复方乳酸杆菌片和乳酸链球菌的区别。

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乳酸菌的作用|乳​酸​菌
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你可能喜欢日期:、焦亚硫酸钠(钾)、丙酸钠(钙)、对羟基苯甲酸乙酯、脱氢醋酸等。其中较多的是山梨酸和苯甲酸及其盐类;此外,一些天然生物防腐剂如乳酸链球菌素、那他霉素等,也有良好的防腐效果。
防腐剂作为重要的食品添加剂之一,在食品工业中被广泛使用。酱油中一般含有防腐剂苯甲酸钠,面包和豆制品常常添加防腐剂丙酸钙,酱菜、果酱、调味品和饮料中常加入山梨酸钾,葡萄酒等果酒的防腐传统上用亚硫酸盐等等。可见,防腐剂在我们日常消费的食品中广泛存在。
我国1/3儿童食品无...一些天然生物防腐剂如乳酸链球菌素的相关内容日期:孕妇链球菌感染快速检查法 据路透社日报道,加拿大魁北克的医生在最新一期《新英格兰医学杂志》上发表报告说,他们发现的一种检查方法能在45分中内检查出孕妇体内的b族链球菌感染,准确率达97%。而目前采用的标准检查至少需要36小时。b族链球菌感染在孕妇中的发日期:天然美容的9种水果(图) 天然滋养你的娇嫩肌肤 香蕉:香蕉含有丰富的维生素a,它不仅能促进皮肤的角化作用,而且具有出色的保湿效果,适用于干性或老化皮肤。如果跟牡蛎、牛奶、蜂王浆、营养蜜、维生素e油等一起做营养面膜,那效果就更佳。 西瓜:西瓜含有大量水分,西瓜的白日期:乳酸菌饮料能否代替牛奶? 现在,广大家长都已了解为孩子买饮料时选乳酸菌饮料好的道理。乳酸菌饮料是利用乳酸杆菌发酵后制成的饮料。乳酸杆菌是一种对人体有益无害的细菌,对人体有良好的保健作用。经过乳酸杆菌发酵的饮料,其中蛋白质和脂肪容易消化,糖、磷、铁的利用率日期:食品中为什么要加防腐剂? 食品中为什么要加防腐剂? 如何才能长期保存食品,防止食品的腐败变质?人们在长期实践中创造了各种各样的食品保存方法,如日晒、风干、熏制、盐渍、瓶装以及冷藏等方法。后来发现了具有防腐效果的化学物质,并把它们作为防腐剂而广泛加以运用,这日期:天然食用色素有哪些?有何特征? 天然食用色素是指直接来自动植物组织的色素,除藤黄有剧毒不使用外,其余对人体健康一般无害。我国允许使用并已制定有国家标准的天然食用色素有:姜黄素、虫胶色...日期:也说食品和饮料中的防腐剂 今天,人们的生活水平提高了,不仅要求吃饱吃好,更要吃出健康。消费者在超市或商场里挑选食品及饮料时,往往会查看食品的保质期,而且不少消费者也知道,相当一部分食品的保质期是靠防腐剂来保证的。难免,很多消费者在...日期:产前服乳酸菌婴儿不易过敏 患过敏的儿童越来越多,已经成了父母和医生心中的一大难题。 台湾高雄长庚医院妇产科与过敏免疫风湿科联合进行了为期一年的研究,结果表明,如果产妇在产前4个月服用乳酸菌,产后再服用6个月,可以有效减少孩子患过敏的几率。 医院5年多来一直对儿
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 - - - - - - - -菌株的培养和保存(菌株,植物乳酸杆菌,链球菌,乳酸)
02:06:25&&&来源:&&&评论:&&
[菌株的培养和保存(菌株,植物乳酸杆菌,链球菌,乳酸)] 有谁知道植物乳酸杆菌和乳酸链球菌的培养方法和保存,请各位大虾帮帮忙吧! 关键词:[菌株 植物乳酸杆菌 乳酸 链球菌]…
有谁知道植物乳酸杆菌和乳酸链球菌的培养方法和保存,请各位大虾帮帮忙吧!
