D氨基葡萄糖片促进猪圆环病毒复制的机理是什么?

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猪圆环病毒衣壳蛋白的表达及其单克隆抗体的制备
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猪圆环病毒病70问
&& 1.&什么是猪圆环病毒病?
&&& 猪圆环病毒病(PCVD)是指由猪圆环病毒2型(PCV2)所引起又一种新的猪的传染病,临床表现症状多种多样,如断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)和猪皮炎和肾病综合征(PDNS)、猪呼吸系统复合体病(PRDC)、肠炎、繁殖障碍、新生仔猪的先天性阵颤等,其中,PMWS、PDNS和繁殖障碍在临床上常见,对养猪业危害较大。
&&& 2.&猪圆环病毒病是如何发现的?
&&& 1991 年,加拿大西部的兽医John Harding 博士首先发现一群明显消瘦的转群猪,该病是一种新的疾病,被命名为仔猪多系统衰弱综合征(PMWS),但未证实致病原因;直到1998年,研究证实该病有致病性的猪圆环病毒(PCV2)的存在,此后,生产中临床发病猪中不断分离出PCV2。
&& &3.&猪圆环病毒病在世界各国的流行情况如何?
&&& 自发现PMWS后,世界各地陆续报道PCVD的发生和流行。目前,世界上养猪国家(包括中国)均存在不同程度的PCV2感染和流行,但在各个地区的流行情况不同。北美国家很多猪场存在PMWS,长期存在少量猪的死亡,有时,死亡率比平时增高3~4倍;欧洲国家长期的高死亡率更加普遍。
图1. 截至2010年世界发生猪圆环病毒的国家和地区(红色)
&&& 4.&我国是否存在猪圆环病毒病?
&&& 有。我国于2000年证明存在该病。年临床发病猪PCV2检测阳性率大约20%,此后,临床发病猪检出阳性率逐渐升高。目前,我国各个省市或自治区存在不同程度的感染和流行,几乎所有规模化猪场都存在不同程度的感染,临床发病猪PCV2检测阳性率达50%以上,而且,混合感染相当普遍。年南京农业大学对来自我国11个省市1146份患病仔猪病料进行了检测,PCV2阳性率为35.8%(图2)。
图2. 我国年规模猪场患病仔猪PCV2检测结果
&&& 5.&猪圆环病毒病对养猪业造成怎样的损失?
&&& 猪群感染PCV2后生长缓慢、体重减轻,死亡率上升,育肥猪出栏期推迟,母猪出现繁殖障碍,母猪繁殖性能下降。同时,病毒引起猪群免疫抑制,给养猪业造成严重经济损失。
&&& 6.&猪圆环病毒是如何分型的?
&&& 猪圆环病毒根据其抗原性和核苷酸序列分为PCV1和PCV2两个血清型,但只有PCV2有致病性。近几年,国内外很多研究结果证明,PCV2主要分为PCV2a、PCV2b、PCV2c三种基因亚型。我国PCV2又可分为PCV2a、PCV2b、PCV2d、PCV2e和PCV2f 5种基因亚型。目前,我国PCV2主要流行毒株属于PCV2b。
&&& 7.&PCV2有什么特点,病毒基因组主要编码什么蛋白?
&&& 猪圆环病毒属于圆环病毒科成员,呈二十面体对称、无囊膜。病毒粒子直径为17nm,是迄今发现的一种最小的动物病毒(图3)。PCV2基因组为DNA,呈环状,大小bp,主要编码复制相关蛋白、核衣壳蛋白和与细胞凋亡相关的蛋白,其中,核衣壳蛋白(Cap)是主要的抗原蛋白。目前,ELISA抗体检测试剂盒和基因工程疫苗主要采用Cap蛋白。
&&& 8.&PCV2主要感染什么细胞?
&&& PCV2在猪体内主要感染淋巴细胞,体外在PK-15细胞上生长,不能引起细胞病变,但感染细胞内含有胞浆或核内包涵体。PCV的PK-15细胞培养物中加入d-氨基葡萄糖盐酸,可促进病毒复制。
&&& 9.&猪圆环病毒在环境中能存活多长时间?
&&& 该病毒对外界的抵抗力较强,在pH3的酸性环境中很长时间不被灭活。病毒对氯仿不敏感,在56℃或70℃处理一段时间,仍不失活。在高温环境(72℃)也能存活一段时间。
&&& 10.&哪些消毒剂对PCV2有效?
&&& 次氯酸钠、氢氧化钠、过氧乙酸、过氧化氢、双癸基二甲基氯化铵、戊二醛烷基二甲基苄铵、过一硫酸氢钾、二氯异氰尿酸钠、羟基丁二酸等消毒剂能有效地灭活该病毒,有较好的消毒效果。
&&& 11.&PCV2的主要传播途径有哪些?
&&& PCV2对猪只具有较强的易感性,可经口腔、呼吸道途径感染不同日龄的猪,病猪所接触的物品或病猪的分泌物(血液、尿液、粪便或粘液)可能含有传染性病原体。怀孕母猪感染PCV2后,也可经胎盘垂直传播感染仔猪,并导致繁殖障碍。
&&& 12.&猪圆环病毒病病因是什么?
&&& PCV2感染是本病的必须病原,但发病程度取决于感染猪群的诱因,包括猪群数量、猪舍温度、空气和湿度等、猪体PCV2抗体水平、其他疫苗免疫、混合感染、运输应激等。最新研究显示,该病主要原因是:仔猪早期感染PCV2b、早期断奶、应激和其他重要病原的混合感染。
&&& 13.&猪呼吸道疾病综合症(PRDC)中PCV2起什么作用?
&&& 猪呼吸道疾病综合症通常是由两种或两种以上的病原混合感染,在环境等因素作用下引起的仔猪或中大猪出现的一种复杂的综合性病症。PCV2与其他病原混合感染会导致PRDC,但不能认为PRDC的病原中一定含有PCV2。
&&& 14.&PCV2在我国母猪繁殖障碍中扮演什么角色?
&&& 国外研究结果显示,PCV2感染种猪,会引起种猪的繁殖障碍,但引起种猪繁殖障碍病因还有很多,我国尚缺少相关研究数据。
&&& 15.&PCV2是PDNS的唯一病原吗?
&&& 尚不清楚。PDNS病例中还可以分离到其他病原,如巴氏杆菌等。目前,国内外实验室研究还没有复制成功PDNS,因此,PDNS可能是多种因素(如饲养密度过大、通风不良、不同日龄的猪混合饲养、与其它病毒细菌混合感染以及其它紧张刺激因素等)相互协同引起。
&&& 16.&PCV2致病机制是什么?
&&&&PCV2感染与猪细小病毒病、猪呼吸和繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)等疾病密切相关。有实验表明,给PCV2阴性猪只接种PCV2病毒,可以复制出与自然发生的PMWS相同症状,而用猪细小病毒、PRRSV和PCV2同时接种PCV2阴性断奶仔猪,发现PMWS症状比单用PCV2接种产生的症状严重。一般认为,PCV2对机体的影响主要造成免疫抑制,使机体的免疫力下降,造成细菌和病毒的继发感染,从而引起更严重的临床症状。
&&& 17.&PCV2感染免疫特性有哪些?
&&& PCV2感染后猪体会诱导产生体液免疫反应,产生PCV2抗体,同时,可以诱导产生细胞免疫反应,产生一些细胞因子和干扰素。
&&& 18.&PCV2感染后何时产生抗体?
&&& 实验猪感染PCV2后,一般在感染后7天出现ELISA抗体,感染后28天抗体最高,并可以检测到中和抗体。&&&
&&& 19.&抗体对于预防PCV2感染起作用吗?
&&& 有。一般抗体水平高,PCV2病毒血症低。
&&& 20.&母源抗体对预防猪圆环病毒病有作用吗?
&&& 有。增加母源抗体、降低母猪血液中的病毒可以降低猪群子代PMWS的死亡率。
&&& 21.&猪圆环病毒病与猪的遗传品系有关吗?
