哈尔滨霉菌性阴道炎是什么?%……黑龙江生殖保健中心技术一流%……患上霉菌性阴道炎相信是每个人都不愿意看到的结果，霉菌的传染途径有很多，比如性行为、个人卫生、公共用品、滥用抗生素、足癣、灰指甲等，都是诱发霉菌性阴道炎的原因。当女性的阴道里有念珠菌，也就是霉菌存在时，就会导致女性患上霉菌性阴道炎。所以说霉菌性阴道炎使我们防不胜防，下面我们就一起来看看黑龙江生殖保健中心医院权威专家的详细讲解吧。　　霉菌性阴道炎是一种高发的妇科炎症，10%～20%的健康妇女阴道中就携带有念珠菌，30%的孕妇阴道中有念珠菌寄生，当女性与念珠菌培养阳性的男性有性接触时，其被感染率为80%，因此在治疗霉菌性阴道炎的时候，要男女同治，才能避免复发。　　有过性行为的女性，阴道处于一个开放的状态，炎症也常常成为“常客”，当阴道里的菌群分布不均衡，霉菌占“主导地位”，霉菌性阴道炎的特征就显现出来，会出现外阴、阴道瘙痒，白带增多，泛黄，呈凝乳状，有异味等，一定要尽快就医治疗，不要自己乱上药。　　【霉菌性阴道炎的诱发原因】　　1、传染：男性的生殖器有霉菌存在，由于男性生殖道比较干燥，也没有霉菌喜欢的酸性环境，因此不会产生明显的霉菌感染症状，但是在发生性行为的时候，就会传染给女性，导致女性发病，对于性生活比较混乱的女性，最好采用避孕套避孕，避免患上这些传染性的阴道炎。　　2、公共用品：主要是间接性的感染，比如公共马桶、毛巾、床单等，一般这些公共用品比较脏，都有可能隐藏大量霉菌，接触以后既可引发霉菌性阴道炎，建议女性少去这样的公共场所，不要用公共卫生品。　　3、滥用抗生素：抗生素使用不当或滥用广谱抗生素也可能引起霉菌性阴道炎，因为抗生素在杀灭致病菌同时，也抑制部分有益菌群，其中也包括霉菌，因此女性在服用抗生素的时候，一定要有医生的指导，不可滥用。　　4、足癣、灰指甲等：霉菌与人类亦敌亦友，可在人体的阴道、皮肤表面、胃肠道、指甲缝等地方大量繁殖，这些部位寄生的霉菌还可以互相传染。　　【O3高能纯净活性氧技术简介】　　O3高能纯净活性氧是氧的同素异形体，有很强的氧化能力，在一定浓度下能与细菌、病毒、病原体等微生物产生生化反应，短时间内破坏病毒生物结构，刺破细胞壁，使之失去活力，当高能氧浓度极剧上升，达到一定值时，消毒灭菌即可快速完成，是目前公认的治疗妇科炎症的首选技术，同时也是生殖健康感染工程重点推荐技术，广泛应用于妇科炎症等疾病的治疗，治愈率达98%。　　【O3高能纯净活性氧技术特点】　　1、技术成熟国际领先：O3高能纯净活性氧技术在德国、法国等欧洲国家应用数年，近万例临床医学报告表明：妇科炎症治疗有效率高达99%以上，是目前治疗妇科炎症最有效的手段。　　2、源自纯净绿色环保：O3高能纯净活性氧技术以99%浓度纯氧输出臭氧，气体浓度均衡稳定、治疗过程无二次污染，在治疗过程中对患者无任何毒副作用。　　3、杀菌广谱不留死角：在不破坏女性生殖道内环境的情况下，快速杀灭女性阴道内各种有害致病菌，全方位直达病灶，不留死角，不出现治疗盲角。　　4、功效快速治疗确切：功效快速，多数患者在经过1次治疗后，白带减少，异味及局部瘙痒症状明显减轻，特别是对久治不愈的阴道炎疗效显着。　　5、无痛无创修复维养：O3高能纯净活性氧技术独创三维治疗头，采用医用高分子纳米材料及人性化设计，治疗时对宫颈无任何损伤，愈后无疤痕，不影响精子渡越，尤其适合未孕女性。　　黑龙江生殖保健中心治疗霉菌性阴道炎　　强大的专家团队做技术保障　　黑龙江生殖保健中心妇科作为妇科诊疗领域的佼佼者，始终把引进人才、培养人才作为一种长期战略。其强大的专家团队包括国内知名专家教授、学科带头人等大批优秀医疗精英。对妇科常见病、多发病、疑难杂症诊治积累了过硬的专业技术水平和丰富的临床诊治经验，赢得了国内外业界同行及专业媒体的广泛报道和关注。　　服务人性化、诊疗个性化　　黑龙江生殖保健中心妇科是一所集医疗、教学、科研为一体的国际化医院，建院以来始终独善其道，道而精专，把国际领先的治疗设备和理念带给患者。