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北京大学第一医院病理科关于开展实时荧光定量PCR技术检测EGFR和K-ras基因突变的通知
时间： 10:24:00 作者： 病理科 来源：
　　&&& EGFR属受体型酪氨酸激酶（Receptor Tyrosine Kinase, RTK）位于细胞表面，其活化可促进细胞生长分化、加速细胞周期、促血管形成等。许多恶性肿瘤中存在EGFR过表达和基因突变而导致其活化，与肿瘤的生长、侵袭和转移等关系密切，这些特点同时使EGFR成为肿瘤治疗的理想靶点。当前针对EGFR的分子靶向药物主要包括EGFR单抗和酪氨酸激酶抑制剂（Tyrosine kinases inhibitors，TKIs），因其在肿瘤治疗中有效性，而受到关注。但仅部分患者对靶向药物治疗有效。研究已证明EGFR激酶编码区基因突变是TKIs奏效的必要条件，而野生型则基本无效。K-ras是EGFR下游的关键调节分子，K-ras基因突变是靶向治疗耐药的主要原因。因此，2010年ASCO肺癌治疗规范及2011年NCCN指南中提出，拟用靶向治疗非小细胞肺癌（除鳞状细胞癌外）患者必需进行EGFR基因突变检测，筛选出对TKIs敏感的患者，指导临床用药。2011年NCCN指南中也明确指出大肠癌患者在使用EGFR单抗治疗前应进行K-ras基因突变检测。鉴于这种靶向药物不菲的价格，在应用靶向治疗前进行EGFR和K-ras基因突变的检测，筛选敏感的个体非常必要。
&&& 研究显示EGFR基因突变集中于18-21号外显子，其中19号外显子缺失突变（del746-752）和21号外显子外显子上的点突变（L858R）覆盖了EGFR所有突变的的85%-90%。其它少见突变主要位于第18和20号外显子。K-ras基因突变主要发生于第二外显子的12和13号密码子。实时荧光定量PCR法（TaqMan-MGB）是目前检测基因突变最有效的方法之一，可以在同一试管完成DNA扩增和检测，避免交叉污染，技术操作相对简便快速，特异性和敏感性高。我实验室也采用正规认证的PCR仪、检测试剂和国际指南指导实验进行，但任何人为实验均有其主观局限性，一些客观因素也可能对检测结果产生影响，如基因突变的复杂性和多样性、石蜡包埋组织的局限性等，部分病人虽经规范技术操作却仍得不到明确结果。建议进一步结合其它检查如EGFR蛋白表达、扩增等检测结果，并需要临床综合判断；另外由于基因组信号调节系统异常复杂，部分EFGR突变患者对TKIs治疗并不敏感，可能与其下游靶基因状态有关。因此建议同时检测EGFR和K-ras基因突变情况。此外，该项检测将为临床应用提供重要参考信息，但最终用药还取决于临床医生的综合判断。
&&& 我科将利用既往分子检测所积累的丰富经验,尽量克服本检测方法的局限性。采用ABI(7500) 荧光定量PCR仪及已购买并预实验了国际上最受认可的试剂，通过专人技术操作和结果判读等措施减少不确定性，以为临床提供尽可能准确的检测结果。目前我科已做好各项准备工作，拟在近期开展相关检测工作。对病理确诊为鳞状细胞癌以外的非小细胞肺癌和大肠癌，拟靶向治疗的患者，由临床医生提出申请（附申请单式样），病人或家属到病理科签署知情同意书，我科将采用实时定量PCR法（TaqMan-MGB）检测EGFR基因突变和/或K-ras基因突变，并专项报告。
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&北京大学第一医院病理科
2011年12月12 日
北京大学第一医院 版权所有　京卫网审字(2001)27号& 文保网安备案号:&& 京公网安备：号& 京公网安备：地址：北京市西城区西什库大街8号　邮编：100034　联系电话: URL: .cn 　E-mail: &&& 技术支持“”关于北京各大医院病理会诊的流程_百度文库
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&&北​京​协​和​、0、​肿​瘤​和​北​大​医​院​等​病​理​会​疹​流​程