&&& 不清楚, PCV2可以感染任何品系猪,但我国地方品系猪PMWS发病率相当较低。
&&& 22.&猪圆环病毒病主要发生于哪个阶段的猪群?
&&& 不同国家或地区有所不同,一般断奶后两周逐渐开始,至育肥早期。我国多见于40-120日龄猪群。
&&& 23.&猪圆环病毒病特征性临床症状有哪些?
&&& 猪圆环病毒病主要表现为PMWS和PDNS,临床特征为消瘦、皮肤苍白、呼吸困难,有时有腹泻、黄疸,皮下淋巴结肿大(图4);皮肤出现不规则的红紫斑及丘疹,皮肤病变最先出现在猪体后1/4、四肢和腹部,然后蔓延到胸部、腰背部和耳部。眼观可见圆形或不规则形状的红色到紫色深浅不一的斑点和丘疹,在会阴部和四肢末端结合形成不规则的斑块。随着病程延长,病变区破溃、结痂呈黑色(图5)。
图4. PMWS病猪:皮肤苍白、行动迟缓、生长速度减慢、消瘦、呼吸困难
图5. 10周龄PDNS患猪:全身皮肤出现疹块,呈圆形或不规则的隆起,红色或紫色。
&&& 24.&猪圆环病毒病特征性肉眼病理变化有哪些?
&&& PMWS主要肉眼病理变化为:消瘦,贫血,皮肤苍白,黄疸;淋巴结异常肿胀,切面为均匀的白色;肾脏水肿,苍白,被膜下有坏死灶;肺脏肿胀,坚硬似橡皮样;肝脏发暗,肝小叶间结缔组织增生(图6)。PDNS主要表现全身皮肤出现疹块,呈圆形或不规则的隆起,红色或紫色。淋巴结水肿胀,切面苍白,肾脏水肿,苍白,被膜下有坏死灶(图7);混合感染时,会出现胸腔结水,肺脏有胶冻状渗出等病变(图8)。
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猪圆环病毒病70问
1.&什么是病?
&&& 病(PCVD)是指由2型(PCV2)所引起又一种新的猪的传染病,临床表现症状多种多样,如断奶仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)和猪皮炎和肾病综合征(PDNS)、猪呼吸系统复合体病(PRDC)、肠炎、障碍、新生仔猪的先天性阵颤等,其中,PMWS、PDNS和障碍在临床上常见,对业危害较大。
2.&病是如何发现的?
&&& 1991 年,加拿大西部的兽医John Harding 博士首先发现一群明显消瘦的转群猪,该病是一种新的疾病,被命名为仔猪多系统衰弱综合征(PMWS),但未证实致病原因;直到1998年,研究证实该病有致病性的(PCV2)的存在,此后,生产中临床发病猪中不断分离出PCV2。
3.&病在世界各国的流行情况如何?
&&& 自发现PMWS后,世界各地陆续报道PCVD的发生和流行。目前,世界上国家(包括中国)均存在不同程度的PCV2感染和流行,但在各个地区的流行情况不同。北美国家很多存在PMWS,长期存在少量猪的死亡,有时,死亡率比平时增高3~4倍;欧洲国家长期的高死亡率更加普遍。&
的国家和地区(红色)&
4.&我国是否存在病?
有。我国于2000年证明存在该病。年临床发病猪PCV2检测阳性率大约20%,此后,临床发病猪检出阳性率逐渐升高。目前,我国各个省市或自治区存在不同程度的感染和流行,几乎所有规模化都存在不同程度的感染,临床发病猪PCV2检测阳性率达50%以上,而且,混合感染相当普遍。年南京农业大学对来自我国11个省市1146份患病仔料进行了检测,PCV2阳性率为35.8%(图2)。
图2. 我国年规模患病仔猪PCV2检测结果
5.&病对业造成怎样的损失?
&&& 猪群感染PCV2后生长缓慢、体重减轻,死亡率上升,育肥猪出栏期推迟,母猪出现障碍,母猪性能下降。同时,病毒引起猪群免疫抑制,给业造成严重经济损失。
5.&病对业造成怎样的损失?
&&& 猪群感染PCV2后生长缓慢、体重减轻,死亡率上升,育肥猪出栏期推迟,母猪出现障碍,母猪性能下降。同时,病毒引起猪群免疫抑制,给业造成严重经济损失。
6.&是如何分型的?
&&& 根据其抗原性和核苷酸序列分为PCV1和PCV2两个血清型,但只有PCV2有致病性。近几年,国内外很多研究结果证明,PCV2主要分为PCV2a、PCV2b、PCV2c三种基因亚型。我国PCV2又可分为PCV2a、PCV2b、PCV2d、PCV2e和PCV2f 5种基因亚型。目前,我国PCV2主要流行毒株属于PCV2b。
7.&PCV2有什么特点,病毒基因组主要编码什么蛋白?
&&& 属于圆环病毒科成员,呈二十面体对称、无囊膜。病毒粒子直径为17nm,是迄今发现的一种最小的动物病毒(图3)。PCV2基因组为DNA,呈环状,大小1768或1767bp,主要编码复制相关蛋白、核衣壳蛋白和与细胞凋亡相关的蛋白,其中,核衣壳蛋白(Cap)是主要的抗原蛋白。目前,ELISA抗体检测试剂盒和基因工程疫苗主要采用Cap蛋白。&
图2. 我国年规模患病仔猪PCV2检测结果&
8.&PCV2主要感染什么细胞?
&&& PCV2在猪体内主要感染淋巴细胞,体外在PK-15细胞上生长,不能引起细胞病变,但感染细胞内含有胞浆或核内包涵体。PCV的PK-15细胞培养物中加入d-氨基葡萄糖盐酸,可促进病毒复制。&
9.&在环境中能存活多长时间?
&&& 该病毒对外界的抵抗力较强,在pH3的酸性环境中很长时间不被灭活。病毒对氯仿不敏感,在56℃或70℃处理一段时间,仍不失活。在高温环境(72℃)也能存活一段时间。&
10.&哪些消毒剂对PCV2有效?
&&& 次氯酸钠、氢氧化钠、过氧乙酸、过氧化氢、双癸基二甲基氯化铵、戊二醛烷基二甲基苄铵、过一硫酸氢钾、二氯异氰尿酸钠、羟基丁二酸等消毒剂能有效地灭活该病毒,有较好的消毒效果。
11.&PCV2的主要传播途径有哪些?
&&& PCV2对猪只具有较强的易感性,可经口腔、呼吸道途径感染不同日龄的猪,病猪所接触的物品或病猪的分泌物(血液、尿液、粪便或粘液)可能含有传染性病原体。怀孕母猪感染PCV2后,也可经胎盘垂直传播感染仔猪,并导致障碍。&
12.&病病因是什么?
&&& PCV2感染是本病的必须病原,但发病程度取决于感染猪群的诱因,包括猪群数量、猪舍温度、空气和湿度等、猪体PCV2抗体水平、其他疫苗免疫、混合感染、运输应激等。最新研究显示,该病主要原因是:仔猪早期感染PCV2b、早期断奶、应激和其他重要病原的混合感染。&
13.&猪呼吸道疾病综合症(PRDC)中PCV2起什么作用?
&&& 猪呼吸道疾病综合症通常是由两种或两种以上的病原混合感染,在环境等因素作用下引起的仔猪或中大猪出现的一种复杂的综合性病症。PCV2与其他病原混合感染会导致PRDC,但不能认为PRDC的病原中一定含有PCV2。14.&PCV2在我国母猪障碍中扮演什么角色?
&&& 国外研究结果显示,PCV2感染种猪,会引起种猪的障碍,但引起种猪障碍病因还有很多,我国尚缺少相关研究数据。&
14.&PCV2在我国母猪障碍中扮演什么角色?
&&& 国外研究结果显示,PCV2感染种猪,会引起种猪的障碍,但引起种猪障碍病因还有很多,我国尚缺少相关研究数据。&
15.&PCV2是PDNS的唯一病原吗?