秉承“医无止境、精益求精”的医疗作风，打造规模化、标准化、品牌化的专科品牌医院。黑龙江生殖保健中心妇科最好的无痛人流中心充分保护患者隐私，让您的 “难言之隐”不被泄露。一人一诊室，充分尊重患者的人格与尊严、个人隐私权与知情同意权，为患者量身制订治疗方案，并对病历严格保密。这个治疗过程中没有人打扰，就像跟自己朋友交心一样。看病，再也不是什么尴尬事!　　费用公开公示，是您就医的权利　　黑龙江生殖保健中心一直以来都以“合理收费，诚信办院”为立足点，专家认为：患者就医有权知道各项收费，对费用的透明合理有权监督。医院在国家医疗体制改革的指导下，根据哈尔滨市卫生局服务规范要求，不断完善各项收费制度，执行哈尔滨市物价局和卫生局的统一收费标准，并实行价格的公开公示，做到各项费用透明，让患者清清楚楚的治病，明明白白消费。费用公开制度执行后，患者清除地知道自己在治疗过程中的每一项收费，并可以监督药品、检查项目等收费价格是否合理。　　【温馨提示】哈尔滨霉菌性阴道炎是什么?以上就是“哈尔滨霉菌性阴道炎是什么?”，女性朋友一定要做好个人卫生，性生活也要健康，才能预防阴道炎的侵扰，阴道炎的治疗要及时，以免炎症上行扩散，而导致慢性炎症。若您还有疑问，可直接点击咨询我们黑龙江生殖保健中心医院的在线专家。
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《抗生素生物技术要求，抗生素生物技术参数》
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此套资料包含书籍和光盘，一共2套内容，共计270元，包含运费&&详情请咨询客服人员&电话：010--第一套资料：《抗生素生物技术》出版社最新出版图书第二套资料：《各种抗生素生物全套资料汇编》光盘，包含以下目录所对应内容，几乎涵盖了所有这方面的内容，全部汇总在一起；图书介绍&目录如下：第一章抗生素产生菌的菌种1&第一节抗生素产生菌的主要分类1&一、放线菌1&二、真菌1&三、细菌2&四、动物或昆虫5&五、海洋微生物8&六、极端微生物18&第二节抗生素产生菌的培养19&一、链霉菌的形态生活史19&二、链霉菌形态发育的分子生物学22&三、放线菌/链霉菌的营养要求24&四、放线菌在固体培养基上的培养特征24&五、固体培养基的设计与选择25&参考文献25&第二章抗生素产生菌菌种优化的理论与方法26&第一节自然选育27&一、菌种自然选育的方法27&二、自然选育的操作过程28&第二节诱变育种29&一、诱变因子的作用机理29&二、诱变因子的使用方法32&三、诱变育种的新技术34&四、特定目的的诱变育种——抗噬菌体菌株的诱变36&五、诱变育种的分子生物学基础——DNA损伤差错修复机制37&第三节理性化诱变育种38&一、途径工程育种39&二、抗生素生物合成限速阶段酶基因的操作43&三、调节基因的操作44&四、转座子的操作45&五、提高有效组分的理性化筛选46&六、核糖体工程育种48&七、抗性调节育种50&八、生理代谢调节变株53&第四节菌种基因突变的分析与定位53&一、基因多态性分析53&二、DNA芯片54&参考文献54&第三章抗生素发酵工程55&第一节抗生素发酵原理55&第二节种子培养过程57&一、菌种制备57&二、种子培养58&第三节发酵培养基的设计59&一、发酵培养基的组成要素59&二、&发酵培养基配方的设计及优化63&第四节发酵过程参数控制70&一、&发酵参数70&二、发酵参数的控制72&参考文献77&第四章抗生素产生菌的生理代谢78&第一节碳源代谢78&一、葡萄糖分解代谢途径78&二、&碳源分解代谢的阻遏79&第二节氮源代谢81&一、链霉菌中氮源的矿物质来源81&二、&链霉菌中肽及蛋白质的利用82&三、&链霉菌中的氨基酸通透酶82&四、&链霉菌氨基酸的合成与分解代谢83&五、氮源分解代谢的调控88&六、&链霉菌氨基酸合成的调控91&第三节磷酸盐代谢93&一、链霉菌中磷酸盐调控的双组分PhoR?PhoP系统93&二、&链霉菌中其他参与磷酸盐调控的基因93&第四节核苷酸代谢94&一、核苷酸的分解94&二、核苷酸的合成94&第五节脂代谢96&一、&脂类的合成96&二、脂类的分解98&第六节核开关——一个新的基因调控元件99&参考文献100&第五章抗生素生物合成及其遗传学101&第一节抗生素构造单位的来源——生源102&一、&聚酮体103&二、异戊二烯类103&三、糖类和氨基糖104&四、氨基酸104&五、3?