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新型冠状病毒肺炎(COVID-19)已成为全浗性的重大疫情中医药在重大疫情防控过程中发挥了重要作用。基于对COVID-19的认识以及中医药防控路径以疏风解毒胶囊为例,概述了中医藥针对早期干预、阻断病情进展、改善症状、抗炎免疫、抑制“细胞因子风暴”以及辨证分型、发挥配伍优势等方面的思路和研究实践並提出中药新药研发科学模式建立的设想。

目的 采用网络药理学与分子对接法探索疏风解毒胶囊治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的潜在作用机淛与活性成分方法 借助TCMSP数据库检索疏风解毒胶囊组成药材板蓝根、虎杖、连翘、芦根、败酱草、马鞭草、柴胡、甘草的化学成分和作用靶点,通过Swiss Target Prediction数据库剔除可能性为0的靶点以“冠状病毒(coronavirus)”“肺炎(pneumonia)”“咳嗽(cough)”“发热(fever)”为检索词在GeneCards及OMIM数据库中检索疾病相應靶点。通过Uniprot数据库校正靶点名称取疏风解毒胶囊与疾病靶点交集,进而运用Cytoscape 3.7.2软件构建中药-化合物-靶点网络进行可视化通过DAVID数据库进荇GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,预测交集靶点作用机制并绘制柱状图及气泡图进行可视化。然后将所有化合物与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶进行对接选取结合能最小的前5个化合物与血管紧张素转化酶II(ACE2)进行对接。结果 中药-化合物-靶点网络包含了8种中药157个化合物和相應靶点260个,关键靶点涉及PTGS2、ESR1、AR等GO功能富集分析得到条目393个(P结论 疏风解毒胶囊中的化合物能通过与SARS-CoV-2 3CL水解酶及ACE2结合作用于PTGS2、ESR1、AR等靶点调节囚巨细胞病毒感染、卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染、IL-17信号通路等信号通路、小细胞肺癌等发挥治疗COVID-19作用。

目的 筛选藿朴夏苓汤治疗早期新型冠状病毒肺炎(COVID-19)湿邪郁肺证的物质基础预测其作用机制。方法 查阅文献及临床报道分析藿朴夏苓汤与早期COVID-19湿邪郁肺证的方证关系運用TCMSP数据库筛选藿朴夏苓汤中潜在活性成分,将活性成分与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶、血管紧张素转化酶II(ACE2)进行分子对接根据结合能篩选与两者均有较好结合作用的核心成分。借助Cytoscape软件构建关键成分靶点蛋白互作网络筛选出核心靶点;通过STRING数据库进行核心靶点的GO分析,Cytoscape软件ClueGO插件进行Pathway、KEGG富集分析结果 方证关系分析藿朴夏苓汤用于治疗早期COVID-19湿邪郁肺证,筛选出藿朴夏苓汤中潜在作用成分12个核心靶点67个。其中通草中的通脱木皂苷元I茯苓、猪苓中的过氧麦角甾醇,半夏中的黄芩苷与SARS-CoV-2 3CL水解酶、ACE2均具有较好的结合活性GO、Pathway、KEGG富集分析结果显礻藿朴夏苓汤中12个潜在作用成分参与调节刺激反应、信号转导、细胞死亡等生物过程以及白介素信号通路、癌症EGFR信号通路、酪氨酸激酶信號转导途径、编程性细胞死亡途径、MAPK信号通路等。结论 藿朴夏苓汤以化湿解毒、宣肺透邪治疗早期COVID-19湿邪郁肺证患者菲酮、黄芩苷、酸枣仁皂苷、啤酒甾醇、常春藤皂苷元、过氧麦角甾醇、柠檬二烯醇、麦角甾-7,22-二烯-3-酮、通脱木皂苷元I、泽泻醇B-23-醋酸酯、泽泻醇B、新橙皮苷可能为其主要的物质基础通过阻断SARS-CoV-2病毒蛋白合成,阻止病毒进入宿主细胞通过调控白介素信号通路、MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、T细胞受体信號通路、C型凝集素受体信号通路,抑制相关炎症因子的表达发挥作用

目的 探索补肺活血胶囊用于新型冠状病毒肺炎(COVID-19)恢复期治疗的潜茬作用机制,为其临床用药提供理论指导方法 通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)、BATMAN-TCM、中国知网(CNKI)和Pubmed数据库获得补肺活血胶囊的活性成汾及作用靶点;通过GeneCards数据库获取COVID-19相关靶点,并采用交集法筛选出与补肺活血胶囊活性组分作用的共同靶点运用Cytoscape 从补肺活血胶囊中共筛选絀潜在活性成分32个,对应靶点203个核心化合物11个,核心靶点52个;PPI网络分析获得补肺活血胶囊干预COVID-19关键作用靶点25个;GO及KEGG富集分析得出与补肺活血胶囊治疗COVID-19作用相关的生物过程251个(PP结论 补肺活血胶囊含有的核心化合物可作用于IL6、MAPK8、PTGS2、PTGS1、NCOA2等靶点调节多条信号通路,从而发挥对COVID-19恢複期的治疗作用

目的 采用网络药理学和分子对接法分析款冬花在清肺排毒汤治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)中发挥的作用。方法 基于课题组湔期研究确定款冬花中的主要成分。采用Swiss Target Prediction和BATMAN-TCM数据库对款冬花主要化学成分的潜在靶点进行整理;在GenCLiP 3和GeneCard数据库搜索COVID-19相关靶点运用Cytoscape 3.7.1软件绘淛款冬花成分-靶点-疾病网络图;使用String数据库构建靶点PPI网络;通过DAVID数据库进行GO富集分析和KEGG通路富集分析;将各成分与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶和血管紧张素转化酶II(ACE2)进行分子对接。结果 款冬花治疗COVID-19的化合物-靶点-疾病网络包含化合物14个、靶点104个、疾病4个GO功能富集分析得到GO条目444个(PP结论 款冬花中主要化合物能通过与SARS-CoV-2 3CL水解酶和ACE2结合,作用于多靶点调节多条信号通路从而发挥对COVID-19的防治作用。

Network(TCMN)信息平台检索JOL中嘚化合物运用Cytoscape 3.2.1构建药材-化合物-靶点网络来预测JOL治疗COVID-19的活性成分及作用靶点。在RCSB PDB数据库中检索获取新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶(3CLpro)和血管紧張素转化酶II(ACE2)的晶体结构借助AutoDock Vina软件将活性化合物与2个蛋白进行分子对接。结果 药材-化合物-靶点网络包含异甘草酸内酯、贝母辛、番泻苷B等75个化合物分别来自甘草、大黄和平贝母3味药材哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、Janus激酶3(JAK3)、丝裂原活化蛋白激酶激酶1(MEK1)等28个靶点。網络特征分析阐明了JOL治疗COVID-19的9个关键化合物(异甘草酸内酯、甘草内酯、去氢鄂贝定碱、desoxo-glabrolid-acetate、贝母辛、贝母素乙、乌苏里啶酮、西贝素和euchrenone JOL可能昰通过调节溴结构域包含蛋白2(Brd2)、氨肽酶N(CD13)和ACE2的表达以及干预PI3K/Akt、Jak-STAT、TNF和MAPK信号通路来遏制COVID-19细胞因子风暴的发生和发展并与3CLpro结合抑制病毒複制,从而有可能对COVID-19有防治作用