&&& 尚不清楚。PDNS病例中还可以分离到其他病原,如巴氏杆菌等。目前,国内外实验室研究还没有复制成功PDNS,因此,PDNS可能是多种因素(如密度过大、通风不良、不同日龄的猪混合、与其它病毒细菌混合感染以及其它紧张刺激因素等)相互协同引起。&
16.&PCV2致病机制是什么?
&&&& PCV2感染与猪细小病毒病、猪呼吸和障碍综合征病毒(PRRSV)等疾病密切相关。有实验表明,给PCV2阴性猪只接种PCV2病毒,可以复制出与自然发生的PMWS相同症状,而用猪细小病毒、PRRSV和PCV2同时接种PCV2阴性断奶仔猪,发现PMWS症状比单用PCV2接种产生的症状严重。一般认为,PCV2对机体的影响主要造成免疫抑制,使机体的免疫力下降,造成细菌和病毒的继发感染,从而引起更严重的临床症状。&
17.&PCV2感染免疫特性有哪些?
&&& PCV2感染后猪体会诱导产生体液免疫反应,产生PCV2抗体,同时,可以诱导产生细胞免疫反应,产生一些细胞因子和干扰素。
18.&PCV2感染后何时产生抗体?
&&& 实验猪感染PCV2后,一般在感染后7天出现ELISA抗体,感染后28天抗体最高,并可以检测到中和抗体。
19.&抗体对于预防PCV2感染起作用吗?
&&& 有。一般抗体水平高,PCV2病毒血症低。
20.&母源抗体对预防病有作用吗?
&&& 有。增加母源抗体、降低母猪血液中的病毒可以降低猪群子代PMWS的死亡率。
21.&病与猪的遗传品系有关吗?
&&& 不清楚, PCV2可以感染任何品系猪,但我国地方品系猪PMWS发病率相当较低。
22.&病主要发生于哪个阶段的猪群?
&&& 不同国家或地区有所不同,一般断奶后两周逐渐开始,至育肥早期。我国多见于40-120日龄猪群。
23.&病特征性临床症状有哪些?
&&& 病主要表现为PMWS和PDNS,临床特征为消瘦、皮肤苍白、呼吸困难,有时有腹泻、黄疸,皮下淋巴结肿大(图4);皮肤出现不规则的红紫斑及丘疹,皮肤病变最先出现在猪体后1/4、四肢和腹部,然后蔓延到胸部、腰背部和耳部。眼观可见圆形或不规则形状的红色到紫色深浅不一的斑点和丘疹,在会阴部和四肢末端结合形成不规则的斑块。随着病程延长,病变区破溃、结痂呈黑色(图5)。&
图4. PMWS病猪:皮肤苍白、行动迟缓、生长速度减慢、消瘦、呼吸困难&
图5. 10周龄PDNS患猪:全身皮肤出现疹块,呈圆形或不规则的隆起,红色或紫色。&
24.&病特征性肉眼病理变化有哪些?
&&& PMWS主要肉眼病理变化为:消瘦,贫血,皮肤苍白,黄疸;淋巴结异常肿胀,切面为均匀的白色;肾脏水肿,苍白,被膜下有坏死灶;肺脏肿胀,坚硬似橡皮样;肝脏发暗,肝小叶间结缔组织增生(图6)。PDNS主要表现全身皮肤出现疹块,呈圆形或不规则的隆起,红色或紫色。淋巴结水肿胀,切面苍白,肾脏水肿,苍白,被膜下有坏死灶(图7);混合感染时,会出现胸腔结水,肺脏有胶冻状渗出等病变(图8)。&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& A&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&& && B&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& C
图6. PMWS:淋巴结肿胀,切面为均匀白色(A\B);肺脏质度坚硬或似橡皮,其上散在有大小不等的褐色实变区(C)&
图7. PDNS:肾脏被膜下有灰白色坏死灶&
图8. PCV2感染相关的PRDC:胸腔结水,肺脏有胶冻状渗出&
25.&PCV2引起障碍有哪些特征?
&&& 母猪怀孕不同阶段出现流产和死胎(图10)。流产或死亡胎儿表现肝脏充血,心脏肥大,多个区域呈现心肌变色等病变。&
图10. PCV2相关性障碍:母猪怀孕不同阶段出现死胎、木乃伊胎、胎儿浸软等&
26.&PCV2相关性肠炎有哪些特征?
&&& 国外报道,PCV2相关性肠炎主要发生于40~70日龄的猪,发病率10%~20%,死亡率50%~60%,主要表现为腹泻,开始拉黄色粪便,后来拉黑色粪便,生长迟缓(图9)。所有病例抗生素治疗都无效。&
图9. PCV2相关性肠炎:保育后期猪拉黑色粪便(A);肠道黏膜出血,肠系膜淋巴结明显肿大(B)&
27.&PMWS有哪些典型组织病理学变化?
&&& 淋巴结:淋巴细胞缺失,大量组织细胞及多核巨细胞浸润(图11)。肺脏:肺泡壁变厚,有巨噬细胞和少量淋巴细胞、浆细胞的浸润(图12)。肾脏:严重的坏死性血管炎和纤维坏死性血管球肾炎。流产或死亡胎儿心脏出现纤维性或坏死性心肌炎。&
图11. 猪淋巴结组织病理学变化(HE染色)与免疫组化检测PCV2 抗原(右下图):淋巴细胞缺失,出现多核巨细胞;PCV2 抗原阳性细胞为棕黄色(右下图)&
图12. 病猪肺脏出现中度明显炎性细胞和轻度坏死性支气管肺炎(A);免疫组织化学染色,巨噬细胞样细胞内含有PCV2抗原(B)。&
28.&病的免疫抑制有哪些危害?
&&& 免疫抑制可以造成(1)细菌混合感染增多,如副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、链球菌等;(2)加重其它传染病损失,如猪蓝耳病、细小病毒病等;(3) 其它疫苗免疫效果降低,如,目前保育阶段仔猪疫苗免疫抗体普遍较低。&
29.&病如何正确诊断?
(1)临床发病,出现典型症状;(2)病理解剖有典型病理变化;(3)PCV2抗原检测阳性。由于正常哪个猪群存在PCV2感染,该病诊断必须同时具备上述三个条件。&&
30.&诊断病,如何采集什么病料?
&&& 采集患病猪的肺脏、淋巴结、扁桃体等含毒组织,实验室诊断最有意义的组织是淋巴结,要求组织新鲜,或采集后冷冻保存组织。&
31.&的实验室检测方法有哪些?
&&& 目前,各国学者建立了多种针对病原的病毒学、免疫学和分子生物学检测方法,如病毒分离、电镜技术、ELISA、免疫组化技术、PCR和原位杂交等技术,其中,PCR快速、简便、特异,而免疫组化技术比较准确,被国外广泛采用,但技术要求比较高。&
32.&抗体检测方法有哪些?
&&& PCV2抗体检测方法有ELISA、IPMA和间接免疫荧光试验,其中、ELISA方法简便、准确、并且已经有商品化试剂盒。&
33.&抗体水平是否可用于判定猪群保护力?
&&& PCV2抗体水平越高,病毒血症水平越低(图13)。非免疫猪群存在PCV2抗体,表明该猪群曾经存在过该病毒感染,因此,一定程度上讲,PCV2抗体水平可以反映猪群保护力。实验室研究数据显示,猪群免疫灭活疫苗后,可以产生ELISA抗体,但生产中抗体水平与其保护力关系还需要进一步研究。&
图13. 猪血清PCV2含量与抗体水平的关系(引自L. Darwich et al. 2007)&
34.&怎样通过猪群的临床症状判定猪群判定是否存在病?
&&& 严格意义上说,不能仅仅通过临床症状来判定猪群是否感染了,根据流行特征、临床征状和病理变化作出初步诊断。但目前,如果规模化45-120日龄猪出现消瘦、皮肤苍白、行动迟缓、生长速度减慢、低度持续死亡,应首先怀疑该病。&
35.&如何鉴别PCV2感染引起的PDNS?