回复你说的乳酸链球菌现在《伯杰细菌系统鉴定手册》(第九版)中已经将其改为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)了!植物乳杆菌用MRS培养基培养即可,乳酸乳球菌用M17培养基即可。见凌代文的《乳酸细菌分类鉴定和实验方法》里面有两种培养基的配方!回复保存:1.斜面保存(一个月左右大多数没问题,个别菌半个月)2.离心收获菌体,并用含30%甘油的液体培养基重悬,于-80℃保存。(半年没问题)3.真空冷冻干燥制成冻干菌粉,对于乳酸菌来讲,通常用脱脂乳(10-12% w/v)即可,为了保证更多的活菌数,也可再加一些海藻糖(已证明效果非常好)!(如果真空度可以保证,可以保藏长达5年没问题)回复太谢谢了,gldgld!!!!!不过我还有几个问题向您请教:在菌种保存中我们实验室没有-80℃的条件,我们师姐用15%甘油保存在-20℃冰箱中(保存其他菌时用此法),还有可以液氮保存吗?您做过植物乳酸杆菌、保加利亚乳酸杆菌、弯曲乳酸杆菌和乳酸链球菌的培养吗?可否指教一二??再次表示感谢!!!!!回复当然可以用液氮进行保存了!我一直在做乳酸菌方面的研究!也是略知一二,不知你想知道哪方面的内容?我们可以互相交流!没有-80℃,放在-20℃我想应该也可以(虽然我没有这么做过),只是保存时间长短的问题!回复gldgld您好!我想知道植物乳酸杆菌,保加利亚乳酸杆菌具体应如何培养?我们从菌种保藏中心买回来的菌株是冻干粉吧?然后我们应如何进行培养呢?在这方面我是个外行,还请多多指教!!!!回复你买的冻干菌粉应该是那种一端是个球型的安瓿管吧?首先,将这个冻干管用75%的酒精擦拭进行消毒,然后将带“柄”的那端(即球的反端)在无菌条件下,用酒精灯火焰烧30秒-1分钟,然后将蒸馏水(最好是无菌的)滴到灼烧的部位,此时此处的玻璃会炸裂,然后用镊子将其掰开,再用无菌处理的接种环挑取里面的菌粉并接种到事先准备好的无菌MRS液体培养基中(如果你怕这样挑取的菌少,可以将无菌接种环先蘸一下无菌MRS液体培养基,然后再挑取菌粉,这样就足够多了,一般不用这样就可以),然后放入培养箱中培养即可。将炸裂的安瓿管再用酒精喷灯将其封好,放入-20℃保存即可(如果没有酒精喷灯,可以用用胶布将其封好,但这样放置时间不宜过长)。一般买来的菌种,都会告知你具体的培养基,及培养温度,按说明做就可以了,乳酸菌个别菌株的培养条件可能不一样。回复gldgld太感谢你对我的帮助了,我还想向你请教一个问题:这些乳酸菌应该都是厌氧培养,我们实验室只有一个小的厌氧罐,你使用过厌氧罐吗?具体应如何操作?谢谢了!!!!回复1 菌种的分离1.1 LB培养基的配制① 液体培养基:胰化蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g,定容至1L。② 固体培养基:在液体培养基中加入琼脂粉15 g。③ 半固体培养基:在液体培养基中加入琼脂粉7.5 g。上述培养基用5 mol/L的NaOH(约0.2 mL)调pH值至7.0。灭菌时采用1.05×105 Pa高压下蒸汽灭菌20 min。使用前在培养基中加入氨苄青霉素20 μg/mL(先配置母液50 mg/mL于-20 ℃保存),加入时温度要降到40 ℃以下,加入氨苄的培养基避免紫外照射。1.2 划线分离单菌落① 菌种的培养将买来的菌种挖出含菌的一块培养基在液体培养基(15 mL的试管中分装5mL)中,37 ℃恒温200 rpm振荡培养过夜。② 划线分离用接种环沾取培养液以“Z”形轻轻划于固体培养基上,具体操作过程见图1。先划至培养皿的1/2处,闭合皿盖,将接种环在火焰上灼烧;冷却后,将培养皿向左转动90 °,通过前面的划线区域划至1/4处,闭合皿盖,灼烧接种环;冷却后,再将培养皿向左转动90 °,通过前面的划线区域划完剩下的1/4。