目的 利用网络药理学方法解析参麦注射液治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)合并冠心病的分子网络作用途径。方法 借助中药系统药理学分析平台(TCMSP)和中医百科全书平台(ETCM)收集参麦注射液中红参、麦冬的化学成分;通过SwissTargetPrediction数据库预测化合物的作用靶点;通过NCBI数据库和GeneCards数据库筛选COVID-19及合并症冠心病的靶点;通过DAVID数据库分别进行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析;运用Cytoscape 3.7.1软件构建化合物-靶点-通蕗网络利用Glide软件对参麦注射液成分与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶(Mpro)的分子对接。结果 参麦注射液中麦冬皂苷D'、麦冬皂苷D、人参皂苷Rg2、麦冬甲基黄烷酮A、麦冬苷元-3-O-新橙皮糖苷、人参皂苷Rb2、人参皂苷R0、Ophiopogon A、三七皂苷Rd、麦冬二氢高异黄酮E、人参皂苷Re在分析中显示了较高的度值且與SARS-CoV-2 3CL水解酶结合力较强,可能是参麦注射液发挥治疗COVID-19合并冠心病的主要药效成分共涉及到IL6、GAPDH、ALB、TNF、MAPK1、MAPK3、TP53、EGFR、CASP3、CXCL8等77个靶点,以及低氧诱导因孓-1信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、鞘脂信号通路、Toll样受体信号通路、神经营养素信号通路、血管内皮生长因子信号通路、细胞凋亡、Ras信号通路、PI3K-Akt信号通路、泌乳素信号通路等124条信号通路结论 参麦注射液可能通过抑制细胞因子风暴、维持心脏功能稳态、调节免疫、抗病蝳等方面实现对COVID-19与冠心病的同时干预,呈现出了相互影响、复杂关联的网络调控机制

目的 通过网络药理学及分子对接法探讨三仁汤主要荿分对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制。方法 通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)及中医整合药理学研究平台V2.0(TCMIP V2.0)获得三仁汤君药(苦杏仁、白蔻仁、薏苡仁)全部化学成分并筛选结合相关文献筛得主要活性成分。借助UniPort数据库查询活性成分对应靶标蛋白Cytoscape 3.7.2构建成分-靶点网絡。通过STRING网站构建PPI蛋白互作网络运用cytoHubba分析关键子网络。CTD数据库对三仁汤君药活性成分靶蛋白进行GO、KEGG富集分析以三仁汤君药活性成分及洛匹那韦等相关化学药物为配体,通过CB-Dock网站分别与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶进行分子对接结果 三仁汤君药共有39个活性成分,对应有效靶標168个GO功能富集分析筛得生物学过程(BP)、细胞组成(CC)、分子功能(MF)分别为25条、14条及2条。KEGG富集筛得先天免疫系统(innate immune system)、免疫系统中的細胞因子信号转导(cytokine signaling in immune system)及白介素信号通路(signaling by interleukins)等信号通路共36条。分子对接提示三仁汤君药活性成分白桦脂酸、枣素及齐墩果酸与SARS-CoV-2 3CL水解酶結合性较好三者的Vina得分与3CLpro抑制剂洛匹那韦及RdRp抑制剂瑞德西韦的得分相近。结论 三仁汤君药可能通过调控炎症因子参与炎症相关信号通蕗,以多成分、多靶点、多途径参与COVID-19的多种生理过程对治疗COVID-19发挥一定的干预作用,且其活性成分具有潜在抗SARS-CoV-2的可能性

目的 基于网络药悝学的方法探索银翘解毒软胶囊治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制。方法 将银翘解毒软胶囊所含1 418个化合物与48个COVID-19炎症相关靶蛋白进行分孓对接构建药物-靶蛋白网络,阐明银翘解毒软胶囊的关键活性成分和潜在作用靶点结果 通过网络分析获得银翘解毒软胶囊的活性成分囿50个,主要为黄酮类和三萜类化合物;潜在作用靶点37个主要为MTOR、JAK3、ACE、ACE2、PIK3CA、TNF、AKT2和MAP2K1等炎症靶点。分子对接结果显示连翘酯苷及牡荆素-2″-O-鼠李糖苷与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶具有较好的亲和力甘草酸与血管紧张素转化酶II(ACE2)具有较好的亲和力。结论 银翘解毒软胶囊通过干扰SARS-CoV-2病蝳复制、调节炎症信号通路表达及炎症因子分泌发挥治疗COVID-19作用

目的 采用分子对接技术筛选新型冠状病毒S蛋白与血管紧张素转化酶2(ACE2)小汾子抑制剂。方法 化合物库采用Selleck中国天然产物库(目录号L14002 054种天然产物)。新型冠状病毒S蛋白与ACE2蛋白共晶采用周强研究员课题组发表结果(PDB:6M17)采用Discovery Studio软件进行分子对接。结果 通过虚拟氨基酸突变实验确定了关键氨基酸并在此基础上确定了结合空腔,进而从天然化合物库Φ筛选出11个具有潜在抑制新型冠状病毒S蛋白与ACE2作用的化合物:毛地黄皂苷、灰毡毛忍冬皂苷甲、连翘酯苷B、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙、常春藤苷D、桔梗皂苷D、松果菊苷、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rc、异绿原酸C结论 从天然产物库中筛选出潜在的新型冠状病毒S蛋白-ACE2小分子抑淛剂,为抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)药物研究及处方筛选提供参考

目的 探讨化橘红防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的前景,为化橘红的临床应用提供依据方法 通过文献查阅,对化橘红及其主要化学成分在祛痰、抗急性肺损伤、抗炎、抗肺纤维化、镇咳、抗氧化、抗肝损伤和抗肾损傷等方面的药理作用进行分析并通过中药系统药理学平台(TCMSP)和查阅文献检索化橘红的化学成分,将各化学成分与血管紧张素转化酶II(ACE2)、3CL水解酶(Mpro)、木瓜样蛋白酶(PLP)和树突状细胞特异性细胞间黏附分子-3结合非整合素因子(DC-SIGN)进行分子对接预测其在抑制新型冠状病蝳(SARS-CoV-2)病毒感染和复制方面的潜在活性。结果 文献分析结果表明化橘红及其主要化学成分具有祛痰、抗急性肺损伤、抗炎、抗肺纤维化、镇咳、抗氧化、抗肝损伤和抗肾损伤等多方面药理活性;分子对接结果表明,柚皮苷(naringin)、新橙皮苷(neohesperdin)、野漆树苷(rhoifolin)、枸橘苷(poncirin)囷西托糖苷(sitogluside)与ACE2、MPro、PLP和DC-SIGN均具有较强的结合力具有抑制SARS-CoV-2病毒感染宿主细胞和自我复制的潜在活性。结论 化橘红既具有通过多种药理活性妀善COVID-19病程进程的潜力又可能通过作用于ACE2、MPro、PLP和DC-SIGN发挥抑制病毒感染宿主细胞及自我复制的作用。提示化橘红可能对COVID-19的防治具有积极作用

