肌钙蛋白Ⅰ的检测方法及研究进展_图文_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
肌钙蛋白Ⅰ的检测方法及研究进展
上传于||暂无简介
阅读已结束，如果下载本文需要使用1下载券
想免费下载本文？
你可能喜欢悬赏20爱心点
分享到微博
您还未登陆，请登录后操作！
您的举报已经提交成功，我们将尽快处理，谢谢！
答: 应用降压药物治疗原发性高血压需长期服药.因此,宜选用降压作用温和,缓慢,持久,副作用少,病人易于掌握而使用方便的口服降压药（如氢氯噻嗪,利血平,复方降压片等）作...
大家还关注
(window.slotbydup=window.slotbydup || []).push({
id: '2081942',
container: s,
size: '1000,60',
display: 'inlay-fix'探讨引起心肌肌钙蛋白Ｉ(cTnI)测定结果假阳性的原因。方法
测定非急性心肌梗塞的入院患者的血清cTnI，统计病种和计算假阳性率。结果
被确诊非心脏疾病患者有164例，其中22例cTnI为假阳性(男性有15例，女性有7例)，引起cTnI假阳性病种分布如下：消化道疾病1例(4.55%)、脑疾病5例(22.73%)、肾脏疾病2例(9.09%)、糖尿病3例(13.64%)、高血压5例(22.73%)、呼吸道疾病5例(4.55%)、肝脏疾病1例(4.55%)。结论 cTnI目前被认为是最具心脏特异性,且最有价值的心肌损伤指标之一，但其检测方法尚未标准化，循环中cTnI浓度的检测也受多种因素干扰，AMI和ＡＣＳ以外的疾患的cTnI的假阳性也值得临床注意。
【关键词】& 心肌肌钙蛋白Ｉ；急性心肌梗死；假阳性
　　Analysis of false positive results in determination of cardiact troponin I.
　　CHEN Bo, HUANG Hai-ying.
　　Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical College, Guangzhou 510260, Guangdong, P. R. China
　　Abstract：Objective& To discuss the cause of false positive results in determination of cardiac troponin I(cTnl).& Methods& The level of serum cTnI in non-AMI inpatients was determined and the cause of false positive rate of cTnI was analyzed.& Results& There 164 cases were confirmed to be non-AMI patients and 22 patients were false positive for cTnI including 15 males and 7 females.& The distribution of illness of the 22 false positives were as follows : 1 case with almentary canal ilness (4.55%),5 cases with brain illness (22.73%), 2 cases with renal illness (9.09%), 3 cases with diabetes (13.64%), 5 cases with hypertension (22.73%) ,5 cases with respiratory disease (4.55%)& and 1 case with liver disease (4.55%).& Conclusion& cTnI is one of the valuable indicator for early diagnosis of myocardial lesion. But this determinatng technique needs to be standardized. In addtion, there are a some confounding factors influencing the results of determination. Attention has slso to be paid to the false positive results in other diseases apart form AMI and ACS.
&&& Key words：cTnI; AMI; False positive
&&& 近年来大量的研究表明，心肌损伤后，心肌肌钙蛋白I（cTnI）是心肌损伤最特异、最敏感的血清标志物之一。由于它具有组织特异性强、宽阔的诊断窗口期、明确的诊断界限、快速的测定方法、血中出现早等优点，己被广泛地应用于临床诊断。最近，欧洲心脏病学会(ＥＳＣ)、美国心脏病学会(ＡＣＣ)对心肌梗死进行了重新定义［1］，将心肌肌钙蛋白(ｃＴｎI)增高作为诊断心肌损伤的最主要条件。但cTnI检测方法尚未标准化，cTnI浓度的捡测也受到某些疾病干扰，影响其在临床中更广泛的应用。为此，笔者特对心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)测定中的假阳性结果进行探讨分析。
　　1& 材料与方法
　　1.1& 材料
　　1.1.1& 实验对象&
　　2003年7月～2004年10月间来我院入住心血管科、呼吸科、肝胆科、骨科、内分泌科、血液科、泌尿科、神经内外科等的住院患者共164例。男性86例，年龄从26～89岁，平均年龄(67.7&12.5)岁；女性78例，年龄从26～94岁，平均年龄(71.2&11.0)岁。根据住院最终诊断为非心脏疾病。
　　1.1.2& 标本处理&
　　入院抽静脉血查cTnI 30min内出报告。
　　1.1.3& 试剂&
　　cTnI为中生北控生物科技股份有限公司生产的试剂盒，配有3种浓度的质控液。
　　1.2& 方法
　　1.2.1& cTnI采用固相免疫层析技术。原理是抗原抗体的免疫反应，人血清或血浆扩散通过附着胶体金包被的抗体的滤膜，与滤膜中的包被抗体结合。在检测区域内，cTnI－抗体复合物开始与附着在抗体固化带内的抗体接触，如果血清cTnI浓度大于0.3ng/ml，在检测区cTnI颗粒被抗－cTnI抗体捕获，并出现一条可见的紫红色条带。cTnI浓度超高，检测区出现色带的速度赶快，色带越深。胶体金粒包被的抗体扩散到对照区被第二抗体捕获形成对照区带。取人血清或血浆180ul加入检测卡孔内，15min内读取结果。阳性出现一条紫红色检测带和一条紫红色对照带，阴性只出现一条紫红色对照带，如果一条红色对照带没有出现表示cTnI检测卡失效，需要更换重做。根据色带深浅进行半定量报告（弱阳性、阳性和强阳性）。
　　1.2.2& cTnI阳性判断值分别为>0.3ｎｇ/ｍＬ为阳性。
　　1.2.3& 统计学方法&
　　利用Excel进行数据统计。
　　2& 结果
　　2.1& 被确诊非心脏疾病患者有164例，其中22例cTnI为阳性，男性有15例，女性有7例，阳性率13.41%（22/164），特异性为86.59%(142/164)。经卡方检验男女差异无统计学意义。
　　2.2& 22例cTnI阳性病种分布如下：消化道疾病1例(4.55%)、脑疾病5例(22.73%)、肾脏疾病2例(9.09%)、糖尿病3例(13.64%)、高血压5例(22.73%)、呼吸道疾病5例(4.55%)、肝脏疾病1例(4.55%)，其中脑疾病、高血压和呼吸道疾病cTnI假阳性最高各占5例(22.73%)，其次糖尿病3例(13.64%)。
