肺结核PPD试验
有些风湿性疾病与结核感染密切相关，例如结节性红斑、结核感染引起的反应性关节炎等，有时需要在治疗风湿性疾病的同时进行抗结核治疗。判断是否存在结核感染的重要指标之一是PPD试验。
结核菌素纯蛋白衍化物（TB—PPD）试验，是诊断结核感染的常用参考指标，与旧结核菌素相比，TB—PPD具有纯度高、灵敏度高、全身反应较少等优点。所以，在临床上诊断结核性疾病时，它是除结核菌检查、影像学检查外最常用的检查手段。随着结核病发病率的增高，TB—PPD试验近几年来越来越普遍应用于结核性疾病的诊断，但在判断PPD试验结果及临床意义时，由于医务人员的知识欠缺及患者不正确的理解，患者得不到合理的解释和指导，甚至影响疾病诊断转归的现象也很常见。现将TB—PPD试验的判断标准及临床意义简述如下。
实验方法：严格按照无菌操作程序进行。采用Mantoux法。选用1ml容量的兰芯注射器，4－5号针头，不宜太长，前臂掌侧中下1/3处为最佳（此处皮肤薄嫩，反应敏感易观察）。避开疤痕，血管和皱褶。用75%酒精消毒局部皮肤，以皮内注射法将PPD
0.1ml(含5个结素单位)缓慢注入，注射深度要合适，剂量准确时局部可出现7－8mm大小的圆形橘皮样皮丘(有毛孔出现)，不要在注射部位按压揉搓和肥皂刺激，72小时内禁止洗澡，洗脸时尽量避开注射部位，尽可能避免用激素类的药物，如果有其它反应请到有关医院检查处理。
注射后48与72小时观察结果，用卡尺测量硬结纵横直径，硬结平均直径=(纵径+横径)/2。
判断标准：硬结平均直径如小于5mm为阴性，大于等于5mm小于20mm为阳性反应[5～9mm为弱阳性(+)，10～19mm为阳性(++)]，20mm以上(+++)或局部有水疱、坏死、淋巴管炎均为强阳性。与旧结核菌素一样，TB—PPD试验除引起局部反应外，偶可引起全身反应，但较前者少见。
TB—PPD试验的临床意义：
（1）婴幼儿：常用于卡介苗接种的选择和监测。阳性时常表示已感染结核菌并产生抗体而不需要接种卡介苗；阴性时则应该及时接种卡介苗。未接种卡介苗的儿童，如果皮试呈强阳性时常表示体内有活动性结核灶，应及时进行结核菌检查、影像学检查、血沉等检查以确定诊断和治疗。
（2）成年人：因我国城镇中人口密集区成年居民的结核感染率很高，所以，如果PPD5单位试验阳性，仅表示有结核感染，并不一定患病；但呈强阳性时，常提示有活动性结核灶。因此，TB—PPD试验在诊断成人结核性疾病时诊断价值受限。
另外，在临床上有感染结核的确切依据而患者PPD试验却阴性，这种情况常见于以下疾病：初次感染结核菌4～8周以内、重度营养不良、恶性肿瘤、机体免疫缺陷性疾病（先天性免疫缺陷症、艾滋病）、免疫抑制剂使用者等，个别老年人因机体变态反应功能低下也常呈阴性反应。
72小时后阴性反应及一般阳性反应(皮丘&5mm不超过10mm)者可恢复正常生活。强阳性可在医生的指导下给预防性治疗。如局部有水泡要注意保护创面，必要时用纱布覆盖。
关于PPD试验&&&&
一、ppD试验阳性说明机体受结核菌感染,而不是"临床肺结核病"&&&&
下列情况除外
1.3岁以下,特别是3个月以内的婴儿,无卡介苗接种史, ppD试验阳性提示体内有活动性结核可能.
2 .近期机体输入含有结核菌的核酸成分或致敏的淋巴细胞时,可出现
ppD试验假阳性.&&
二、ppD试验阴性说明机体未受结核菌感染
下列情况下，如果 ppD试验阴性,要考虑假阴性可能.
1 . 早期结核菌变态反应尚未形成(结核感染4-8周内).
2 . 无反应性重症结核,例如粟粒型结核,晚期结核病.
