中山大学学报医学科学版
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中山大学学报医学科学版
2014年&35卷&2期
刊出日期：
陈树达,陈子怡,方子妍,周珏倩,李泽,潘小平,周列民*
普朗尼克P85与维拉帕米对苯妥英钠脑靶向分布的比较
【目的】 比较表面活性剂普朗尼克P85和维拉帕米对传统抗癫痫药物苯妥英钠的脑靶向分布作用?【方法】 健康雌性Sprague-Dawley大鼠,25只,周龄9~10周,体质量190~240 g,随机分为5组,每组5只?具体为PHT组?+VPM组?+0.1%P85组?+1%P85组?+10%P85组?PHT组静脉注射苯妥英钠;+VPM组静脉注射苯妥英钠前30 min腹腔注射维拉帕米;+0.1%P85组?+1%P85组和+10%P85组静脉注射的苯妥英钠用相应浓度的普朗尼克P85溶液配制?给予苯妥英钠后分别在不同时间点取大脑微透析液和血液,最后处死大鼠分离肝脏和肾脏组织?高效液相色谱法检测各样本中苯妥英钠的浓度,评估苯妥英钠的脑靶向分布情况? 【结果】 +10%P85组?+1%P85组?+0.1%P85组和+VPM组与PHT组比较,脑组织间液和血浆苯妥英钠的曲线下面积比值分别提高113.5%?50.4%?21.9%和7.2%,各组之间两两比较差异均有统计学意义?+VPM组苯妥英钠药物浓度肝血比明显升高,与其余各组之间差异有统计学意义?各组苯妥英钠药物浓度肾血比之间比较,差异无统计学意义?【结论】 相对于维拉帕米,普朗尼克P85可明显的提高苯妥英钠进入大脑的剂量,而且不会提高苯妥英钠在肝脏和肾脏的累积分布,具有脑靶向输送作用?
2014&Vol. 35&(2):&161-168
李佳成,郭燕珊,屠 美,吴 昊,郑力恒,张嘉晴*
胚胎干细胞条件培养基对人脂肪干细胞增殖及分化能力的影响
【目的】 探究小鼠胚胎干细胞(ESC)条件培养基(CM)对人类脂肪干细胞(ADSC)增殖速率的促进作用,并研究CM对ADSC表面标志表达以及成骨成脂分化的影响?【方法】 胶原酶I消化法提取人ADSC?培养2代后分普通组?40%CM组和40%ES组,分别以普通ADSC培养液?普通ADSC培养液加40%CM和普通ADSC培养液加40%ES培养液处理?3代后,用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测实验前后细胞表面标志的表达;诱导其向成骨成脂分化并鉴定?【结果】MTT法检测,40%CM组MTT吸光值显著高于ADSC组(P = 0.012 & 0.05)?流式检测结果发现经CM培养后的ADSC,其阳性表达细胞表面标志CD29?CD44?CD73?CD90?CD105表达量无变化,阴性表达的表面标志CD31?CD45表达量降低,HLA-DR表达量增加?经过油红O染色和茜素红S染色,成脂成骨分化形成的脂滴,钙结节数目没有明显区别? 【结论】 ES细胞CM可以促进ADSC体外扩增,且不影响其细胞表面标志的表达及分化能力?
2014&Vol. 35&(2):&169-176
徐 燕,朱 姝,焦 举,邹 琼,邹旻红,李小平,张 勇*
高成瘤性前列腺癌细胞亚克隆细胞株在反基因治疗中的应用
【目的】 选用高成瘤性前列腺癌细胞亚克隆细胞株LNCap1-luc构建人类前列腺癌裸鼠移植瘤模型,应用于反基因治疗,探讨该细胞株进行抗肿瘤研究的价值?【方法】 采用皮下接种法制备24只荷LNCap1-luc前列腺癌移植瘤裸鼠模型,随机分为3组:三螺旋形成寡核苷酸(TFO)治疗组?序列对照寡核苷酸(SCO)非特异性对照组?生理盐水(NS)阴性对照组?瘤内注射给药6周,测量移植瘤质量和体积,计算抑瘤率?实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测肿瘤组织AR mRNA表达;免疫组化法检测AR,PSA,Ki67蛋白的表达;TUNEL法检测细胞凋亡?【结果】 TF0治疗组的抑瘤率为63.16%,AR mRNA的表达水平(39.16 & 3.21)%,Ki67的阳性表达率(25.43 & 2.01)%,凋亡指数(35.76&2.35)%,与对照组相比差异有统计学意义(P & 0.05)?TFO组AR?PSA蛋白的表达水平低于对照组?【结论】 TFO能有效抑制LNCap1-luc移植瘤的生长;LNCap1-luc细胞株为前列腺癌抗肿瘤药物的研究提供了新的细胞模型,具有良好的应用价值?
2014&Vol. 35&(2):&177-181
毕良宽,周 楠,刘 成,陆福鼎,许可慰*
肾癌分泌IL-8激活ERK促进间充质干细胞迁移的机制
【目的】 拟探讨肾癌内IL-8的分泌水平及其对骨髓间充质干细胞(MSC)的调节机制,探讨其在归巢中的作用机制?【方法】 ELISA法检测肾癌患者血清以及肾癌细胞分泌的IL-8;免疫组织化学和RT-PCR检测MSC表面IL-8受体表达;迁移实验观察IL-8对MSC的迁移作用;Western blotting 法检测IL-8对MSC内ERK的激活作用?【结果】研究发现正常人群的血液中IL-8为210.4 pg/mL,而肾癌患者血液中IL-8升高至526.7 pg/mL,肾癌细胞株786-O和ACHN均可以分泌IL-8;在MSC细胞中表达IL-8的受体基因CXCR2,肾癌细胞分泌IL-8可以通过CXCR2受体促进MSC迁移?进一步研究发现,IL-8刺激后可以明显提高MSC内ERK的磷酸化水平?【结论】肾癌可以分泌IL-8 能够通过CXCR2受体激活MSC内ERK信号通路,进而促进MSC迁移归巢,这可能是肾癌促进MSC归巢的重要机制之一?
