisa试剂盒、进口elisa试剂盒、TSZelisa试剂盒
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上海研生生化试剂有限公司是一家专业经营生化试剂、仪器、实验室耗材的公司, 代理许多国际先进水平的高科技产品,包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、诊断等多个研究及应用领域。我们努力将欧美专业生产厂家的具有国际先进水平的产品推荐给各类研究人员;另一方面也非常重视自主产品研究和开发,推出了一系列具有竞争力的产品和服务。同时国家对于生物行业的发展给予了极大的重视,更多地侧重于科研的投入。公司客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司的服务和业务 在同行获得一致好评。 立足于生命科学领域,全力打造高品质生物科技产品链和技术服务链,也具备丰富的管理经验,同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想,更有责任感,是您科研道路上值得信赖的伙伴。公司的理念是:以诚信为本,努力打造优质品牌,为您提供全方位的售中、售后服务。
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金牌企业:MKN-1贴壁细胞
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产品名称:
ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
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自买家付款之日起 7 天内发货
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产品详细说明
&MKN-1人胃癌贴壁细胞
【细胞货号】 C0884
&选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀小心勿造成气泡,使温度与成分均一,MKN-1贴壁细胞减少沉淀的发生。勿直接由&20℃直接至37℃ 解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清包括不同批次对细胞的影响。【细胞缩写】& MKN-1细胞
【细胞名称】 MKN-1(人胃癌细胞)
【背景资料】 见细胞说明书
【细胞来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
【代次】 P4
【规格】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
&细胞冻存及复苏基本知识普及:
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。
除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜DMSO,可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。&
采用&&慢冻快融&&的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内-196℃。【细胞数】& 1*10(6)
【生物安全级别】 1
【生物体】 人
【组织来源】 胃
【细胞形态】 上皮细胞样
【细胞特性】 贴壁
【细胞活力】 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【细胞检测】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
&细胞常规培养传代流程请严格遵照无菌操作
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞注意把握消化时间,通常控制在1-2min
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,MKN-1贴壁细胞贴壁松动时不建议消化到细胞漂浮去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液每周2-3次,待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意:如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养
1、收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时
2、贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养
3、如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。【培养条件】& 详见细胞说明书
【传代方法】 建议1:2-1:3 两天换液一次
【冻存条件】 详见细胞说明书
【主要文献】 请具体查阅相关发表文章
常见培养细胞预防污染的有效措施:
体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:
(1)添加抗生素:各种抗生素性质不同,对各种微生物的作用也不同,联合应用比单用效果好,预防性应用比污染后使用好(但迄今尚无对抗支原体特效抗生素)。但反复使用抗生素会使微生物产生耐药性,且对细胞本身也有一定影响,因此为避免诱导抗药细菌,应定期更换培养系统中的抗生素,或尽可能不用抗生素处理。
(2)从物品、用品消毒灭菌着手:细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在取样检菌一周后确认无菌才能使用。同时,在无菌过滤操作中,随着滤过体积的增大,滤膜破损的可能性增加,故应选择最后过滤的液体进行检测。定期对二氧化碳培养箱进行消毒。具体操作:75%的酒精搽拭培养箱后,使用可移动的紫外灯至少消毒30min,加入高压灭菌过的超纯水于培养箱水槽中保持湿度。也可配制300ml的饱和硫酸铜加3L 灭菌超纯水混合成硫酸铜溶液加入水槽中。
(3)从操作者做起:①进无菌室前要彻底洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用 75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞,同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶,开瓶后的培养液应保持斜位,避免直立,以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口,培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话,咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时,应专管专用,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去,以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面,用消毒水浸泡的纱布擦拭台面。
(4)防止细胞交叉污染:所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备,一旦怀疑发生交叉污染,可做细胞遗传学方面的鉴定,如发现原有的细胞遗传物发生改变,可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行。
(5)无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比,最大的优点是便宜,而且可以稀释50倍用,而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。C0758 L929:小鼠肺成纤维细胞 ,公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系(三千多种),提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!
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