氨基?5?羟基苯甲酸106&六、环多醇107&七、核苷类107&第二节主要类群抗生素的生物合成及分子生物学109&一、多肽类抗生素109&二、聚酮类抗生素133&三、聚酮与非核糖体多肽复合型合酶共同介导合成的抗生素183&四、寡糖类抗生素及糖基化酶在抗生素生物合成中的作用189&五、氨基糖苷类抗生素197&六、核苷类抗生素212&七、氨基香豆素类抗生素217&八、异戊二烯类抗生素223&九、林可霉素类抗生素226&参考文献228&第六章抗生素产生菌次级代谢调控及其分子机制229&第一节抗生素生物合成全局性调控230&一、生长速率及多磷酸化核苷酸ppGpp的调控230&二、sigma因子231&三、营养代谢的调节232&四、反馈调节235&五、诱导调节236&六、腺苷甲硫氨酸（SAM）的调节241&七、细胞通透性的调节242&八、金属离子的调节242&九、热休克反应242&十、抗生素生物合成全局性调控基因242&第二节抗生素生物合成的多效性调控247&一、链霉菌形态发育分化和抗生素生物合成的多效性调控247&二、多种途径抗生素生物合成的多效性调控247&第三节抗生素生物合成途径特异性调控247&一、抗生素生物合成途径特异性调控蛋白247&二、各类抗生素生物合成途径的特异性调控249&第四节链霉菌次级代谢基因转录调控253&一、链霉菌基因转录的特点253&二、链霉菌启动子域的特点257&第五节调节基因的研究方法261&一、小分子诱导物的分离鉴定261&二、启动子区及活性分析261&三、基因表达的时空性262&四、基因转录的起始位点263&五、调节蛋白与DNA的相互作用263&参考文献264&第七章抗生素生物合成基因组合创制&新抗生素或其先导化合物265&第一节组合生物合成的分类267&一、突变组合生物合成267&二、前体导向生物合成276&三、基因组合生物合成281&第二节基因组合生物合成的原理及其应用283&一、聚酮合酶（PKS）Ⅰ型283&二、聚酮合酶(PKS)Ⅱ型300&三、聚酮合酶(PKS)Ⅲ型307&四、非核糖体肽合酶309&五、后修饰酶在组合生物合成中的应用315&第三节异源基因表达组合生物合成336&一、宏基因组在组合生物合成中的应用337&二、异源基因表达宿主系统342&三、异源基因表达载体系统344&四、抗生素生物合成基因簇的异源基因表达346&五、异源基因表达的组合生物合成349&六、组合生物合成研究存在的问题及展望360&参考文献361&附录362&一、放线菌培养常用培养基362&二、&几种培养基常用有机氮源的成分&分析364&三、链霉菌菌种研究常用技术与方法368&光盘内容介绍&目录如下：1&一种无抗生素抗性标记的枯草芽孢杆菌构建方法及筛选靶基因失活的枯草芽孢杆菌的方法2&用于将糖肽抗生素递送至医学装置表面的组合物和方法3&一种抗生素耐药NDM-1基因的荧光检测试剂盒及检测方法4&制备噬菌体混合物的方法以及该噬菌体混合物在抗生素抗性葡萄球菌治疗中的用途5&采用大孔吸附树脂去除头孢菌素类抗生素中细菌内毒素的方法6&从抗生素生产废酸水中减压蒸馏回收丁醇-醋酸丁脂的方法7&一种替代抗生素的微生物饲料添加剂及其制备方法8&一种铁碳微电解处理高浓度含铜抗生素废水及回收铜的方法9&1β甲基碳青霉烯类抗生素的合成方法10&含有烃基硼酸络合物的抗生素和使用方法11&一种抗生素的高产菌株及其制备方法和用途12&用于检测化妆品中抗生素的标准物质的配制方法13&新颖的氨基糖苷类抗生素、其制造方法及其医药用途14&一种β-甲基碳青霉烯抗生素中间体的制备方法15&