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帮忙看一下提的真菌RNA
最近提真菌RNA要做转录组，跑的电泳图片。请大家帮忙看一下~~~& &生工的triol试剂盒，电泳是200V 10分钟
image002.jpg
理论上应该是明显的三条条带吧？但是感觉你提取的不太纯…… 挺好的，可以进行下一步的实验了。 还可以，1，2泳道还是有点拖尾，不过很好了 中午，公司工程师回的邮件，有以下问题：
1、最下边有一条带，样品应该存在DNA污染；
2、28s下面有弥散，可能样品中存在杂质，当然这不能很确定，因为也不确定是样品本身还是胶的原因；
3、18s比较亮，其后存在弥散，5s带较亮，样品可能存在降解。
应该怎么改进？请求指点~~~ : Originally posted by wangranjun at
理论上应该是明显的三条条带吧？但是感觉你提取的不太纯…… 谢谢回复~~&&应该怎么改进？中午工程师回复的邮件里也说有杂质~~讲解~~& &希望再详细指点一下。& &枪头和EP管&&用买的无酶的好&&还是自己用DEPC处理的好~~ : Originally posted by ssssllllnnnn at
挺好的，可以进行下一步的实验了。 谢谢您的回复~~中午公司工程师恢复了邮件，说是质量还没达到要求。需要改进~~ : Originally posted by
还可以，1，2泳道还是有点拖尾，不过很好了 谢谢您的回复~~中午公司工程师恢复了邮件，说是质量还没达到要求。需要改进~~& &请问一下拖尾现象怎么改进？ 再顺便问一下~~& &枪头和EP管买的无酶的好&&还是自己用DEPC处理的好？& & 买的无酶的还用在高温灭菌一下吗？ : Originally posted by
谢谢回复~~&&应该怎么改进？中午工程师回复的邮件里也说有杂质~~讲解~~& &希望再详细指点一下。& &枪头和EP管&&用买的无酶的好&&还是自己用DEPC处理的好~~... 我们用的都是自己用DEPC处理然后高压灭菌的枪头、EP管，我感觉这个应该是关系不大的。提取RNA时周围环境要注意一下，例如喷酒精或在超净台中提取。吹打动作都轻柔一些，因为RNA很容易被降解或断裂。祝顺利！ 第一次提吧，先看一下RNA提取注意事项吧，多提几次就好了。
提得多了，熟练了，动作又规范又快就好了。
DNA污染，看看是否对你下步实验有影响。有的话加酶去掉就可以。 估计是没有提纯，我之前做真菌经常出现拖带，分析原因是有蛋白质。建议，提取后的RNA做一下核酸蛋白分析，确定一下能否用。 1，适当提高样品的量，如果提取之前样品总量很少，提出的RNA容易弥散
2，检查你所用的所有试剂，凡是自己配的试剂，DEPC水可能效果不好了，更换试试
3，加Trizol后，氯仿抽提两次试试，效果会好些；取上清时，少取，不要贪多，会减少DNA及蛋白污染
提取后，测浓度，如果按比例稀释，浓度成比例变化，那你提取的RNA基本是没有问题的 你好，本人是生工提取RNA的，不知道你的RNA后续是做什么精密实验。就我们公司而言，这样的RNA做荧光定量是没有问题的。注意提取过程中的一些小操作细节，如带口罩，吸液，取样均一等，润色一下应该可以达到你们工程师的要求吧。祝您顺利！ 不知道你提的是什么真菌，如果是酵母类的单细胞真菌，建议用液氮冻融几次，再用trizol破菌抽提，如果是植物类大型真菌或者是丝状真菌，那我建议你用液氮好好磨一下，你这个结果明显基因组dna太多了，这个会严重干扰的，没法往下做。你也可以试着用dna酶处理一下，但一定要是rna酶free的，否则你的rna就尸骨无存了。 我想问一下您跑的marker是多少的&&rRNA的大小各是多少？谢谢帮忙看一下！~~~~~~~~_我的电脑吧_百度贴吧
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快试试吧，可以对自己使用挽尊卡咯~◆◆
文件信息:&,&
名称:&WUWebControl&Class
文件:&C:\WINDOWS\system32\wuweb.dll
类型:&[CabHistory]
CLSID:&
文件信息:&,&
名称:&MUWebControl&Class
文件:&C:\WINDOWS\system32\muweb.dll
类型:&[CabHistory]
CLSID:&
文件信息:&,&
===============================================================
IE&Host内容
===============================================================
127.0.0.1&&&&&&&localhost
===============================================================
当前系统进程列表
===============================================================
进程名称:&rfwProxy.exe,&PID=1024
命令行:&d:\瑞星防火墙\rising\rfw\rfwproxy.exe
进程路径:&d:\瑞星防火墙\rising\rfw\rfwproxy.exe
文件信息:&Rising&Personal&Proxy&Service,&Beijing&Rising&Technology&Co.,&Ltd.
