原有900个细胞,一分钟后变为850 900 1800 1900,多久变为2000个

1000个卵原细胞与500个精原细胞如果全部发育成熟,受精后最多产生的合子数为(  )A.1000个B.2000个C.4000个D.500个
根据题意分析可知:1000个卵原细胞经减数分裂可产生1000个卵细胞,而500个精原细胞经减数分裂可产生2000个精细胞.因此,1000个卵原细胞与500个精原细胞如果全部发育成熟,受精后最多产生的合子数为1000个.故选:A.
为您推荐:
根据题意分析可知:1个卵原细胞经减数分裂可产生1个卵细胞,而1个精原细胞经减数分裂可产生4个精细胞;1个精子与1个卵细胞结合可形成1个受精卵.据此答题.
本题考点:
精子和卵细胞形成过程的异同;受精作用.
考点点评:
本题考查减数分裂的相关知识,意在考查学生的识记能力和判断能力,运用所学知识综合分析问题的能力.
扫描下载二维码关注今日:48 | 主题:462693
微信扫一扫
扫一扫,下载丁香园 App
即送15丁当
【求助】请问Lipofectamine2000使用高手:转染后多久加药物?
页码直达:
这个帖子发布于9年零31天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
加LIPO2000后,我选择4小时后换培养基.那大家是换液后多久加药进行研究的呢?(根据自己研究的不同,药物是不同的);先谢谢啦!
不知道邀请谁?试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
说明书上不是说的48-72小时后就可以了么?
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我是根据转的效率加药的
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
一般Lipofectamine 2000转染后4-6小时换液是指去除含有转染因子的培养液,避免其作用时间过长对细胞产生毒性,但是质粒或RNA转入细胞后仍需要一段时间才能真正观察到效应,一般来说是48-72小时后可以检测到mRNA和蛋白水平的变化。不太明白你说的加药是怎么回事,只能举个例子吧:比如做肿瘤细胞KB-A1的MDR基因的转染以抑制其对化疗药物的耐药性,在转染siRNA48-72小时后,可以检测MDR基因在mRNA和相应蛋白水平有无下调,并作药物敏感性试验,观察药物IC50的变化,或者进行其他生物学活性的检测。希望我的回答能对你有帮助!
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
首先感谢大家的热情回答!我理解说明书上的意思是48-72小时后是可以收获细胞的.不知是不是这样?我的意思是在转染后进行药物干预,我的药物是能和转染的质粒进行反应的,质粒中带有药物反应元件的.我的问题也就是在转染后具体何时进行药物干预?其后维持多久可以收获细胞?(当然是在72小时之内)
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我的理解是48小时转染后的细胞已经开始表达目的质粒,故应该在48小时后就是可以得到目的质粒,也就是可以加药干预了.至于加药干预多久收获细胞,当然是与你所用的药物的动力学,信息的传导途径以及质粒的性质等等有关的了.
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
Lipofectamine2000说明书上不是写着:在检测转基因表达前,将细胞在37?C CO2培养箱中孵育18-48小时吗???为何一定要等到48小时侯再给予干预或刺激???我是在24小时侯就把细胞拿来处理了,可以吗?质粒表达时间应该够了吗??谢谢!!!
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
zy_dalian 首先感谢大家的热情回答!我理解说明书上的意思是48-72小时后是可以收获细胞的.不知是不是这样?我的意思是在转染后进行药物干预,我的药物是能和转染的质粒进行反应的,质粒中带有药物反应元件的.我的问题也就是在转染后具体何时进行药物干预?其后维持多久可以收获细胞?(当然是在72小时之内)你对说明书的理解是正确的。对于你所说的药物干预,我认为你需要进行预实验摸条件,转染后什么时候转染的质粒表达量达到最高?如果质粒表达水平可测,找出时间浓度曲线,如果不可测,就做不同时间与质粒药物反应的效应的曲线,何时收获也是一样。通过预实验的优化,你才能找到最适当的加药时间和收获时间!希望我的意见能对你有帮助!
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我也想知道,多久合适?楼主有答案了么?
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园关注今日:48 | 主题:462693
微信扫一扫
扫一扫,下载丁香园 App
即送15丁当
【求助】请教,关于lipo2000转染效率低下的原因探讨
页码直达:
各位前辈、同学们,在这里想请教一下大家一些lipo2000转染的问题,我六孔板的lipo2000转染效率好低,转的平滑肌细胞,质粒是新提取的,lipo2000的量他建议10ul我用到5ul每孔,质粒我用到10ug每孔,做出来转染效率大概是20-30%,你们觉得可能是哪些原因呢?恳请大家多多指教!
不知道邀请谁?试试他们
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