&&&& 猪皮肤疾病有很多,如葡萄球菌感染、猪丹毒、猪痘、蚊虫叮咬、寄生虫等, 容易与PCV2感染引起的PDNS混淆,应给予鉴别。PDNS通常发生于8~18 周龄的猪,发病率为0.15%~2%,有时候可高达7%。主要临诊特征是全身(尤其是会阴部和四肢)皮肤出现红紫色隆起的不规则斑块,有时体温上升。通常在3天内死亡,有时可以维持2~3 周。剖检可见肾肿大、苍白、有出血点或坏死点。&
36.&引起病暴发的触发因素是什么?
&&& 同为PCV2感染,有些表现临床症状,有些不表现临床症状,其原因还不清楚。PCV2的存在、猪体的状况、管理方法、其他病原和环境条件组合在一起可能发挥着一定的作用,但具体情况尚不清楚。&
37.&控制病有哪些方法?
(1)接种病疫苗(如圆克清);(2)完善传统的管理,尽可能采用分段同步生产、两点式或三点式方式;(3)改进或改善品质,包括维生素、氨基酸及某些微量元素,增强猪体抵抗力,尽力避免使用发霉;(4)有效的环境卫生和消毒措施,减少病毒感染机会;(5)提高管理水平,尽力减少各种应激;(6)病猪隔离,及时治疗或淘汰;(7)引种时检疫隔离,对于人工受精的,选择无PCV2污染的精液。&
38.&疫苗接种是预防和控制病的主要措施吗?
&&& 是。虽然该病发病程度与其它诱因有关,但PCV2是该病的必须病原,大量疫苗使用结果显示,有效的免疫接种时预防和控制本病的主要和根本措施,疫苗免疫后可以降低发病率和死亡率,提高日增重和猪群的整齐度。&
39.&抗原检测阳性,而生产未出现异常的猪群需要接种疫苗吗?
&&& 猪呼吸道病多发地区或,如猪蓝耳病、气喘病、流感、副猪嗜血杆菌病等,建议接种疫苗,这样不仅可以预防PCVD发生,还可以在一定程度上改善和提高生产成绩,减少其它疾病发生。&
40.&引进或建立后备母猪时,应注意哪些因素?
(1)尽量从无病种猪群引进,引进前进行检测,应没有PRRSV和病毒感染;(2)从本场猪群中选择PCV2抗体阳性猪;(3)减少运输途中的应激;(4)引进的母猪应进行隔离,观察1个月;(5)接种灭活疫苗两次,间隔3周。&
41.&阴性能长期避免感染吗?
&&& 生物安全措施不到位,引种不慎、精液带毒、外来车辆消毒不彻底等都可引起病毒的传播,目前,很难找到阴性场,只有少数户的猪没有PCV2感染。&
42.&病抗生素治疗有效吗?
&&& PCVD是一种病毒性疾病,抗生素治疗是没有效果的,但在发病猪群或饮水中添加抗生素类药和电解质有助于缓解继发或并发感染,提高猪体抵抗力,改善健康状况,减少或减轻临床症状,降低死亡率。&
43.&中定期添加抗生素类药物对病有什么作用?
&&& 定期在中添加抗生素类药物,如支原净、金霉素、阿莫西林、氟甲砜霉素、壮观霉素、林可霉素等,对预防本病或降低发病率有一定作用,这主要是因为抑制了猪群中的一些常见细菌性病原体,增强了猪群抵抗力。&
44.&目前国外市场上有哪些圆环病毒疫苗?&
&&& 国外多个公司已相继研究并开发成功PCV2灭活疫苗、PCV2 Cap蛋白重组杆状病毒灭活疫苗、PCV1-PCV2嵌合体灭活疫苗,临床应用结果证明,该病不同类型疫苗均可用于有效预防PCV2感染,具有明显预防效果,受到各国肯定。&
45.&我国病疫苗有哪些重要研究进展?&
&&& 近十年来,我国学者对该病疫苗也进行了深入研究,包括PCV2全病毒灭活疫苗、表达Cap蛋白的重组腺病毒和重组伪狂犬病病毒活载体疫苗、基于重组杆状病毒和酵母等表达系统的PCV2 Cap蛋白亚单位疫苗以及基因疫苗等。目前,PCV2全病毒灭活疫苗取得重要突破,实现产业化生产。&
46.&目前我国有哪些商品化疫苗?&
&&& PCV2重组杆状病毒灭活疫苗(进口,勃林格公司生产)、2型灭活疫苗(SH株)、2型灭活疫苗(LG株),其中,2型灭活疫苗(SH株)为我国第一个病疫苗,由南京农业大学联合洛阳普莱柯和江苏南农高科技股份有限公司研究开发成功,具有自主知识产权。&
47.&控制病,为什么要选择灭活疫苗?
&&& 目前,国内外所有的病都是灭活疫苗,基因工程疫苗灭活可以降低转基因产品的生物安全风险,PCV2全病毒灭活疫苗种毒有毒力,需要灭活处理。PCV2灭活疫苗免疫猪体后可以引起体液免疫反应,抵抗PCV2感染。PCV2灭活疫苗不存在毒力返强和基因重组现象,安全性较好。&
48.&高质量灭活疫苗的生产工艺中,有哪些关键环节?
(1)疫苗毒种毒力强、遗传性稳定、免疫原性强的本国流行毒株;(2)病毒滴度高,疫苗抗原纯净;(3)病毒灭活要彻底,抗原保留完好;(4)选择的免疫佐剂辅助免疫效果好、副作用小、使用方便;(5)疫苗生产中间检验和产品质量控制。&
49.&自家苗和疫苗是一样的吗?
不一样。国内自家苗通常是采取自家的病猪组织,经过灭活制作的疫苗。如果病猪组织中含有,那么该自家苗对于的控制是有一定效果的。反之,则没有效果。&
50.&控制相关性疾病,能否采取血清疗法?
使用PMWS猪血清疗法对于PCVAD有一定效果,但猪血清疗法存在很大风险,必须排除可能存在的其它病原体的污染问题,如病毒、伪狂犬病等。&
51.&圆克清有哪些优点?
&&& 圆克清是2型灭活疫苗(SH株)的商品名称,由江苏南农高科技股份有限公司生产。该疫苗主要优点有:(1)疫苗种毒SH株为PCV2b,与国内PCV2流行毒株完全一致;(2)采用克隆细胞增殖病毒,病毒滴度高;(3)病毒规模培养工艺先进稳定,灭活彻底,抗原性保留完好;(4)选用进口双相佐剂,疫苗起效快、副作用小;(5)疫苗接种免疫效果确实,对PMWS保护效率达100%。(5)疫苗质量采用国际先进的标准化控制方法,疫苗质量稳定。&
52.&圆克清的免疫效果如何?
&&& PCV2感染猪群免疫后PMWS发病率和病死率降低50% 以上,PCV2病毒血症程度和持续时间降低50%以上,猪的生产性能有效改善,屠宰体重提高2-3kg/头,猪蓝耳病和细菌感染引起的损失明显降低。&
53.&猪免疫圆克清后,是否会出现应激反应,应该采取哪些措施?
&&& 同其他疫苗一样,个别猪会出现应激反应。注射疫苗时,应带上肾上腺素,如有个别猪出现应激反应时,可注射肾上腺素进行急救,或者使用剂量减半。&
54.&后备母猪应该怎样免疫圆克清?
&&& 后备母猪在进行第一次配种前,应进行两次免疫,间隔3周,产前再免疫一次,之后按胎次免疫,产前免疫两次即可。&
55.&生产母猪如何免疫圆克清?应注意哪些管理因素?
&&& 疫苗临床试验证明,生产母猪接种圆克清,对防控商品猪PMWS有一定效果,但产前免疫时,要预防注射动作应激导致某些重胎猪流产。特别是炎热季节,应注意在凉爽的时间进行免疫接种。&
56.&圆克清对生产母猪是否安全,必须按胎次免疫吗?
&&& 疫苗临床试验证明,圆克清对母猪安全,没有不良反应,采用普免和按胎次免疫都可以,但一般建议产前免疫两次。&
57.&免疫母猪所产的仔猪是否要免疫圆克清?