　　3 讨论
　　心肌肌钙蛋白复合体是由Ｔ、Ｃ、Ｉ 3种亚单位组成，分别称为cTnＴ、cTnＣ、cTnＩ。TnＩ是肌钙蛋白和原肌球蛋白复合物的抑制蛋白，可抑制肌球蛋白和肌钙蛋白的作用而防止肌肉收缩。TnＩ存在三种不同的亚基，即慢收缩骨骼肌TnＩ、快收缩骨骼肌ＴｎＩ和心肌收缩ＴｎＩ(cTnI)，分别有3种不同基因编码，快、慢收缩骨骼肌ＴｎＩ与cTnI在氨基酸排列顺序上仅有4%相同，且后者比前者在Ｎ末端多31个氨基酸残基。前者分子量为19.8ｋＤａ，后者为22.5ｋＤａ，不同组织来源的TnＩ有组织特异性而无种属特异性，而cTnI仅存在于心房肌和心室肌中，且只有一种ＴｎＩ存在，胎儿、新生儿及成年人各阶段的cTnI均相同，所以cTnI是一种理想的心肌细胞特异性标志。在心肌细胞膜完整时cTnI不能透过细胞膜进入血循环，当心肌细胞因缺血缺氧而发生变性坏死时，CTnI可通过破损的细胞膜弥散进入细胞间质，随之进入血液循环中。由于cTnI分子量较小，并持续从变性细胞内逸出，心肌损伤后CTnI 3～6ｈ开始升高，14～20ｈ达高峰，血中可持续5～7d，故cTnI作为心肌损害的指标有较高特异性和敏感性。cTnI作为心肌轻度受损的指标，对急性心肌梗死(ＡＭＩ)、不稳定型心绞痛(ＵＡＰ)、围手术期心肌损伤等疾病的诊断、病情监测、疗效观察及预后评估都具有较高的临床价值［1］。
　　本次实验cTnI检测是用免疫层析原理快速定性检测血清中cTnI的含量，它是用一种独特的偶联有金标颗粒的单抗和多克隆抗体来识别标本中的cTnI，测定时间为15min，浓度>0.3ｎｇ/ｍＬ就可得阳性结果。由于其检测快速、方便，且无需任何其它设备，试剂稳定，易于保存，适用床边检测(ＰＯＣＴ) 等特点。虽然cTnI是反映心肌损伤的良好指标，但AMI和ＡＣＳ以外的疾患的cTnI的升高也值得注意。其中包括高血压、过度紧张、心律不齐、糖尿病、甲状腺机能不足、心肌炎、肺栓塞、慢性肌炎症、败血症、肾功能衰竭、接受血透析患者、药物中毒、血液恶性瘤、淀粉样变性、癌症化疗引起的心脏中毒病人中，都发现过cTnI的假阳性，因此,在实际诊断过程中，这种现象值得注意和重视［2～3］ 。
　　从实验数据来看，被确诊非心脏疾病患者有164例，其中22例cTnI为假阳性，假阳性率为13.41%（22/164），由于ｃＴｎI测定方法基于免疫反应，这就可能发生非特异反应的干扰。已证明，血清中的类风湿因子、人抗鼠抗体、嗜异性抗体、cTnI与Ig等大分子的结合物均会造成cTnI假性升高［2］。因此，必须密切结合临床表现解释测定结果，提高鉴别诊断效能。
　　cTnI试剂质量也存在差异，其影响因素不容忽视。抗体特异性造成不同的检测方法对同一样本的检测值的差别。有时候,ｃＴｎＩ的检测还会受到体内物质如血红蛋白和胆红素的干扰。这些假阳性和假阴性结果是临床诊断和护理中极大的潜在危险。试剂厂家应该在产品说明中详细标出可能的干扰因素，比如血红蛋白、甘油三酯、胆红素、异型球蛋白等［3～4］。
　　综上所述，虽然cTnl目前被认为是最具心脏特异性最有价值的心肌损伤指标，但其检测方法尚未标准化以前，循环中cTnl浓度的检测也受多种因素干扰，应引起高度重视，尽量避免干扰因素；注重于患者临床表现和参考其他实验结果进行综合分析，而不仅仅依赖于一次cTnI检测结果进行判断。
【参考文献】
& 　　［1］武文娟,章尧.心肌肌钙蛋白Ｉ测定及其临床意义［J］.蚌埠医学院学报,(5):466～468.
　　［2］王金良.心肌肌钙蛋白虽为金标准,尚需标准化［J］.中国实验诊断学,(5):546～547.
　　［3］高翔羽，姜毅.心肌肌钙蛋白Ｉ检测方法及其影响因素［J］.国外医学临床生物化学与检验学分册,)：243.
　　［4］韩雪松,李强,丛进阳.心肌肌钙蛋白Ｉ检测及临床诊断标准化进展［J］.中华检验医学杂志,(3):197～200.
日期：日 - 来自[]栏目
【关键词】& 肌钙蛋白I;心肌疾病;诊断
心肌肌钙蛋白I(cTn I)作为心肌肌钙蛋白的一种亚型，由于其高度的心肌特异性及对急性心肌梗死(AMI)诊断的高度敏感性，成为对急性心肌梗死快速、特异性诊断的标志物，通过测定其在血清中浓度的变化对心肌梗死的诊断、病情危重程度及预后的判定，并指导临床治疗具有重要作用。本文就cTn I及其临床应用研究进行综述。
　　cTn I在心肌组织中表达，在胎儿、健康人或疾病状态的成人骨骼肌中不表达[1]，因而对心肌具有高度特异性。1987年Cummins等[2]首先报道，通过测定血中cTn I浓度可诊断AMI。由于cTn I具有组织特异性强、诊断窗口期长、测定方法快速、在血中出现早等优点，使其在心肌梗死诊断中的作用越来越受到人们的重视，并于年被美国国家食品与药品管理局(FDA)批准应用于临床AMI的诊断[3]。
　　1 cTn I的分子结构与组织细胞分布
　　肌钙蛋白是横纹肌收缩的重要调节蛋白，分子呈球形，包括三个亚单位：Tn T、Tn I和Tn C。Tn T是一种非对称性蛋白质，伴有一球形C端功能区，它有一个与原肌球蛋白结合的位点。Tn I是一种碱性蛋白，由209个氨基酸组成。Tn T、Tn I均有三种亚型：快骨骼肌亚型、慢骨骼肌亚型和心肌亚型。在无Ca2+和Tn C的情况下，Tn I是阻止肌肉收缩的亚单位，通过抑制肌动-肌球蛋白ATP酶的活性，阻止肌球蛋白运动，而阻止肌肉收缩。Tn C呈哑铃形，是钙离子受体，参与调节细丝的活化过程;骨骼肌和心肌中Tn C是相同的。人心肌肌钙蛋白I(cTn I)有5个螺旋区域，呈伸展式构型。抗体识别相应抗原表位不依赖于蛋白质的三级结构，使cTn I氨基酸序列易被免疫系统识别，故cTn I具有较强的抗原性。在cTn I蛋白质的功能域中，抑制区是其最重要的功能区，它能在无钙离子存在的情况下，与组成细纤丝的肌动蛋白相互作用，抑制肌球蛋白的ATP酶活性。
　　cTn I以不同形式存在于心肌细胞中，以游离形式存在于胞浆内的cTn I只占很少的部分，为可溶性;大部分与肌钙蛋白T及C亚单位结合在一起，以复合体的形式存在。当心肌损伤时，外周血中cTn I主要以cTn I-Tn C复合物形式存在(90%以上)[4]，其他形式的cTn I较少，如氧化型、还原型、磷酸化、去磷酸化、蛋白降解形式释放等。因cTn I分子质量较CK-MB小，对心肌损伤较敏感，微型心肌损伤时cTn I即可出现阳性结果，而此时CK-MB未增高或处于正常高限。当心肌细胞膜的完整性受破坏，cTn I先从胞浆内释放，因此，血清水平很快升高，而结合的cTn I由于相对分子质量大，从心肌细胞结构蛋白缓慢持续的释放[5]。肌钙蛋白在循环血中的半衰期为数小时，由肾脏排出体外。游离cTn I在循环血中的半衰期为67 min。所以，cTn I较早出现在血中，且持续时间长，这对于心肌损伤的诊断很有价值。
　　2 血清cTn I测定的方法学
　　2.1 cTn I检测方法 cTn I的测定始于20世纪80年代中期，多采用双抗体竞争放射免疫法和竞争性ELISA测定法。有研究者将金标记或硒标记单克隆抗体与免疫层析技术相结合，用纸条法定量或半定量床边检测cTn I浓度，最低检测值为0.4 g/L。目前，对cTn I的检测多采用化学发光法。用化学发光物质标记抗cTn I抗体，大大提高了对cTn I测定的精确性和敏感性，但现在通用的cTn I测定方法尚无标准化，不同的方法采用不同的抗体识别位点，所以在使用商品cTn I试剂盒时，必须明确商品试剂的特性，并使用相同的标准品进行质量控制。