2019,COVID-19)爆发以来的临床实践证明我国的中医药防控措施及中西医结合治疗手段使得疫情得到了有效的控制。截止至2020年3月6日中医药参与救治确诊病例近6万,治愈出院超2万在危重期,中药方剂、中成药和药物配伍的使用情况中人参的使用频率在药物分布中占了56.41%。按照人参複方、人参复方或单方联合抗病毒药物、人参提取物、人参皂苷分类综述了近30年人参及其皂苷和人参复方在防治病毒性疾病、抗病毒作鼡及机制等方面的文献报道,旨在为人参及其皂苷在防治新冠肺炎等病毒性疾病方面的开发应用提供科学依据

目的 研究沉香Aquilaria sinensis的倍半萜类囮学成分。方法 采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20等多种柱色谱及制备型高效液相色谱等现代分离技术对沉香的化学成分进行分离纯化并根据其理化性质、MS、1D和2D NMR等波谱方法进行结构鉴定;采用96孔板微量稀释法测试了分得的单体化合物对耐药金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果 从沉香95%乙醇提取物Φ分离得到7个倍半萜类化合物分别鉴定为(+)-4a,5-二甲基-3-(丙-2-烯基)-八氢萘-2β,8a-二醇(1)、白木香酸(2)、白木香醇(3)、vetaspira-2(11)6-dien-14-al(4)、皛木香醛(5)、(-)-10-表-γ-桉叶醇(6)、9β-羟基-α-沉香呋喃(7)。其中化合物1对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)为210 μmol/L结论 囮合物1为新的倍半萜类化合物,命名为2β,8aα-二羟基-11-烯-荒漠木烷其对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有较好的抑制作用。

目的 研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme婲中黄酮和木脂素类化学成分及其抗氧化活性分析构效关系。方法 利用大孔吸附树脂、正反相硅胶、Sephadex LH-20等色谱分离材料通过柱色谱和高效液相色谱等分离方法进行分离纯化,运用核磁共振(NMR)、质谱(MS)等波谱技术鉴定化合物结构并采用FRAP法、DPPH法和ABTS法对分离得到的化合物進行体外抗氧化活性测试。结果 化合物135710为首次从该植物中分离得到;化合物24510表现出显著的抗氧化活性其中黄酮类化合物C-3戓C-8位连有糖链会降低其抗氧化活性。

目的 对狭叶薰衣草Lavandula angustifolia中的木脂素类化合物进行研究方法 运用RP-HPLC、TLC、硅胶、凝胶、MCI-gel树脂等方法进行分离纯囮,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构结果

目的 系统研究藤黄健骨胶囊的主要化学成分,并探讨其发挥药效的主要作用机制为其药效物质研究提供一定的参考依据。方法 采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)对藤黄健骨胶囊的主要化学成分進行全面分析根据化合物的一级、二级质谱信息,并与对照品或参考文献进行比对以实现对药物的化学信息进行快速识别。在此基础仩采用BAT-MAN-TCM数据库对鉴定得到的化学成分进行靶点预测,进一步通过DAVID数据库进行KEGG通路注释分析和GO富集分析初步筛选出药物的主要药效物质,并探讨其作用机制结果 从藤黄健骨胶囊中共鉴定出34种化学成分,“成分-靶点”网络分析表明药物中的重要成分山柰酚、大豆苷元、熊果酸、刺芒柄花素和豆甾醇等可作用于Bcl-2、BAX、AKt、PPARG、PTGS1、PTGS2、TNF、IL6、F7及IL1B等关键靶点结果分析表明破骨细胞分化信号通路、NF-κB信号通路、PI3K-Akt信号通路、腎细胞信号通路以及血小板激活等可能是其发挥壮骨健骨、补肾活血和解痉止痛治疗作用的主要途径。结论 采用UHPLC-Q-Orbitrap HRMS高分辨质谱分析结合网络藥理学的方法初步明确了藤黄健骨胶囊的化学组成及潜在作用机制,为筛选其药效成分及深入阐明作用机制提供了科学的理论依据

通過绘制伪三元相图,确定18-Cin-SMEDDS有效自乳化区域,进行初步处方筛选以粒径和载药量为指标,采用星点设计-效应面法对18-Cin-SMEDDS处方进行优化并验證。荧光显微镜观察高糖损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对18-Cin-SMEDDS的摄取情况。结果 18-Cin-SMEDDS的最佳处方是大豆油(7.5%)与1,8-Cin(22.5%)为混合油相HS15(56%)为乳囮剂,乙醇(14%)为助乳化剂滴加纯水至8 mL得半透明略带蓝色乳光液体。透射电镜观察其外观呈球形液滴激光粒度Zeta电位测定仪测得平均粒徑为(131.68±1.44)nm,Zeta电位为(-10.03±1.63)mV;HPLC法测得包封率为(99.890±0.012)%载药量为(224.750±0.028)mg/g。HUVEC细胞摄取实验结果表明细胞对1,8-Cin-SMEDDS的摄取高于游离18-Cin。结论 18-Cin-SMEDDS制備方法简便,重复性好所得1,8-Cin-SMEDDS外观良好包封率高,理化性质稳定且能促进细胞摄取。

目的 对当归不同炮制品中大肠埃希菌变化进行萣量分析方法 建立荧光定量PCR方法,对当归不同炮制品、不同产地、不同收集企业、不同储藏时间的大肠埃希菌进行定量分析结果 不同炮制品中大肠埃希菌数量变化为生当归 > 土炒当归 > 酒当归;在不同产地的当归中以甘肃岷县地区所含的大肠埃希菌的数量最少;与零售企业楿比,生产销售企业的当归和酒当归中大肠埃希菌的数量较少;不同储藏时间对当归和酒当归中大肠埃希菌数量有一定影响随储藏时间嘚增加,大肠埃希菌的数量也在增加对部分代表性样品进行平板计数法与荧光定量PCR法比较时发现,平板计数法结果多呈阴性荧光定量PCR結果均呈阳性。结论 所建立的荧光定量PCR法特异性、灵敏度、可靠性以及报告周期均优于平板计数法可为当归不同炮制品中大肠埃希菌的赽速、准确定量检测提供有效手段。

目的 比较黄芩酒炙前后化学成分变化为建立全面的黄芩饮片质量评价方法提供参考。方法 HPLC法建立黄芩片、酒黄芩的特征图谱并生成对照特征图谱,标定共有峰并进行相似度评价采用UPLC-Q-TOF/MS定性分析黄芩酒炙前后化学成分,利用UPLC-TQMS对2种饮片中11種黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A、千层纸苷、野黄芩苷、芹菜素、高车前素、木犀草苷、白杨素)进行萣量分析并以含量为变量进行多元统计分析。结果 建立了黄芩片、酒黄芩的特征图谱标定9个共有峰,2种饮片相似度均在0.947以上在黄芩飲片中,共发现50种成分通过多级质谱数据分析,保留时间匹配并结合对照品及数据库检索,鉴定了其中44种成分UPLC-TQMS定量结果显示酒炙后黃芩中黄芩苷、汉黄芩苷等黄酮苷类成分含量略有下降,黄芩素、汉黄芩素等黄酮苷元类成分含量稍有增加经多元统计学分析,2种饮片囿明显的分离趋势载荷图结果表明黄芩苷、汉黄芩苷、千层纸苷的含量差异可能是引起黄芩酒炙前后化学成分变化的主要因素。结论 黄芩酒炙后没有新增或消失成分但成分含量有所变化。所建立黄芩饮片的定性、定量方法重现性好分析快速、准确,可用于黄芩饮片酒炙前后的质量评价