一种β甲基碳青霉烯类抗生素母核的制备方法16&一种β甲基碳青霉烯类抗生素中间体的制备方法17&一种β-内酰胺类抗生素溶液剂及其制备方法18&抗生素以及控制微生物数量的控制剂的使用方法19&一种不含抗生素的微生物发酵饲料的制备方法20&截短侧耳素类抗生素合成中间体姆替林的制备方法21&碳青霉烯类抗生素的合成中间体的酸加成盐及其制备方法22&一种碳青霉烯类抗生素中间体的制备方法23&一种牛奶中β-内酰胺类抗生素配体受体法检测试剂盒及其检测方法24&蒽环类抗肿瘤抗生素脂肪酸复合物脂质纳米粒制剂及其制备方法25&包含蜂毒和药物粗提物的天然抗生素及其制备方法26&微生物发酵无抗生素饲料及其制作方法27&一种可替代抗生素的高蛋白饲料添加剂及其制备方法28&利用植物浮床处理含抗生素养殖废水的方法29&从大肠杆菌BL21CCM7394中无色菌CCM4824制备固定重组青霉素酰化酶催化剂的方法及其在合成β-内酰胺抗生素中的应用30&抗生素类药物1-(邻-氟苯基)二氢吡啶酮的合成及生产的方法和工艺31&非天然型抗生素的制造方法32&一种氨基糖苷类抗生素的制备方法33&1β-甲基碳青霉烯类抗生素双环母核的制备方法34&一种β-内酰胺类双抗生素化合物及其制备方法和用途35&一种处理抗生素废水的新方法36&一种水产品中磺胺类和抗生素类药物多残留的分析方法37&一种酶催化一锅法合成青霉素类抗生素的方法38&一种新型抗生素及其核苷酸序列、制备方法与应用39&一种含抗体模拟物的新型抗生素及其制备方法与应用40&头孢类抗生素酸式复盐及制备方法41&一种抗肿瘤抗生素和其药学上可接受的盐、及其制备方法和用途42&嗜热脂肪芽孢杆菌及抗生素残留检测方法43&生产动物专用抗生素阿维拉霉素的菌株及方法44&牛奶中β-内酰胺类抗生素残留试剂盒检测方法45&超高温瞬时处理的酸性乳饮料中抗生素的检测方法46&用环糊精增加氟苯尼考及结构相关的抗生素的溶解度的化合物和方法47&氟喹诺酮类抗生素的固相萃取与HPLC-荧光检测方法48&一种检测乳品中多种抗生素残留的方法49&用于抗生素和心脏病标记物快速检测的适配子生物传感器的制作方法50&牛奶中β-内酰胺类抗生素残留的检测方法51&一种氟喹诺酮类抗生素的快速检测方法和快速检测试剂盒52&一种测定畜牧粪便中抗生素的方法53&青霉素类抗生素替卡西林钠的制备方法54&微生物溶菌酶在饲料中替代抗生素的应用方法55&一种牛奶中诺氟沙星抗生素残留量的检测方法56&测定对溶解细胞的抗生素具有抗性的细菌存在的方法57&1β甲基碳青霉烯类抗生素中间体的合成方法58&二取代硼酸抗生素局部制剂及其使用方法59&用于抗生素的稳定组合物以及应用方法60&一种替代抗生素的畜禽饲料添加剂及其制备方法61&无抗生素有机高能量半湿饲料及其制备方法62&一种抗肿瘤类抗生素及其制备方法63&大环内酯类抗生素分子印迹聚合物微球的制备方法64&抗生素的调节释放组合物及其制备方法65&含肽类抗生素成品干燥方法66&一种青霉素类抗生素多残留酶联免疫检测方法67&一种动物源食品中氨基糖苷类抗生素的酶联免疫检测方法68&大环内酯类抗生素菌渣无害化处理方法69&一种检测乳中抗生素和/或抗生素拮抗剂的方法70&残留的青霉素类抗生素酶解产物的检测方法71&一种分离富集环境中痕量四环素类抗生素的方法72&一种碳青霉烯类抗生素侧链的制备方法73&一种含氮杂环取代的抗生素及其制备方法与用途74&碳青霉素烯抗生素中间体的改良结晶析出方法75&四环素与载体蛋白偶联产物和四环素类抗生素抗体制备的方法及用途76&用于制备羊毛硫抗生素的方法77&一种可替代鸡日粮中抗生素的绿色饲料添加剂的配制方法78&用于制备碳青霉烯类抗生素的中间体及其制备方法79&一种制备蒽环类抗肿瘤抗生素的纳米胶束制剂的方法80&抗生素/TCP复合纳米材料及其制备方法81&一种促进载抗生素骨水泥局部药物释放的方法82&抗生素制剂、单位剂量、试剂盒以及方法83&一种抗生素生物农药及其制备方法84&喹诺酮类抗生素多残留酶联免疫检测方