　　鉴于cTn I作为心肌损伤诊断标志物的重要性及缺乏方法的标准化，目前有不少研究者对这些检测系统进行了比较评价。临床上常用的方法有：Stratus检测法、AxSYM检测法、Access检测法、Opus Plus检测法、RxL-HM检测法等。早在1997年，美国临床病理学会对检测cTn I的Access，Opus Plus和Stratus Ⅱ三个检测系统进行比较，调查结果显示，三个系统检测到的cTn I浓度有实质性差异。AxSYM检测法与Stratus检测法有显著相关性(r=0.88)，两种方法对AMI检测的一致性为95.3%。Shi等于1999年用分别表达4个cTn I片段的E.coli细菌裂解液来测试它们与Stratus Ⅱ、Opus Plus和Access免疫试剂盒之间的反应性[6]，结果表明，Stratus和Opus Puls抗体识别cTn I的N末端部分，而抗Access抗体识别cTn I的C末端部分。并发现，cTn I的C末端部分更易被降解，这也可能是造成这三种测定方法之间变异的主要原因之一。此后，Hafner等对RxL-HM检测法进行评价[7]，它是以两个特异性的单克隆抗体为基础的一步酶免疫检测法，比Stratus检测法更敏感，且能提供更好的预后信息。Liu等研究表明[8]，通过基因工程方法得到的两种cTn I-cTnC单链多肽：ScTn I-C和ScTn I-C-2(ScTn I-C由全长的人cTn I和cTnC组成，ScTn I-C-2由人cTn I 28～110片段和全长cTnC组成)，经单抗亲和层析纯化后，均可作为标准品使用。靳彩宁等[9]也对Access一代、Opus和immulite三种cTn I测定试剂盒进行评价，显示三种测定方法间具有良好的相关性，但不同方法所测cTn I参考值和患者血清中cTn I含量相差悬殊。抗凝对不同厂商出品的cTn I测定试剂影响程度不尽相同，另外，immulite测定的再现性比较好，Opus相对较差，Access一代试剂测定患者血样的结果随时间的延长结果下降幅度明显增大。据文献报道[10]，新一代的Access cTn I测定用抗体，特异识别cTn I分子位于残基33～110的肽段，因而，所测cTn I值具有较好的稳定性。
　　2.2 cTn I检测方法的影响因素
　　2.2.1 cTn I的体外降解 cTn I在患者的血清中有不同程度的降解，而且由于其在血清中存在形式的不同其半衰期也不同，各种检测方法针对不同抗原决定簇的cTn I抗体，其免疫反应也必然不同。Morjana等[11]分析显示，cTn I的蛋白水解片段中，具有96～116个氨基酸残基的片段有较强的抵抗蛋白水解作用，在血清中与TnC形成二聚物的TnI片段是稳定的，而且可能拥有整个抑制区域。cTn I的抑制区域对cTn I-cTnC复合物的免疫活性和稳定性有重要作用。因此，建议选择能够优先识别较稳定的氨基酸序列的抗体，这助于cTn I免疫检测的标准化并有利于提高检测的特异性和敏感性。
　　2.2.2 化学物质对cTn I测定结果的影响 采用全血或血浆标本时的某些抗凝物质(如EDTA、肝素)也会对检测产生影响。EDTA螯合血标本中的钙离子可使cTn I-cTnC复合物解离，使游离cTn I单体增加，从而影响检测值。肝素也可以直接与cTn I结合，阻断抗原表位或改变分子构象而影响检测结果。
　　2.2.3 贮存时间和温度对cTn I测定结果的影响 血清在体外存储时间的长短及存储运输温度的差异也会对检测结果产生影响。
　　2.2.4 抗原-抗体反应对cTn I测定结果的影响 另外，理论上存在着由于抗原-抗体反应的干扰而引起的假阳性。类风湿因子(RFs)、人抗鼠抗体(HAMAb)或嗜异性的抗体对商品试剂有明显的干扰。肌钙蛋白也可能受内源物质，如Hb和胆红素的阴性或阳性干扰。溶血或高胆红素血症及风湿等因素对cTn I测定也有一定的影响，有的可能会产生假阳性结果[12]。
　　3 cTn I在临床诊断中的应用
　　3.1 对心肌损伤的诊断 在诸多被诊断为急性心肌梗死(AMI)的临床生化指标中，CK-MB曾一度被认为是诊断AMI的&金标准&，已广泛应用多年。随着对心肌肌钙蛋白(cTn)的深入研究，无论其特异性还是诊断的敏感性，CK-MB的地位都受到了严重挑战。cTn I被认为是目前最好的确定标志物，中国检验学会推荐由cTn I逐步取代CK-MB成为检出心肌损伤的新标准。
　　在各种发生心肌细胞损伤的冠状动脉疾病患者中，有些患者的临床表现可能不完全符合WHO关于AMI诊断标准(不稳定心绞痛就是其中之一)，但却伴有某些心肌损伤标志物的升高，这使得心肌细胞损伤标志物的检测成为可能。cTnT和cTn I在AMI后(3～6 h)血中的浓度很快升高，其表现和CK-MB(3～8 h)相当或稍早，但它们的特异性和灵敏度明显高于CK-MB，而且cTn具有相当长的诊断窗口期(cTn I 7～10天，cTn T 10～14天)。近年来对cTn I的大量研究证实[13]，其特异性和敏感性均高于cTn T，而后者与骨骼肌的生理及病理状态时的cTn T有交叉反应，对cTn T的特异性测定也有一定的局限。放免测定中cTn I与其骨骼肌同型物仅有0.1%～0.2%的交叉反应，而cTn T和骨骼肌的交叉反应可高达6.8%～100%[14]。
　　不论是不稳定性心绞痛还是无Q波的心肌梗死患者，cTn I都具有预后诊断价值。对不稳定冠状动脉疾患病人的随访发现，cTn I检测值大于0.1 g/L病人的死亡率较cTn I小于0.1 g/L病人的死亡率大3倍多。因此，任何急性冠状动脉疾患病人同时测得cTn I增高，都应视为高危险性[15]。
　　3.2 AMI后溶栓治疗的指示物 静脉注入溶栓药物是近年来常用的AMI治疗方法，在治疗后判断是否出现再灌注也成为临床医生最关注的问题之一。试验数据表明，如果肌钙蛋白的峰值提前出现，这往往说明出现了再灌注。早期冠状动脉再灌注的指示物CK-MB、肌红蛋白(Mgb)、cTn T和cTn I在血栓治疗成功后的早期血流动力学比较研究表明，四种标志物在溶栓后释放的早期血流动力学基本相似，但是，cTn T和cTn I在发病90 min的冠状动脉再灌注平均指数显著大于CK-MB和Mgb[16]。
　　3.3 对围术期心肌梗死的诊断 冠状动脉搭桥术后心肌梗死的诊断在心脏手术中有重要作用。cTn I是围术期心肌梗死的敏感和特异性标志物，能够鉴别出没有达到常规围术期心肌梗死判断标准的微小的围手术期心肌损伤。
　　3.4 对心肌炎的诊断 与CK活性相比，心肌炎时，cTn I因其相对较高的血清检测值和较长的上升时间，而具有较高的检测敏感性。1997年美国Hirsch等通过检测儿童血清cTn I，证实了儿童心肌损伤时应用cTn I检测的价值。
　　3.5 与肾功能衰竭的关系 缺血性心脏病是晚期肾病患者发病和死亡的主要原因之一，占总死亡率的大约40%;这些缺血性心脏病患者中，大约25%发展为AMI。因此，在晚期肾脏病患者的临床治疗中，心血管并发症的诊断成为至关重要的问题。研究结果认为，晚期肾脏病患者血清中cTn I的升高可能是由于存在一定程度的心肌损伤[17]。
　　3.6 药物作用观察 cTn还被用于观察某些药物的药理作用与心脏关系的观察研究，了解是否改善或者加剧心肌缺血现象。
　　3.7 其他 如急性心功能衰竭时，常出现cTn I增高而CK-MB无异常的现象。另外，cTn I也可作为小儿手足口病心肌损伤[18]及骨骼肌损伤患者的心肌损伤诊断时较好的标志物。
　　4 小结
　　由于cTn I具有高度的心肌特异性和敏感性，使其在心脏疾病诊断与鉴别诊断中的作用越来越受到人们的重视。通过对cTn I的检测不仅可以提高心肌损伤的诊断而且大大提升了对患者的救治效率，并使人们对已存在的诊断与鉴别诊断的方法学重新认识。然而，由于相关检验的标准仍然没有统一，以及检测中众多干扰因素的存在，使其在临床以及科研中的应用仍然受到一定的限制。
【参考文献】
& 　1 Bodor GS，Porterfield D，Voss EM，et al.Cardiac troponin-I is not expressed in fetal and healthy or diseased adult human skeletal muscle tissue.Clin Chem， pt 1)：.