2014&Vol. 35&(2):&182-186
杨 超,吴传新,孙
航*,龚建平,刘 杞
丙酮酸乙酯抑制脓毒症时HMGB1释放的分子机制
【目的】 探讨丙酮酸乙酯(EP)抑制脓毒症巨噬细胞表达和释放HMGB1的相关分子机制?【方法】将小鼠腹腔巨噬细胞株RAW264.7分为LPS和LPS+ EP组,分别采用100 ng/mL LPS和100 ng/mL LPS+ 5 mmol/L EP刺激,于刺激后不同的时间点,Western blot检测细胞总蛋白内p-p38MAPK?CBP的含量变化以及胞质和胞核内NF-&B的含量;用免疫细胞化学?激光共聚焦显微镜观察培养细胞内p-p38MAPK?NF-&B和CBP的变化;Real-time PCR检测培养细胞HMGB1的mRNA水平,ELISA检测培养上清HMGB1的蛋白含量?【结果】 LPS和LPS+ EP刺激后2~6 h,细胞内p-p38MAPK蛋白含量逐渐增加,但LPS+ EP组p-p38MAPK蛋白含量明显低于LPS组;NF-&B在细胞质内的含量逐渐减少,而在细胞核内的含量逐渐增多,而LPS+ EP组NF-&B从胞质到胞核的移位明显弱于LPS组;细胞内CBP的蛋白含量逐渐增加,但LPS+ EP组明显低于LPS组?随着p-p38MAPK?NF-&B和CBP等蛋白的变化,LPS和LPS+ EP刺激后24?36和48 h,LPS+ EP组细胞内HMGB1 mRNA表达比LPS组明显减少;在LPS和LPS+ EP刺激后18~48h,LPS+ EP组培养上清中HMGB1蛋白含量明显低于LPS组?【结论】 EP通过抑制单核-巨噬细胞内的信号分子p-p38MAPK?NF-&B?和 CBP的表达,从而抑制LPS诱导单核-巨噬细胞表达和释放HMGB1?
2014&Vol. 35&(2):&187-193
许庆芳,侯〓巍,郑〓跃,刘〓晨,龚子鉴,陆〓春,赖维*
SP600125抑制UVA激活皮肤成纤维细胞JNK通路
的最佳浓度
【目的】&研究抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞JNK通路的最佳SP600125浓度,为研究JNK信号通路在光老化中的作用机制奠定基础? 【方法】 原代培养取自儿童包皮的皮肤成纤维细胞?用CCK-8法结合荧光倒置显微镜研究不同剂量UVA和不同浓度SP600125及两者联合对皮肤成纤维细胞活性和形态的影响,以选择非细胞毒性的UVA剂量和SP600125浓度?再用Western-blot检测UVA辐照后不同时间点皮肤成纤维细胞中磷酸化c-Jun(P-c-Jun)表达以确定其被诱导表达的时间点?最后用Western-blot 检测不同浓度SP600125对UVA上调的P-c-Jun表达的抑制?【结果】 UVA和SP600125分别辐照细胞和孵育细胞时,UVA&10 J/cm2和SP &mol/L均能保持细胞活性在90% 以上?10 J/cm2 的UVA辐照不同浓度SP600125孵育的细胞时,&800 nmol/L的SP600125孵育的细胞活性在90% 以上;1 &mol/L的SP600125使细胞活性明显下降至67.1%,镜下见部分细胞皱缩?碎裂?死亡;2 &mol/L的SP600125使细胞活性进一步下降至7.6%,镜下见绝大部分细胞变形?碎裂?死亡?Western-blot结果显示P-c-Jun在UVA辐照后0.75 h?1.5 h均较0 h升高,3&h后恢复至0 h水平?200 ~ 800 nmol/L SP600125呈剂量依赖性地抑制UVA上调的P-c-Jun表达,差异有统计学意义? 【结论】&低于常用浓度的200 ~ 800 nmol/L SP600125即可抑制UVA激活的皮肤成纤维细胞的JNK通路?JNK通路可能在UVA辐照的皮肤成纤维细胞中起抗凋亡作用?
2014&Vol. 35&(2):&194-199
刘〓岩,潘云峰*,方霖楷,郭〓欣,吴云婷
uPAR在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的功能及机制
【目的】 采用RNA干扰(RNAi)技术阻断类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)基因的表达,探讨uPAR基因沉默后对RA-FLS功能产生的影响及有关机制?【方法】 收集行关节置换术或滑膜清理术的RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA-FLS?通过阳离子脂质体转染的方法,转染体外合成的特异性uPAR-siRNA;利用荧光定量PCR法和Western blotting法检测uPAR沉默效果;CCK8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞技术检测细胞周期改变;Transwell趋化小室测定细胞的迁移能力;Western blotting技术分析沉默uPAR基因对RA-FLS中PI3K/AKT通路的影响?【结果】 uPAR-siRNA能有效阻断RA-FLS中uPAR基因在mRNA和蛋白水平上的表达?沉默uPAR基因后,细胞48?72?96 h增殖抑制率分别为(17.51 & 2.27)%?(28.62 & 4.82)%?(22.91 & 5.78)%,显著高于对照组(P & 0.05);uPAR-siRNA干扰后,被阻滞于G0/G1期的细胞增加,而S和G2/M期的细胞减少;Transwell趋化小室结果显示:与对照组相比,特异性干扰组的RA-FLS迁移细胞数(35 & 11)相比空白对照组(138 & 21)和NC-siRNA组(136 & 19)明显减少(P & 0.05);转染后的RA-FLS相对于对照组,PI3K?AKT?GSK3&的磷酸化水平显著降低(P & 0.05)?【结论】 uPAR在RA-FLS的增殖?周期及迁移中起重要作用,这可能与其对PI3KAKT通路的激活有关?