法85&一种定量检测动物源食品中头孢类抗生素含量的酶联免疫检测方法86&利用粉末活性炭处理含四环素类抗生素水体的方法87&处理抗生素发酵废水的方法88&检测头孢类抗生素的免疫层析试纸条的制备方法89&一种乳及乳制品中四环素类抗生素残留量的检测方法90&大环内酯类抗生素的纯化方法91&一种细菌蛋白对抗生素抗性功能研究的技术方法92&一种乳制品中抗生素水解残留物的检测方法93&抗生素A10255复合物和诸因子及其工艺规程,微生物,和生产方法94&新抗生素B-3543的生产方法和应用95&糖肽抗生素的制备方法96&新抗生素金核霉素的制备方法和农用杀菌剂97&抗生素的中间体和制备方法98&新抗生素SR-1223的制备方法99&制备β-内酰胺类抗生素的方法及其在药物中的应用100&制备β-内酰胺类抗生素的方法及其在药物中的应用101&新抗生素胞变菌素的制备方法102&新抗生素制黄肝菌素的制备方法和农业园艺用杀菌剂103&生产抗生素A40926复合物及其纯因子PA.PB.A.B.及B0的方法104&新抗生素SP-120,SP-120A,SP-120B及其制备方法和农业园艺用农药105&β-_内酰胺抗生素的制备方法及其应用106&抗生素6270的制备方法及其作为一种抗球虫病剂和饲料添加剂的应用107&用于制备抗生素颗粒的方法及其用途108&基于表面等离子体共振乳制品中抗生素的检测方法及系统109&氨基糖苷类抗生素的大孔吸附树脂富集纯化方法110&氨基糖苷类抗生素的膜分离纯化方法111&不包含抗生素抗性基因的RSF1010衍生MOB-缺陷型质粒、包含该质粒的细菌和生产有用代谢物的方法112&含二烃基代硼酸络合物的抗生素及使用方法113&一类头孢抗生素及其中间体的制备方法114&离子液体萃取青霉素及酶促催化反应耦合制备半合成抗生素6-氨基青霉烷酸的方法115&氨基糖苷类抗生素的早期快速鉴别和排查方法116&新抗生素卡莫霉素A(Chemomycin&A)及其制造方法117&苜苣植物抗生素饲料添加剂的制备方法118&碳青霉烯类抗生素法罗培南钠的制备方法119&一种利福平纳米乳剂抗生素药物及其制备方法120&一种内酰胺类抗生素及其制备方法121&酶催化“一锅法”制备β-内酰胺抗生素的方法122&用于提高链霉菌抗生素产量的方法及菌株123&生产动物用抗生素泰妙菌素过程中的发酵方法124&使用戊-1,5-二醇抑制抗生素耐药菌生长的方法125&一种制备大环内酯类半合成抗生素泰利霉素的方法126&一种生鲜牛奶抗生素残留检测盒及其制造方法127&吡喃酮抗生素及其制备方法与应用128&一种食物抗生素及其制备方法129&一种食物抗生素及其制备方法130&含β-内酰胺抗生素的分散片剂及其制备方法131&利用生物技术对抗生素药渣进行无害化处理的方法132&头孢类抗生素的制备方法133&含有烃基硼酸络合物的抗生素和使用方法134&集光催化氧化反应-膜分离处理抗生素制药工业废水的方法135&使用氨基糖苷类抗生素检测PRP的方法136&提纯硫醚抗生素的方法137&使用羊毛硫抗生素治疗干眼病的方法138&用pH计检测牛奶中抗生素的方法139&原料乳中抗生素残留物的快速检测方法140&一种大环内酯类抗生素重要中间体的新的制备方法141&喹啉抗生素中间体的制备方法142&用于浓缩抗生素溶媒莘取液的聚酰亚胺纳滤膜的制备方法143&为抗生素的生物合成从蓝灰链霉菌非产蓝亚种中克隆基因及其使用方法144&大环内酯类抗生素的酮内酯化合物及其制备方法和用途145&经微生物学方法制备假单胞菌酸A抗生素的方法146&用于制备喹诺酮抗生素中间体的方法147&新的新型大环内酯类抗生素2-位羟基酯和其制剂及其制备方法148&新的扁桃酸大环内酯类抗生素盐和其制剂及其制备方法149&微生物抗生素抗性检测方法150&口服无苦味的大环内酯类抗生素散剂及其处方和制备方法温馨提示：我们可提供各类技术，因篇幅限制不能全部列出，若没找到你要的技术资料，可联系客服提供（客服电话：010-0-）网站：