　　2 Cummins B，Auckland ML，Cummins P.Cardiac specific troponin-I radioimmunoassay in the diagnosis of acute myocardial infarction.Am Heart J，)：.
　　3 Jaffe AS，Landt Y，Parvin CA，et al.Diagnostic efficiency of troponin I measurements in acute myocardial infarction.Clin Chem，)：.
　　4 Datta P，Foster K，parison of immunoreactivity of five human cardiac troponin I assays toward free and complexed foms of the antigen：implications for assay discordance.Clin Chem，)：.
　　5 Giuliani I，Bertinchant JP，Granier C，et al.Detemination of cardiac troponin I forms in the blood of patients with acute myocardial infarction and patients receiving crystalloid or cold blood cardioplegia.Clin Chem，)：213-222.
　　6 Shi Q，Ling M，Zhang X，et al.Degradation of cardiac troponin I in serum complicates comparisons of cardiac troponin I assays.Clin Chem，)：.
　　7 Hafner G，Peetz D，Dati F，et al.Analytical and clinical evaluation of troponin I determination on dimension RXL-HM.Clin Chem Lab Med，)：355-361.
　　8 Liu S，Zhang MY，Song Q，et al.Recombinant single chain cardiac troponin I-C polypeptides：superior calibration and control materials for cardiac troponin I immunoassays.Clin Lab，)：19-27.
　　9 靳彩宁，徐国宾，朱立华，等.几种心肌肌钙蛋白I测定试剂盒的初步评价.中国实验诊断学，3-366.
　　10 Venge P，Lindahl B，Wallentin L.New generation cardiac troponin I assay for the access immunoassay system.Clin Chem，)：959-961.
　　11 Morjana N，Clark D，Tal R.Biochemical and immunological properties of human cardiac troponin I fragments.Biotechnol Appl Biochem，)：107-115.
　　12 Gerhardt W，Nordin G，Herbert AK，et al.Troponin T and I assays show decreased concentrations in heparin plasma compared with serum：lower recoveries in early than in late phases of myocardial injury.Clin Chem，)：817-821.
　　13 黄新冲，曾因明.体外循环中心肌保护措施的评价.国外医学：麻醉与复苏分册，)：294-296.
　　14 Cummins B，Cummins P.Cardiac specific troponin I release in canine experimenal myocardial infarction：development of a sensitive enzyme- linked immunoassay.J Mol Cell Cardial，)：999-1010.
　　15 Lee HY，Cooke CE，Robertson TA.ACC/AHA 2002 guidline up date for the management of patients with unstable angina and non ST semment elevation myocardial infarction.J Manaq Care Pharm，)：271-280.
　　16 Schulz O，Kromer A.Cardiac troponin I：a potential marker of exercise intolerance in patients with moderate heart failure.Am Heart J，)：351-358.
　　17 Nakai K，Nagane Y，Obara W，et al.Serum levels of cardiac tropnin I and other marker proteins in patients with chronic renal failure.Clin Exp Nephrol，)：43-47.
　　18 许贞贞，徐冬新，梁友方.血清肌钙蛋白I检测对手足口病心肌损伤的诊断价值.临床和试验医学杂志，)：79.
日期：日 - 来自[]栏目
【关键词】& 血清心肌肌钙蛋白Ⅰ；检测；比较
近年来，急性心肌梗死（AMI）已经成为了一种临床常见的急性多发病，它起病急，致死率高，所以要求临床对其做出及时、正确的诊断，为挽救濒死的心肌赢得宝贵的时间。在AMI的生化诊断方面，肌酸肌酶（CK）及其同工酶（CK-MB）是常用的指标，但是CK-MB并非心脏所特有，在正常人骨骼中也有存在［1］。1987年英国Cummins等首先报告用测定周围血中心肌蛋白（CTN）浓度来诊断AMI［1］。同时，近期的研究表明心肌肌钙蛋白（Cardiac& Troponin）是心肌特异的调节蛋白，其肌钙蛋白Ⅰ在AMI释放入血是心肌损伤的特异性标志物，并具有灵敏度高，出现时间早，诊断窗口时间长等优点，所以心肌肌钙蛋白Ⅰ成为了诊断AMI的金指标。
　　心肌肌钙蛋白Ⅰ（CTnI）是心肌纤维上专有的收缩蛋白，它是肌钙蛋白三个亚单位之一（Ⅰ，T，C），它和原肌球蛋白一起通过肌原纤维的肌丝与肌幼蛋白结合。CTnI有两种形式，一种为游离的肌钙蛋白Ⅰ，一种为与肌钙蛋白C、T或同时与C、T结合而成的二联或三联复合物［2］。它们的生物学作用是在钙不参与的情况下抑制肌动蛋白与肌浆蛋白复合物的ATP酶的活性，由此来阻止纤维的收缩。
　　在急性心肌梗死中，肌钙蛋白Ⅰ在胸痛发生3～6小时后即可检测到，峰值大约出现在12～16小时，并且在AMI后的4～9天内保持升高状态，而且在没有接受溶栓治疗的患者中，CTnI的峰值可延迟出现。
　　1& 材料和方法
　　目前，临床应用的检测肌钙蛋白Ⅰ的方法可分为两类，即定性和定量两种方法。
　　定性检测CTnI的方法，采用的是高兹公司的CTnI快速测试板，其原理是免疫学上的双抗体夹心法。血清加入样本孔（S）后，其中CTnI会和金标抗体CTnI抗体结合形成免疫复合物，此复合物会因毛细管作用向上流动至测试区与那里的抗CTnI抗体反应，如果CTnI浓度在1.0 ng/ml或更高，将在测试区（T）里形成一条红色色带。如果样品中没有CTnI，此测试区将会保持无色。
　　其次定量的方法。试验所用的仪器为贝克曼库尔特公司生产的ACCESS全自动微粒子化学发光免疫分析系统，使用的检测试剂均由贝克曼库尔特公司提供。Access& AccuTnI检测采用的是双位点酶免疫法检测，即双抗体夹心法。样品、标记了碱性磷酸酶的抗CTnI单抗（酶结合物）以及包被了抗CTnI另一位点单抗的磁性颗粒被一起加入到反应管中，样品中的CTnI和固相在磁性颗粒表面的抗体及游离的酶结合物在不同的抗原位点上同时发生反应，而后，孵育后的反应管被传送到磁性分离区域进行多次冲洗，去除未和固相结合的其它成分，最后在反应管中加入化学发光底物，已与固相结合的碱性磷酸酶会使该底物发出光子并被光电比色计所检测，最后，对照仪器中所储存的多点定标曲线中所描述的光量子与标准品CTnI的对应关系而计算出样品中CTnI浓度，反应产生的光子与样品中的CTnI含量成正比。此方法具有高特异性、高灵敏性、高准确性，高稳定性等特点［3］。
　　2& 结果
　　试验中，将357例CTnI的测定值分为三组，第一组CTnI的测定值为0～0.4 ng/ml，第二组CTnI的测定值为0.4～1.0 ng/ml，第三组为CTnI的测定值为1.0～100 ng/ml。其中第一组为219例，占总数的61%，第二组为109例，占总数的30%，第三组为29例，占总数的8%。在第二组的109例中，又用CTnI的定性检测法进行检测，只有偶见的几例在测试区出现了一条颜色极淡的红色色带，在对第三组的29例进行定性检测时，有25例在测试区出现了一条深红色的色带，表明了其测定结果为阳性。
　　表1& 357例CTnI不同检测的方法比较（略）
　　3& 讨论
　　CTnI的定性方法具有方便，快捷的特点，而且对实验室设备要求不高，很适合基层医院的实验室，但是由于定性方法有一定局限性，只有在CTnI的浓度高于1.0 ng/ml的时候，才能检测出阳性结果。而CTnI的定量方法，却可以很精确的测出血中的CTnI的浓度，它的测得值可以为0～100 ng/ml，本实验中的1例最高测得值曾达到55.9 ng/ml。Access的正常值介定为0～0.4 ng/ml，即当测得值高于0.4 ng/ml时，结果就具有一定的临床意义。而对于定性实验来说，CTnI的浓度在0.4～1.0 ng/ml之间的结果，便成为了一段灰区，无法检测到，这一部分占到了30%，这就说明将有30%的AMI患者有可能被漏诊。
　　由此可见,对于AMI的检测,化学免疫发光的定量方法无疑是我们最好的选择,但是它对仪器的要求很高,只有大型的医疗机构才能满足临床的需要。
　　虽然，CTnI是诊断AMI的金指标，也不能只凭它的升高来定诊，临床医生还会结合其它的辅助检查以及一些临床症状来做出正确的判断，特别是当实验室只能提供CTnI的定性结果时，不要被误导，因为定性实验阴性，并不能排除AMI的发生，所以不管是实验室的工作人员，还是临床医生，都要在工作中多一份细心，以挽救更多患者的生命。
【参考文献】
Robert H Christson. Cardiac troponin I measurement with the ACCESS immrnoassay system:analytical and clinical performance characteristics［J］. Clinical Chemistry， 52-56.