3,&&免疫衰退和免疫抑制者的结核感染,例如HIV感染、老年、激素使用者、其它重病患者。
4.&&病毒性感染，恶性肿瘤的结核感染。5妇女月经期、妊娠期、哺乳期等。
三、结素反应的助推效应：
ppD试验第一次为可疑或阴性结果，但在1-2周后，复试ppD试验却为阳性结果，其本质为激活削弱的免疫细胞活性，增强了回忆反应。该现象反映了受试者当时感染力不强，或感染时间久远。
四、发烧时是否应该做ppD试验？
若为了诊断可做，若为了流行病学调查不可做
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以上网友发言只代表其个人观点，不代表新浪网的观点或立场。结核菌素及结核抗体试验对肺结核诊断价值的研究--《疾病监测与控制》2012年10期
结核菌素及结核抗体试验对肺结核诊断价值的研究
【摘要】：目的探讨结核菌素试验(PPD)及结核抗体在肺结核诊断中的诊断价值。方法对1 111例新发初治肺结核患者进行PPD试验及结核抗体检测,PPD试验采用5 U前臂屈侧皮内注射,72 h观察反应;结核抗体采用胶体金法检测。结果肺结核菌阴组中,PPD阳性477例(阳性率58.5%),结核抗体阳性251例(阳性率30.8%);肺结核菌阳组中,PPD阳性173例(阳性率58.6%),结核抗体阳性110例(阳性率37.3%)。结论 PPD试验对肺结核的诊断简单、有效,敏感性强于结核抗体检测,可用作菌阴肺结核的辅助诊断,与结核抗体检测联合应用效果更佳。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R521【正文快照】：
近年来,结核病的发病率日趋上升,我国现有结核病人约450万例,每年病死近13万例。而这其中最重要的原因,就是结核病的早期诊断技术不理想。对结核病做出快速、准确的诊断一直是临床工作中的重点、难点,所以寻找简便、快速、实用的实验诊断方法是亟待解决的课题。在新的检测方
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结核菌素纯蛋白衍化物（TB-PPD）制造及检定规程
来源：中国生物制品规程 作者：
摘要: 结核菌素纯蛋白衍化物（TB-PPD）制造及检定规程 本品系用结核杆菌经液体表面培养、蒸汽杀菌过滤除去菌体，用沉淀分离、洗涤及再溶解的提纯方法制成的液体或冻干制品，含有从结核杆菌培养滤液中获得的活性物质，其主要成分是蛋白质，对已受结核菌感染或曾接受卡介苗免疫的机体，能引起特异的皮肤变态反应。用于检查结核杆......
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菌素纯蛋白衍化物（TB-PPD）制造及检定规程 　　本品系用结核杆菌经液体表面培养、蒸汽杀菌过滤除去菌体，用沉淀分离、洗涤及再溶解的提纯方法制成的液体或冻干制品，含有从结核杆菌培养滤液中获得的活性物质，其主要成分是蛋白质，对已受结核菌感染或曾接受卡介苗免疫的机体，能引起特异的皮肤变态反应。用于检查结核杆菌的感染及观察免疫反应。 　　1　菌种 　　1.1　菌种由中国药品生物肉制品检定所分发或经同意。 　　1.2　制造TB-PPD用人型结核杆菌，菌号93009（H37Rv）。菌种应有完整的历史资料，经过全面检定，冻干保存。 　　1.3　应制备生产用菌种批，次级菌种批应控制在5代以内。 　　2　制造 　　全部生产过程，包括杀死分枝杆菌，应在完全隔离的区域内用专用设备进行。 　　2.1　制造用培养基 　　使用苏通马铃薯培养基，改良苏通综合培养基，或其他适宜培养基。培养基中应不含已知能对人或动物造成毒性和变态性反应的成分。 　　2.2　启开菌种（菌种批）反接种于苏通马铃薯培养基上。置37℃培养2～3周，可在苏通马铃薯培养基上再传一代或直接挑取苏通马铃薯管内生长良好的菌膜，移种于改良苏通综合培养基或其他适宜培养基的表面，置37℃静止培养1～2周，供大量接种用。 　　2.3　大量接种 　　挑取发育良好的菌膜移种于改良苏通综合培养基或其他适宜培养基的表面，置37℃静止培育8～10周。凡在培养期间或培养终止时，有菌膜下沉、发育异常或污染杂菌者，必须废弃。 　　