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商品已成功添加到收藏夹！玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63抗生素生物合成基因相关线性质粒的研究--《河北农业大学》2009年硕士论文
玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63抗生素生物合成基因相关线性质粒的研究
【摘要】：
玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63是一株从马铃薯疮痂病自然衰退土壤中分离的生防菌,能够产生多种脂溶性抗生素,对多种植物病原菌有抑制作用。
根据“链霉菌线性质粒5'末端都结合有共价蛋白”这一性质,通过改进琼脂糖包埋块制作方法,发明了一项高效快速检测链霉菌质粒种类和构型的技术,即“包埋块二次处理法”,并检测出了Men-myco-93-63中存在两种内源线性质粒。双向电泳验证了该方法的正确性,推测质粒大小分别约为47 kb和53 kb。
利用冻融法、SDS/高温循环法和原生质体法对玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63内源线性质粒进行消除,来检测抗生素合成相关基因是否位于质粒DNA上。结果表明,冻融法和SDS/高温循环法分别能有效地获取稳定的缺失质粒pSR47而保留pSR53的菌株P1、P2、P3、P4、P6、P7以及SH7、SH9,它们不能正常产生孢子,对棉花黄萎病菌V41的抑制作用消失,而对马铃薯疮痂病菌H2的抑制作用不变或减弱。因此推测线性质粒pSR47可能含有抑制棉花黄萎病菌V41的抗生素合成相关基因和控制孢子形成的基因,而抑制马铃薯疮痂病菌H2的抗生素合成相关基因定位在染色体或pSR53上。线性质粒pSR53很难消除,推测pSR53可能含有宿主菌的持家基因。SDS/高温循环质粒消除法获得的异形菌株SH10,开始在PDA培养基上呈“光秃”型,产生黄色可溶色素,生物活性无变化,但在传代培养过程中形态特征又恢复到野生型,推测玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63染色体DNA或pSR53含有类似于灰色链霉菌的形态分化adsA的基因,并受某种因子调控。
利用“高盐浓度下CTAB能使大部分糖类和脂类沉淀”的原理,改进了提取基因组DNA的CTAB法,得到了符合构建cosmid基因组文库的大于150kb的基因组DNA,片段大小均一。利用“水煮后5'末端结合有共价蛋白的线性质粒能跟蛋白质一起沉淀,而与染色体DNA分开”的假设来分离线性质粒,成功地提取了玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63的两种线性质粒,但产量较低,尚需进一步优化。
通过克隆pSR47的端粒及构建pSR47基因文库,获得了pSR47的DNA序列,目前拼接得到66个contigs,共131 428bp。核苷酸序列比对发现,pSR47的一部分序列与先前得到的抗生素合成相关基因克隆子pSA31、pSA321和pSA32一致,表明pSR47与抗生素合成相关。生物信息学分析发现pSR47含有抗生素合成关键酶NRPSs/PKSs杂合基因,形态分化调控基因ssgA,whiB-like和FtsK/SpoIIIE家族基因,细胞色素P450基因,细胞色素代谢相关的基因,羊毛硫抗生素修饰蛋白LanC基因,一个组氨酸激酶信号传导途径的操纵子及一些转录调控基因和质粒自身复制、修复、整合及接合转移的基因。这些基因控制的性状与pSR47质粒缺失菌株性状吻合,这直接证明pSR47与抗生素合成相关。但线性质粒的异源转化没有获得成功,有待进一步摸索转化条件。
【关键词】：