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你可能喜欢北大人民医院，我拿什么来相信你？！　　强忍着悲痛，我反复数次，才写完这篇文章。因为这是一段令人伤心的发生在我们家庭里的事，每当想起，我的心就一阵阵刺痛，甚至有窒息的感觉。但是为了揭露这家医院的种种不齿行为及黑幕，为了避免更多的人上当受骗，为了避免更多的家庭陷入悲痛，也是为了让这个社会多一份和谐，我觉得我有责任、有必要提起笔来，将我们的不幸遭遇告诉大家。　　我父亲今年70岁，平时身体相当好，很少生病。日，他突然感到胸闷气短，到医院做检查，医生诊断为冠状动脉粥样硬化性心脏病，应立即住院治疗。住院一段时间后，经过口服药及输液等治疗手段，父亲感觉一切正常，就准备出院。可是医生说过几天有个北京专家要来坐诊，请专家看看更放心。过几天，专家来了，冠状动脉造影检查显示左右冠状动脉均堵塞严重。专家建议立即手术，并提出搭桥和支架两种方案，我们选择了创伤较小的支架介入疗法。当天通过桡动脉在右冠放了两个支架，感觉良好。专家有说左边冠状病变复杂，需到北京手术，等他联系好床位后通知我们。我们虽然不是太懂，但有些担心，问专家能否等等再做，专家斩钉截铁地说不行，必须尽快做，否则人随时可能因心肌梗塞引发生命危险。经过讨论，我们决定听专家的，可谁知道从此将老父亲送上了不归路。　　这个专家叫王伟民，是北京大学人民医院的心血管科主任。　　4月12日，我们陪爸爸一起坐火车来到北京。第二天，找到专家安排住院，也没有过多的检查和询问，当天下午就做了支架手术，通过股动脉在左边放了3个支架，一个进口的，两个国产的。手术后当天下午只挂了一瓶生理盐水，从晚上开始逐渐增加液体，最多的时候4瓶液同时在输，分别有肝素钠、爱倍、左克、法安明等，每天下午还有一个肚皮针。同时还有每天早上的口服药，共有5种，分别是拜阿司匹林、波利维、阿尔卡尔、欣康、瑞泰等。因在当地放完两个支架后，基本上没有输任何液体，而且口服药还没有这么多。我们当时就有些疑虑，先问主管医生许俊堂，他说没事也不解释具体各种药的功效以及为何用这些药。第三天专家查房时我特意又问了两次，每次都被专家威风凛凛、盛气凌人地拒绝，只是说家属不用管用药的问题，照顾好病人即可。因为专家发话了，尽管心里有些惴惴和忐忑，我们还是没有多想太多，只是盼着早日结束能返回老家（原计划5天）。谁知道从第四天起，爸爸突然感觉头痛，而且越来越严重，中午吃饭甚至都拿不住筷子夹不住饭菜。经检查血压偏低，当时的液体只剩下爱倍，在我们的要求下值班医生（姓李）停止输液。傍晚时分，爸爸感觉好些，睡觉前我还陪她慢慢在病房走了一圈。晚上爸爸头疼加重，护士就能检查个体温和血压，都正常。凌晨4点，爸爸疼的无法入睡，值班医生检查后也没有什么好办法，开了两片止疼药吃下去。好不容易支撑到天明，我们催促医生赶快想办法，医生开单子让检查脑部。4月17日，星期天，早上7点多，爸爸感觉眼睛看不清东西，视力越来越模糊，而且疼的眉头紧紧蹙在一起。先做眼睛检查，眼底眼压正常，再做脑部CT，结果鞍区占位。原来爸爸有个脑垂体瘤（良性），本来已经基本萎缩了，现在可能已经充血。　　做完检查，爸爸意识已经开始模糊，坐在轮椅上快要昏迷。我们赶快回病房，爸爸躺在床上一动不动，水也不喝，话也不说，像在睡觉一样。在我们催促下，几个年轻医生会诊，说可能脑部有问题，等到明天周一再做个增强CT看看。看着爸爸皱眉躺在床上，我们的心都碎了，爸爸可是坐火车来的啊，怎么会这样？！中午，爸爸没办法吃饭，还是一动不动。我和哥哥在床前守候，干着急束手无策。几次催促医生护士给做手术的王伟民联系，均说联系不上（现在想想，估计又去外地走穴骗钱去了，据说这帮家伙都是千万富翁啊）。下午，爸爸状态进一步恶化，感觉人都奄奄一息了。我们急了，找医生。他们又联系检查室，马上做了增强CT，显示脑垂体瘤出血。这时候，主治医生不在，管床医生不在，就一个值班的年轻医生。下病危通知书，让签字，我们还能怎么办。