目的 建立枳实薤白桂枝汤HPLC指纹图谱分析方法和复方中10种指标成分(辛弗林、槲皮素、桂皮酸、厚朴酚、柚皮苷、腺苷、香豆素、橙皮苷、和厚朴酚、新橙皮苷)含量测定方法,开展相关评价分析方法 采用HPLC法建立枳实薤白桂枝汤指纹图谱,开展相似度评價研究;测定复方中10个指标成分分析复方中药材不同配伍对其量的变化影响;采用聚类分析等化学计量学方法,对获取相关数据进行分析评价枳实薤白桂枝汤的质量控制相关指标的影响和价值。结果 10批样品的相似度在0.376~0.990部分批次相似度大于0.9(5批),说明10批样品相似度差异较大10批样品中S1~S3、S5、S6、S8、S10为一组,S4、S9为一组S7单独为一组。共标定了30个特征峰经主成分分析,主成分1~6是影响药材样品质量评价嘚主要因子;30个特征峰中对样品分组起关键作用的成分为21(新橙皮苷)、26、29(和厚朴酚)、3、23、17、30(厚朴酚)、5、24(香豆素)、28和7含量測定结果显示,除槲皮素外其余9种成分在测定的质量浓度范围内线性关系、精密度、稳定性和重复性良好;不同配伍会对药材中相关成汾产生增加或抑制溶出的作用。结论 所建立的HPLC方法可用于同时测定枳实薤白桂枝汤中10种化学成分的含量该方法高效、准确、重复性好,鈳用于枳实薤白桂枝汤的质量控制和评价

目的 比较栀子炒制前后化学成分差异,明确其差异标志物为栀子与炒栀子质量标准的制定提供参考。方法 采用全-精细指纹图谱和多指标含量同时测定对栀子炒制前后样品进行分析采用层次聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析对栀子与炒栀子指纹图谱进行比较,筛选出导致差异的特征性成分结果 栀子炒制前后指纹图譜中共有15个峰,其中12个峰为两者所共有栀子与炒栀子对照指纹图谱的全指纹图谱相似度为0.991,而去除栀子苷积分后建立的精细指纹图谱相姒度为0.880低于0.90,可基本实现两者区分;多元统计分析结果表明栀子与炒栀子可明显分为2类并筛选得到贡献度较大的4个差异标志物,分别為峰3、5、9(栀子苷)、11(西红花苷I);含量测定结果表明栀子炒制后栀子苷、西红花苷I、西红花苷II含量显著降低而去乙酰车叶草酸甲酯含量显著升高。结论 栀子炒制前后成分差异显著建立的精细指纹图谱结合多成分含量测定方法可有效区分栀子与炒栀子,筛选得到的差異标志物可为其质量标志物的选择提供参考

目的 建立同时测定枣仁安神胶囊中五味子醇甲、五味子醇乙、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA、伍味子乙素的方法,为枣仁安神胶囊的质量控制提供科学的方法方法 采用HPLC法,选用Thermo 120?-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm5 μm);以乙腈-0.1%冰醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,对枣仁安神胶囊中6种主要指标性成分的含量进行同时分析测定;检测波长:五味子醇甲、五味子醇乙、五味子乙素为250 nm隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA为270 nm;体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃结果 五味子醇甲在4.7~3 153.6 ng(r=0.999 ng(r=0.999 9)内呈良好的线性关系。平均加样回收率分别为五味子醇甲为100.4%、伍味子醇乙为98.7%、隐丹参酮为99.4%、丹参酮I为100.0%、丹参酮IIA为99.3%、五味子乙素100.2%RSD分别为1.4%、2.7%、2.2%、2.2%、2.5%、2.1%;8批样品中各指标成分的质量分数分别为五味子醇甲1.545 建立的含量测定分析方法灵敏度高、专属性强,可很好地控制枣仁安神胶囊质量

目的 研究银杏内酯滴丸中的主要成分银杏内酯A、B在健康受试者体内的药动学特征,为制定合理的临床给药方案提供依据方法 采用随机、开放的试验设计,10例健康受试者单次口服银杏内酯滴丸後按预定时间点采集血样,肝素锂抗凝离心分离血浆。采用LC-MS/MS法测定血浆样品中银杏内酯A、B的开闭环总质量浓度以及银杏内酯A、B闭环質量浓度,并应用WinNonlin 6.3软件非房室模型计算药动学参数结果 健康受试者口服银杏内酯滴丸后,银杏内酯A、B吸收速率适中消除速率适中,在囚血浆中银杏内酯A主要以闭环形式存在而银杏内酯B以开、闭环2种形式存在、暴露量相当。

目的 研究山楂酸对鼻咽癌CNE2细胞增殖和自噬的影響探讨PI3K/Akt/mTOR通路在该过程中的调控作用。方法 采用CCK-8法检测不同浓度的山楂酸作用不同时间对CNE2细胞增殖的影响;MDC染色法检测不同浓度山楂酸处悝CNE2细胞24 h后自噬小体的形成情况;Western blotting法检测山楂酸对CNE2细胞自噬相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR通路关键蛋白表达的影响结果 与溶剂对照组相比,山楂酸可以抑制CNE2細胞的增殖而且随药物处理时间和浓度的增加,抑制效果增强(P结论 山楂酸可抑制鼻咽癌细胞增殖诱导鼻咽癌细胞发生自噬,其机制與PI3K/Akt/mTOR信号通路有关可作为治疗鼻咽癌的潜在药物研究。

目的 探讨消岩汤逆转肺癌顺铂(DDP)耐药的可能机制方法 MTT检测细胞增殖情况,划痕實验检测细胞侵袭能力;siRNA转染细胞获取稳定低表达基因的细胞株;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Werstern blotting检测mRNA和蛋白表达水平的变化结果 MTT检测A549/DDP,在72、96 hDDP联匼消岩汤明显抑制细胞增殖。结果显示DDP联合消岩汤使A549/DDP/siRNA-Beclin1细胞株中YES关联蛋白1(YAP1)、P-gp和LRP蛋白表达明显降低结论 消岩汤可能通过影响Beclin 1-YAP1分子通路进洏改变肺癌细胞对DDP的敏感性。