2.4　杀菌 　　培养终止，将培养物加热，121℃30分钟进行杀菌处理。 　　2.5　除菌 　　杀菌后用滤器除去菌膜及菌体，收集滤液并取样做无菌试验，然后，加入0.3%苯酚或其他适宜的防腐剂。滤液保存在4～8℃，但要防止冻结。 　　2.6　提纯 　　用三氯乙酸和饱和硫酸铵法分别沉淀蛋白，加压过滤除去清液，并收集沉淀物于3μm孔径的滤膜上，然后用10%氯化钠液洗酸脱盐至中性为止，最后以磷酸盐缓冲液将沉淀物溶解，除菌过滤后即为原液。亦可采用其他适宜方法提纯。 　　2.7　分批 　　每次提纯的原液作为1亚批。最多将5个亚批混合组成为1批。 　　2.8　半成品检定 　　2.8.1　物理检查 　　原液应为深棕色的澄明液体，不应有沉淀物或其他杂质。 　　2.8.2　无菌试验 　　按《生物制品无菌试验规程》进行。 　　2.8.3　安全试验 　　用体重300～400g健康豚鼠2只，每只腹腔注射原液1.0ml，观察6周，检查其症征或死亡。所有在试验后24小时内死亡的或表现出症征的动物应作镜检，然后将有关的组织镜检和培养，检查其有无分枝杆菌存在的证据。观察期中活存的动物也要以同样方法检查。 　　如果分析杆菌活菌培养试验阴性，在观察期中全部豚鼠健康存活，无一动物出现分枝杆菌的症征，则可判定浓缩原液通过试验。 　　如果未到观察期，任何动物死于非结核病因，本试验可复试一次。 　　2.8.4　致敏效应试验 　　实验组与对照组分别用体重300～400g未做过任何试验的健康豚鼠各3只，实验组每只豚鼠皮内注射0.1ml含500IUTB―PPD样品，共3次，每次间隔5天，在第3次注射后15天，实验组与对照组每只豚鼠各皮内注射0.1ml含500IUTB―PPD样品，连续观察3天，两组动物反应不应有明显区别。 　　2.8.5　纯度测定 　　应测定蛋白（凯氏定氮法）、多糖（蒽酮法）与核酸（紫外分光光度法）含量。蛋白含量应≥90%，多糖含量≤3%。 　　2.8.6　效价测定 　　TB―PPD标准品由中国药品生物制品检定所提供。 　　2.8.6.1　动物试验 　　将标准品及待检原液分别稀释马0.1ml含100IU、20IU及4IU或其他适宜的稀释度，用体重400～600g已致敏的白色雌性豚鼠最少4只，去毛后于背部脊柱两侧相对部位，分别皮内注射上述稀释度各0.1ml（从尾侧起先注射稀释度最高者）。于注射后24、48小时各观察结果1次（可根据48小时的反应结果判定），算出待检和标准TB-PPD的平均硬结反应（纵横直径相加除2）计算累计值，并求其比值，比值1±0.2者为合格。 　　也可按WHO规程要求，标准品及待检样品分别稀释3个不同的适宜稀释度，用6只致敏豚鼠，以轮圈法注射于豚鼠背部两则，每侧3点，每点皮内注射0.1或0.2ml样品，用双盲法分别记录24及48小时局部硬结的纵径与横径。计算每个稀释度2天的总和（也可计算2天的平均面积），并求其比值，比值1±0.2者为合格。 　　稀释度的选择应能使注射后24小时所产生的局部硬结反应直径不小于8mm，不大于25mm，两个样品的反应直径大致相同及两个样品的3个稀释度的剂量对数反应线应基本平行。 　　如待检样品效价与标准品效价不一致，可用同样方法重试一次，并算出相当于标准品的效价进行调整，调整后再重新抽样测定效价，直至合格。 　　2.8.6.2　人体反应测定 　　动物试验合格后，应进行小量人体测定，选择对TB―PPD1IU（好0.02μg结核蛋白）反应阳性的敏感成人最少5人或者皮内接种卡介苗12周后免疫效果观察的婴幼儿至少20人，每人于两前臂内侧相对部位分别注射5IU的标准品与待检样品各0.1ml，注射后72小时观察结果，并求其比值（计算方法与2.8.6.1项相同）。比值1±0.2，并无1例异常反应者为合格。 　　2.9　分装冻干 　　经物理检查、无菌试验、安全试验、致敏效应试验、蛋白质含量及效价测定合格后，即可根据蛋白质含量将原液进行定量稀释至规定浓度，然后定量分装安瓿，每安瓿装量为0.5ml，分装后立即进行冻干。每安瓿的分装误差应符合标准品的要求（差异系数不超过1%）。 　　冻干后抽样做成品检定，亦可将原液保存备用。 　　3　浓缩物检定 　　3.1　物理检查 　　冻干TB―PPD应为白色疏松体，无融化迹象。