【学位授予单位】：河北农业大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2009【分类号】：Q78【目录】：
Abstract5-11
1 玫瑰黄链霉菌研究进展11-12
2 抗生素生物合成基因簇的组成特点及克隆策略12-13
3 链霉菌线性质粒的研究进展13
4 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 的研究进展及立题依据和目的意义13-15
第一章 内源线性质粒的检测分析15-22
1 材料和方法15-18
1.1 材料15-16
1.2 菌丝体培养16
1.3 基因组DNA 的提取16
1.4 碱性溶菌法提取内源质粒16
1.5 改进的碱裂解法提取内源质粒16-17
1.6 标准琼脂糖包埋块的制备17
1.7 非标准琼脂糖包埋块的制备17
1.8 二次处理17
1.9 电泳检测质粒构型17-18
1.10 双向电泳验证18
1.11 脉冲场凝胶电泳（PFGE）检测质粒种类18
1.12 电泳验证质粒大小18
2 结果与分析18-20
2.1 基因组DNA 及内源质粒DNA 的检测18-19
2.2 “包埋块二次处理法”检测质粒构型19
2.3 双向电泳验证19
2.4 PFGE 检测质粒种类及大小19-20
2.5 验证线性质粒大小20
3 讨论20-21
4 结论21-22
第二章 质粒消除22-35
1 材料和方法22-27
1.1 材料22-23
1.2 冻融法去除质粒23
1.3 十二烷基硫酸钠（SDS）/高温循环法去除质粒23-24
1.4 原生质体法去除质粒24
1.5 传代培养24
1.6 包埋块法验证24-25
1.7 16s rDNA 扩增25
1.8 形态观察25-26
1.9 链霉菌菌种保存26
1.10 生物活性测定26
1.11 粗提抗生素的制备26
1.12 粗提抗生素的活性测定26-27
1.13 薄层层析分析27
2 结果与分析27-32
2.1 冻融质粒消除法27
2.2 SDS/高温循环质粒消除法27-28
2.3 原生质体质粒消除法28
2.4 传代培养28-29
2.5 16s rDNA 序列分析29
2.6 包埋块验证29-30
2.7 形态特征30-31
2.8 生物活性测定31
2.9 粗提抗生素的生物活性测定31-32
2.10 薄层层析分析32
3 讨论32-34
4 结论34-35
第三章 线性质粒DNA 及大片段基因组DNA 提取方法的研究35-42
1 材料和方法35-39
1.1 材料35
1.2 菌丝体的培养及检测35
1.3 活性成分的检测35-36
1.4 基因组DNA 提取方法的摸索36-38
1.5 线性质粒提取方法的探索38
1.6 脉冲场凝胶电泳38-39
1.7 紫外检测浓度和纯度39
1.8 琼脂糖凝胶电泳39
2 结果与分析39-41
2.1 菌株质量检测39
2.2 基因组DNA 的检测39-40
2.3 基因组DNA 的质量分析40
2.4 线性质粒DNA 的检测40-41
4 结论41-42
第四章 内源线性质粒的分子生物学研究42-58
1 材料与方法42-44
1.1 材料42
1.2 线性质粒的分离42
1.3 端粒的克隆42-43
1.4 线性质粒DNA 文库的构建43-44
1.5 线性质粒的异源转化44
2 结果与分析44-54
2.1 检测分离的线性质粒44
2.2 线性质粒的部分酶切44-45
2.3 检测文库质量45
2.4 序列分析45-54
2.5 线性质粒的异源转化54
3 讨论54-57
3.1 非核糖体合成酶（NRPSs）54-55
3.2 聚酮合成酶（PKSs）55
3.3 次级代谢调控基因55-56
3.4 其他抗生素相关基因56-57
3.5 形态分化基因57
4 结论57-58
全文结论58-59
参考文献59-67
作者简历68-69
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