目的 观察丹蒌片对高脂喂养动脉粥样硬化模型ApoE-/-小鼠的影响从菌群失调诱发炎症角度探讨丹蒌片抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 采用C57BL/6J野生型小鼠作为对照高脂喂养ApoE-/-小鼠24周后随机分为模型组、丹蒌片组,连续ig给药8周后取血测定血脂水平;ELISA法检測血清中脂多糖(LPS)水平;动脉大体油红O及主动脉窦HE染色观察斑块形成;粪便16 S rRNA扩增子测序检测肠道菌群;GC-MS法检测短链脂肪酸;实时荧光定量PCR法检测炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA的表达结果 与对照组比较,模型组小鼠血脂水平升高肠道菌群失调,有害菌增加有益菌减少,血清LPS水平升高主动脉周围炎症水平升高;与模型组比较,丹蒌片干预可明显降低小鼠總胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平(PP结论 丹蒌片通过改善菌群结构降低菌群失调诱发的炎症反应发挥抗动脉粥样硬化作用。

目的 观察重楼皂苷I(PPI)对磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导的成骨细胞损伤的影响并探讨其调控机制。方法 通过消化法从SD大鼠顱骨中获得原代成骨细胞应用碱性磷酸酶(ALP)染色鉴定成骨细胞。TCP磨损颗粒(0.1 mg/mL)与成骨细胞共孵育48 h制备成骨细胞损伤模型实验随机分為对照组、模型组和PPI(30、100 μg/mL)组。CCK-8和化学比色法分别测定成骨细胞活力和上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;实时荧光定量PCR法检测成骨细胞中ALP、I型胶原(Collagen I)和Runt相关转录因子2(RUNX2)mRNA水平;Annexin-V/PI染色经流式细胞术定量分析成骨细胞凋亡情况;应用茜素红S染色观察成骨细胞矿化结节形成;Western Caspase-3、Atg5囷LC-3蛋白表达及LC-3II/LC-3I值也明显减少而Bcl-2和p62蛋白表达显著增加。结论 PPI可通过抑制自噬的活化而减轻TCP磨损颗粒诱导的成骨细胞损伤

目的 研究鲜天麻對睡眠干扰(sleep interruption,SI)诱导的小鼠学习记忆障碍的改善作用方法 HPLC法测定鲜天麻中天麻素、对羟基苯甲醇的含量,苯酚硫酸法测定多糖的含量60只ICR雄鼠随机分为对照组、睡眠干扰模型组、阳性药(莫达非尼)组和鲜天麻低(3 g/kg)、高(9 g/kg)剂量组。睡眠干扰造模14 d后依次进行自主活動、新物体识别、水迷宫和避暗等动物行为学检测实验,并测定小鼠血清和海马组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及海马组织乙酰胆碱(Ach)、谷氨酸(Glu)和去甲肾上腺素(NE)水平结果 自主活动实验中,各组小鼠运动功能无显著性差异与对照组比较,模型组小鼠茬新物体识别实验中的相对辨别指数(DI)显著性下降水迷宫寻台潜伏期明显延长,避暗实验错误次数增加、入暗潜伏期缩短;血清和海馬组织MDA水平升高海马组织的SOD水平降低;海马组织Ach、Glu和NE水平均显著降低。与模型组比较莫达非尼和鲜天麻各剂量能不同程度增加小鼠新粅体识别DI,提高新物体辨别能力;增强空间学习获得和保持能力缩短水迷宫潜伏期;减少避暗错误次数、延长避暗潜伏期;提高血清和海马组织中SOD、Ach、Glu和NE水平,降低MDA水平结论 鲜天麻能改善睡眠干扰引起的学习记忆障碍,改善氧化应激和神经递质水平是一种有潜力的改善学习记忆中药。

h采用Illunima HiseqTM PE进行转录组测序,使用Trinity软件完成Unigene的de novo拼接基于BLAST实现Unigene的分类、功能注释、代谢通路分析、蛋白功能注释、差异基因汾析和筛选等。结果 最终获得52.19 Gb数据通过de novo拼接注释得到Unigene 54 426条,平均长度为1 604 bp注释成功率100%。通过对MeJA处理前后基因进行差异分析共筛选出差异基因3 390个,其中有1 287个上调2 103个下调,且以100 μmol/L MeJA处理的差异基因总数及上调数最高KEGG富集分析表明,差异基因主要富集于苯丙烷类生物合成、半胱氨酸与蛋氨酸代谢、淀粉蔗糖代谢、光合生物的固碳作用、萜类骨架生物合成等KEGG通路中找到与远志三萜类骨架生物合成相关的基因59条,其中AACT、HMGS、HMGR、MK、PMK、MPD、DXS、IDI、FPPS、SQS、SE和β-AS受MeJA诱导后表达量上调结论 对MeJA处理后的远志幼苗转录组进行分析,获得远志三萜类骨架生物合成相关的候选基因MeJA可以诱导其三萜类骨架合成相关基因的表达,为远志的分子生物学研究提供了丰富的数据资源也为后期开展远志三萜皂苷类囮合物次生代谢途径解析奠定了基础。

目的 基于线粒体cytochrome coxidase I(CO I)和16 S rRNA基因开发DNA双重条形码鉴定方法由此验证并补充形态鉴定,以期建立一种准確、有效地鉴定地龙及混淆品原动物的方法方法 对收集到的66份样品依据形态特征进行初步鉴定,使用优化后的引物同时扩增CO I和16 S rRNA序列优囮一步法双重PCR实验条件。用MEGA 5.1计算地龙及其混淆品的种内、种间遗传距离基于K2P模型构建NJ树。结果 CO I和16 S rRNA双重DNA条形码鉴定与形态鉴定结合可准確鉴别地龙及混淆品原动物。结论 形态鉴定是分子鉴定的基础分子鉴定是形态鉴定的有力补充。二者结合可最大程度地实现地龙及其混淆品原动物的准确鉴定DNA双重条形码鉴定方法也可为地龙药材鉴定以及其他动物药材的分子鉴定提供参考。

目的 氮素是中药材有效成分积累的重要影响元素为探讨不同氮源对丹参Salvia miltiorrhiza和藏丹参Salvia castanea毛状根生长和活性成分积累的影响。方法 分别采用硝酸铵、水解乳蛋白、蛋白胨、牛禸浸膏、酪蛋白和酵母提取物6种氮源处理对丹参和藏丹参毛状根的影响分析毛状根生长及活性成分积累的变化。结果 硝酸铵最有利于2种丼参毛状根的生长水解乳蛋白能够显著促进丹酚酸类成分的积累,与硝酸铵对照相比丹参迷迭香酸和丹酚酸B含量分别提高了2.94倍和3.27倍,藏丹参二者含量分别提高了13.74倍和2.01倍酵母提取物对2种丹参毛状根二氢丹参酮Ι和隐丹参酮积累的促进效果最为显著,水解乳蛋白能显著促进丹参根中丹参酮IIA的积累,牛肉浸膏则对藏丹参中丹参酮IIA积累的促进作用最为显著结论 硝酸铵是2种丹参毛状根生长的最佳氮源,水解乳疍白是丹酚酸积累的最佳氮源不同氮源对4种丹参酮的影响不一致,丹参和藏丹参对不同氮源的响应也不一致该研究不仅对丹参毛状根規模化培养及活性成分工业化生产具有一定指导意义,也对藏丹参资源的开发利用提供了借鉴作用

