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多核巨细胞
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　　多核巨细胞在类上皮细胞之间散在多核巨细胞，结核结节之多核巨细胞又称为Langhans巨细胞。这种巨细胞体积很大，直径达40～50&m.胞核形态与类上皮细胞相似，数目可达几十个，甚至百余个，排列在细胞周边部呈马蹄形或环形，胞浆丰富。Langhans巨细胞系由类上皮细胞融合而成；类上皮细胞首先伸出胞浆突起，然后胞体相互靠近，最后经胞浆突起的融合使类上皮细胞融合在一起形成多核巨细胞。但融合的机制尚有待阑明。　　多核巨细胞还常见于不易被消化的较大的异物（如手术缝线、石棉纤维等）和代谢产物（如痛风的尿酸盐结晶）周围。许多巨噬细胞围绕在刺激物周围并互相融合，形成由多数巨噬细胞质膜包围刺激物的巨大吞噬体，胞核散在分布于巨细胞胞浆中。这种多核巨细胞称为异物巨细胞，多见于异物刺激引起的慢性肉芽肿性炎症。　　多核巨细胞移动的速度十分缓慢，约每分钟0.04～1&m，而且随细胞核数目增多，移动速度更慢。巨噬细胞融合成多核巨细胞后，其胞膜的Fc和C3b受体数目也大大减少。因此，多核巨细胞的功能与类上皮细胞相似，可能分泌一些杀伤生物性病原体的物质并参与组成隔离宿主组织与细菌的屏障结构医学`教育网搜集整理。
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尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测对婴儿
2016年19期目录
&&&&&&本期共收录文章20篇
　　【摘要】 目的：研究探索在诊断婴儿巨细胞病毒感染中采用尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测的诊断价值，评估其临床意义。方法：选择2014年2月-2015年5月本院收诊的90例疑似巨细胞病毒感染的婴幼儿为研究对象，采用尿液巨细胞病毒DNA和血清巨细胞病毒特异抗体对患儿进行检测，比较单一检测及联合检测与治疗前后患儿检测结果。结果：尿液巨细胞病毒DNA检测的阳性率58.89%（53/90）、特异性62.22%（56/90）与血清巨细胞病毒特异抗体检测阳性率51.11%（46/90）、特异性61.11%（55/90）比较差异均无统计学意义（P>0.05）；联合检测的阳性率78.89%（71/90）、特异性91.11%（82/90）与两种单一检测比较差异均有统计学意义（P<0.05）；治疗后，患儿尿液巨细胞病毒DNA和血清巨细胞病毒特异抗体含量均低于治疗前（P<0.05）。结论：在诊断婴儿巨细胞病毒感染中采用尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测的临床效果理想，值得推广应用。 中国论文网 /6/view-7462326.htm　　【关键词】 巨细胞病毒； 尿液巨细胞病毒DNA； 血清巨细胞病毒特异抗体； 诊断价值 　　【Abstract】 Objective：To study the diagnostic value of exploring the use of CMV DNA in urine and serum of CMV-specific antibody detection in the diagnosis of cytomegalovirus infection in infants， to assess its clinical significance.Method：From February 2014 to May 2015 in our hospital received 90 cases of suspected diagnosis of cytomegalovirus infection in infants for the study，they were given the urine CMV DNA and CMV-specific serum antibody detection in children.The results of a single test and combined two detection methods were compared