进程名称:&rfwsrv.exe,&PID=1104
命令行:&d:\瑞星防火墙\rising\rfw\rfwsrv.exe
进程路径:&d:\瑞星防火墙\rising\rfw\rfwsrv.exe
文件信息:&Rising&Personal&FireWall&Service,&Beijing&Rising&Technology&Co.,&Ltd.
进程名称:&EXPLORER.EXE,&PID=1288
命令行:&C:\WINDOWS\Explorer.EXE
进程路径:&C:\WINDOWS\Explorer.EXE
文件信息:&Windows&Explorer,&Microsoft&Corporation
进程名称:&LEXBCES.EXE,&PID=1424
命令行:&C:\WINDOWS\system32\LEXBCES.EXE
进程路径:&C:\WINDOWS\system32\LEXBCES.EXE
文件信息:&LexBce&Service,&Lexmark&International,&Inc.
进程名称:&LEXPPS.EXE,&PID=1456
命令行:&LEXPPS.EXE
进程路径:&C:\WINDOWS\system32\LEXPPS.EXE
文件信息:&LEXPPS.EXE,&Lexmark&International,&Inc.
进程名称:&HKCMD.EXE,&PID=1656
命令行:&&C:\WINDOWS\system32\hkcmd.exe&&
进程路径:&C:\WINDOWS\system32\hkcmd.exe
文件信息:&hkcmd&Module,&Intel&Corporation
进程名称:&SMax4PNP.exe,&PID=1664
命令行:&&C:\Program&Files\Analog&Devices\SoundMAX\SMax4PNP.exe&&
进程路径:&C:\Program&Files\Analog&Devices\SoundMAX\SMax4PNP.exe
文件信息:&SMax4PNP&MFC&Application,&Analog&Devices,&Inc.
进程名称:&SMax4.exe,&PID=1672
命令行:&&C:\Program&Files\Analog&Devices\SoundMAX\Smax4.exe&&/tray
进程路径:&C:\Program&Files\Analog&Devices\SoundMAX\Smax4.exe
文件信息:&SoundMAX&Control&Center,&Analog&Devices,&Inc.
进程名称:&KAV.EXE,&PID=1696
命令行:&
进程路径:&
文件信息:&,&
进程名称:&RFWMAIN.EXE,&PID=1712
命令行:&&D:\瑞星防火墙\Rising\Rfw\rfwmain.exe&&-Startup
进程路径:&D:\瑞星防火墙\Rising\Rfw\rfwmain.exe
文件信息:&Rising&Personal&FireWall&Main&Program,&Beijing&Rising&Technology&Co.,&Ltd.
进程名称:&kavsvc.exe,&PID=1896
命令行:&
进程路径:&
文件信息:&,&
进程名称:&MDM.EXE,&PID=1924
命令行:&&C:\Program&Files\Common&Files\Microsoft&Shared\VS7DEBUG\MDM.EXE&
进程路径:&C:\Program&Files\Common&Files\Microsoft&Shared\VS7DEBUG\MDM.EXE
文件信息:&Machine&Debug&Manager,&Microsoft&Corporation
进程名称:&SMAgent.exe,&PID=1988
命令行:&&C:\Program&Files\Analog&Devices\SoundMAX\SMAgent.exe&
进程路径:&C:\Program&Files\Analog&Devices\SoundMAX\SMAgent.exe
文件信息:&SoundMAX&service&agent&component,&Analog&Devices,&Inc.
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