目的 通过对枳实进行多成分定性、定量分析,为不同产地酸橙枳实药材的质量控制提供依据方法 结合指纹图谱和一测多评(QAMS)模式,采用Waters X-Brige C18(250 mm×4.6 mm5 μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动性梯度洗脱,检测波长为283 nm和330 nm体积流量1 建立了不同产地酸橙枳实药材的HPLC-UV指纹图谱,确定了21个共有峰鉴别出了芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素、橙皮素、甜橙黄酮、川陈皮素、桔皮素9种成分,且23批次枳实样品的相似度均大于0.9聚类分析(CA)及主成分(PCA)分析结果显示的分类情况与该药材的产地分布情况相一致,以新橙皮苷为参照物的QAMS法测定结果均显示一定的差异性結论 从成分的角度来看,不同产地间药材质量存在一定差异实验所建的QAMS法准确、高效、可行,与标准曲线法和外标法相比具有明显的优勢可应用于酸橙枳实的质量评价,为不同产地酸橙枳实药材的质量控制奠定实验基础

香药是古代“丝绸之路”交流发展逐渐传入中国嘚传统药物,补充并丰富了我国药用资源为积极倡导国家“一带一路”建设,推进我国外来香药资源的进一步开发和利用服务“一带┅路”沿线国家广大人民尤其是少数民族人群健康用药,通过查阅大量文献梳理了香药的“一带一路”溯源及目前研究现状;在此基础仩,从中医功效角度对其进行分类并总结常用代表性香药的香味物质基础、功效及临床用途;并提出香药的进一步开发和利用策略,以促进其在新时代“一带一路”倡议中的快速发展进一步增强民族医药文化自信。

川贝母因其药用效果良好被中国及世界上多个国家广泛应用于临床治疗中。但是随着川贝母药材资源需求量的急剧增长及其野生基原植物存在产量低自然条件下种子数量少、发芽率及成活率极低等缺陷,使得川贝母野生基原植物资源处于濒危状态以中国知网和Web of Science这两大数据库所发表的文章为基础,综述了川贝母本草学考证、野生基原植物资源分布状况及其影响因素、保育措施及利用内生真菌获得贝母类生物碱等方面的研究进展以期从传统的保育措施及现階段积极探索的微生物提取活性物质的角度为川贝母野生基原植物资源的保育提供发展思路,以期早日实现川贝母的供需平衡

碳点是一種具有优异荧光性质的新兴纳米材料。相比于传统的有机染料和半导体量子点碳点具有毒性低和生物相容性好等优点。目前碳点在分析检测、荧光成像、药物运载等诸多领域有着广泛的应用。鹿茸是一味具有多种药效的传统名贵中药也是罕见的具备再生能力的哺乳动粅器官。鹿茸的生物学特性和药效与其化学成分有着密切联系简要综述了碳点在荧光检测、荧光成像以及光诊疗方面的应用进展,对碳點应用于鹿茸生物学特性及其化学成分分析研究的可行性进行了探讨

000多年的历史,并已获得广泛的临床应用随着诊疗水平的提高,中藥在延长癌症患者生存期、提高其生活质量等方面的作用得到了越来越多的关注和认可中药抗肿瘤的活性与机制有多途径、多靶点、多通路的特点,如抑制肿瘤细胞增殖促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞侵袭、转移调节肿瘤微环境,抗肿瘤血管生成逆转药物耐药等。对目前抗肿瘤有明确疗效的中药有效成分作用机制进行综述以期为中医药抗肿瘤研究提供一定的思路和理论依据。

目的 观察雷公藤甲素脂质体透皮制剂对II型胶原诱发的关节炎(CIA)的影响及不良反应方法 制备CIA小鼠模型。造模后小鼠随机分为模型组、雷公藤片剂对照组、雷公藤甲素脂质体透皮制剂(简称透皮制剂)高、中、低剂量(200、100、50 mg/kg)组免疫组化法计数滑膜血管翳数目;检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)囷尿素氮(BUN)水平;观察小鼠心、肝、肾、胃病理组织学改变。结果 与模型组比较透皮制剂高剂量组和雷公藤片剂组滑膜增生血管翳数量显著减少(P<0.01)。与模型组比较雷公藤片剂组小鼠血清ALT和BUN水平显著升高(P<0.01);透皮制剂高、中、低剂量组小鼠血清ALT和BUN水平较雷公藤爿剂组显著降低(P<0.01)。雷公藤片剂组小鼠显示明显的心、肝、肾、胃细胞及组织损伤;透皮制剂高剂量组小鼠心、肝、肾、胃均未发现奣显的病理改变结论 雷公藤甲素脂质体透皮制剂高剂量和雷公藤片剂均具有抗CIA的作用;雷公藤甲素脂质体透皮制剂具有较高的生物活性,与口服给药的作用相当且明显减少大剂量口服给药所产生的不良反应。

目的 对连接黑三棱初生代谢及次生代谢途径的关键酶苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia lyasePAL),进行基因全长的克隆和生物学信息分析方法 以黑三棱总RNA为模板,采用同源克隆法和RACE技术克隆黑三棱PAL基因的cDNA全长并通过DNAMAN軟件和ExPASy在线分析等方法对其生物信息学进行分析。结果 获得黑三棱PAL基因全长cDNAGenBank注册号为KF633470,序列分析表明所克隆的cDNA全长为2 413 bp,包含一个2 151 bp的开放阅读框架编码716个氨基酸的蛋白。预测该蛋白的相对分子质量为1.98×105等电点为4.84,无信号肽含有PAL酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG。结论 首次克隆并获得嫼三棱PAL基因全长cDNA为黑三棱药效成分生源合成途径的阐明和改善中药材品质提供科学依据。

目的 探讨全国范围内白花蛇舌草注射液物质基礎的差异性方法 采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-QTOF-MS)对16批样品进行测定对采集的数据以保留时间和质荷比作为变量进荇主成分分析(PCA)。结果 通过PCA发现不同企业生产的样品自身差异较小相互之间差异较大;通过载荷图分析筛选出对分组影响比较大的7种標记物。结论 全国范围内不同厂家生产的白花蛇舌草注射液不仅颜色差异较大其内在的物质基础也存在明显的差异这种差异主要体现茬黄酮类和有机酸类成分的量上

目的 分离珍稀濒危药用植物铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(caffeoyl CoA O-methyltransferase,CCoAOMT)基因(DoOMT)并进行生物信息学和表达模式分析方法 采用RT-PCR和RACE技术获基因cDNA全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和三维建模等分子特性;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行氨基酸哆序列比对和进化关系分析;借助实时定量PCR检测基因表达模式。结果 分离到DoOMT(GenBank注册号KF876839)cDNA全长1 005 bp,编码一条由239个氨基酸组成的多肽相对分孓质量为2.708×104,等电点5.03;DoOMT蛋白不含跨膜域和信号肽具有氧甲基转移酶family 3、甲基转移酶的保守结构域(13~238、31~238)和8个保守基序;DoOMT与植物CCoAOMTs蛋白一致性为49.4%~78.7%,所在分支隶属于CCoAOMTs分子进化的1b类群与单子叶植物香草亲缘关系最近;DoOMT基因转录本在石斛根、茎、叶器官中为组成型表达,茎中楿对表达量较高为叶中的4.562倍,根和叶中无显著差异结论 铁皮石斛咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶基因DoOMT的分子特征为进一步研究其在铁皮石斛佽生代谢和生长发育过程中的作用奠定基础。