with treatment of children before and after.Result：The positive rate of CMV DNA detection in urine was 58.89% （53/90），specificity was 62.22% （56/90） and specificity of serum antibody positive rate of CMV was 51.11%（46/90），specificity was 61.11%（55/90） showed no significant difference（P>0.05）.The positive rate of CMV DNA in urine and serum of CMV-specific antibody detection was 78.89% （71/90），and specificity was 91.11%（82/90），compared with two single species detection methods detect，the differences were statistically significant（P<0.05）.After treatment，CMV DNA and serum of CMV-specific antibody were lowher than before treatment（P<0.05）.Conclusion：In the diagnosis of infantile cytomegalovirus infection cytomegalovirus DNA over urine and serum antibody detection of CMV-specific clinical results，should be widely applied. 　　【Key words】 Cytomegalovirus； Urine cytomegalovirus DNA； CMV-specific antibodies in serum； Diagnostic value 　　First-author’s address：Fanyu District Shawan People’s Hospital of Guangzhou，Guangzhou 511400，China 　　doi：10.3969/j.issn.16.19.034 　　巨细胞病毒（CMV）感染是一种人类感染性疾病，在我国感染率在逐年上升。感染主要发生在婴幼儿期，但巨细胞病毒感染的患者无论有无症状都会在其体液中被检测出来[1]。婴幼儿感染时身体系统会发生多处病变，引起严重的并发症，危及患儿的生命。为探索在诊断婴儿巨细胞病毒感染中采用尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测的诊断价值，分析应用价值，本文选取2014年2月-2015年5月收诊的90例疑似巨细胞病毒感染的婴幼儿为研究对象，报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 选取2014年2月-2015年5月本院收诊的90例疑似巨细胞病毒感染的婴幼儿。所有患儿均符合巨细胞病毒感染诊断方案的诊断标准，患儿中男61例，女29例；年龄1～14个月，平均（2.12 ±0.65）个月；本研究经本院伦理委员会批准进行，且家属均已在知情同意书上签字。
　　1.2 检测方法 　　1.2.1 尿液巨细胞病毒DNA检测 具体步骤：在灭菌离心管中加入1000μL干净的尿液，并将离心管置于离心机上以50 r/s的速度离心10 min，分离澄清尿液和尿渣后，往尿渣中注入50μL的DNA提取液，手握紧反应管摇动使提取液和尿渣混合均匀，将其放于达到100 ℃的仪器上进行10 min的干浴，干浴结束后进行5 min的离心操作，操作结束取上层清液进行由广州达安基因诊断有限公司生产的DA-7600 PCR仪扩增操作。扩增的靶区域为患儿巨细胞的AD-169基因组中早期转录调节蛋白IE1基因中的高保守非编码区，并在该区域置入特异性的荧光探针和引物。将取好上清液放到DA-7600 PCR仪及配套的试剂盒的反应管中，然后在扩增仪中进行扩增操作，93 ℃下2 min预变性45 s； 　　55 ℃ 45 s，10个循环左右；93 ℃ 30 s、45 s，30个循环。