&&& 需要。虽然免疫母猪所产的仔猪带有的母源抗体对仔猪有保护作用,但随着仔猪的生长,母源抗体逐渐降低直至消失,因此建议对仔猪进行免疫,调动仔猪的免疫系统,使其产生自动免疫。&
58.&猪群免疫一段时间后未出现相关性疾病症状,是否继续免疫?
&&& 猪群免疫后健康状况保持相对稳定,但并不表示已净化了PCV2,在一定范围内可能还存在 PCV2感染,建议继续使用圆克清一段时间。&
59.&仔猪免疫圆克清是否受母源抗体干扰,最佳免疫时机是什么?
&&& 圆克清不受母源抗体干扰,最佳免疫时机哺乳中后期。免疫后猪体开始产生免疫反应,从而抵抗PCV2的感染,防止保育中后期发病。&
60.&保育仔猪群发病时,能否使用圆克清普免哺乳仔猪和保育仔猪?
&&& 不可以,圆克清只能使用于外表健康猪只。一旦发病,可以选择2周龄以上的健康哺乳仔猪、保育仔猪、以及怀孕60天以上的母猪,进行紧急接种。随后,新出身的仔猪2周龄时接种疫苗。圆克清疫苗对发病猪没有治疗效果。&
61.&公猪免疫圆克清,安全吗?
&&& 安全。感染发病可以使用。&
62.&圆克清对猪蓝耳病、、猪伪狂犬疫苗免疫是否有干扰作用?&
&&& 圆克清为灭活疫苗,一般对猪蓝耳病疫苗、疫苗、猪伪狂犬疫苗没有免疫干扰作用,但目前还不清楚是否可以同时使用。猪体免疫圆克清后,可预防PCV2感染,降低PCV2免疫抑制作用,有利于提高其它疫苗免疫效果。&
63.&种猪群存在流产比例较高和死胎多问题,能否使用圆克清紧急接种?&
&&& 首先要搞清楚种猪流产和死胎是否真的由圆环病毒引起的,确诊后,在母猪配种前接种疫苗,可以改善下一胎次健康状况。母猪紧急接种是否有效,还没有相关研究数据。&
64.&母猪免疫圆克清,能带来怎样的经济效益?
&&& 母猪免疫圆克清,可以预防圆环病毒引起的障碍,降低流产、死胎出现的机率,母猪的合格产仔数提高,将会有更多的出栏猪分摊母猪的成本,即降低了成本。此外,母源抗体可以帮助哺乳仔猪免受圆环病毒感染引起的危害,断奶成活率提高。&
65.&仔猪免疫圆克清,能带来怎样的经济效益?
&&& 仔猪免疫圆克清,可以预防圆环病毒对猪体的危害,如减少PMWS、PDNS猪的出现,降低细菌继发感染的机率,降低肺炎的发生率,减轻肺部病变,猪群更加健康,采食保持良好。因此,圆克清对经济效益的改善表现为:(1)猪群的成活率上升;(2)整齐度提高;(3)日增重提高;(4)转化率增高。&
66.&在哺乳期已接种圆克清的猪群,为什么在保育阶段还出现呼吸道症状?
&&& 引起保育仔猪出现呼吸道症状的疾病很多,如猪肺炎支原体、猪蓝耳病、病、猪伪狂犬病、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎等。接种过圆克清的猪群,只能表明控制了感染,如果存在以上病毒或细菌感染,同样引起呼吸道症状。&
67.&种母猪状况未出现异常,而120日龄的猪群表现呼吸道症状,该怎样诊断与控制?
&&& 建议进行必要的实验室系统诊断,鉴别病、蓝耳病、和猪气喘病等,明确病因,采取针对性的防控措施,包括疫苗接种、使用抗生素控制继发细菌感染等。&
68.&2型灭活疫苗免疫程序是什么?
仔&&& 猪:2~5周龄免疫一次,2毫升/头;
生产母猪:产前5~6周,2毫升/头,间隔3周,加强免疫,2毫升/头;
后备母猪:配种前免疫两次,间隔3周,每次2毫升/头;产前45再天免疫一次,2毫升/头,。&
69.&商品猪群混合感染蓝耳病、病、、气喘病,该如何合理安排仔猪的免疫程序?
&&& 一般来说,只有了解猪群的疾病感染规律,才能制定合理有效的免疫程序。因此,针对此猪群的混合感染,可以通过抗体检测,了解这些疾病在猪群中的感染状况。然后,在猪群感染某疾病前就要完成该疫苗的免疫接种。建议仔猪免疫程序:7日龄气喘病疫苗、14日龄病疫苗、21日龄猪蓝耳病活疫苗、35日龄活疫苗、65日龄疫苗。&
70.&可否推荐规模免疫程序?&
母猪& 产前45天& 病灭活疫苗
&&&&&&&&& 产前35天& 伪狂犬病活疫苗
&&&&&&&&& 产前25天& 病灭活疫苗
&&&&&&&&& 产后14天& 疫苗
&&&&&&&&& 产后21天& 猪蓝耳病活疫苗
&&&&&&&&& 口蹄疫苗一年3次
肉猪& 7天龄&& 气喘病疫苗
&&&&&&&&& 14天龄& 病灭活疫苗
&&&&&&&&& 21天龄& 猪蓝耳病活疫苗
&&&&&&&&& 35天龄& 疫苗
&&&&&&&&& 45天龄& 口蹄疫疫苗
&&&&&&&&& 55天龄& 伪狂犬病活疫苗
&&&&&&&&& 65天龄& 疫苗
&&&&&&&&& 75天龄& 口蹄疫疫苗&
4.&我国是否存在病?
有。我国于2000年证明存在该病。年临床发病猪PCV2检测阳性率大约20%,此后,临床发病猪检出阳性率逐渐升高。目前,我国各个省市或自治区存在不同程度的感染和流行,几乎所有规模化都存在不同程度的感染,临床发病猪PCV2检测阳性率达50%以上,而且,混合感染相当普遍。年南京农业大学对来自我国11个省市1146份患病仔料进行了检测,PCV2阳性率为35.8%(图2)。
图2. 我国年规模患病仔猪PCV2检测结果
5.&病对业造成怎样的损失?
&&& 猪群感染PCV2后生长缓慢、体重减轻,死亡率上升,育肥猪出栏期推迟,母猪出现障碍,母猪性能下降。同时,病毒引起猪群免疫抑制,给业造成严重经济损失。
5.&病对业造成怎样的损失?
&&& 猪群感染PCV2后生长缓慢、体重减轻,死亡率上升,育肥猪出栏期推迟,母猪出现障碍,母猪性能下降。同时,病毒引起猪群免疫抑制,给业造成严重经济损失。
6.&是如何分型的?
&&& 根据其抗原性和核苷酸序列分为PCV1和PCV2两个血清型,但只有PCV2有致病性。近几年,国内外很多研究结果证明,PCV2主要分为PCV2a、PCV2b、PCV2c三种基因亚型。我国PCV2又可分为PCV2a、PCV2b、PCV2d、PCV2e和PCV2f 5种基因亚型。目前,我国PCV2主要流行毒株属于PCV2b。
7.&PCV2有什么特点,病毒基因组主要编码什么蛋白?
&&& 属于圆环病毒科成员,呈二十面体对称、无囊膜。病毒粒子直径为17nm,是迄今发现的一种最小的动物病毒(图3)。PCV2基因组为DNA,呈环状,大小1768或1767bp,主要编码复制相关蛋白、核衣壳蛋白和与细胞凋亡相关的蛋白,其中,核衣壳蛋白(Cap)是主要的抗原蛋白。目前,ELISA抗体检测试剂盒和基因工程疫苗主要采用Cap蛋白。&
图2. 我国年规模患病仔猪PCV2检测结果&
8.&PCV2主要感染什么细胞?
&&& PCV2在猪体内主要感染淋巴细胞,体外在PK-15细胞上生长,不能引起细胞病变,但感染细胞内含有胞浆或核内包涵体。PCV的PK-15细胞培养物中加入d-氨基葡萄糖盐酸,可促进病毒复制。&
9.&在环境中能存活多长时间?