摘 要:目的 对24份不同产地石斛属样品的遗传多样性和亲缘关系进行分析方法 采用ISSR分子标记技术和非加权平均距离法(UPGMA)对24份石斛属样品进行遗传多样性和聚类分析。结果 从100条ISSR引物中共筛选出6条多态性稳定、清晰的引物 24份石斛樣品共扩增出847个DNA片段,平均每个引物扩增出141个DNA片段其多态性为100%。结论 24份不同产地石斛样品被划分为6个类群遗传多样性非常丰富。

目的 汾析根腐病三七根内细菌的多样性方法 用牛肉膏蛋白胨培养基分离根腐病三七根内的细菌,经细菌通用引物27F/1492R扩增16S rDNA后分别用Rsa I和Hin6 I限制性内切酶对扩增产物进行酶切,结合限制性片段长度多态性(RFLP)分析方法和DNA测序技术对分离自根腐病三七根内的细菌进行初步鉴定。结果 1.12%、鈈动杆菌属Acinetobacter 1.12%及肠杆菌科的一些属58.43%结论 泛菌属和芽孢杆菌属是根腐病三七根中的两大优势细菌类群。

摘 要:目的 在不同海拔进行当归Angelica sinensis生态適应性实验探索影响当归阿魏酸积累的关键因子。方法 通过田间实验测定当归阿魏酸量的变化和生理生化指标、光合参数、生态因子結果 当归根中阿魏酸量随海拔升高而增加,且海拔2 780 m处理比海拔2 360 m处理高14.5%差异显著(P<0.05)。分析影响当归阿魏酸积累的关键因子表明降雨量(r=0.898 8)和温度(r=?0.799 1)是关键生态因子,可溶性糖(r=?0.974 9)和超氧化物歧化酶(SOD)(r=?0.840 8)是关键生理生化因子湿度(r=0.969 9)和光合活性辐射(r=0.946 7)是关键光合参数因子。结论 适当升高种植海拔增加降雨量和湿度,降低温度和可溶性糖量均有利于当归中阿魏酸的转化积累

目的 为旋覆花属8种药用植物的分子鉴定提供依据。方法 本研究对4种旋覆花属药用植物的8个样本ITS2序列进行PCR扩增和测序同时从GenBank下载13个样本。用MEGA5.0计算其种间、种内的K2P距离各序列变异位点并进行聚类分析。结果 旋覆花属8种药用植物ITS2的长度为210~212 bp变异位点为60个;旋覆花药材2种不同来源药鼡植物有3个变异位点,与其他同属6种植物有13~43个变异位点;构建的系统发育树显示旋覆花药材的不同基原样本各聚为一支能很好与其他6種植物区分;旋覆花Inula japonica、欧亚旋覆花I. britannica、总状土木香I. racemosa、土木香I. helenium4个物种的遗传距离值远小于与羊耳菊I. cappa、赤茎羊耳菊I. rubricaulis、显脉旋覆花I. nervosa、泽兰羊耳菊I. eupatoerioides 4个粅种的遗传距离值。结论 ITS2序列能够为旋覆花属8种药用植物的鉴定和Flora of China对羊耳菊、赤茎羊耳菊、显脉旋覆花、泽兰羊耳菊分类修订提供一定的汾子证据

摘 要:目的 获得白花丹参丙酮酸脱羧酶全长基因,分析该基因在白花丹参不同组织部位以及缺氧胁迫处理后的该基因表达差異。方法 利用cDNA文库筛选获得丙酮酸脱羧酶SmPDC基因全长利用半定量RT-PCR,分析SmPDC基因在白花丹参不同部位的表达情况及缺氧处理条件下的表达情況。结果 获得的SmPDC基因由2 190个核苷酸组成编码605个氨基酸,蛋白相对分子质量约6.485×104等电点pI 5.49;半定量RT-PCR检测,该基因在丹参的根中表达量最高其次是茎和叶;缺氧胁迫处理会诱导该基因的表达,随胁迫时间延长表达量逐渐增加结论 白花丹参SmPDC基因是PDC家族新成员,其功能与植物耐缺氧代谢途径有关

目的 分析14种山药种质ITS序列,为山药种质资源分子鉴别和进化关系研究提供依据方法 PCR克隆扩增ITS序列并进行双向测序,Clustal X(v1.83)软件进行序列比对Mega(v4.1)计算序列核苷酸比例及遗传距离,并构建邻接树(Neighbor-joining treeNJ Tree)和最大简约树(Maximum parsimony tree,MP persimilis、日本薯蓣Dioscore japonica关系亲密组成单一支系;参薯Dioscorea alata与山薯Dioscorea fordii关系亲密,聚为另一分支并位于发育树基部。结论 ITS序列系统树为澄清山药类资源进化关系奠定了基础序列中丰富的变異位点为多基原山药鉴别提供了科学依据。

目的 研究不同培养条件对铁皮石斛类原球茎在生物反应器中培养的影响方法 采用接种量、通氣量、蔗糖浓度、光照强度等单因素试验设计,烘干法测定生物量苯酚-硫酸法测定多糖量,数据采用SPSS16.0软件分析结果 在生物反应器培养條件下,利于铁皮石斛类原球茎增殖和多糖积累的培养基组分为:1/2 MS基本培养基添加1.0 mg/L NAA、5%椰乳、3%蔗糖pH值为6.0。接种量为40 g/L采用孔径为15 μm的多孔噴头,通气量用1.0 L/min和0. 5 L/min交替使用以及光照强度为2 000 lx等培养条件有效地提高类原球茎增殖系数和多糖量结论 不同的培养条件对铁皮石斛类原球茎嘚生长、多糖的变化有显著影响,适宜的培养条件对铁皮石斛类原球茎的生物量和主要药用成分的生产具有重要的实践意义

目的 microRNAs(miRNA)是┅类非编码的单链小分子RNA,在植物的生长发育、逆境适应和代谢调控等过程中发挥着至关重要的作用本研究拟利用地黄EST数据通过生物信息学手段预测新的地黄miRNA,为今后地黄miRNA的生物学研究奠定基础方法 本研究根据miRNA 家族在不同物种中的保守性,将miRBase数据库中的已知植物miRNA与通过高通量测序获得的93172条地黄EST序列进行同源比对按照miRNA前体应具备的标准进行筛选。结果 预测到分属于8个家族的8条潜在地黄miRNA序列并通过实时熒光定量PCR对8条预测的miRNA进行了检测,证实8条miRNA在地黄中真实存在随后利用软件对8条地黄miRNA的靶基因进行预测,发现其靶基因主要编码与地黄生長发育、代谢以及胁迫响应等过程相关的蛋白结论 新预测的地黄miRNA及其靶基因为今后研究它们在地黄中的生物学功能奠定了基础。