操作结束后，将数据输入电脑进行计算和分析，将基因拷贝数/mL作为尿液巨细胞病毒DNA的单位，尿液巨细胞病毒DNA拷贝数/mL超过500表示患儿检测结果为阳性。 　　1.2.2 血清巨细胞病毒特异性抗体检测 具体步骤：真空管中加入从患儿空腹状态下抽取的2 mL的静脉血液，盖上盖子上下倒置使其充分混合，并将其置于离心机上以50 r/s的速度离心5 min，离心结束后放于低温-80 ℃中备测，使用美国雅培公司生产的化学发光仪进行血清巨细胞病毒特异性抗体检测，检测值index大于0.5时表示患儿检测结果为阳性[2]。 　　1.2.3 两种方法联合检测 将两种单独检测方式联合对患儿的血清和尿液进行检测，具体步骤同上。 　　1.2.4 阳性结果判断 尿液巨细胞病毒DNA检测操作结束后，将数据输入电脑进行计算和分析，将基因拷贝数/mL作为尿液巨细胞病毒DNA的单位，尿液巨细胞病毒DNA拷贝数/mL超过500表示患儿检测结果为阳性。血清巨细胞病毒特异性抗体检测时，检测值index大于0.5时表示患儿检测结果为阳性。 　　1.3 治疗方法 通过两种检测方式检测确诊为巨细胞病毒感染的患儿，采用10 mg/（kg?d）剂量的更昔洛韦进行治疗，服用2周。 　　1.4 观察指标 比较单一检测及联合检测的检查结果，并对比分析治疗前后患儿尿液巨细胞病毒DNA含量、血清巨细胞病毒特异抗体含量。 　　1.5 统计学处理 采用PEMS 3.1统计学软件对数据进行分析，计量资料以（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料的比较采用 字2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 两种方法单一检测及联合检测结果比较 尿液巨细胞病毒DNA检测的阳性率、特异性与血清巨细胞病毒特异抗体检测阳性率、特异性比较差异无统计学意义（P>0.05）；联合检测的阳性率、特异性与两种单一检测比较差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。 　　2.2 治疗前后患儿检测结果比较 治疗前后患儿尿液巨细胞病毒DNA含量比较差异有统计学意义（P<0.05）；治疗前后患儿血清巨细胞病毒特异抗体含量比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。 　　3 讨论 　　巨细胞病毒（CMV）感染是在婴幼儿时期没有明显的临床表现的一种人类感染性疾病，我国感染率在逐年上升，特别是在发展中国家最多。感染主要发生在婴幼儿期，巨细胞病毒感染的患者无论有无症状都会在其体液中被检测出来。通过检测血清巨细胞病毒特异抗体和尿液巨细胞病毒DNA能对患儿是否被巨细胞病毒感染起到很好的辅助诊断作用。两种检测方式结合在一起检测阳性率高且检测的特异性强，能极大程度地诊断出被巨细胞感染的患儿，及时给予治疗，减少患儿并发症和后遗症的发生，在临床上逐渐被广泛应用。 　　本研究显示，两种单一检测及联合检测结果比较，尿液巨细胞病毒DNA检测的阳性率58.89%（53/90）、特异性62.22%（56/90）与血清巨细胞病毒特异抗体检测阳性率51.11%（46/90）、特异性61.11%（55/90）比较差异无统计学意义（P>0.05）；联合检测的阳性率78.89%（71/90）、特异性91.11%（82/90）与两种单一检测比较差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗前后患儿检测结果比较，治疗前患儿尿液巨细胞病毒DNA含量（6.11±2.99）拷贝数/mL与治疗后尿液巨细胞病毒DNA含量（2.28±1.12）拷贝数/mL比较差异有统计学意义（P<0.05）；治疗前血清巨细胞病毒特异抗体含量（3.01±0.22）U/mL与治疗后血清巨细胞病毒特异抗体含量（1.32±0.16）U/mL比较差异有统计学意义（P<0.05）。结果表明，两种检测方式在单一进行检测时各自检测的阳性率和特异性无明显差异，但将两种检测方式同时应用，其检测出的阳性率和特异性明显高于单一检测，准确率明显提高，减少了患儿可能引起的并发症和后期可能发生的后遗症，给患儿一个健康的未来，也给患儿的家属减轻不必要的经济负担和精神压力，提高了我国优生优育的质量。 　　