2014&Vol. 35&(2):&200-206
蒋〓源1,韩永智1,孙〓建2*
microRNA抑制黑色素瘤VEGF基因表达及对细胞增殖和
侵袭能力的影响
【目的】 研究外源性靶向microRNA对恶性黑色素瘤细胞血管内皮生长因子(VEGF)基因表达的抑制作用,以及对癌细胞增殖和侵袭迁移能力的影响?【方法】根据VEGF基因序列人工设计合成4对microRNA干扰片段,构建质粒真核表达载体,分别为:X-26-1-3?X-26-2n-1?X-26-3-2和X-26-4-4,测序分析鉴定插入序列的完整性;脂质体法将该四个重组表达载体转染黑色素瘤细胞株SKmel-28,RT-PCR检测转染细胞中VEGF基因的mRNA表达变化,Western Blot检测microRNA对VEGF蛋白表达水平的调控效应,明确抑制效果最为显著的microRNA干扰序列?MTS和EDU法分别检测靶向VEGF的microRNA对SKmel-28生长的抑制作用,流式细胞仪观察转染对肿瘤细胞凋亡的影响,Transwell检测细胞侵袭和迁移能力变化?【结果】测序分析证实4个重组体插入片段的碱基序列均完全正确,成功转染SKmel-28细胞后,均能显著抑制肿瘤细胞VEGF mRNA和蛋白的表达,与对照组相比有统计学差异(P & 0.05)?抑制效应最强的重组载体是X-26-2n-1;MTS和EDU检测显示,SKmel-28细胞转染X-26-2n-1后,细胞增殖受到明显抑制,与对照组相比有统计学差异(P & 0.05),增殖抑制效应具有时间依赖性,细胞侵袭和迁移能力也显著减弱(P & 0.01);流式细胞仪检测显示肿瘤细胞早期凋亡率?晚期凋亡率?总凋亡率也显著高于对照组(P & 0.01)?【结论】 外源性靶向VEGF的microRNA能够显著降低黑色素瘤细胞SKmel-28 VEGF基因和蛋白的表达水平,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的体外增殖和侵袭迁移能力?
2014&Vol. 35&(2):&207-214
马 娟,余莲英,廖山婴,王蓓蓓,沙卫红,王启仪,刘庆华*
胰十二指肠同源基因1在胃癌中的表达及对胃癌生物学
行为的影响
【目的】 明确PDX1基因在胃癌中的表达模式,探讨PDX1表达上调对胃癌细胞增殖和凋亡的影响,从而揭示PDX1在胃癌发生发展中的作用?【方法】 免疫组化法检测胃癌组织芯片的PDX1蛋白表达,RT-PCR和免疫印迹法检测3株胃癌细胞(AGS?SGC7901?BCG823)PDX1 mRNA表达;构建PDX1正义表达载体,瞬时转染胃癌细胞,免疫印迹法检测转染后PDX1?Ki-67?PCNA?Caspase3的表达,同时检测转染后胃癌细胞的增殖指数和凋亡指数?筛选PDX1稳定表达株,评价胃癌细胞伤口愈合?克隆形成?移植瘤形成等生物学行为?【结果】 胃癌组织芯片包括171例腺癌,12例黏液腺癌,6例印戒细胞癌,5例未分化癌,7例恶性间质瘤,1例类癌,8例正常胃黏膜组织?PDX1蛋白在正常胃粘膜组织中腺上皮细胞的胞浆及胞核中高表达,胃癌组织中PDX1蛋白则表达下降甚至缺失(P & 0.05);肿瘤分化级别越高,PDX1表达随之下降(P & 0.05);与淋巴结无转移组比较,淋巴结转移组PDX1表达显著降低(P & 0.05)?与正常对照相比,PDX1 mRNA和蛋白在胃癌细胞中表达微弱?瞬时转染PDX1正义表达载体后,PDX1表达明显上调,胃癌细胞增殖相关蛋白Ki67和PCNA下降,增殖指数显著下降;凋亡蛋白Caspase3被激活,cleaved- Caspase3被诱导表达,凋亡指数显著增加?与空质粒对照组比较,PDX1稳定过表达抑制了体外胃癌细胞的伤口愈合率以及克隆形成率和体内裸鼠移植瘤形成率(P & 0.05)? 【结论】 PDX1基因在胃癌组织和细胞中表达下调,与癌组织淋巴结转移与分化程度有关;PDX1基因可能在胃癌发展过程中可能起着重要作用?