随后爸爸进入重症监护室，医生说病情复杂，脑部要止血，心脏要抗凝，用药矛盾。暂时保守治疗，上些脱水的药看看情况。　　当天晚上，家里人都赶过来了。4月18日，上午到医院，神经外科主任张庆俊让我们看片子，说这种情况不乐观，压迫视神经，这样下去眼睛肯定不保，而且有生命危险，建议手术切除垂体瘤。下午5点20分，爸爸进入手术室，直到第二天凌晨0点50才出来，随后进入重症观察室，上午10点多转入重症监护室。下午3点，我们才有机会看望父亲，可是看了心更痛，几乎认不出了。老爸全副武装躺在床上，周围被各种管子仪器包围，全身浮肿，嘴上戴着呼吸机，鼻子里插着胃管，手上插着输液管。看不见的被子下面，身上还有尿管和各种监测探头。爸爸没醒，喊他也没有反应，只是左手在不停地抓挠。探视时间只有一个小时，我们不停地呼喊，可是爸爸只是昏睡。　　第二天下午，我们又来探视，发现爸爸很烦躁，左手不停地动来动去，左腿也有动作，赶快问医生，答复等会再做个脑部CT。我们又去找主刀的张主任，他说动了是好事，不动才麻烦呢。做完CT，病情更加严重，爸爸的左脑大面积梗塞还伴有水肿。又下一次病危通知书，所有人都很茫然无助，可是人还在那里，我们就只能继续听专家在忽悠，希望老爸能挺过这几天应急期吧。　　在重症监护室呆了9天，父亲一直没有醒过来，而且一直靠冰毯降温，4月28日转到普通病房。在普通病房呆了8天，人还是那样子，处于昏迷状态，每天没完没了地输液，时不时抽血化验。我们已经筋疲力尽，而且钱也不多了，5月5日下午，我和哥哥陪着昏迷的爸爸心力交瘁地返回老家，住进了当地医院。　　爸爸目前有所恢复，体温正常了，尿管和气管都拔掉了，输液慢慢减少直至停止，每天通过鼻饲进营养流食和口服药物。现在还没有任何知觉，偶尔流露出哭泣的表情，也许在表达自己的伤悲和对黑心医院无声的控诉！我们都希望有一天爸爸能苏醒过来。无论如何，爸爸不可能恢复如初了，家里没有往日的欢乐了。我断断续续将这段经历写下来，希望大家引以为戒，愿天下病人都能康复，愿每个人都能永远地留住自己的健康。　　我们认为北大人民医院有几个违规之处，总结如下：　　一、违法行医　　《北京市医师多点执业管理办法(试行)》规定：从日开始，符合条件的中级以上职称的执业医师，最多可以在本市范围内的3家医院出门诊。但王伟民私自跑到河南省来坐诊明显就是违法规定了。其目的何在，不外乎多挣点外快，充实钱袋子。而且这种人动机不纯后，很难能客观公正地为病人拿出科学合理的治疗方案。他必然会从私人目的出发，尽可能地个人利益最大化，其结果就是遵循“贼不走空”原则，尽量忽悠病人进行手术治疗。　　二、剥夺病人及家属知情权　　卫生部2006年就规定，所有的医疗机构必须为患者提供每日清单供核对。但是这家就在卫生部对面的所谓三甲医院竟然公开违反规定，藐视国家法律法规，藐视所有病人及家属，从不提供对账清单。住院期间，我多次问医生护士索要清单，均答复电脑系统无法提供，只能显示到目前所花费用，清单出院时才有。出院时结账倒是出来一份汇总账单，我一看就头大了，竟然是把住院期间所有费用按照手术费、材料费、检查费、化验费、护理费等分类汇总，还是没有每日清单啊。别说对账了，让人看起来一头雾水，只知道我需要交这么多钱。可以说，这样给病人及家属带来极大不便，倒是方便了黑心医院收钱分赃。而且患者别想对医院翻旧账核对费用，特别是住院时间长、治疗费用高的，根本就无处下手。　　住院期间，无论在普通病房还是重症监护室，家属很难和医生甚至护士进行良好沟通（当然不是所有人）。首先医生都很忙，忙得没有时间能坐在那里听你说完话，忙着做手术，忙着坐诊检查，忙着推卸责任保护自己，忙着开银行账户，忙着和银行核对每日账单，忙着投资为大笔钱找出路。。。。。。病人算老几，家属算老几，既然进了我的门，哈哈对不住啦，您慢慢躺着吧，看我小李飞刀如何划拉。而且正好又多一个实验品，我还有几刀没练好呢。什么？想告我！随你啦，卫生部就在对面，每天都有人打条幅诉委屈表抗议，结果又能如何？连看热闹的人都是寥寥的。你就不想想，如果没有相关部门的不作为，我们能如此生意兴隆、财源滚滚吗？