&&& 该病毒对外界的抵抗力较强,在pH3的酸性环境中很长时间不被灭活。病毒对氯仿不敏感,在56℃或70℃处理一段时间,仍不失活。在高温环境(72℃)也能存活一段时间。&
10.&哪些消毒剂对PCV2有效?
&&& 次氯酸钠、氢氧化钠、过氧乙酸、过氧化氢、双癸基二甲基氯化铵、戊二醛烷基二甲基苄铵、过一硫酸氢钾、二氯异氰尿酸钠、羟基丁二酸等消毒剂能有效地灭活该病毒,有较好的消毒效果。
11.&PCV2的主要传播途径有哪些?
&&& PCV2对猪只具有较强的易感性,可经口腔、呼吸道途径感染不同日龄的猪,病猪所接触的物品或病猪的分泌物(血液、尿液、粪便或粘液)可能含有传染性病原体。怀孕母猪感染PCV2后,也可经胎盘垂直传播感染仔猪,并导致障碍。&
12.&病病因是什么?
&&& PCV2感染是本病的必须病原,但发病程度取决于感染猪群的诱因,包括猪群数量、猪舍温度、空气和湿度等、猪体PCV2抗体水平、其他疫苗免疫、混合感染、运输应激等。最新研究显示,该病主要原因是:仔猪早期感染PCV2b、早期断奶、应激和其他重要病原的混合感染。&
13.&猪呼吸道疾病综合症(PRDC)中PCV2起什么作用?
&&& 猪呼吸道疾病综合症通常是由两种或两种以上的病原混合感染,在环境等因素作用下引起的仔猪或中大猪出现的一种复杂的综合性病症。PCV2与其他病原混合感染会导致PRDC,但不能认为PRDC的病原中一定含有PCV2。14.&PCV2在我国母猪障碍中扮演什么角色?
&&& 国外研究结果显示,PCV2感染种猪,会引起种猪的障碍,但引起种猪障碍病因还有很多,我国尚缺少相关研究数据。&
14.&PCV2在我国母猪障碍中扮演什么角色?
&&& 国外研究结果显示,PCV2感染种猪,会引起种猪的障碍,但引起种猪障碍病因还有很多,我国尚缺少相关研究数据。&
15.&PCV2是PDNS的唯一病原吗?
&&& 尚不清楚。PDNS病例中还可以分离到其他病原,如巴氏杆菌等。目前,国内外实验室研究还没有复制成功PDNS,因此,PDNS可能是多种因素(如密度过大、通风不良、不同日龄的猪混合、与其它病毒细菌混合感染以及其它紧张刺激因素等)相互协同引起。&
16.&PCV2致病机制是什么?
&&&& PCV2感染与猪细小病毒病、猪呼吸和障碍综合征病毒(PRRSV)等疾病密切相关。有实验表明,给PCV2阴性猪只接种PCV2病毒,可以复制出与自然发生的PMWS相同症状,而用猪细小病毒、PRRSV和PCV2同时接种PCV2阴性断奶仔猪,发现PMWS症状比单用PCV2接种产生的症状严重。一般认为,PCV2对机体的影响主要造成免疫抑制,使机体的免疫力下降,造成细菌和病毒的继发感染,从而引起更严重的临床症状。&
17.&PCV2感染免疫特性有哪些?
&&& PCV2感染后猪体会诱导产生体液免疫反应,产生PCV2抗体,同时,可以诱导产生细胞免疫反应,产生一些细胞因子和干扰素。
18.&PCV2感染后何时产生抗体?
&&& 实验猪感染PCV2后,一般在感染后7天出现ELISA抗体,感染后28天抗体最高,并可以检测到中和抗体。
19.&抗体对于预防PCV2感染起作用吗?
&&& 有。一般抗体水平高,PCV2病毒血症低。
20.&母源抗体对预防病有作用吗?
&&& 有。增加母源抗体、降低母猪血液中的病毒可以降低猪群子代PMWS的死亡率。
21.&病与猪的遗传品系有关吗?
&&& 不清楚, PCV2可以感染任何品系猪,但我国地方品系猪PMWS发病率相当较低。
22.&病主要发生于哪个阶段的猪群?
&&& 不同国家或地区有所不同,一般断奶后两周逐渐开始,至育肥早期。我国多见于40-120日龄猪群。
23.&病特征性临床症状有哪些?
&&& 病主要表现为PMWS和PDNS,临床特征为消瘦、皮肤苍白、呼吸困难,有时有腹泻、黄疸,皮下淋巴结肿大(图4);皮肤出现不规则的红紫斑及丘疹,皮肤病变最先出现在猪体后1/4、四肢和腹部,然后蔓延到胸部、腰背部和耳部。眼观可见圆形或不规则形状的红色到紫色深浅不一的斑点和丘疹,在会阴部和四肢末端结合形成不规则的斑块。随着病程延长,病变区破溃、结痂呈黑色(图5)。&
图4. PMWS病猪:皮肤苍白、行动迟缓、生长速度减慢、消瘦、呼吸困难&
图5. 10周龄PDNS患猪:全身皮肤出现疹块,呈圆形或不规则的隆起,红色或紫色。&
24.&病特征性肉眼病理变化有哪些?
&&& PMWS主要肉眼病理变化为:消瘦,贫血,皮肤苍白,黄疸;淋巴结异常肿胀,切面为均匀的白色;肾脏水肿,苍白,被膜下有坏死灶;肺脏肿胀,坚硬似橡皮样;肝脏发暗,肝小叶间结缔组织增生(图6)。PDNS主要表现全身皮肤出现疹块,呈圆形或不规则的隆起,红色或紫色。淋巴结水肿胀,切面苍白,肾脏水肿,苍白,被膜下有坏死灶(图7);混合感染时,会出现胸腔结水,肺脏有胶冻状渗出等病变(图8)。&
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& A&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&& && B&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& C
图6. PMWS:淋巴结肿胀,切面为均匀白色(A\B);肺脏质度坚硬或似橡皮,其上散在有大小不等的褐色实变区(C)&
图7. PDNS:肾脏被膜下有灰白色坏死灶&
图8. PCV2感染相关的PRDC:胸腔结水,肺脏有胶冻状渗出&
25.&PCV2引起障碍有哪些特征?
&&& 母猪怀孕不同阶段出现流产和死胎(图10)。流产或死亡胎儿表现肝脏充血,心脏肥大,多个区域呈现心肌变色等病变。&
图10. PCV2相关性障碍:母猪怀孕不同阶段出现死胎、木乃伊胎、胎儿浸软等&
26.&PCV2相关性肠炎有哪些特征?
&&& 国外报道,PCV2相关性肠炎主要发生于40~70日龄的猪,发病率10%~20%,死亡率50%~60%,主要表现为腹泻,开始拉黄色粪便,后来拉黑色粪便,生长迟缓(图9)。所有病例抗生素治疗都无效。&
图9. PCV2相关性肠炎:保育后期猪拉黑色粪便(A);肠道黏膜出血,肠系膜淋巴结明显肿大(B)&
27.&PMWS有哪些典型组织病理学变化?
&&& 淋巴结:淋巴细胞缺失,大量组织细胞及多核巨细胞浸润(图11)。肺脏:肺泡壁变厚,有巨噬细胞和少量淋巴细胞、浆细胞的浸润(图12)。肾脏:严重的坏死性血管炎和纤维坏死性血管球肾炎。流产或死亡胎儿心脏出现纤维性或坏死性心肌炎。&
图11. 猪淋巴结组织病理学变化(HE染色)与免疫组化检测PCV2 抗原(右下图):淋巴细胞缺失,出现多核巨细胞;PCV2 抗原阳性细胞为棕黄色(右下图)&
图12. 病猪肺脏出现中度明显炎性细胞和轻度坏死性支气管肺炎(A);免疫组织化学染色,巨噬细胞样细胞内含有PCV2抗原(B)。&
28.&病的免疫抑制有哪些危害?