Mao GD. Clinical laboratory investigation of the ACCESS CK-Mbprocedure and comparison to electrophoresis and Abbott Imx［J］. Am J Clin Pathol，2-7.
JP Etievent. Use of Cardiac Troponin I as a Marker of Perioperative Myocardial Ischemia［J］. Annual of Thorac Surgery, 2-1194.
作者单位：吉林市第二中心医院检验科，吉林
日期：日 - 来自[]栏目
评价低氧血症患者血清TnT水平变化的临床意义。方法
选取本院急诊住院的50例患者。患者血气分析示均有低氧血症存在, 以往无冠心病史，本次入院时EKG排除心梗及心绞痛存在。结果
TnT均有不同程度的升高，随着病情控制，TnT值恢复至正常。病情加重者，TnT回落减慢，或始终异常。结论
TnT对临床病情的发展及预后有预测价值。
【关键词】& 低氧血症；心肌肌钙蛋白T；预测价值
心肌肌钙蛋白(cTnT)是目前临床敏感性和特异性最好的心肌损伤标志物，已成为心肌组织损伤最重要的诊断依据。但在各类重症急诊患者中发现，许多患者在低氧血症存在时，血清肌钙蛋白均有不同程度的升高，而这些病人心电图没有心肌梗死或心绞痛的表现。因此，笔者选取了50例急诊入院的患者，这些患者均存在低氧血症，心电图正常，以往无冠心病史。动态测定其血清肌钙蛋白水平，以了解其临床意义。
　　1& 资料与方法
&&& 1．1& 一般资料& 选取月间本科住院患者50例，血气分析示均有低氧血症存在，测定其cTnT，并与动态观测心电图及心肌酶谱结合排除急性心肌梗死等疾病。其中观察组50例，男35例，女15例，平均年龄68.5岁。阻塞性肺病急性加重期（AECOPD）患者25例，重症肺炎患者10例，普通肺炎患者10例，脑出血患者5例。对照组30例，男15例，女15例，平均年龄41.1岁，同期健康体检者。
&&& 1．2& 方法& 两组患者均在入院后当日静脉抽血测定cTnT(瑞士Roche公司生产Elee-sysl010型全自动电化学发光分析仪及配套试剂测定静脉血清)和血气分析(美国i-STAT公司生产)，做12导联心电图检。
&&& 1．3& 统计学处理& 计量资料采用（x&s）表示，采用t检验。
　　2& 结果
&&& 2.1& 两组患者急性期血cTnT比较& 观察组50例患者急性期血cTnT均升高，为(0．31&0．18) g／L，对照组(0．012&0．01) g／L，两组比较差异有非常显著性。见表1。表1& 两组患者急性期血cTnT比较
&&& 2.2& 观察组患者急性期与缓解期血cTnT比较& 每日复查血气分析，随着低氧血症的纠正，血清肌钙蛋白值逐步恢复正常，与病情严重度成反比。见表2。 表2& 观察组患者急性期与缓解期血cTnT比较 注：P<0.05
&&& 3& 讨论
&&& 心肌肌钙蛋白是横纹肌上的结构蛋白，只存在于心肌细胞中，当心肌细胞缺血受损时，游离型肌钙蛋白(cTnT)就首先迅速透过细胞膜释放入血且具有很高的敏感性，所以TnT的早期阳性率较高，并能检出微小心肌损伤。当持续性损伤或不可逆损伤激活蛋白分解酶时，引起结合型TnT的降解和释放，使TnT在血中升高持续时间长，为临床提供了一个较宽的诊断时间窗。因此，TnT不但特异性强，且敏感性高，诊断窗口宽，明显优于CK、CK-MB的诊断价值［1］。
&&& 肌钙蛋白的升高反映了危重病患者心肌的进行性损伤过程，即使是很微小的损伤，也会出现TnT的轻微升高［2］。
&&& AECOPD、重症肺炎等均存在有全身炎症反应，由于病毒、细菌及其毒素、细胞因子的作用，导致全身多脏器损害，包括肺部、肾脏、心血管、中枢神经系统等，可表现为呼吸困难、少尿、无尿及不同程度的休克、昏迷等。心肌细胞在上述因子的作用下而损伤后，其内的肌钙蛋白释放出来，表现为血清cTnT的持续增高［3］。人血cTnT的增高一般在心肌损伤后2～4h开始部分升高，8～12h后100％患者均有增高，峰值在10～24h，持续时间5～14天。
&&& 本组资料显示，两组患者cTnT间差异有显著性，缺氧可导致血清cTnT升高，且缺氧越明显，血清cTnT值越高。随着患者病情控制及缺氧症状的纠正，炎症控制、心肌细胞炎症好转，心肌损伤得到恢复，释放出的cTnT开始下降，直到完全恢复正常。由于cTnT具有较高的特异性，故其是判断缺氧患者是否有心肌损害及其损害程度的标志，对判断患者预后可能有一定帮助，有着重要的临床价值。
【参考文献】
刘芳．肌钙蛋白I在临床应用中的优越性．心血管病学进展，)：89-91.
Andrew T，Mary T．Myocardial cell injury in septic shock．Crit Care Med，)：．
华琦，张建．心血管疾病临床备忘录．北京：人民军医出版社,2006,6.