与治疗前相比，患儿治疗后的血清巨细胞病毒特异抗体含量和尿液巨细胞病毒DNA含量均明显下降，表明通过治疗可以治愈患儿的巨细胞感染，早期诊断和早期对患儿进行治疗对患儿治愈有很重要的作用。分析原因：血清巨细胞病毒特异抗体检测的特点是特异性强、灵敏度高、能快速检测、自动化等优点，尿液巨细胞病毒DNA检测可以快速检测并且能建立扩增曲线，能很好地通过曲线检测DNA等优点，进而两种检测方式结合在一起对患儿进行检测时能提高阳性检测率和特异性。巨细胞感染早期患儿临床症状表现不明显，早期检测早期进行治疗，对治愈患儿的巨细胞感染有很重要的意义与袁浩等[17]研究结果相似。 　　巨细胞病毒是一种传播途径为胎盘或生殖道进行感染等方式的疱疹病毒，绝大部分患儿感染后身体呈亚临床期或潜伏感染期。并且患儿身体内会产生特异性抗体，当抽取患儿空腹时静脉血清单份稀释达到（1/8）以上，通过化学发光法对血清巨细胞病毒特异抗体进行检测时对诊断患儿是否受巨细胞感染有很重要临床应用价值[20]。但是由于患儿机体的免疫能力较弱因而产生的特异性抗体较弱导致检测过程中检测的阳性率较低并且特异性不够灵敏，进而易出现假阴性，使得少数患儿没有被检测出来，特异性虽较强但敏感程度较弱，易导致后期发现的时候治疗起来棘手。对患儿洁净的尿液进行实时荧光定量PCR法（FQ-PCR）时，能对患儿基因的各种表达进行定量分析，可以进行一个点的突变分析及等位基因进行分析，也可以对单核酸的多态性进行分析，但先要在基团置入特异性荧光探针和引物。因而通过实时荧光定量PCR法检测尿液巨细胞病毒DNA时能很好的通过荧光显示，检测是否患儿被巨细胞病毒感染[20]。因体内免疫能力未受抑制时潜伏的病毒未能活化增殖使得检测的阳性率偏低并特异性较弱进而使得检测存在一定的假阴率，造成少数患儿未能被检测出来，错过患儿的早期治疗，增加后期治疗费用。但相比于血清巨细胞病毒特异性抗体检测，尿液检测具有取样便捷、对患儿没有机体创伤等优点。进而两种检测方式联合进行检测时相比于单一检测能提高检测的阳性率且增强特异性，两种检测方式联合检测是临床上检测巨细胞感染的一种较好的方法，值得推广应用。
　　综上所述，在诊断婴儿巨细胞病毒感染中采用尿液巨细胞病毒DNA联合血清巨细胞病毒特异抗体检测的临床效果理想，早期诊断出来并进行治疗对治疗巨细胞感染具有重要意义，值得推广应用。 　　参考文献 　　[1]徐莉莉，牟文凤，杨丽，等.婴儿血液、尿液及母乳中病毒 DNA 检测在诊断人巨细胞病毒感染中的应用[J].中国当代儿科杂志，）：748-750. 　　[2] Poto?njak I，Te?ovi? G，Kuna A T，et al.Unusually difficult clinical presentation of an infant suffering from congenital Cytomegalovirus （CMV） infection combined with alpha 1-antitrypsin （A1AT） deficiency[J].Biochemia Medica，）：396-402. 　　[3]陈平洋，谢宗德，王涛.更昔洛韦治疗新生儿先天性巨细胞病毒感染的临床研究[J].中国医师杂志，）：502-504. 　　[4] Gompels U A，Larke N，Sanz-Ramos M，et al.Human cytomegalovirus infant infection adversely affects growth and development in maternally HIV-exposed and unexposed infants in Zambia[J].Clin Infect Dis，）：434-442. 　　[5]赵巍松，刘伶，杨飞.母乳及婴儿血液、尿液人巨细胞病毒 DNA 检测在婴儿 HCMV 感染中的应用[J].中国实验诊断学，）：. 　　[6] Chen F H，Samson K T.Clinical applications of real-time PCR for diagnosis and treatment of human cytomegalovirus infection in children[J].Pediatr Allergy Immunol，）：210-215. 　　[7]叶剑荣，袁利群，陆建国.FQ-PCR技术在儿童尿液巨细胞病毒检测的临床应用[J].实用预防医学，）：114-115. 　　[8] Pascale M，De Girolamo A，Visconti A，et al.Use of itaconic acid-based polymers for solid-phase extraction of deoxynivalenol and application to pasta analysis[J].Anal Chim Acta，（2）：131-138. 　　[9]肖燕，林雯，刘勤，等.特发性血小板减少性紫癜巨核系祖细胞巨细胞病毒感染的临床研究[J].中华儿科杂志，）：346-349. 　　[10] Nijman J，Van Loon A M，De Vries L S，et al.Urine viralload and correlation with disease severity in infants with congenital or postnatal cytomegalovirus infection[J].J Clin Virol，）：121-124. 　　[11]米荣，张巍，张雪峰，等.婴儿期巨细胞病毒感染对生长发育影响的前瞻性研究[J].中华儿科杂志，）：385-389. 　　[12]梁玲芳，吴捷，孙梅.婴儿巨细胞病毒感染致听力受损研究进展[J].国际儿科学杂志，）：475-478. 　　[13] Kimber Lin D W，LIN C Y，Sanchez P J，et al.Effect ofganciclovir therapy on hearing in symptomatic congenital cytomegalovirus disease involving the central nerve system： arandomized，controlled trial[J].J Pediatr，（1）：16-25. 　　[14]石卫武，周美英，许成新.婴幼儿巨细胞病毒感染不同检测方法的比较[J].中国卫生检验杂志，）：. 　　[15] Retière C，Prod'homme V，Imbert-Marcille B M，et al. 　　Generation of Cytomegalovirus-specific human T-Lymphocyte clones by using autologous B-Lymphoblastoid cells with stable expression of pp65 or IE1 proteins：a tool to study the fine， specificity of the antiviral response[J].Journal of Virology，）：. 　　[16]徐锦，陈剑平，丁韵珍，等.尿巨细胞病毒定量检测在巨细胞病毒感染诊断中的意义[J].实用儿科临床杂志，）：596-597. 　　[17]袁浩，唐曾，周毅峰.巨细胞病毒的3种检测方法在诊断小儿巨细胞病毒感染中的评价[J].现代预防医学，）：. 　　[18] De Lonlay-Debeney P，Von Kleist-Retzow J C，Hertz-Pannier L，et al.Cerebral white matter disease inchildren may be caused by mitochondrial respiratory chain deficiency[J].J Pediatr，（2）：209-214. 　　[19]陈平洋，谢宗德，王涛.更昔洛韦治疗新生儿先天性巨细胞病毒感染的临床研究[J].中国医师杂志，）：502-504. 　　[20]刘成程，钱东萌，王斌，等.利用ELISA与荧光定量PCR技术筛查新生儿巨细胞病毒感染水平及探讨与肝脏损害的相关性[J].现代生物医学进展，）：. 　　[21]梨平，覃亚斌，祝兴元，等.婴幼儿巨细胞病毒感染器官损害与基因型[J].中国感染控制杂志，）：81-87.
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我的小孩六个月了,第一次发烧,前囟门有点隆起,住院一周,烧已退,前囟门已恢复如从前,可在快出院前验出他的谷饼转氨酶和谷草转氨酶达90,其他各类肝炎均没有都是正常的,而且乙肝表面抗原体是阳性,血液里没有发现巨细胞病毒,尿液里验出有巨细胞病毒.孩子的精神状态也很好,但我本人上网查看了些巨细胞病毒的资料,巨细胞病毒危害很大,所以想问专家目前我应该为孩子做些什么?包括饮食等等