加入稀释液后，应于3分钟内全部溶解，呈棕黄色澄明液体，不得有不容物或杂质。 　　如系液体原液，亦应为棕黄色澄明液体，不应有不溶物或杂质。 　　3.2　水分测定 　　冻干制品水分含量应≤3%。 　　3.3　无菌试验 　　按《生物制品无菌试验规程》进行。 　　3.4　安全试验 　　按2.8.3项进行。 　　3.5　纯度测定 　　按2.8.5项进行。 　　3.6　致敏效应试验 　　按2.8.4项进行。 　　3.7　效价测定 　　动物试验按2.8.6.1项进行。人体反应测定按2.8.6.2项进行。但观察人数需增加1～2倍。 　　3.8　保存与效期 　　保存于2～8℃冷暗处。冻干制品自效价测定合格之日起效期为10年。液体原液自效价测定合格之日起效期为5年。 　　4　TB―PPD和稀释 　　4.1　稀释 　　经检定合格的浓缩物用内含0.0005%吐温80及0.3%苯酚的pH7.2～7.4的0.01mol的磷酸盐缓冲生理盐水稀释至20IU或50IU。 　　各处稀释用具应专用。加入TB―PPD后应充分摇匀，并逐瓶抽样作无菌试验，合格后分装。 　　4.2　分批 　　每次稀释的同一浓度的稀释TB―PPD为一批，同时有数瓶者，按瓶分为亚批。 　　4.3　分装 　　由专人用专用工具进行。 　　5　成品检定 　　5.1　物理检查 　　分装后应进行破漏、装量、外观检查。应为无色澄明液体，不得有不容物或杂质。 　　5.2　化学检查 　　pH值应为6.8～7.4。苯酚含量应为0.25%～0.5%。 　　5.3　无菌试验 　　按《生物制品无菌试验规程》进行。 　　5.4　防腐剂试验 　　用体重18～20g小白鼠2只，各皮下注射样品0.5ml，小白鼠震颤时间不得超过半小时，观察7天，不得有局部脓肿或死亡。 　　5.5　安全试验 　　每批用体重18～20g小白鼠5只，各腹腔注射样品0.5ml，观察1周，小白鼠应健康活存。 　　5.6　效价测定 　　按2.8.6.1项进行。比值1±0.2者为合格。 　　6　保存与效期 　　保存于2～8℃暗处。自稀释检定合格之日起效期为1年。 50IU/ml结核菌素纯蛋白衍化物（TB-PPD）使用说明书 　　本品为每ml含50IU结核菌素纯蛋白衍化物（TB―PPD）的稀释，经与国家标准品标准，达到完全一致。专供结核病的诊断，卡介苗接种对象的选择及卡介苗接种后质量监测用。 　　本品为无色澄明液体，含苯酚防腐剂，不得有不溶物或杂质。 　　对象 　　婴儿、儿童及成人均可使用。 　　用法 　　吸取上述稀释液0.1ml（5IU），采取孟都氏法注射于前臂掌侧皮内，于注射后48～72小时检查注射部位反应。测量应以硬结的横径及其垂直径的mm数记录之。反应平均直径≥5mm为阳性反应。凡有水泡、坏死、淋巴管炎者均属强阳性反应，应详细注明。 　　禁忌 　　患急性传染病（如麻疹、百日咳、流行性、肺炎等），急性眼结合摸炎，急性中耳炎，广泛性皮肤病者暂不宜使用。 　　注射事项 　　1.注射器及针头应当专用，不可作任何其他注射之用。 　　2.安瓿有裂纹、制品内有异物者不可使用。 　　保存 　　本品为已稀释制品，于2～8℃保存，效期为1年。 　20IU/ml结核菌素纯蛋白衍化物（TB―PPD）使用说明书　　　 （专供流行病学调查用） 　　本品为每ml含20IU结核菌素纯蛋白衍化物（TB―PPD）的稀释制剂，经与国家标准品及PPD―PT23标化，达到完全一致。专供结核病流行病学调查及临床疑似结核病人诊断用。 　　本品为无色澄明液体，含苯酚防腐剂，不得有不溶物或杂质。 　　用法 　　吸取上述稀释液0.1ml（2IU），采取孟都氏法注射于前臂掌侧皮内，于注射后48～72小时检查注射部位反应。测量应以硬结的横径及其垂直径的mm数记录之，反应平均直径≥6mm为阳性反应。凡有水泡（包括微小水泡）、坏死、淋巴管炎者均属强阳性反应，应详细注明。 　　反应判定及处理 　　凡强阳性及硬结直径≥20mm，或3岁以内未接种过卡介苗的儿童（根据接种史和检查局部卡痕确定），结素反应阳性者，即使胞部透视正常，仍需按活动性结核处理，并建议予以内服异烟肼半年至1年。 　　禁忌 　　患急性传染病（如麻疹、百日咳、流行性感冒、肺炎等）、急性眼结合膜炎、急性中耳炎、广泛性皮肤病者暂不宜使用。 　　注意事项 　　1.注射器及针头应当专用，不可作任何其他注射之用。 　　2.安瓿有裂纹、制品内有异物者不可使用。 　　保存 　　本品为已稀释制品，于2～8℃保存，效期为1年。
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长春市朝阳区2009年初中与小学新生结核菌素试验结果分析
【摘要】：
结核病(Tuberculosis)是由结核杆菌引起的一种慢性和缓发的传染病,结核菌可能侵入人体全身各种器官,但主要侵犯肺脏,肺结核最为常见。主要经呼吸道传播,排菌者为其重要的传染源。结核病严重危害人类健康。我国已将结核病列为学校重点防治的常见病之一。近年来关于各类学校结核病流行的情况常有报道,因此,了解学生结核病免疫水平,保障学生的身体健康,积极、主动发现病人,从而采取相应的预防措施,进行积极的干预治疗,有效的防治结核病在校园内的传播,对于初中、小学预防控制结核病具有重要意义。
为了解长春市朝阳区初中与小学入学新生结核菌素感染情况,本文对长春市朝阳区38所初中与小学,5902名入学新生开展结核菌素(purifiedprotein derivative,PPD)测试,采用国家统一试验标准判断并对结果进行分析,测试结果显示:一般阳性率27.25%;中度阳性率7.66%,强阳性率0.98%,对PPD试验中度阳性及强阳性学生,向家长发出复查通知书,复查率为58.04 %,但未查出患结核病的学生。男性强阳性率1.05%;女性强阳性率0.91%;不同性别结核菌素试验比较差异无统计学意义(p
0.05);小学生强阳性率0.53%,初中学生强阳性率1.30%,差异有统计学意义(p
0.01),市区新生PPD强阳性率0.80%,乡镇新生强阳性率1.75%,乡镇学生的中度及以上阳性率高于市区学生,差异有统计学意义(p
0.01)。新生有无BCG疤痕与PPD试验结果比较差异有统计学意义(p
由本研究结果可得到如下初步结论:长春市朝阳区初中与小学入学新生中虽未发现有学生患有结核病但说明这部分学生仍有患病危险,有关部门应加强管理,控制病例的出现;乡镇学生的强阳性率高于城市学生提示乡镇学生的患病危险比城市学生的患病危险性要高。本文通过对长春市朝阳区初中与小学入学新生结核菌素感染情况的分析,了解长春市朝阳区2009年初中与小学入学新生结核菌素感染情况,为今后开展学校结核病的防控工作提供可靠的科学依据。
【关键词】：
【学位授予单位】：吉林大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：R52【目录】：
内容提要4-5
中文摘要5-7
Abstract7-12
第1章 前言12-18
1.1 研究背景12-17
1.1.1 结核病的流行情况12-13
1.1.2 结核病的感染与发病特性13-14
1.1.3 结核病的危险因素14
1.1.4 结核病的防治14-17
1.2 研究的目的与意义17-18
第2章 对象与方法18-20
2.1 研究对象18
2.2 研究内容和方法18-19
2.2.1 结核菌素试验18-19
2.2.2 检查双臂有无BCG 疤痕19
2.3 资料分析19-20
第3章 结果与分析20-25
3.1 PPD 试验结果20
3.2 PPD 试验复查结果20-21
3.3 男女新生间PPD 试验结果比较21
3.4 初中与小学新生 PPD 试验结果比较21-22
3.5 城乡新生PPD 试验结果比较22-23
3.6 BCG 疤痕与PPD 试验结果比较23-25
第4章 讨论25-33
4.1 PPD 实验结果分析26-27
4.2 新生PPD 试验复查结果27
4.3 不同性别新生PPD 试验结果分析27
4.4 初中与小学新生 PPD 试验结果比较分析27-28
4.5 城乡新生PPD 试验结果比较分析28
4.6 有无BCG 疤痕与PPD 试验结果比较分析28-29
4.7 学校结核病的防治29-33
4.7.1 部门配合29-30
4.7.2 健康教育30-31
4.7.3 健康管理31-33
第5章 结论33-34
参考文献34-40
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