作者单位：上海，上海市第一人民医院
日期：日 - 来自[]栏目
Thorax. 2009 Jun 11. [Epub ahead of print]
法国里昂中心医院报道，利用B型利钠肽（BNP和NT-proBNP）和肌钙蛋白可对急性肺动脉栓塞（APE）进行风险评估。研究结果刊登在本月《胸科》杂志上。
Lega教授等检索了Medline和EMBASE数据库，纳入23项相关研究，包括1127例APE患者。分析后发现与利钠肽升高显著相关的有总死亡率 (OR 6.2; 95% CI: 3.0 - 12.7)、APE有关的死亡率(OR 5.0; CI: 2.2 - 11.5)和严重不良事件(OR 6.7; CI: 3.9 - 11.6)，这些患者肌钙蛋白也随之升高。诊断右心室功能不全时，BNP比NT-proBNP敏感性和特异性更高。
由该系统评价结果可见，利钠肽升高可用于判断肺栓塞患者的危险度。
日期：日 - 来自[]栏目
人心肌肌钙蛋白T胶体金免疫层析法的建立
免疫学杂志 2000年第5期第16卷 技术与方法
作者：李志梁　钱洪津　焦保明　姜朝新　陆青　王素华
单位：李志梁（第一军医大学珠江医院心内科，广东 广州 510280）；洪津（第一军医大学珠江医院心内科，广东 广州 510280）；焦保明（第一军医大学珠江医院心内科，广东 广州 510280）；姜朝新（第一军医大学珠江医院检验科，广东 广州 510280）；陆青（第一军医大学珠江医院心内科，广东 广州 510280）；王素华（第一军医大学珠江医院心内科，广东 广州 510280）
关键词：心肌肌钙蛋白T；胶体金；链霉亲和素；生物素；免疫层析法
　　［摘 要］ 目的 建立一种简便、快速、准确检测人心肌肌钙蛋白T（cTnT）的胶体金免疫层析法（GICA）。方法 制备的胶体金标记抗cTnT单克隆抗体3F7，生物素标记另一株抗体2H8，链霉亲和素结合于硝酸纤维素膜上，制成免疫层析试纸条。血清中cTnT与测试条两种抗体结合后，沿硝酸纤维素膜移动，与链霉亲和素交联形成肉眼可见的红色线条。结果 测试条灵敏度可达0.5 ng／ml。检测30例急性心肌梗塞（AMI）患者血清cTnT水平，并与国外同类产品比较，符合率达92％。结论 本方法特异性强、灵敏度高、简便快速，可广泛应用于急性心肌梗塞的早期诊断。
　　［中图分类号］ 392.33
［文献标识码］ A
　　［文章编号］（0-03
Development of a gold-immunochromatography assay for determi-nation of human cardiac troponin T
LI Zhi-liang　QIAN Hong-jin　JIAO Bao-ming　LU Qing　WANG Su-hua
　　（Department of Cardiovascular Disease ，Zhujiang Hospital，the First Military Medical University，Guangzhou 510280，China）
　　Jiang Chao-xin
　　（Department of Laboratory，Zhujiang Hospital，the First Military Medical University，Guangzhou 510280，China）
　　［Abstract］ Objective To develope a sensitive，rapid and simple gold immunochromatography assay（GICA）for determination of human cardiac troponin T （cTnT）in sera．Methods Colloidal gold was prepared and coupled with anti-cTnT monoclonal antibody 3F7．2H8，another monoclonal antibody，was biotinylated，streptavidin solidified to nitrocellose to prepare a test strip．cTnT in sera which combined with 3F7 and 2H8，migrates up the nitrocellulose strip after combination of serum cTnT and the two antibodies fixed on the test strip，two red lines were detectable to naked eyes．This was taken as positive．Results The sensitivity of GICA was 0.5 ng／ml．The Level of cTnT in 30 patients with acute myocardial infarction（AMI）were measured by this assay and also by using test kit supplied by Boehringer Mannheim Corp．The corresponding rate between the results using this method and that obtained by using products supplied by Boehringer Mannheim Corp was 92％．Conclusion This is a sensitive，specfic，simple and rapid assay for measuring cTnT．It may be used for early diagnosis of AMI．
　　［Key words］ cardiac troponin T；colloidal gold；streptavidin；biotin；immunochromatography
　　人心肌肌钙蛋白（cTnT）是90年代发展起来的一种新的诊断心肌缺血、坏死的高敏感性、高特异性的血清学指标［1］，其定量、定性测量方法已在国内外临床心血管领域广泛应用。目前国内应用这一测定方法的测试盒均依赖于国外产品。我们于1994年进行cTnT的基础和临床应用研究，在提取人cTnT、制备抗cTnT单克隆抗体的基础上，采用免疫层析技术，制成检测人cTnT的胶体金免疫层析（GICA）测试条并与宝灵曼产品比较分析，证明本方法具有简便、快速、准确等优点。
　　1　材料和方法
　　1.1　材料　氯金酸：北京化学试剂厂出品；链霉亲和素：BNHS：Sigma产品；cTnTT、I：本室从自愿者捐献心肌中提取［2］；抗cTnT单克隆抗体：本实验室经多次细胞融合制备［3］。从12株细胞株中筛选2H8、3F7两株进行本实验；cTnT定性标准测试条：Boehringer　Mannheim　Corp产品；血清标本：30例急性心肌梗塞（AMI）患者均有典型胸痛（时间＞30 min）、心电图改变及心肌酶学增高（CK-MB超过正常值2倍以上），并经选择性冠状动脉造影证实。所有病人血清标本均在入院时抽取，静置析出血清后即刻检测。50例对照组血清均为本院健康体检者。
　　1.2　方法
　　1.2.1　胶体金制备及抗cTnT抗体：根据参考文献［4］加以改进。三蒸水溶解氯金酸，加热至沸腾，至终浓度为0.01％，每100 ml加入10％柠檬酸三钠水溶液1．5 ml。再煮沸10 min呈橙红色，冷却后用0.2 mol／LK2CO3调至pH8．5，快速搅拌下加入纯化的3F7抗体IgG2 mg，加入牛血清的蛋白250 mg，快速搅拌10 min，加入10％NaCl，使NaCl的浓度为1％，摇匀，分别以2 000、4 000、10 000 r／min梯度离心，10 min／次，最后获得沉淀物即为初步纯化的金标记抗cTnT结合物，溶于储存液。
　　1.2.2　生物素化抗体2H8制备：根据参考文献［5］的方法加以改进为：按BNHS∶IgG＞（重量比）根据1∶7进行，室温搅拌3 h后，用pH7．2　0.05 mol／L　PB溶液透析过夜，加等量甘油，－30 °C储存。
　　1.2.3　免疫测试条的制备：根据M&ller-Bardoff法改进［6］。整个测试条由2层吸水纤维，1层硝酸纤维素膜，吸水滤纸及白色塑料垫板组成。吸水纤维使用前予0.5％BSA处理，上层吸水纤维点生物素化抗体2H8，下层吸水纤维点胶体金标记抗体3H7，硝酸纤维素膜上标记1∶100链霉亲和素（检测线）及兔抗鼠IgG（对照线），均为1 mm宽。晾干后用含1％新生牛血清的0.1 mol／L　pH7．4　PBS封闭。干燥后依次粘在白色塑料片上。切成0.6 cm×10 cm条，－4　°C储存备用。
　　1.2.4　cTnT检测：新鲜血清0.5 ml滴入检测孔观察20 min。结果判定：以硝酸纤维素膜上出现两条红色为cTnT阳性；若有对照线红色为阴性；两条线均无显色为测试条失效。为检测其灵敏度，将cTnT抗原按0，0.1，0.2，0.5，1，10 ng／ml滴入测试孔，检测线出现红色则为最低可测定量。
　　2　结果