婴儿感染乙肝病毒与乙肝表面抗原及乙肝e抗原双阳性的孕母关系最大。主要通过母婴垂直传播，生后水平传播。亦与生活密切接触的亲属、保姆是乙肝病毒无症状携带者或急
慢性乙型肝炎患者有关。临床及流行病学研究表明与下列因素有关：
(1)与怀孕妇女感染乙肝病毒的时间有关：妊娠早、中期患乙型肝炎者，出生后婴儿的感染率仅为6．2％；孕妇在妊娠晚期至产后两月内患乙型肝炎时，其婴儿感染率可达70％。
(2)与孕妇乙肝e抗原、乙肝e抗体有关：乙肝病毒无症状携带者母亲血清中乙肝e抗原阳性者所生婴儿90％以上要感染乙肝病毒；而乙肝e抗体阳性母亲的婴儿仅有10％一２0％发生感染。
(3)与母亲血清乙肝病毒脱氧核糖核酸阳性有关：血清中乙肝病毒脱氧核糖核酸与乙肝e抗原的指标相平行，孕妇乙肝病毒脱氧核糖核酸阳性者其乙肝e抗原必定阳性；而乙肝e抗原阳性时，乙肝病毒脱氧核糖核酸83％阳性。凡血清中乙肝病毒脱氧核糖核酸>80皮克／lo微升的孕妇所生的子女，即使接受了乙肝疫苗及乙肝免疫球蛋白注射，婴儿还是全部 感染了乙肝病毒。
(4)与种族地区有关：抽样测定乙肝表面抗原阳性者中的乙肝。抗原，发现美国人的乙肝表面抗原及乙肝e抗原双阳性率为4．7％；法国人为3．6％一6．6％；意大利人为5％；西
班牙人为5．5％；台湾人为39％；香港人为54．1％；上海人为31．3％；印度人为56．1％；新加坡人为50％。其中亚洲黄种人 的乙肝e抗原阳性期可持续长达20余年。英国妈妈乙肝表面抗原阳性39例所生婴儿无一例表面抗原转阳者；而中国妈妈例所生子女一年内有9例(64．3％)表面抗原转阳。提示与遗传因素可能亦有关。
(5)孕妇血中乙肝表面抗原滴度越高，婴儿感染率也越高：孕妇血中滴度为1：32的9例，其婴儿有2例(22．2％)转 阳；孕妇血1：128的16例，其婴儿有8例(50％)转阳；孕妇血1：256的23例，其婴儿有15例(65．0％)转阳；孕妇血l ；512的9例中，其婴儿有8例(88．8％)表面抗原转阳。
(6)与婴儿首次感染乙肝病毒的年龄有关：凡在1月龄以 内受感染的婴儿，日后78％可成为持续乙肝表面抗原携带 者；而大于1岁的受染者，乙肝表面抗原携带率小于20％；成人感染后转成慢性者在5％以下。
(７)父亲对婴儿的传播：凡父亲是乙肝表面抗原携带者兼有乙肝e抗原阳性时，子女的感染率可达85．?％，成为乙肝表面抗原携带者为42．8％；但父亲乙肝e抗体阳性时，其子女感染率为25％，而未见成为乙肝表面抗原携带者的婴儿
提问者对回答的评价(星)：
巨细胞病毒感染无症状者无需治疗。有症状者应根据临床表现给予相应的对症治疗和抗病毒治疗。先天性CMV感染者，不论有无症状都应长期随访，定期检查智力和听力。1、抗病毒治疗：抗生素和丙种球蛋白对巨细胞病毒感染治疗无效。有报道5-氟脱氧尿嘧啶核苷、阿糖胸苷、阿粮糖苷、疱疹净、丙氧岛苷等可暂时抑制尿排病毒。2、对症治疗：肾上腺皮质激素可减轻症状，尤其适用于先天性感染和心内膜炎患者。出现某一系统症状时应及时对症处理，若出现神经系统症状，虽经治疗，仍常遗留永久性后遗症。3、病毒存在于唾液，飞沫，粪便，尿，乳汁等分泌物和排泄物中，有传染性。
在人群中感染巨细胞病毒是很普遍的，大多数发生在儿童时期：一是小儿从娘胎里受到了巨细胞病毒感染；一是小儿先天免疫功能异常受到了这种病毒感染后患病。这两种感染以胎内感染最严重，可引起胎儿先天性畸形和智力障碍。
我国是巨细胞病毒感染的高发区，一般人群的感染率高达90％左右，儿童至12岁时感染率已高达80％。感染病毒的患儿是惟一的传染源。此病毒可以从鼻咽分泌物、尿、宫颈和阴道分泌物、乳汁、精液及血液中排出。传染途径与乙型肝炎病毒基本相似。大多数儿童感染巨细胞病毒后并无症状，但是婴幼儿易引起黄疸性肝炎，胎内感染后出生的新生儿可患有黄疸、肝肿大、肺炎等。以前所称的婴儿肝炎综合征，很多也是由这种病毒所致。
由巨细胞病毒引起的肝炎可采用中西医治疗。中药用蒲公英、广郁金、赤芍、大黄、茅根、茯苓、车前草等煎汤，每日一剂。单味药有甘草甜素，有增强免疫功能的作用。冬虫夏草可补肺益肾，改善肝功能。西药用磷甲酸有一定效果。
要给患儿富含蛋白质、维生素的饮食，如牛奶、豆制品、新鲜蔬菜、水果等。另外，我国已生产出巨细胞病毒疫苗，对预防该病有效。
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