（好些有些跑题了）　　三、推卸责任，不讲医德　　我父亲开始头痛时正好星期六，只有值班的年轻医生在，第二天，我们催促了多次，医生均说没有给主治医生王伟民联系上。这是真的吗，我想无论人在哪里，手机总要开吧。难道真是忙着赚钱到如此地步，做完手术收完钱就不管病人死活了吗？就算你人在外地走穴，起码也要通过电话了解病情和家属沟通吧。姓王的，你到底考没考虑病人及家属的感受？！　　后来见到王伟民，这厮竟然说属于正常用药，完全是由于病人脑垂体瘤引起的。一句话将责任完全推到病人这边，而且还大言不惭地说，幸亏没有做搭桥手术，否则人早已完了。这是什么屁话，什么狗屁强盗逻辑？你手术前直说病人必须做手术，否则随时有生命危险，老将病人及家属思路往有利于你谋算的方向发展，根本没有站在病人立场方面客观评价做和不做手术的利与弊、收益与风险，只是忽悠说要不搭桥要不支架，误导患者以为不手术危险，手术后一切OK。而且没有认真检查或询问病人以前有无什么病史，到北京后就匆忙手术。病人完全被牵着鼻子、蒙着眼睛、揣着血汗钱，满怀着对首都大医院主任医生的敬畏、期待和感谢过来，最后在家属极度疲劳悲愤的陪护下奄奄一息地回去。　　另外父亲脑垂体瘤手术未必成功，术后第二天就导致脑梗塞，主刀医生还当着家属面大言不惭对学生说，这是多么好的案例。医术医德全然不顾，怎么能让老百姓放心去看病治疗，和草菅人命有何区别？！大家说说看，这是什么样的医生？！这是什么样的医院？？！！　　还有，最近搜索资料时才发现，就是这家医院，医患纠纷不断，非典时期还造成患者相互感染。令人发指的是，前几年本院研究所的某专家患病（普通疾病），就在自家医院被治死啦，而且院方百般推卸责任，篡改病历，极力阻扰事故调查。医德何在，天理何在，法律何在，人权何在？！　　希望广大受害者联合起来，讨伐万恶的北大人民医院！！！　　北大专家死在自家医院：　　.cn/c//.shtml　　/7940182.shtml　　医生和强盗的区别：/question/.html　　我的空间链接：http://user./325297?ptlang=2052　　请各位朋友帮忙转发，仅为了避免更多的人上当受骗。　　/i/　　/read__0.html
楼主发言：1次 发图：0张
　　　　路过
　　没办法....
　　你可知道诽谤和中伤也是触犯法律的，我也是一名医生，从你的叙述我没有看出你的医生有违反诊疗常规的地方。这都是不可预料的，你的心情可以理解，但医学就是很复杂，不论怎样都要保持理性，恶意中伤会被告的　　
　　气愤，太气愤了，唉！当今共和国，还有几个医院值得信？还有几个医生有医德？长此以往，人人喊打的不只是老鼠，又多了一种生物，叫做医生的：人。。　　
　　默默问一句，一般做手术都会有病史的询问吧，你们没给说有垂体瘤么？这么重要的事不能省，就算医生没有问你们也得说啊……　　提醒大家去医院看病，自己有什么病史一定要给医生说啊！有些药是有试用限制的，某些病不能用。　　另外，对已经萎缩的垂体瘤在输液几天后就充血压迫表示很惊讶，我是医学生，当初学病理的时候在书上没有看见有这样的说法。果然还是要经过临床才有用。
　　@cayery 同是受害者，能给个联系方式吗
　　比起北大一院和北大三院，北大人民医院确实差了不少。　　原因说不清楚.....
　　@cayery
10:59:34　　北大人民医院，我拿什么来相信你？！ 　　强忍着悲痛，我反复数次，才写完这篇文章。因为这是一段令人伤心的发生在我们家庭里的事，每当想起，我的心就一阵阵刺痛，甚至有窒息的感觉。但是为了揭露这家医院的种种不齿行为及黑幕，为了　　-----------------------------　　别的我不敢说，那值班年轻医生不可能有主任医生的电话，他们也许是别的医院来实习，地位很滴，还不如这医院护士，哎都不知道怎么说了，医生不是神，有的病确实没办法治，不要手术失败病没看好就是医生的责任，这话也太不负责了。
　　北大人民医院的林剑浩令人无语
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