　　2.1　特异性　本测试条与cTnT，cTnI反应，显示仅与cTnT反应，与cTnI呈阴性反应。测定健康体检者有一例弱阳性反应。
　　2.2　灵敏度　当cTnT浓度高于0.5 ng／ml时，检测线为红色，示其最低检测值可达0.5 ng／ml（见图1）。
图1两种测试条检测cTnT
　　Fig　1Two　assays　detecting　cTnT
　　A：Boehringer　Mannheim　Corp．assay；B：Colloidal　gold　immunochromatography　assay．The　level　of　cTnT　antigen　is　0.5 ng／ml．
　　2.3　稳定性　将测试条置入－4 °C 1个月后，与新制备的测试条比较无明显差异。
　　2.4　临床初步检测　30例AMI患者及50例健康体检者血清应用本测试条及国外同类产品比较，本测试条50例健康人血清中1例为弱阳性，符合率为96％；30例AMI患者，其中26例为阳性，符合率为86.66％（见表1，2）。
表1　急性心肌梗塞血清cTcT水平
　　Tab　1　Detecting results of serum cTnT both AMI and control groups
　　number
this　method
BMC　method
　　number
　　rate（％）
　　number
　　rate（％）
health　control
　　BMC：Boechringer　Mannheim　Corp表2　两种方法测定结果比较
　　Tab　2　Comparison of positive and negetive results in 80 sera using two assays
this　assay
　　BMC：Boechringer　Mannheim　Corp3　讨论
　　免疫层析技术是80年代发展的一种独特的免疫分析方式。以条状纤维层析材料为固相，通过毛细作用使样品溶液在层析条上泳动，当样品与纤维材料上相应的抗体相结合产生高特异、高亲和的免疫反应，并滞留或富集在检测区域，通过反应物而出现呈色现象，是一种目前发展最快的复合型免疫层析技术［7］。现在临床广泛使用的人绒毛膜促性腺激素（HCG）、乙型肝炎表面抗原（HbsAg）、可卡因等检测方法均是采用这类方法建立的，其优点是在于快捷、简便、准确，具有高度特异性及高敏感性。
　　本实验采用链霉亲和素固定于检测带，是根据链霉亲和素具有与各种生物素化抗体结合的能力，同时其四价性使其具有较高的放大系统，提高其敏感性和稳定性［6，7］。这对于检测血清中含有极微量（ng／ml水平）物质是极重要的。本实验是在建立了链霉亲和素-ELISA定量检测cTnT的基础上进行的，同时cTnT血清正常水平应在0.1 ng／ml以下，因此，不引入链霉亲和素是无法实现检测目的的，宝灵曼cTnT产品亦是采用这一方法而实现的。
　　胶体金免疫层析技术与ELISA技术原理不尽相同，前者技术要求更高，实施中更为困难。其主要原因在于：①胶体金免疫层析技术发展快，时间较短；②层析材料选择，处理至为重要。本实验采用国内外5种层析材料，其差异性较大，国内产品尚无法达到要求；③必须有较好的抗体及固定、稳定方法。
　　本测试条诊断临床急性心肌梗塞患者血清cTnT与国外同类产品比较符合率为86.66％，与冠状动脉结果比较，检测敏感性略低于国外同类产品，但基本达到临床早期快速、特异诊断的目的。目前这一国外产品价格昂贵，临床广泛开展和使用有困难。本方法的成功建立为国内城乡罹患心肌缺血、坏死患者的临床诊断提供新的手段，并具有广泛的应用价值。
　　［基金项目］ 广州市重点攻关项目（9724806）
　　［作者简介］ 李志梁（1958－），男，福建长汀县人，硕士，副教授，主要从事冠心病早期诊断和防治的研究。
［参考文献］
杨振华．应考虑在缺血性心脏疾病中使用一些新的生化标记物［J］．中华心血管杂志，）：327－329．
李志梁，付朝平，陆 青，等．人心肌肌钙蛋白T的纯化和鉴定［J］．第一军医大学学报，）：130－131．
李志梁，付朝平，陆 青，等．人心肌肌钙蛋白T的纯化和单克隆抗体的制备［J］．生物化学与生物物理进展，）：459－461．
蔡文琴，王伯云．实用免疫细胞化学与核酸分子杂交技术［M］．成都：四川科学技术出版社，－108．
李成文．现代免疫化学技术［M］．上海：上海科学技术出版社，－168．
MULLER-BARDORFF M，FREITAGX H，SCHEFFOLD T，et al．Development and characterization of a rapid assay for bedside determinations of cardic of troponin T［J］．Circulation，）：2 869－2 876．
吴冯波，侯惠仁，贺优丰，等．免疫层析分析进展［J］．中华医学检验杂志，）：122―127．
　　［收稿日期］ ； ［修回日期］
日期：日 - 来自[]栏目
【关键词】& 肌钙蛋白；急性冠脉综合征
　　急性冠脉综合征（ACS）是一组由急性心肌缺血引起的临床综合征，包括急性心肌梗死(AMI)、不稳定型心绞痛（UAP）和心源性猝死。20世纪80年代末期，心肌损伤标志物肌钙蛋白的应用，提高了其诊断的敏感性和特异性，愈来愈受到临床的关注。
　　1& 诊断急性心肌梗死
　　WHO推荐，患者有胸痛、心电图改变、心肌酶学异常，只要有两项符合，即可诊断AMI。可是，临床上大约有25%的AMI患者心电图无改变，极易造成漏诊。传统中诊断急性心肌梗死的酶学指标有AST、LDH、CPK、CK-MB、HBDH，通过对其窗口日期、达峰值时间以及持续时间的不同评估，发现这些检测指标不足以阐述及诊断急性心肌梗死。心肌肌钙蛋白的应用，开创了急性心肌梗死诊断史上的新纪元，使得急性心肌梗死的漏诊率降至最低。
　　1.1& 肌钙蛋白的基本生物学特性& 肌钙蛋白是与心肌和骨骼肌收缩有关的调节蛋白，调节肌肉的收缩与舒张，肌钙蛋白是横纹肌的结构蛋白，存在于肌原纤维的细丝中，分为T、C和I三个亚基。
　　cTnI作为肌原纤维ATP酶的抑制性亚单位，它可抑制肌球蛋白与肌动蛋白的偶联，松弛骨骼肌或心肌。cTnI有快骨骼肌亚型、慢骨骼肌亚型和心肌亚型三种亚型。心肌亚型与骨骼肌亚型比较具有40%不同源性，因此，骨骼肌与cTnI无交叉反应，可用于鉴别心肌损伤还是骨骼肌损伤。
　　有文献报道，测定血清cTnI诊断AMI的敏感性为97%，特异性为98%，预测值为99.8%。
　　cTnT作为附着于原肌凝蛋白分子上的亚单位，正常人中检测不到，它以6%游离形式存在于胞浆中，以94%的结合形式存在于心肌收缩单位的细肌丝上。当发生AMI时，由于不可逆的心肌缺血，导致心肌细胞坏死，血中cTnT可显著增高，阳性检出率在61.8%，且持续时间可达2周［1］。
　　1.2& 心肌酶谱与心肌肌钙蛋白诊断急性心肌梗死的比较& 见表1。
　　作为理想的心肌损伤标物，肌钙蛋白具有绝对的心肌特异性。心肌损伤时，逐渐释放、窗口期适当、持续时间长、具有高度敏感性等优越的特征，成为诊断心肌损伤的首选生化标志物。
　　2& 肌钙蛋白与不稳定心绞痛
　　诊断不稳定心绞痛的指标很多，但尤以肌钙蛋白T占优势，肌钙蛋白T阳性表明发生微小心肌损伤，并可能发生AMI猝死［2］。所以，肌钙蛋白T水平升高，对UAP有预测价值，有助于发现严重冠脉狭窄、靶血管血栓、远端微血管梗死、冠脉完全闭塞和心肌梗死［3］。
　　表1& 心肌酶谱与心肌肌钙蛋白特性比较（略）
　　3& 关于肌钙蛋白检测的标准化
　　能够实现肌钙蛋白检测的标准化，建立一个适用于不同方法的检测限和参考范围，可以实现真正意义上的标准化。由于生产肌钙蛋白的厂家不同，检测的方法学不同，除了肌钙蛋白I的检测方法已有一致性意见外，这方面的工作仍然任重而道远。
　　4& 临床肌钙蛋白检测注意事项
　　4.1& 合理选择采血时间和采集标本& 在临床应用中，肌钙蛋白的标准采集时间，理论上应在窗口期，但临床很难做到这一点。由此，国内外有关学术团体和心脑病学专家达成共识，根据病人的就诊时间来考虑标本采集时间。
　　4.2& 合理选择抗凝标本& 采用肝素抗凝时，肌钙蛋白有可能与肝素结合而影响检测的免疫反应。EDTA可使肌钙蛋白的复合物裂解，从而影响检测结果的准确性。
　　4.3& 标本中的类风湿因子等& 非特异性反应物质极易造成肌钙蛋白结果的假阳性，干扰临床诊断，应予以高度重视。
　　5& 专家建议
　　对疑似AMI的患者早期进行的血清学检测项目有CK-MB、MB和肌钙蛋白。MB仅为过筛实验［4］，CK-MB（-）、肌钙蛋白（+），仍为高危患者。CK-MB（-）、临床症状可疑者，仍需做3、6、9、12小时肌钙蛋白的动态观测。有文献显示，cTnI在胸痛10小时对AMI诊断的特异性、敏感性、POC效率均为100%［5］。
　　综上所述，肌钙蛋白作为一种存在于心肌细胞的特异性蛋白，只有当心肌受到损伤时，才能透过已破坏的细胞膜进入细胞间质中，从而较早地出现在外周血和淋巴液中。在急性冠脉综合征诊断中，它的敏感性和特异性足以引起临床的高度重视。
【参考文献】
& 　　［1］
李定国，李
萍.心肌损害标志物的测定诊断学［M］.北京：人民卫生出版社，4.