&&& 免疫抑制可以造成(1)细菌混合感染增多,如副猪嗜血杆菌、巴氏杆菌、链球菌等;(2)加重其它传染病损失,如猪蓝耳病、细小病毒病等;(3) 其它疫苗免疫效果降低,如,目前保育阶段仔猪疫苗免疫抗体普遍较低。&
29.&病如何正确诊断?
(1)临床发病,出现典型症状;(2)病理解剖有典型病理变化;(3)PCV2抗原检测阳性。由于正常哪个猪群存在PCV2感染,该病诊断必须同时具备上述三个条件。&&
30.&诊断病,如何采集什么病料?
&&& 采集患病猪的肺脏、淋巴结、扁桃体等含毒组织,实验室诊断最有意义的组织是淋巴结,要求组织新鲜,或采集后冷冻保存组织。&
31.&的实验室检测方法有哪些?
&&& 目前,各国学者建立了多种针对病原的病毒学、免疫学和分子生物学检测方法,如病毒分离、电镜技术、ELISA、免疫组化技术、PCR和原位杂交等技术,其中,PCR快速、简便、特异,而免疫组化技术比较准确,被国外广泛采用,但技术要求比较高。&
32.&抗体检测方法有哪些?
&&& PCV2抗体检测方法有ELISA、IPMA和间接免疫荧光试验,其中、ELISA方法简便、准确、并且已经有商品化试剂盒。&
33.&抗体水平是否可用于判定猪群保护力?
&&& PCV2抗体水平越高,病毒血症水平越低(图13)。非免疫猪群存在PCV2抗体,表明该猪群曾经存在过该病毒感染,因此,一定程度上讲,PCV2抗体水平可以反映猪群保护力。实验室研究数据显示,猪群免疫灭活疫苗后,可以产生ELISA抗体,但生产中抗体水平与其保护力关系还需要进一步研究。&
图13. 猪血清PCV2含量与抗体水平的关系(引自L. Darwich et al. 2007)&
34.&怎样通过猪群的临床症状判定猪群判定是否存在病?
&&& 严格意义上说,不能仅仅通过临床症状来判定猪群是否感染了,根据流行特征、临床征状和病理变化作出初步诊断。但目前,如果规模化45-120日龄猪出现消瘦、皮肤苍白、行动迟缓、生长速度减慢、低度持续死亡,应首先怀疑该病。&
35.&如何鉴别PCV2感染引起的PDNS?
&&&& 猪皮肤疾病有很多,如葡萄球菌感染、猪丹毒、猪痘、蚊虫叮咬、寄生虫等, 容易与PCV2感染引起的PDNS混淆,应给予鉴别。PDNS通常发生于8~18 周龄的猪,发病率为0.15%~2%,有时候可高达7%。主要临诊特征是全身(尤其是会阴部和四肢)皮肤出现红紫色隆起的不规则斑块,有时体温上升。通常在3天内死亡,有时可以维持2~3 周。剖检可见肾肿大、苍白、有出血点或坏死点。&
36.&引起病暴发的触发因素是什么?
&&& 同为PCV2感染,有些表现临床症状,有些不表现临床症状,其原因还不清楚。PCV2的存在、猪体的状况、管理方法、其他病原和环境条件组合在一起可能发挥着一定的作用,但具体情况尚不清楚。&
37.&控制病有哪些方法?
(1)接种病疫苗(如圆克清);(2)完善传统的管理,尽可能采用分段同步生产、两点式或三点式方式;(3)改进或改善品质,包括维生素、氨基酸及某些微量元素,增强猪体抵抗力,尽力避免使用发霉;(4)有效的环境卫生和消毒措施,减少病毒感染机会;(5)提高管理水平,尽力减少各种应激;(6)病猪隔离,及时治疗或淘汰;(7)引种时检疫隔离,对于人工受精的,选择无PCV2污染的精液。&
38.&疫苗接种是预防和控制病的主要措施吗?
&&& 是。虽然该病发病程度与其它诱因有关,但PCV2是该病的必须病原,大量疫苗使用结果显示,有效的免疫接种时预防和控制本病的主要和根本措施,疫苗免疫后可以降低发病率和死亡率,提高日增重和猪群的整齐度。&
39.&抗原检测阳性,而生产未出现异常的猪群需要接种疫苗吗?
&&& 猪呼吸道病多发地区或,如猪蓝耳病、气喘病、流感、副猪嗜血杆菌病等,建议接种疫苗,这样不仅可以预防PCVD发生,还可以在一定程度上改善和提高生产成绩,减少其它疾病发生。&
40.&引进或建立后备母猪时,应注意哪些因素?
(1)尽量从无病种猪群引进,引进前进行检测,应没有PRRSV和病毒感染;(2)从本场猪群中选择PCV2抗体阳性猪;(3)减少运输途中的应激;(4)引进的母猪应进行隔离,观察1个月;(5)接种灭活疫苗两次,间隔3周。&
41.&阴性能长期避免感染吗?
&&& 生物安全措施不到位,引种不慎、精液带毒、外来车辆消毒不彻底等都可引起病毒的传播,目前,很难找到阴性场,只有少数户的猪没有PCV2感染。&
42.&病抗生素治疗有效吗?
&&& PCVD是一种病毒性疾病,抗生素治疗是没有效果的,但在发病猪群或饮水中添加抗生素类药和电解质有助于缓解继发或并发感染,提高猪体抵抗力,改善健康状况,减少或减轻临床症状,降低死亡率。&
43.&中定期添加抗生素类药物对病有什么作用?
&&& 定期在中添加抗生素类药物,如支原净、金霉素、阿莫西林、氟甲砜霉素、壮观霉素、林可霉素等,对预防本病或降低发病率有一定作用,这主要是因为抑制了猪群中的一些常见细菌性病原体,增强了猪群抵抗力。&
44.&目前国外市场上有哪些圆环病毒疫苗?&
&&& 国外多个公司已相继研究并开发成功PCV2灭活疫苗、PCV2 Cap蛋白重组杆状病毒灭活疫苗、PCV1-PCV2嵌合体灭活疫苗,临床应用结果证明,该病不同类型疫苗均可用于有效预防PCV2感染,具有明显预防效果,受到各国肯定。&
45.&我国病疫苗有哪些重要研究进展?&
&&& 近十年来,我国学者对该病疫苗也进行了深入研究,包括PCV2全病毒灭活疫苗、表达Cap蛋白的重组腺病毒和重组伪狂犬病病毒活载体疫苗、基于重组杆状病毒和酵母等表达系统的PCV2 Cap蛋白亚单位疫苗以及基因疫苗等。目前,PCV2全病毒灭活疫苗取得重要突破,实现产业化生产。&
46.&目前我国有哪些商品化疫苗?&
&&& PCV2重组杆状病毒灭活疫苗(进口,勃林格公司生产)、2型灭活疫苗(SH株)、2型灭活疫苗(LG株),其中,2型灭活疫苗(SH株)为我国第一个病疫苗,由南京农业大学联合洛阳普莱柯和江苏南农高科技股份有限公司研究开发成功,具有自主知识产权。&
47.&控制病,为什么要选择灭活疫苗?
&&& 目前,国内外所有的病都是灭活疫苗,基因工程疫苗灭活可以降低转基因产品的生物安全风险,PCV2全病毒灭活疫苗种毒有毒力,需要灭活处理。PCV2灭活疫苗免疫猪体后可以引起体液免疫反应,抵抗PCV2感染。PCV2灭活疫苗不存在毒力返强和基因重组现象,安全性较好。&
48.&高质量灭活疫苗的生产工艺中,有哪些关键环节?
(1)疫苗毒种毒力强、遗传性稳定、免疫原性强的本国流行毒株;(2)病毒滴度高,疫苗抗原纯净;(3)病毒灭活要彻底,抗原保留完好;(4)选择的免疫佐剂辅助免疫效果好、副作用小、使用方便;(5)疫苗生产中间检验和产品质量控制。&
49.&自家苗和疫苗是一样的吗?
不一样。国内自家苗通常是采取自家的病猪组织,经过灭活制作的疫苗。如果病猪组织中含有,那么该自家苗对于的控制是有一定效果的。反之,则没有效果。&
50.&控制相关性疾病,能否采取血清疗法?
使用PMWS猪血清疗法对于PCVAD有一定效果,但猪血清疗法存在很大风险,必须排除可能存在的其它病原体的污染问题,如病毒、伪狂犬病等。&
51.&圆克清有哪些优点?
&&& 圆克清是2型灭活疫苗(SH株)的商品名称,由江苏南农高科技股份有限公司生产。该疫苗主要优点有:(1)疫苗种毒SH株为PCV2b,与国内PCV2流行毒株完全一致;(2)采用克隆细胞增殖病毒,病毒滴度高;(3)病毒规模培养工艺先进稳定,灭活彻底,抗原性保留完好;(4)选用进口双相佐剂,疫苗起效快、副作用小;(5)疫苗接种免疫效果确实,对PMWS保护效率达100%。(5)疫苗质量采用国际先进的标准化控制方法,疫苗质量稳定。&
52.&圆克清的免疫效果如何?
&&& PCV2感染猪群免疫后PMWS发病率和病死率降低50% 以上,PCV2病毒血症程度和持续时间降低50%以上,猪的生产性能有效改善,屠宰体重提高2-3kg/头,猪蓝耳病和细菌感染引起的损失明显降低。&
53.&猪免疫圆克清后,是否会出现应激反应,应该采取哪些措施?
&&& 同其他疫苗一样,个别猪会出现应激反应。注射疫苗时,应带上肾上腺素,如有个别猪出现应激反应时,可注射肾上腺素进行急救,或者使用剂量减半。&
54.&后备母猪应该怎样免疫圆克清?
&&& 后备母猪在进行第一次配种前,应进行两次免疫,间隔3周,产前再免疫一次,之后按胎次免疫,产前免疫两次即可。&
55.&生产母猪如何免疫圆克清?应注意哪些管理因素?
&&& 疫苗临床试验证明,生产母猪接种圆克清,对防控商品猪PMWS有一定效果,但产前免疫时,要预防注射动作应激导致某些重胎猪流产。特别是炎热季节,应注意在凉爽的时间进行免疫接种。&
56.&圆克清对生产母猪是否安全,必须按胎次免疫吗?
&&& 疫苗临床试验证明,圆克清对母猪安全,没有不良反应,采用普免和按胎次免疫都可以,但一般建议产前免疫两次。&
57.&免疫母猪所产的仔猪是否要免疫圆克清?
&&& 需要。虽然免疫母猪所产的仔猪带有的母源抗体对仔猪有保护作用,但随着仔猪的生长,母源抗体逐渐降低直至消失,因此建议对仔猪进行免疫,调动仔猪的免疫系统,使其产生自动免疫。&
58.&猪群免疫一段时间后未出现相关性疾病症状,是否继续免疫?
&&& 猪群免疫后健康状况保持相对稳定,但并不表示已净化了PCV2,在一定范围内可能还存在 PCV2感染,建议继续使用圆克清一段时间。&
59.&仔猪免疫圆克清是否受母源抗体干扰,最佳免疫时机是什么?
&&& 圆克清不受母源抗体干扰,最佳免疫时机哺乳中后期。免疫后猪体开始产生免疫反应,从而抵抗PCV2的感染,防止保育中后期发病。&
60.&保育仔猪群发病时,能否使用圆克清普免哺乳仔猪和保育仔猪?
&&& 不可以,圆克清只能使用于外表健康猪只。一旦发病,可以选择2周龄以上的健康哺乳仔猪、保育仔猪、以及怀孕60天以上的母猪,进行紧急接种。随后,新出身的仔猪2周龄时接种疫苗。圆克清疫苗对发病猪没有治疗效果。&
61.&公猪免疫圆克清,安全吗?
&&& 安全。感染发病可以使用。&
62.&圆克清对猪蓝耳病、、猪伪狂犬疫苗免疫是否有干扰作用?&
&&& 圆克清为灭活疫苗,一般对猪蓝耳病疫苗、疫苗、猪伪狂犬疫苗没有免疫干扰作用,但目前还不清楚是否可以同时使用。猪体免疫圆克清后,可预防PCV2感染,降低PCV2免疫抑制作用,有利于提高其它疫苗免疫效果。&
63.&种猪群存在流产比例较高和死胎多问题,能否使用圆克清紧急接种?&
&&& 首先要搞清楚种猪流产和死胎是否真的由圆环病毒引起的,确诊后,在母猪配种前接种疫苗,可以改善下一胎次健康状况。母猪紧急接种是否有效,还没有相关研究数据。&
64.&母猪免疫圆克清,能带来怎样的经济效益?
&&& 母猪免疫圆克清,可以预防圆环病毒引起的障碍,降低流产、死胎出现的机率,母猪的合格产仔数提高,将会有更多的出栏猪分摊母猪的成本,即降低了成本。此外,母源抗体可以帮助哺乳仔猪免受圆环病毒感染引起的危害,断奶成活率提高。&
65.&仔猪免疫圆克清,能带来怎样的经济效益?
&&& 仔猪免疫圆克清,可以预防圆环病毒对猪体的危害,如减少PMWS、PDNS猪的出现,降低细菌继发感染的机率,降低肺炎的发生率,减轻肺部病变,猪群更加健康,采食保持良好。因此,圆克清对经济效益的改善表现为:(1)猪群的成活率上升;(2)整齐度提高;(3)日增重提高;(4)转化率增高。&
66.&在哺乳期已接种圆克清的猪群,为什么在保育阶段还出现呼吸道症状?
&&& 引起保育仔猪出现呼吸道症状的疾病很多,如猪肺炎支原体、猪蓝耳病、病、猪伪狂犬病、副猪嗜血杆菌、猪传染性胸膜肺炎等。接种过圆克清的猪群,只能表明控制了感染,如果存在以上病毒或细菌感染,同样引起呼吸道症状。&
67.&种母猪状况未出现异常,而120日龄的猪群表现呼吸道症状,该怎样诊断与控制?
&&& 建议进行必要的实验室系统诊断,鉴别病、蓝耳病、和猪气喘病等,明确病因,采取针对性的防控措施,包括疫苗接种、使用抗生素控制继发细菌感染等。&
68.&2型灭活疫苗免疫程序是什么?
仔&&& 猪:2~5周龄免疫一次,2毫升/头;
生产母猪:产前5~6周,2毫升/头,间隔3周,加强免疫,2毫升/头;
后备母猪:配种前免疫两次,间隔3周,每次2毫升/头;产前45再天免疫一次,2毫升/头,。&
69.&商品猪群混合感染蓝耳病、病、、气喘病,该如何合理安排仔猪的免疫程序?
&&& 一般来说,只有了解猪群的疾病感染规律,才能制定合理有效的免疫程序。因此,针对此猪群的混合感染,可以通过抗体检测,了解这些疾病在猪群中的感染状况。然后,在猪群感染某疾病前就要完成该疫苗的免疫接种。建议仔猪免疫程序:7日龄气喘病疫苗、14日龄病疫苗、21日龄猪蓝耳病活疫苗、35日龄活疫苗、65日龄疫苗。&
70.&可否推荐规模免疫程序?&
母猪& 产前45天& 病灭活疫苗
&&&&&&&&& 产前35天& 伪狂犬病活疫苗
&&&&&&&&& 产前25天& 病灭活疫苗
&&&&&&&&& 产后14天& 疫苗
&&&&&&&&& 产后21天& 猪蓝耳病活疫苗
&&&&&&&&& 口蹄疫苗一年3次
肉猪& 7天龄&& 气喘病疫苗
&&&&&&&&& 14天龄& 病灭活疫苗
&&&&&&&&& 21天龄& 猪蓝耳病活疫苗
&&&&&&&&& 35天龄& 疫苗
&&&&&&&&& 45天龄& 口蹄疫疫苗
&&&&&&&&& 55天龄& 伪狂犬病活疫苗
&&&&&&&&& 65天龄& 疫苗
&&&&&&&&& 75天龄& 口蹄疫疫苗&
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