2014&Vol. 35&(2):&215-223
宋冰冰,陈〓沐,黄涛祥,雷〓霓,王〓欣,曹〓飞,周丰琦,朱永红*
雌激素诱导泌乳素瘤动物模型的建立及稳定性的观察
【目的】 通过注射苯甲酸雌二醇建立大鼠泌乳素瘤动物模型,并鉴定肿瘤模型的稳定性?【方法】 取40只雌性Wistar大鼠随机分成对照组(A组)和用药组:注射苯甲酸雌二醇8周组(B组)?注射苯甲酸雌二醇12周组(C组)和撤除苯甲酸雌二醇4周组(D组),每组10只?每隔15 d记录大鼠的体质量变化,并在相应的时间处死大鼠称量垂体质量并观察成瘤情况质量?取各组垂体进行HE染色和泌乳素免疫组化来鉴定泌乳素瘤?选取1只大鼠做标记,分别在注射苯甲酸雌二醇8?12周以及撤除苯甲酸雌二醇4周后做MRI,通过动态观察垂体大小的变化来鉴定泌乳素瘤模型的稳定性?【结果】苯甲酸雌二醇诱导组大鼠体质量明显增长缓慢,并且在2周左右开始出现脱毛现象,B?C和D组致瘤率分别为70%?100%和100%?苯甲酸雌二醇诱导组HE染色细胞排列紊乱,出现核深染细胞,血管丰富?免疫组化鉴定为泌乳素瘤,泌乳素阳性表达细胞明显多于对照组?MRI显示随着苯甲酸雌二醇诱导时间的增长,垂体体积逐渐增加,且在撤除苯甲酸雌二醇后垂体体积并未缩小,证明泌乳素瘤模型的稳定性? 【结论】 腹腔注射苯甲酸雌二醇诱导大鼠泌乳素瘤不仅诱导率高,而且具有很好的稳定性?
2014&Vol. 35&(2):&224-229
罗嘉全, 黄路,刘会文,韩智敏,邹学农,曹凯*
hMSC成骨分化相关lncRNA的筛选和初步鉴定
【目的】 筛选和初步鉴定人骨髓间充质干细胞(hMSC)成骨分化相关的长链非编码RNA (lncRNA)? 【方法】 利用Refseq, UCSC knowngenes, Ensembl ,H-invDB 7.0, RNAdb 2.0, NRED生物软件分析成骨基因相关的lncRNA,综合获得可能的成骨相关lncRNA;3例骨髓标本来源于行腰椎手术患者,密度梯度法分离扩增hMSC后,分成骨诱导组和对照组,地塞米松?维生素C?&-甘油磷酸钠诱导hMSC成骨分化,通过ALP测定及钙结节茜素红染色进行成骨诱导鉴定;qRT-PCR验证hMSC成骨分化前?后差异表达的lncRNA,以及成骨分化前?后差异表达的基因BMP1?MSX1?Runx2?Smurf-1?ALP?【结果】通过上述生物软件综合分析发现3个成骨基因MSX1?BMP1和Smurf1周围存在相关lncRNA?4个lncRNA (AK129811 ?AK024937 ?AK096529?uc003ups)与成骨基因Smurf-1相关;2个lncRNA(AF289591和uc003xbe)与成骨基因BMP1相关;1个lncRNA(AK056311)与成骨基因MSX1相关?ALP检测示:与对照组细胞相比,成骨诱导组细胞1周ALP值最高,达到(16.82 & 1.64)nmol/min,随着诱导时间的延长,ALP值逐渐降低,3周降至(8.37 & 1.01)nmol/min?钙结节染色显示hMSC成骨诱导分化2周后胞外开始出现少量钙结节,随着诱导时间延长钙结节数量逐渐增加,成骨诱导至第3周钙结节最多,定量测定钙质量浓度达(716 & 49)mg/mL?RT-qPCR结果显示绝大部分lncRNA在hMSC成骨分化过程中表达均下调,其中2个与Smurf-1相关lncRNA (AK096529和uc003ups)与成骨诱导前相比,存在显著性下调?1个与MSX1相关的lncRNA(AK056311)与成骨诱导前相比,也存在显著性下调?同时,成骨分化基因Runx2?ALP表达显著性上调,MSX1?Smurf-1表达显著性下调?【结论】 结合既往研究结果分析:AK096529和uc003ups可能通过正向调控Smurf1,促使Smurf1下调,减少Runx2的降解,继而促进hMSC的成骨分化?
2014&Vol. 35&(2):&230-236
陈章燕,原冬冬,王
韧,黄〓菲,黎尚荣*
缝隙连接增强肿瘤坏死因子-&的肝细胞毒性
【目的】 观察缝隙连接(GJ)功能改变对肿瘤坏死因子-&(TNF-&)肝细胞毒性的影响?【方法】 使用3种不同的方法:(1)GJ抑制剂预处理;(2)高低密度接种细胞;(3)小分子RNA转染抑制缝隙连接蛋白32(Cx32)表达等3种不同的方法抑制GJ的功能,观察不同浓度TNF-&作用不同时间后对肝细胞毒性的影响?【结果】 TNF-&的肝细胞毒性呈浓度和时间依赖性;抑制剂预处理后,TNF-&的肝细胞毒性明显降低(P & 0.01);低密度接种细胞(细胞间无GJ形成)时,TNF-&的肝细胞毒性较高密度接种细胞(细胞间有GJ形成)明显降低(P & 0.01);抑制Cx32的表达后,TNF-&的肝细胞毒性明显降低(P & 0.01)? 【结论】 抑制由Cx32组成的GJ的功能后,TNF-&的肝细胞毒性明显降低,Cx32的表达对于TNF-&的肝细胞毒性作用具有重要的作用?
2014&Vol. 35&(2):&237-241
周祁娜,蒋 华,周贤惠, 杨毅宁,许国军,汤宝鹏*
导管消融去肾交感神经抑制星状神经节刺激诱发的心房颤动
【目的】探讨经导管射频消融去肾交感神经对交感神经过度激活介导的心房颤动的影响和心房电重构机制?【方法】 16只家犬随机分为对照组(n = 8)和去肾交感神经(RSD)组(n = 8),RSD组进行经导管射频消融去肾交感神经术,对照组行不消融肾交感神经的假手术,通过左侧星状神经节电刺激(LSG) +快速心房起搏(RAP)3 h建立交感神经介导的房颤犬模型?【结果】 LSG刺激联合RAP使左心耳?右心房?左上肺静脉?左下肺静脉部位的房颤诱发率升高,有效不应期缩短(ERP),有效不应期离散度增大,均较基础值有统计学差异(P & 0.05),RSD组消融后各部位房颤诱发率降低?ERP显著延长?ERP离散度显著缩小,与对照组相比有统计学差异(P & 0.05)?LSG刺激联合RAP引起各检测部位的R-R间期?SDNN缩短,LF?HF和LF/HF降低,均较基础值有统计学差异(P & 0.05);RSD可逆转LSG刺激联合RAP引起的这些心率变异性改变,与对照组相比具有统计学差异(P & 0.05)?【结论】 交感神经过度激活使房颤易于诱发?恶化急性心房电重构,RSD可有效降低房颤的诱发率,抑制心房电重构?改善心脏自主神经功能,提示RSD对交感神经过度激活介导的房颤的发生具有潜在抑制作用?
2014&Vol. 35&(2):&242-249
孙文娟,唐倩*,黄南楠,任力,侯思润
双层胶原支架与人牙周膜细胞的体外生物相容性
【目的】 研究双层胶原支架与人牙周膜细胞的体外生物相容性?【方法】 组织块培养法培养原代人牙周膜细胞?MTT法测胶原支架不同浓度浸提液的细胞毒性?将人牙周膜细胞与支架材料三维培养,通过扫描电镜?组织切片观察其复合情况,并检测三维培养后细胞碱性磷酸酶(ALP)?羟脯氨酸(HYP)的分泌情况? 【结果】 不同浓度材料浸提液毒性评级为0 ~ 1级?细胞与支架复合培养后,细胞在支架上黏附?增殖良好,支架材料内部细胞分布均匀,且致密层可起屏障膜作用,阻挡细胞进入支架内部?细胞与胶原支架复合培养24 h后,细胞的ALP活性与对照组无明显差异(P & 0.05),复合培养48?72 h后,细胞的ALP活性高于对照组(P & 0.05)?复合培养24?48?72 h后,细胞的HYP活性均高于对照组(P & 0.05)?【结论】 双层胶原支架具有良好的生物相容性,可进一步应用于牙周组织工程的研究?
2014&Vol. 35&(2):&250-255
蒋玉洁1,曾 勉1*,许元文2,何婉媚1,陈瑞滔1,李 斌1
慢性阻塞性肺疾病患者血浆ADAMTS-13变化及其与
血栓前状态关系
【目的】&探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13)水平及其与COPD血栓前状态?炎症反应的关系?【方法】 采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定67例在我院呼吸内科门诊及住院COPD患者(其中40例AECOPD,27例稳定期COPD)?21例健康对照者(11例吸烟健康者,10例非吸烟健康者)入组当天外周血血管性血友病因子(vWF)和ADAMTS-13水平,白介素6(IL-6)水平及血栓前状态的各指标(D-二聚体?纤维蛋白原)?【结果】 AECOPD组?稳定期COPD组?吸烟健康组及非吸烟健康组血浆vWF水平分别为(12.5 & 1.9)?(9.8 & 1.5)?(5.5 & 1.9)及(3.8 & 1.3)pg/mL,呈依次下降趋势,协方差分析示各组间差异有统计学意义(P & 0.001);血浆ADAMTS-13水平分别为(261 & 59)?(396 & 74)?(668 & 138)及(913&131)ng/mL,呈依次上升趋势,协方差分析示各组间差异有统计学意义(P & 0.001)?多重线性回归分析显示血浆ADAMTS-13与血浆vWF(偏相关系数-0.661,P & 0.001)?D-二聚体(偏相关系数-0.357,P = 0.028)?纤维蛋白原(偏相关系数-0.402,P = 0.004)及IL-6(偏相关系数-0.275,P = 0.001)均呈负相关?【结论】 COPD患者血浆ADAMTS-13水平下降,全身炎症反应和吸烟可能是其原因之一,血浆ADAMTS-13水平下降或许是COPD患者血栓前状态形成的机制之一?
2014&Vol. 35&(2):&256-260
温星桥*,陶奕然,蔡 燚,高 新,王 喻,黄文涛,吴杰英,苏嘉锐,李 骏
单孔腹腔镜技术在肾上腺病损切除术中的应用
【目的】 回顾分析腹膜后途径单孔腹腔镜肾上腺病损切除术的治疗体会,并与传统腹腔镜肾上腺病损手术作对照分析?【方法】收集23例接受了单孔腹腔镜肾上腺病损切除术的患者作为研究组,以同一术者主刀的22例传统腹腔镜肾上腺手术病例作对照组,共45例?记录手术时间?术中出血量?术后止痛药物剂量?肿瘤平均最大径线等手术指标,比较2组间的差异?【结果】 两组手术均顺利完成,均无重大并发症发生?单孔腹腔镜组有一例患者需增加一枚曲卡完成手术?单孔与传统腹腔镜组平均手术时间分别为(105 & 43) min和(102 & 37) min(P﹥0.05),术中平均出血量5 ~ 100(35 & 30) mL 和10 ~ 120(30 & 31) mL (P﹥0.05)平均术后止痛药物剂量分别为(1.2&1.1)和(2.1&1.4)吗啡当量(P﹤0.05),切除肿瘤平均最大径线分别为1.3 ~ 3.8(2.7 & 0.8) cm 和1.2 ~ 4.5(2.8 & 0.9)cm (P﹥0.05)?【结论】 单孔腹腔镜技术可应用于治疗较小体积的肾上腺肿瘤,并取得与传统腹腔镜相近的效果,并在切口美容?疼痛等方面有一定优势?
2014&Vol. 35&(2):&261-265
徐玲玲,陈红珊*,杜敏联,马华梅,李燕虹,苏 喆,陈秋莉
肥胖儿童血清omentin-1和vaspin水平及其与脂代谢的关系
【目的】 探讨肥胖儿童血清omentin-1?vaspin水平及其与脂代谢的关系?【方法】 59名儿童参加本研究,肥胖组30人,年龄(9.43 & 2.02)岁,对照组29人,年龄(10.3 & 2.2)岁,两组年龄无显著差异(P & 0.05)?采用ELISA法检测血清omentin-1和vaspin水平?采用生化检测测定空腹血脂和空腹血糖?采用化学发光法检测空腹胰岛素?计算每个个体的体质量指数(BMI)?体质量指数Z积分(BMI-SDS)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)?【结果】 肥胖组的BMI(24.8 & 3.4)较对照组(16.2 & 3.2)显著升高(P = 0.000)?与对照组相比,肥胖组具有较高的胆固醇(TC)?低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)?空腹胰岛素(FINS)?HOMA-IR水平(P 均 & 0.05)?相关因素分析发现:肥胖组血清omentin-1水平与HDL-C呈正相关(rs = 0.405,P =0.026);肥胖组女童血清omentin-1水平与TC((rs = 0.614,P & 0.05)呈正相关?肥胖组女童血清vaspin水平与TC(rs = -0.621,P = 0.031)?LDL-C(rs = -0.678,P = 0.015)呈负相关?【结论】 肥胖儿童血清omentin-1水平及肥胖女童血清vaspin水平与脂代谢关系密切,血清vaspin水平还可能与性别及青春分期有关?
2014&Vol. 35&(2):&266-269
李 瑾,付 莉,劳国娟*,杨 川,任 萌,严 励
苯磺酸左旋氨氯地平对2型糖尿病合并高血压患者血小板聚集及MMP-9/MMP-2表达的影响
【目的】 观察苯磺酸左旋氨氯地平对2型糖尿病合并高血压患者血小板聚集率(PAG)的影响,并探讨其血小板抑制作用是否通过改变血小板释放MMP-9和MMP-2的途径实现?【方法】 体外测定32例2型糖尿病合并高血压患者的血小板经苯磺酸左旋氨氯地平处理前后聚集率的变化,同时用ELISA法测定MMP-9和MMP-2表达的变化?【结果】 经苯磺酸左旋氨氯地平处理后,2型糖尿病合并高血压患者血小板的聚集率从(47.77 & 11.92)%下降至(40.78 & 13.97)%,P & 0.05,抑制率为(13.50 & 25.23)%;MMP-2的表达从(22.27 & 17.52)ng/mL下降到(19.85&17.09)ng/mL,MMP-9的表达从(61.12&30.95)ng/mL下降到(59.92 & 32.78)ng/mL,P & 0.05? 【结论】&苯磺酸左旋氨氯地平可抑制2型糖尿病合并高血压患者血小板聚集,其抑制作用不是通过改变血小板释放MMP-9和MMP-2的途径实现?
2014&Vol. 35&(2):&270-273
陶莹1,牛刚*,张祖威,荆永萍,何力,杨文生,骆婕
高铁电磁辐射对女乘务员卵巢功能的影响
【目的】 调查普通列车和高速列车生育年龄女乘务员卵巢功能相关情况,探讨高铁电磁辐射对女性生殖内分泌系统的影响?【方法】在广州铁路集团按照入选原则随机抽取普通列车组和高速列车组女乘务员各100名,进行女性健康调查,测定血清基础E2?FSH?LH水平以及B超检查卵巢体积及窦卵泡数,按年龄和工作时限分组进行统计学分析?【结果】两组的月经状况?基础性激素水平?B超检查结果有轻微差异,但无统计学意义;高速列车组不同工作时限女乘务员月经状况?基础性激素水平?B超检查结果均在正常范围内,组间比较无统计学差异?【结论】 高铁电磁环境和不同暴露程度的电磁辐射未对女乘务员卵巢功能造成影响,但由于干扰因素过多,仍需进一步完善调查设计,进行大样本的流行病学调查,或通过动物实验佐证?
2014&Vol. 35&(2):&274-277
陈 妤,田 虹,黄晓丽,王 省,杨英慧,吴 斌*
肝硬化合并非静脉曲张性上消化道出血临床分析
【目的】 总结分析肝硬化合并非静脉曲张性上消化道出血的临床特征?【方法】 回顾性分析我们科日至日上消化道出血患者(&18周岁)464例,将肝硬化非静脉曲张性上消化道出血患者共60例的临床资料,与同期肝硬化患者食管静脉曲张破裂出血患者158例的临床资料进行对比研究,同时与非肝硬化非静脉曲张上消化道出血患者246例的内镜特点进行比较,并对3组的临床预后进行分析?【结果】肝硬化非静脉曲张出血占同期肝硬化并上消化道出血的比率为27.5%,肝硬化静脉曲张破裂出血占同期肝硬化并上消化道出血的比率为72.5%,肝硬化非静脉曲张出血占同期上消化道出血的比率为12.9%?肝硬化非静脉曲张上消化道出血临床表现以呕吐咖啡样物为主,肝硬化静脉曲张破裂出血临床表现以呕血为主;肝硬化非静脉曲张上消化道出血人群患高血压的概率明显高于肝硬化静脉曲张破裂出血人群;在非静脉曲张上消化道出血内镜分析中,肝硬化患者以十二指肠溃疡的发生率最高,肝硬化组比非肝硬化组更易患胃溃疡及食管溃疡?【结论】 肝硬化患者出现非静脉曲张性出血并非罕见,以十二指肠溃疡的发生率最高,肝硬化患者更易患胃溃疡及食管溃疡,及时的内镜检查对治疗的决策至关重要?
2014&Vol. 35&(2):&278-283
王继辉,韩洪瀛,张〓明,温盛霖*
&睡眠伴侣辅助治疗对慢性失眠患者行为疗法依从性及疗效的影响
【目的】 探讨睡眠伴侣辅助治疗对慢性失眠患者行为疗法依从性及疗效影响?【方法】 对象为64例门诊慢性失眠患者,研究组和对照组各32例?两组患者均给予睡眠卫生教育和行为疗法,疗程4周,研究组睡眠伴侣辅助治疗?在基线?2周?4周末采用匹茨堡睡眠质量指数量表(PSQI)评定患者睡眠状况?每天记录睡眠日志,主要指标包括入睡潜伏期(SL)?夜间觉醒时间(WASO)?总睡眠时间(TST)?睡眠效率(SE)?在治疗末评估患者对行为疗法5种主要成分的依从程度?【结果】 重复测量的方差分析显示,研究组和对照组PSQI总分?SL?SE?WASO在治疗前后不同时间之间的差异有统计学意义(P & 0.05),时间因素和分组因素存在交叉效应 (P & 0.05),研究组的改善优于对照组,Cohen d效应量分别为0.76?0.62?0.93?0.70?研究组对&固定起床时间[(82.83 & 9.87)vs(75.14 & 11.99)]?限制卧床时间[(79.21 & 8.80)vs(71.28 & 7.21)]?不在床上做其他事[(81.03 & 11.43)vs(74.73 & 12.43)]&的依从性高于对照组,差异有统计学意义(P & 0.05)?【结论】 睡眠伴侣辅助的行为疗法,不仅可提高患者的依从性,并且有助于获得更好的疗效?
2014&Vol. 35&(2):&284-288
欧 冰,罗葆明,杨海云,智 慧*
声速测算技术与BI-RADS相结合对乳腺肿物诊断价值的初探
【目的】 初步评估声速测算技术与乳腺影像学报告及数据系统(BI-RADS)诊断标准相结合对乳腺肿物良恶性的诊断价值?【方法】回顾性分析经手术病理证实的75例女性患者共99个乳腺肿物?先进行常规超声检查,并用BI-RADS诊断标准判断其良恶性;接着应用声速匹配技术测量肿物的声速匹配值(ZSI),进而得到病灶的声速(SV);以病理结果作为金标准,构建受试者的工作特征曲线,比较两种方法以及二者结合后的诊断价值? 【结果】 SV判断乳腺良恶性肿物的最佳临界点为1 561 m/s,ROC曲线下面积为0.842;BI-RADS诊断标准ROC曲线下面积为0.818,与SV之间的差异没有统计学意义(P & 0.05)?BI-RADS诊断标准的敏感性高于SV,特异性?准确性较SV低(P & 0.05)?两种方法结合后诊断的特异性及准确性均较BI-RADS时增高(P & 0.05)?【结论】 BI-RADS诊断标准与SV相结合对乳腺肿物良恶性的判断有一定的帮助?
2014&Vol. 35&(2):&265-299
林楚岚,江桂华,吴重重,赵 红,蔡 伟,高长青,杨 立*
标准化肾肿瘤影像解剖特征与术式选择的相关性
【目的】 评价基于肾肿瘤影像解剖特征的RENAL评分系统临床应用的稳定性,并探讨该评分系统与局限性肾肿瘤患者术式选择的相关性?【方法】 回顾性分析2011年8月至2012年8月共225例在解放军总医院行手术治疗的局限性肾肿瘤患者的术前CT及临床资料,由三名影像科医师采用RENAL评分系统分别进行总分和R(最大径)?E(外生性/内生性)?N(与肾窦的距离)?A(腹/背侧)?L(沿肾纵轴的关系)和h(是否与肾蒂血管接触)各变量评分,采用统计学方法比较三名观察者评分的一致性?依据总评分将患者分为为低?中?高分三组;根据术式分为根治术和部分切除术;分析总分及各变量分值与手术方式选择的相关性?【结果】三名观察者的总分评分及各变量分值一致率均达90%以上(P & 0.001)?RENAL评分高低与术式选择相关,采用后腹腔镜下肾部分切除术式患者的总分低于后腹腔镜肾根治切除术式的患者(P & 0.001)?患者年龄和评分项目R?N?L?h与术式选择相关;R?N?L得分越高,肿瘤与肾蒂血管(h)有接触,越倾向于采用后腹腔镜肾根治切除术式,反之,则倾向于采用后腹腔镜下肾部分切除术式(P值分别为0.000,0.034,0.034和0.012)?而评分项目E?A和患者的性别?肿瘤的患侧均与术式选择无相关性(P & 0.05)?【结论】 基于肾肿瘤影像解剖特征的RENAL评分系统稳定性良好,评分高低与手术方式有显著相关性?
2014&Vol. 35&(2):&289-294
李庆玲1, 郭若汨2, 李全喜2, 骆众星2, 张建生2, 陈燕铭1, 单 鸿2*
320 排动态容积CT血管造影对评估糖尿病眼动脉硬化的应用
【目的】 探讨320排动态容积CT血管造影对评估糖尿病眼动脉硬化的临床价值?【方法】对30例非糖尿病患者和22例糖尿病患者进行320排动态容积CT血管造影检查,对所有扫描原始数据行最大密度投影(MIP)?容积再现(VR)?多平面重建(MRP)及曲面重建(CPR),观察眼动脉的管腔情况?【结果】 320排动态容积CT血管造影检查可以清晰显示眼动脉形态?走行,以及病变的部位?情况?22例糖尿病患者血管呈不同程度粥样硬化表现?其中颅内段轻度狭窄6侧,中度狭窄4侧;视神经管内段轻度狭窄2侧,中度狭窄4侧;眶内段轻度6侧,中度狭窄2侧?斑块性质以钙化斑块或混合斑块为主?【结论】 320排动态容积CT血管造影可以对糖尿病眼动脉硬化进行无创?准确?快捷的评估,具有重要的临床价值?
2014&Vol. 35&(2):&300-303
张冠荣,麦韵屏,林爱华,周立峰,符力*
体检人群非酒精性脂肪肝与心血管危险因素关系的
病例对照分析
【目的】 探讨心血管危险因素及其交互作用?聚集特征对非酒精性脂肪肝(NAFLD)的影响?【方法】 采用病例对照研究方法,首先整群抽取在广东省人民医院参加体检的12家单位中35~74岁的受检者进行调查,内容包括问卷调查?体格?血液生化和肝脏超声检查?然后以确诊的所有NAFLD患者作为病例组,并选择与病例工作单位和性别相同?职业和年龄相近的所有非NAFLD者为对照组?应用二分类logistic回归分析心血管危险因素及其聚集特征与NAFLD的关系 ,相加效应模型分析影响因素间的交互作用?【结果】 纳入分析1191人,其中病例组353例,对照组838例;调整人口学因素后,NAFLD与肥胖?高血糖?血脂异常?血压升高?丙氨酸氨基转移酶异常?高尿酸及总胆固醇水平呈正关联,与规律运动呈负关联;体质指数(BMI)与空腹血糖间交互作用的相对超额危险度?交互作用归因比和交互作用指数(95% CI)分别为7.562(1.496 ~ 13.628)?0.636(0.434 ~ 0.839)和3.278 (1.720 ~ 6.248);与无心血管危险因素者相比,危险因素聚集数为1~5者患NAFLD的OR值(95% CI)分别为2.04(1.17 ~ 3.54)?6.18(3.62 ~ 10.55)?10.45(5.95 ~ 18.35)?28.94(13.97 ~ 59.98)和33.68(11.47 ~ 98.92),呈明显的剂量效应关系?【结论】 心血管危险因素与NAFLD密切相关,且危险因素聚集可增加NAFLD患病风险;BMI和空腹血糖对NAFLD的影响可能存在正交互作用?
2014&Vol. 35&(2):&304-309
周旭辉,林 玲,高 樱,严超贵,李树荣,李子平*
心周脂肪与心房颤动的相关性
【目的】 探讨心周脂肪(EAT )与心房颤动(AF)发生的相关性?【方法】 用MDCT测量34例心房颤动患者和30例窦性心律患者(SR)的心周脂肪容积(EATV )?左心房&食管间隙脂肪厚度(LA-ESOFT)和左心房容积(LAV)?在所有患者中运用logistic回归模型,在调整了基线变量后分析EATV?LA-ESOFT和AF的相关性?【结果】 AF组患者LA-ESOFT(mm)较SR组增加(1.69 & 0.71 vs 1.06 & 0.70,P & 0.05);AF组患者LAV (mL)较SR组增大[140.0(101.5,170.5) vs 97.0(86.8,112.5),P & 0.05];AF组患者EATV(mL)较SR组增加(123.81 & 48.02 vs 103.64 & 35.40,P & 0.05)?在所有患者中运用Logistic回归模型,在调整了基线变量后,分析显示LA-ESOFT与AF发生相关(Odds Ratio:3.470;95% confidence interval:1.242-9.717)?【结论】 LA-ESOFT很可能是独立于年龄?体格指数和左心房增大与AF发生相关的危险因素?
2014&Vol. 35&(2):&310-314
唐旭华,周 晖,陈闻纳,杨雨清,章星琪,何定阳*
表现为先天性红皮病的Netherton综合征2例报道
【目的】报道2例罕见的表现为先天性红皮病的Netherton综合征?【方法】分析Netherton综合征患者的临床特征?治疗?预后,扫描电镜观察患者的毛发超微结构,SPINK5基因检测患者的突变位点?【结果】 临床均表现为新生儿期弥漫性红斑伴脱屑,经扫描电镜观察到竹节状发,SPINK5基因检测发现c.2423 C&T(p.Thr808Ile)纯合错义突变?弟(先证者)给予静脉用免疫球蛋白(IVIG),口服扑尔敏,局部外用喜辽妥?莫匹罗星软膏?糠酸莫米松乳膏,同时每日全身外用沐浴油和保湿剂等治疗,2周后红斑明显消退?鳞屑减少?姐因出生后未予母乳喂养引起营养不足等原因导致生长迟缓? 【结论】 临床上表现为先天性红皮病或湿疹样皮炎的患儿要考虑Netherton综合征的可能,扫描电镜找到竹节状发和SPINK5基因检测发现病理性突变即可确诊,皮损治疗方面以保湿?抗炎?防治感染为主,病情严重者可选择IVIG,早期给予营养支持可能避免生长迟缓?
2014&Vol. 35&(2):&315-320
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