吴学思.肌钙蛋白在ACS中的正确应用［N］.中国医学论坛报――心血管内科专刊，，13版.
荣.肌钙蛋白可用来判定不稳定性冠心病的病变范围和程度［N］.中国医学论坛报――心血管，，10版.
潘柏申.心肌损伤标志物的研究进展与心肌梗死标准的修订［J］.临床检验杂志，（3）：129-132.
靳采宁.人心肌TnI的生物学特性测定及其在临床诊断中的应用［J］.临床检验杂志，）：118-120.
作者单位：辽宁省阜新市第二人民医院，辽宁
日期：日 - 来自[]栏目
研究一种具有高度敏感性和特异性的血清标记物，能够早期对不稳定型心绞痛患者进行检测和诊断。方法
将200例诊断为不稳定型心绞痛患者分成两组：一组24h前无心绞痛，一组24h前有心绞痛。然后，分别对它们采取血液进行肌钙蛋白T（TNT）和肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）水平的定量检测，研究其阳性率、敏感性和特异性。结果
阳性率：TNT为92.3%，CK-MB为34.1%； 敏感性：TNT为100%，CK-MB为50.1%；特异性：TNT为92.3%，CK-MB为34.1%。结论
TNT阳性结果对不稳定型心绞痛患者发生心肌梗死具有高度的预见性，TNT的阴性结果显示不稳定型心绞痛患者发生心肌梗死几率很小。因此，当心肌细胞受损时，TNT可作为一种高度敏感性和特异性的血液标记物。TNT可以早期预见不稳定型心绞痛患者微血栓的形成，TNT也可以作为一种排除不稳定型心绞痛患者发生心肌梗死的标记物。
【关键词】& 肌钙蛋白T；冠状动脉性心脏病；急性心肌梗死；肌酸激酶；肌酸激酶同工酶-MB；超敏C反应蛋白
&&& 【Abstract】& Objective& To investigate the highly sensitive and specific blood marker, it can earlier examine and diagnose a patient with unstable angina.Methods& 200 patients with unstable angina were divided into two groups, one group had no angina before 24 hours and second group had angina before 24 hours. Respectively took its blood into be measured the TNT or CK-MB levels, studying its positive rate, sensitivity and specificity.Results& TNT positive rate: 92.3%, sensitivity:100%, specificity:92.3%;CK-MB positive rate: 34.1%, sensitivity:50.1%,specificity:34.1%.Conclusion& TNT appeared to have a high predictive value that MI occurred. TNT-negative value indicates very little risk of MI TNT is the highly sensitive and specific blood marker as myocardial cell was injured. It can early forecast that the patient&s tiny thrombus is formed. It is the marker which excludes patient&s myocardial infarction.
&&& 【Key words】& troponin T(TNT)；coronary heart disease(CHD)；acute myocardial infarction(AMI)；creatine kinase(CK)；creatine kinase isomer-MB(CK-MB)；high sensitivity C-reactive protein（hs-CRP）
&&& 不稳定型心绞痛是冠状动脉性心脏病的一个关键性阶段［1］。它的发生率介于稳定型心绞痛和急性心肌梗死（AMI）［2］。稳定型心绞痛一旦转变为不稳定型心绞痛，其发作次数与危险性也越来越大［3，4］。
&&&& 1& 材料与方法
&&& 1.1& 一般资料& 全组200例，男125例，女75例；年龄48～75岁，平均61岁。
&&& 1.2& 原理& TNT是一种心肌细胞调节收缩蛋白的亚级单位，正常情况下在血液中不被发现，当心肌细胞受损或坏死时才释放到血液中。
&&& 1.3& 仪器与试剂
&&& 1.3.1& 仪器& 美国Bayer Acs-180 全自动化学发光免疫分析仪和日立7060型全自动生化分析仪。
&&& 1.3.2& 试剂& 由美国Bayer公司原厂提供和上海科华试剂有限公司提供。
&&& 1.4& 方法& 将200例不稳定型心绞痛患者分为两组。
&&& 1.4.1& 第一组& 31例患者有亚急性或加速型心绞痛病，即24h无心绞痛史，分别取血液进行TNT和CK-MB的定量检测。
&&& 1.4.2& 第二组& 169例患者24h前有心绞痛史，分别取其血液进行TNT和CK-MB的定量检测。
&&& 2& 结果
&&& 在第一组31例患者中，均无TNT和CK-MB水平的升高。
&&& 在第二组169例患者中，有165例仅有TNT水平的升高，有4例患者同时TNT和CK-MB水平的升高。这表明差异具有显著性（P<0.001）。
&&& 在13例MI患者中，11例有TNT水平升高而无CK-MB水平升高，1例TNT和CK-MB水平均升高，1例无TNT和CK-MB水平升高。这表明差异具有显著性（P<0.001）。
&&& 在不稳定型心绞痛中，TNT的阳性率92.3%，敏感性100%，特异性92.3%；CK-MB的阳性率34.1%，敏感性50.1%，特异性34.1%。由此可见，TNT预见MI发生的敏感性100%，TNT阴性结果提示MI发生的风险性极低微。因此，TNT是心肌细胞损伤时最具有特异性和敏感性的标记物，它可预见早期患者微血栓形成或作为排除患者的MI的标记物。
&&& 3& 讨论
&&& 目前，早期诊断和检测不稳定型心绞痛的标记物和方法很多，方法有超敏C反应蛋白（hs-CRP）、即时心电图、24h动态心电图、心脏彩超等等；血液的标记物有TNT、CK、CK-MB、Myoglobin（肌红蛋白）、MLC-1（肌球蛋白轻链-1）等等。到目前为止，TNT对不稳定型心绞痛的早期诊断是最具有特异性和敏感性的标记物。
【参考文献】
Hamm CW,Ravkilde J,Gerhardt W,et al.The prognostic value of serum troponin T in unstable angina. N Engle J Med,-50.
Ravkide J,Horder M,Gehardt W, et al.Diagnostic performance and prognostic value of serum troponin T in suspected acute myocardial infarction.Scand J Clin Lab Invest,-685.
Senio Y,Tomia Y,Taknao T,et al.Early Identification of eardiac events with serum troponin T in patients with unstable angina.Lancet,6-1237.
康格非,巫向前.临床生物化学和生物化学检验,第2版.北京:人民卫生出版社,.
作者单位：515100 广东汕头，汕头市潮阳区大峰医院日期：日 - 来自[]栏目共 4 页，当前第 1 页
Copyright & 2008
All rights reserved. 医源世界 版权所有
医源世界所刊载之内容一般仅用于教育目的。您从医源世界获取的信息不得直接用于诊断、治疗疾病或应对您的健康问题。如果您怀疑自己有健康问题，请直接咨询您的保健医生。医源世界、作者、编辑都将不负任何责任和义务。
本站内容来源于网络，转载仅为传播信息促进医药行业发展，如果我们的行为侵犯了您的权益，请及时与我们联系我们将在收到通知后妥善处理该部分内容联系Email: