细菌如何分阳性和阴性?_百度知道
细菌如何分阳性和阴性?
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通过革兰氏染色法可将所有细菌的重要方法，1884年由丹麦人革兰氏发明。其染色要点：先用结晶紫染液染色，再加媒染剂--碘液处理，使菌体着色，然后用乙醇脱色，最后用复染液(沙黄或番红)复染。显微镜下菌体呈红色者为革兰氏染色阴性细菌(常以G-表示)，呈深紫色者为革兰氏染色阳性反应细菌(常以G+表示)。G+菌与G-菌细胞壁的化学组成结构具有明显差异。1、革兰氏阳性细菌(Gram-positivebacteria)??? 细胞壁的化学组成以肽聚糖(peptidoglycam)为主，这是原核生物所特有的成分，占细胞壁物质总量的40-90%。另外还结合有其他多糖及一类特殊的多聚物--磷壁(酸)质(teichoicacid)。肽聚糖是一个大分子复合体，由若干个N-乙酰葡萄胺(简写NAG)和N-乙酰胞壁酸(，简写NAM)以及少数氨基酸短肽链组成的亚单位聚合而成。NAG和NAM相间排列，以β1，4葡萄糖苷键连接，形成肽聚糖多糖链，其长度因菌种而异，一般每条多糖链有10-56个二糖单位(或氨基糖)，例如金黄色葡萄球菌最短，只有9个二糖单位，而地衣芽孢杆菌可多达79个单位。以肽键连接的氨基短肽，形成了肽聚糖的肽链，其氨基酸的组成和排列顺序，通常为L-丙氨酸、D-谷氨酸、L-二氨基酸(即L-赖氨酸或二氨基庚二酸等)和D-丙氨酸。这些短肽，通过D-乳酰羧基连在部分或全部N-乙酰胞壁酸的残基上。相邻的短肽通过一定的方式将肽聚糖亚单位交叉联结成重复结构。革兰氏阳性细菌肽聚糖分子中的75%的亚单位纵横交错连接，从而形成了紧密编织、质地坚硬和机械性强度很大的多层的三度空间风格结构。如枯草芽孢杆菌的肽聚糖分子可达20层之多。许多G+菌肽聚糖亚单位的组成及连接方式见图2-11和图。??? 磷壁(酸)质又名垣酸，是大多数革兰氏阳性细胞壁组成基质所特有的化学成分。它以末端的磷酸二酯键连接于N-乙酰胞壁酸第六位碳原子上，可能占细胞壁干重50%，它是多元醇和磷酸的聚合物，能溶于水。其主链一般由数十个磷酸核糖醇或磷酸甘油组成，有的还具有由氨基酸或还原糖构成的侧链。根据主链组成的不同，分别称为甘油型和核糖醇型两种。 核糖醇磷壁(酸)质是以磷酸二酯键把两个相邻的核糖醇第一位和第五位的碳原子连接起来。大多数核糖醇残基在第二位碳原子上接一个D-丙氨酸，而第三和第四位碳原子上可由不同的糖(葡萄糖、半乳糖、N-乙酰葡萄糖胺)取代。核糖醇磷壁(酸)质的链较长，少者为10个残基，多者有40-50个残基。甘油磷壁(酸)质在相邻的两个磷酸甘油第一位与第三位碳原子上的羟基则与D-丙氨酸或糖连接。少量的甘油磷壁(酸)质也分布在细胞膜中，被称为膜磷壁(酸)质或脂磷壁(酸)质，它们同膜中的糖脂共价结合。除个别球菌外，革兰氏阳性细菌的细胞壁都只含一种磷壁(酸)质。磷壁(酸)质的存在，使细胞壁形成了一个负电荷环境，大大加强了细胞膜对二价离子的吸附，尤其是Mg2+。而高浓度Mg2+的存在，对于保持膜的硬度，提高细胞壁合成酶的活性极为重要；另有报道认为，磷壁(酸)质在细胞表面构成了有利于噬菌体吸附的受体位点，也是细胞壁深层的一种抗原物质。 2、革兰氏阴性细菌(Gram-negtivebacteria)?? 革兰氏阴性细菌细胞壁的组成和结构比革兰氏阳性细菌更复杂。其结构层次明显，分为内壁层和外壁层。内壁层紧贴细胞膜，厚约2-3nm，是一单分子层或双分子层，占细胞壁干重5-10%，由肽聚糖组成。肽聚糖多糖链结构与革兰氏阳性细菌相同，但肽链中的L-赖氨酸往往被其他二氨基酸取代。由于它们只有30%的肽聚糖亚单位彼此交织联结，故其网状结构不及革兰氏阳性细菌的坚固，显得比较疏松(图2-16和图2-17)。外壁层覆盖于肽聚糖层的外部、表面不规则，切面呈波浪形。外壁层可再分为内、中、外三层。最外层为脂多糖层，中间为磷脂层，内层为脂蛋白层，它以脂类部分与肽聚糖肽链中的二氨基庚二酸连接。某些细菌的抗原性、致病性以及对噬菌体的敏感性均与这些成分有关。脂多糖是革兰氏阴性细菌细胞外壁层的主要成分，也是革兰氏阴性细菌细胞壁中独有的成分，其化学组成因种而有一定差别。分子结构非常复杂，分子量在一万以上。它由三个部分组成，即核心。O-侧链和脂质。核心部分由5-10种糖类。乙醇胺和磷酸盐组成核心链，其中2-酮-3-脱氧辛酸和庚糖是少见的成分，多个核心链通过磷酸酯键彼此连接。核心的一体抗原。不同种或型的细菌，O-侧链的组成和结构(如多糖的种类和序列)均有变化，构成了各自的特异性抗原，像沙门氏菌，根据O-抗原可再细分为1，000多个血清型，这些血清型的沙门氏菌，核心部门相同，而O-抗原的差异，使之在免疫学和临床诊断中具有重要意义。非致病性革兰氏阴性细菌细胞壁组成中不具O-侧链，只有核心。核心的另一端以共价键连接脂质，由葡萄糖、半乳糖、N-乙酰葡萄糖胺、脂肪酸和磷酸组成，是脂多糖的主要毒性成分。综上所述，除支原体外，几乎所有的原核生物都具有坚韧的细胞壁，通过革兰氏染色法，可将它们分为革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌两大类，二者的细胞壁差别很大。革兰氏阳性细菌的细胞壁较厚，只有一层，主要由肽聚糖组成，革兰氏阴性细菌却有内壁层和外壁层两 (图2-20)，它们的成分也不同，从化学组成看，革兰氏阳性细菌却有内壁层和外壁层两层(40-90%)，含脂量低，而革兰氏阴性细菌正好相反(表2-3)。此外，二者肽聚糖亚单位联结的方式也有些差异。肽聚糖亚单位间的交联，通常由一条肽链的第四个基的羧基同另一条和第三个氨基酸的自由氨基，以氨基酸间桥连接，并通过以下几种方式构成肽聚糖同网格：1.直接以肽链交联，如大肠杆菌(图2-21，A)；2.加进单一的氨基酸，多种革兰氏阴性细菌属此方式(图2-21，B)；4.通过一条与连接在胞壁酸上的四肽链基本相同的额外多肽链交联，如溶壁微球菌。细菌细胞组成中，胞壁酸、磷壁(酸)质、二氧基庚二酸、D-氨基酸等是细菌以及与之相近的原核生物细胞壁中所特有的。D-氨基酸的存在，有助于抵抗普通蛋白酶和肽酶的分解作用。3.细菌细胞壁与革兰氏染色反应??? 关于革兰氏阳性细菌与革兰氏阴性细菌细胞壁结构和组成的区别对革兰氏染色反应有何关系，尚待研究。现在大多认为，在染色过程中，细胞内形成了深紫色晶紫-碘复合物。这种复合物可被酒精从革兰氏阴性细菌细胞内浸出，而阳性菌则较困难。这是由于阳性细菌细胞壁较厚，尤其是肽聚糖含量较高，网格结构紧密，含脂量又低，当它被酒精脱色时，引起了细胞壁肽聚糖层网状结构的孔么缩小以至关闭，从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物的逸出，故菌体呈深紫色；可是，革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄，含量较少，而脂抽提出来，故革兰氏阴性细菌菌体呈复染液的红色。此外还有其他的解释。但很多观点都涉及到细胞壁的结构与组成，结晶紫-碘复合物与细胞壁、细胞膜的关系。研究者发现，细胞内的核酸和核蛋白、脂类、磷酸盐复体如多元醇磷酸盐、或多糖和核酸，这些物质都能保留结晶紫-碘复合物在细胞内不至脱色。4.细胞壁缺陷细菌??? 用溶菌酶处理细胞或在培养基中加入霉素等因子，使可破坏或抑制细胞壁的形成，成为细胞壁缺陷细菌。通常包括原生质体、球形体和细菌L-型。用溶菌酶除去革兰氏阴性菌细胞壁时，若先用乙二胺四乙酸(EDTA)处理一下外壁，则效果要好些。原生质体(protoplast) 在革兰氏阳性细菌培养物中加溶菌酶或在含青霉素等的培养基里培养阳性细菌，便可破坏或抑制细胞壁的合成。细菌除去细胞壁后剩下的部分叫做原生质体。原生质体由于没有坚韧的细胞壁，故任何形态的菌体均呈球形。对环境条件很敏感，而且特别脆弱，渗透压、振荡、离心以至通气等因素都易引起原生质体破裂，有的原生质体还保留着鞭毛，但不能运动，也不能被相应的噬菌体感染。可是其他生活性基本不变，在适宜条件下照样生长繁殖，形成菌落，如用即将形成芽孢的营养体获得的原生质体还可形成芽孢。原生质体的获得，给微生物学工作者提供了另一种类型的生物学实体，以研究基本生物学过程；用原生质体融合新技术，可培育新的优良菌种。 ??? 球形体(spheroplast) 多用革兰氏阴性细菌，以上述同样方法处理便可获得。该类菌由于细胞壁肽聚糖含量少，虽被溶菌酶除去，但外壁层中脂多糖、脂蛋白仍然全部保留，外壁的结构存在，所以，球形体较之原生质体外界环境具一定抗性，并能在普通培养基上生长。 ??? 细菌L-型(bacterialL-form)是细菌在某些环境条件下所形成的变异型。没有完整而坚韧的细胞壁，细胞呈多形态，有的能通过滤器，故又称&滤过型菌&。在低渗条件下生长缓慢，在固体培养基上形成一种直径约0.1mm的微小菌落，中心部分深埋于培养基内，呈典型的&油煎蛋&状。这些变异型，有些是能回复至亲代的&不稳定&变异株，有些是不能回复的&稳定&变异株。由于它最先被英国Lister医学研究院发现，故名细菌L-型。现在，大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等20多种细菌中的均有发现。
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说简单点儿用革兰氏染色
呈蓝紫色的为阳性菌 呈红色的为阴性菌主要原因是由他们的细胞壁的结构决定的大学微生物会系统学到
那个镜子,照镜子的时阴的 .其他的是阳的
一楼的学生物的吧！
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革兰氏阳性菌与阴性菌的区别
14:57　来源：&　　　　【
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【提问】革兰氏阳性菌与阴性菌的区别？
【回答】学员，您好！您的问题答复如下：
革兰氏阳性菌与阴性菌的区别在于：用结晶紫液加碘液染色，再用酒精脱色，然后用稀复红液染色。经过这样的处理，有的细菌被染成紫色，是革兰氏阳性菌；有的被染成红色，是革兰氏阴性菌医|学教育网搜集整理。
祝您顺利通过考试！
问题所属科目：---药理学
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【作者单位】：
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【正文快照】：
革兰氏染色阳性反应和阴性反应是细菌分类和鉴定的最重要、最基本的方法之一.但是,使用革兰氏染色时常会发现某些革兰氏阳性菌褪色,某些革兰氏阴性菌会由于菌龄或培养基的不同而产生黑色的染色粒。而且染色程序又较为复杂。我们经反复试验发现用氢氧化钠能迅速地将革兰氏阳性
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刘荣标t1.习关于用氢氧化钾区分革兰氏阳性菌和阴性菌的方法,近年来得到Grege~[3]的进一步印证。我们用这一方法检查了前人未报道过试验结果的22属80种共185株细菌,也肯定了这一方法的准确性,现将方法及试验结果报告如下。一、方法 置l一2滴3肠KOH溶液于载玻片上,用接种环取培养17一20小时的或生长良好的斜面培养物少许,与KoH溶液混合并不停搅动,一般在15秒钟内观察结果,观察结果时将载玻片置黑色背景下。若细菌与KOH液混合后变粘稠,且随接种环搅动的方向移动,并可用接种环提起粘丝状物,则为阳性反应;若混合后不形成粘稠物而另为水状悬浮液,并且不随接种环搅动而移动则为阴性反应。与革兰氏染色法相比,革兰氏阳性菌氢氧化钾试验为阴性,反之亦然。二、试验结果 试验结果见表。所试验的10属37种91株裹纽t化钾法位班抢果 菌.名-一一}醚艳菌名菌株数!结果.十十,‘曰、了草兰氏阴性门.纹腆醋酸杆菌干燥无色杆菌(才.~后)洲夕然夕气杆菌...&
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革兰氏染色是对未知细菌进行初步分类的传统方法。该法虽已习用甚久,但有操作复杂和某些革兰氏阳性菌因较易脱色而可能被染成革兰氏阴性菌的缺点。最近,国外报道一些可以克服上述缺点的辅助方法,如氨肚酶法、叮咤橙染色法、氢氧化钾法等(’、“、“、‘)。本文应用细菌培养物以氢氧化钾法与革兰氏染色法作了对比观察,并对氢氧化钾法的临床实用提出评价。 原理氢氧化钾(KOH)法和革兰氏染色法一样,是依据细菌细胞壁的化学成分不同以区分细菌的类别。在稀氢氧化钾溶液中革兰氏阴性菌的细胞壁容易裂解,裂解后释出DNA,使氢氧化钾溶液变为粘稠并形成粘丝。反之,稀氢氧化钾溶液对节兰氏阳性菌则无此作用。 试剂3%氢氧化钾水溶液。盛人滴瓶中备用。 方法取载物玻片一张,于其表面上滴加3%氢氧化钾溶液1滴,然后用接种环 (直径2毫米)刮取经过18一24小时培养的细菌菌落少许,在液滴中作环状研磨,并不时将接种环从液滴中提起,以观察溶液是否变为粘稠和有无粘丝形成。 一张玻片可...&
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