细胞没有污染,个别孔的死细胞较多,总体来说细胞形态,状态还是可以的
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
实验步骤1.接种到六孔板中,60%左右同步化;2.溶液A:245ul opti-MEM+5ul lipo 2000(每孔);3.溶液B:无血清培养基+10ug质粒(定容到250ul每孔);4.A/B混合室温置20 min;5.六孔板中细胞用无血清培养基冲洗两遍后,加入2ml无血清培养基;6.A、B混合液逐滴加入孔中,摇动培养板混匀,置培养箱中6h;7.6h后洗两遍后更换正常培养基,培养48h后检测转染水平。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
我感觉步骤没问题,但是为什么你的Lipo 2000与 pDNA的比值是1:2呢?我记得protocol上给出的初始比值是2:1吧。另外转染效率随细胞系的变化而变化,对于你的细胞,是需要先寻找最佳转染试剂的。
微信扫一扫
广告宣传推广
政治敏感、违法虚假信息
恶意灌水、重复发帖
违规侵权、站友争执
附件异常、链接失效
关于丁香园& 【求助】 293T细胞用lipo2000转染后死亡很多
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
【求助】 293T细胞用lipo2000转染后死亡很多
信誉分 100
可用分 1821
阅读权限 255
注册 状态 离线
【求助】 293T细胞用lipo2000转染后死亡很多
我的293T细胞状态不算差,但是连续进行了2次试验,lipo2000转染后细胞都大量死亡,飘起来的很多,不知道大家有啥好的建议?先说说我的具体过程。我用12孔板种的,汇合度达到了90%,质粒1.5ug,lipo20003.75uL(1:2.5)溶于opti-MEM200ul,在转染6h后拿出来看,细胞贴的还是较多,可是一换正常培养基,细胞就出现大量飘起,(我加的很温柔的啊)第二天拿出来看发现飘起的更多了,一团一团的全都浮着。在荧光显微镜下看却发现GFP是转进去了的。目前怀疑是不是含血清培养基要先预热,但是之前师兄做也没预热啊,他都没事。不知道是何缘故,明天还要再做一次,希望各位能给点指点,O(∩_∩)O谢谢!
信誉分 100
可用分 5136
阅读权限 255
注册 状态 离线
脂质体的转染毒性是最大的,很明显,那么多的细胞死亡是由于转染的细胞毒性导致的。对于这一点我有两个建议,一个是减少DNA的用量,我一般做转染,对于任何细胞,只要是12孔板,一般都是用1ugDNA,这个量绝对够了。,因为质粒转染进入细胞的本质,和病毒感染没区别,质粒的各种元件会从宿主细胞内抢夺细胞机器大量开始转录翻译你的目的蛋白,在这个过程中会产生大量的没有正确折叠蛋白,这些异常折叠蛋白进一步引起ER stress导致细胞凋亡。因此你用DNA太多,本身就有细胞毒性。另外就是脂质体本身的毒性。事实上,对于293系的细胞系,最好用的是PEI这种东西。毒性小,转染效率高,一般对293系列的细胞系可以轻易达到80%。polyscience有粉末买,买回来后直接在分子纯度的水里配置成1ug/uL的溶液,和你的质粒按照1ug DNA/6ug PEI对293进行转染。
而且直接使用自制的PEI非常便宜,在293上远比商品化的脂质体要好。
另外,如果你们实验室确实钱多,不怕花钱,建议你取用Promega的FugenHD,那个转染效率比脂质体更好,而且毒性小,至于价格。。。。。。。。。。。也更高。。。。。。。。。
另外,你说漂浮的细胞有表到GFP,那个不一定是真的GFP,很多时候细胞死亡后会在荧光显微镜下有非特异性荧光。
UID 107975
信誉分 102
可用分 3691
阅读权限 255
注册 状态 离线
293T本来贴壁就不紧,很有可能是吹起来的
信誉分 100
可用分 1821
阅读权限 255
注册 状态 离线
更正一下,是293FT细胞。虽然它本来就贴不紧,也不至于几乎全部都吹起来了呀。con就是没转染的孔就没事哦。
信誉分 102
可用分 5663
阅读权限 255
注册 状态 离线
我们实验室转染后换液一般都预热,而且我也用脂质体2000转染,死亡细胞很少,所以建议你换液前将培养液预热30min-1h。我们还用另一种转染试剂,invitrogen公司的lipofectamine reagent 和Plus Reagent,这两个试剂必须搭配使用,我们做过预实验,它对细胞的毒性要比脂质体2000小的多,转染效率也高,你可以试试
信誉分 100
可用分 1821
阅读权限 255
注册 状态 离线
谢谢你,给了这么详细的解答。我已经做完了,也成功了,主要改进了两个地方,第一,换液时一定要用预热过的培养基,第二,细胞铺板的密度要够高,至少90%。呵呵,很感谢你。
信誉分 100
可用分 1821
阅读权限 255
注册 状态 离线
我已经做完了,也成功了,主要改进了两个地方,第一,换液时一定要用预热过的培养基,第二,细胞铺板的密度要够高,至少90%。呵呵,很感谢你。
信誉分 100
可用分 9116
阅读权限 255
注册 状态 离线
我也要做转染了,不知道转染效率会怎么样。保佑!
UID 114495
信誉分 100
可用分 1538
阅读权限 255
注册 状态 离线
我也要做转染,可是也是老是容易飘
信誉分 101
可用分 7086
阅读权限 255
注册 状态 离线
求教,293,293T细胞染色体数目是多少,一样吗

我要回帖

更多关于 gsm850 900 1800 1900 的文章

 

随机推荐