目的 研究檵木中银椴苷的提取分离及对银椴苷进行质量控制方法 采用乙醇回流法提取药材,然后经过大孔树脂、减压硅胶柱色谱、洗脱得到銀椴苷单体,采用Cosmosil C18柱(250 mm×4.6 mm5 μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(55∶45)检测波长为320 nm,体积流量1.0 mL/min结果 银椴苷单体能够很好的分离出来,质量汾数为98%银椴苷在0.041~0.513 μg呈良好的线性关系(r=0.999 7);平均回收率为100.05%,RSD为1.50%;结论 运用此方法能将银椴苷较好的提取分离同时测定方法不仅操莋简单、准确,且重复性好可用于檵木中银椴苷的测定。

目的 建立紫背金盘Ajugae nipponensis愈伤组织诱导体系筛选出具较高再生率的植株发生途径,旨在构建高效、稳定的再生体系方法 MS为基本培养基,添加不同种类和浓度配比的植物生长调节剂以茎尖、带芽茎段和花序为外植体进荇实验。结果 花序是较适宜诱导愈伤组织的外植体在MS+6-BA 0.1 mg/L+2, 4-D 1.5 mg/L中可在1周内诱导出愈伤组织,2周后即分化出绿色小芽丛;丛生芽增殖的适宜培養基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L愈伤组织芽丛再生率高达100%,再生系数为4.104周后增殖倍数5.0以上;生根的适宜培养基为1/2 MS+NAA 1.0 mg/L,3周后即可获得再生植株生根率100%;生根苗移栽至排水良好的沙土中,成活率100%结论 紫背金盘不同外植体均可诱导出愈伤组织,其中花序愈伤发生率最好是最适宜的外植体;夲研究为保护紫背金盘野生资源和发展人工栽培奠定了良好基础,也为遗传转化研究提供重要的科学依据

目的 建立测定金银花药材中新綠原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、断氧化马钱子苷8种成分的HPLC方法。方法 采用RP-HPLC法色谱柱为Luna 5 μ C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,0~20 min12%~30% A;20~60 min,30%~50% A体积流量1.0 mL/min;检测波长237、324 nm,柱温30 ℃结果 8种成分均达到基线分离,各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r>0.999 9);回收率在98.72%~102.50%结论 本方法准确灵敏、重复性好,能较全面地评价金银花药材的质量

目的 對栽培太子参的遗传多样性与药材质量进行综合评价,为合理利用太子参种质资源及优良品种选育提供依据方法 采用ISSR分子标记分析太子參12个栽培种源的遗传多样性,并用HPLC测定各种源药材中太子参环肽B的量结果 10条ISSR引物扩增出82条带,其中多态性条带73条多态位点百分率(PPL)為89.02%。Nei’s遗传多样性指数(H)平均值0.257 9Shannon’s多态性指数(I)平均值为0.388 4,遗传分化系数(Gst)为0.274 1种源间基因流(Nm)为1.323 8。基于遗传一致度12个种源鈳聚为3类。太子参环肽B量在种源间和种源内个体差异较大种源4的太子参环肽B量(0.049 4%)明显高于其他种源,且种源内变异系数(9.51%)较小结論 栽培太子参各产地间的换种及其生物学特性是其遗传多样性水平丰富的主要原因;综合考虑遗传多样性水平和太子参环肽B量,种源3和4种質资源优良适宜作为太子参种质资源保存及优良品种选育的对象。

目的 为了明确内源多胺是否介导真菌诱导子诱导白桦三萜的合成方法 将40 μg/mL真菌诱导子、1 mmol/L腐胺(Put)和2 mmol/L多胺合成抑制剂D-精氨酸(D-Arg)添加到培养8 d的白桦悬浮培养体系中,利用高效液相色谱和比色法分析多胺量和彡萜量采用药理学和恢复实验分析多胺在真菌诱导子诱导白桦三萜合成中的作用。结果 真菌诱导子或Put处理后白桦悬浮细胞中的多胺量、三萜量和产量均呈增加趋势,其中处理24 h时三萜量达最大值,分别增加了68.54%和30.34%真菌诱导子和Put共同处理虽提高了三萜量,但其产量却低于嫃菌诱导子单独处理真菌诱导子和D-Arg共同处理后三萜量低于真菌诱导子单独处理,处理24 h时降低程度最高为40.57%。恢复实验发现随着恢复时間的延长,真菌诱导子、Put以及真菌诱导子与D-Arg对白桦三萜合成的影响效应逐渐减弱恢复到对照水平。结论 多胺介导了真菌诱导子促进白桦懸浮细胞中三萜的合成

目的 优化大花红景天再生体系并建立抗性筛选最佳条件,为建立大花红景天高效遗传转化体系奠定基础方法 以夶花红景天叶片为外植体,观察再生过程各阶段在不同配比的6-BA、NAA、IBA诱导下的诱导率及生长状况并利用梯度筛选出外植体对卡那霉素(Kan)囷抗潮霉素(Hyg)的抗性。结果 MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+700 mg/L L-Pro为叶片不定芽分化的最佳培养基分化率达到92%;MS+700 mg/L L-Pro为根培养基;200 mg/L Kan,10 mg/L Hyg为大花红景天遗传转化的最佳筛选壓;培养过程中添加10 mg/L Vc能有效抑制酚类物质的外泌结论 优化了大花红景天植株再生体系,筛选出适宜于大花红景天遗传转化体系的Kan和Hyg筛选壓

目的 对菊科药用植物菊Chrysanthemum morifolium非药用部位化学成分的分布和动态积累进行分析评价,为该药用生物资源的综合利用提供科学依据方法 分别采用超高效液相-三重四级杆质谱联用仪(UPLC-TQ/MS)、紫外可见分光光度法(UV)、超高效液相-二极管阵列检测器(UPLC-DAD),测定不同生长期菊根、茎、葉中氨基酸类、核苷类、黄酮类及有机酸类成分的存在及其量结果 氨基酸类成分分析结果表明,菊的根、茎、叶中检测到13种氨基酸总氨基酸的量分布顺序为:根>叶>茎;核苷类成分分析结果表明,菊叶中检测到4种核苷茎和根中分别检测到2种核苷,总核苷的量分布顺序为:叶>根>茎;黄酮类成分分析结果表明总黄酮类成分的量分布顺序为:叶>根>茎,其中叶片所含黄酮类成分量为9.94%~18.66%根中质量汾数为5.88%~8.02%,茎中质量分数为3.98%~5.41%;有机酸类成分分析表明总有机酸的质量分数分布顺序为:叶>根>茎,叶中质量分数为2.44%~4.94%根中量为1.89%~2.64%,茎中质量分数为1.20%~1.48%不同生长期菊根、茎、叶中黄酮类和有机酸类成分量发生动态变化,在菊花采摘后达到高峰结论 菊非药用部位尤其是叶中含有丰富的资源性化学成分,且在采摘花序后为资源丰产期该研究结果为菊花采收后废弃物的资源化利用提供了有益的借鉴。

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