然后在37 ℃恒温培养24 h。以长出直径为1~3 mm的单菌落为成功,通常会出现在2、3号区域。 图1 划线分离图2 菌种的鉴定(PCR法)每个培养皿挑取3个单菌落分别置于3个液体培养基中(15 mL的试管中分装5mL),37 ℃恒温200 rpm振荡培养过夜。每个培养管取700 μL培养液加200 μL甘油于-20 ℃保存(用于穿刺保藏),另外4 mL用于PCR鉴定。2.1 PCR扩增① 在200 μL Eppendorf管内配制50 μL反应体系(体积/μL):ddH2O10×buffer10 mmol/L dNTP25 mmol/L MgCl210 μmmol/L引物110 μmmol/L引物2模板DNATaq酶37.05.01.03.01.01.01.01.0(1U)② 按下述程序进行扩增序号步骤温度/℃时间/ s1预变性941202变性94203退火50304延伸72455重复2~4步骤30次6延伸721202.2 琼脂糖凝胶电泳检测DNA① 制备5%的PAGE胶ddH2O/mL5×TBE/mL30% PAGE/mL10% AP/μLTEMED/μL7.01.01.663.05.0② 电泳电压100V,时间45min,点样:8 μL样品+2μL 6×loading buffer③ 洗胶蒸馏水洗 10%乙醇洗 1% HNO3洗 蒸馏水洗 0.2% AgNO3于脱色摇床上脱色30 min 双蒸水10 s/次洗2次 3% Na2CO3+0.15%甲醛于脱色摇床上显色5 min 蒸馏水洗 3%乙酸10min停止显色3半固体穿刺保藏用接种针沾取适量经鉴定合格的菌种培养液,将针垂直穿过半固体培养基直至接近管底,但不要穿透,然后沿原穿刺线将针退出。盖上盖子但不拧紧,在试管和盖子上均做上标记,于37 ℃恒温培养箱中培养过夜。取出后拧紧盖子并加封Parafilm膜,于4 ℃保存。回复我还想向你请教一个问题:这些乳酸菌应该都是厌氧培养,我们实验室只有一个小的厌氧罐,你使用过厌氧罐吗?具体应如何操作?谢谢了!!!!这些乳酸菌都是兼性厌氧的细菌(不像双歧杆菌是需要严格厌氧的),在普通的培养箱内就可以培养的,生长状况都还挺不错的,只是在厌氧条件下会长的更好。你想用这些乳酸菌做什么研究?如果你的目的是研究其在肠道内的益生功能,那用厌氧来培养是必要的,因为肠道本身就是一个厌氧的环境。如果是其他可以不用厌氧。我原来用的都是厌氧箱(进口/国产均用过),我们的国产厌氧箱配了几个厌氧罐,厌氧箱上直接有厌氧罐的接口,首先把要培养的东西放进去,拧紧盖,先进行抽真空,再充氮气,此操作再重复一次,然后再抽真空,并充混合气体(N2:H2:CO2=8:1:1)一次,放到普通培养箱培养就ok了。这个过程是有一个压力表来指示厌氧罐内真空度,以便确定何时抽/充气。如果你的厌氧罐上有压力表,向上面的操作流程就可以了。如果没有表可以配一个。如果不能配,那就只能评感觉了,或者把厌氧罐某个位置钻个洞,连一个气囊,通过这个来指示,应该也可以(这个纯属个人观点)。如果实验室条件允许的话,可以买个国产的厌氧箱,价钱不是很贵,2万RMB就可以解决。回复gldgld谢谢你了!我们是一个小的厌氧罐,里面放着(产气片专用的塑料袋)盖子反面放着钯催化剂,在普通的恒温培养箱培养出的菌多吗?刚买回来的菌种我们应如何进行处理(保种,培养等)回复在普通培养箱中培养,我们做的时候都挺多的,至少都能达到1×108CFU/mL。刚买回来的菌种,要先活化(连续传代2~3次即可),然后可以象上面所说的保存方法保种了。(为了保险起见,需要对其进行镜检看其是否纯,但一般购买的都不会有问题)回复gldgld您好!十分感谢您对我的帮助!!!!!!!植物乳酸杆菌,乳酸乳球菌,保加利亚乳酸杆菌都可以用普通的培养箱培养吗?你做过乳酸菌的活菌计数,用什么方法?准确吗?回复这三种菌我都做过,都是用普通培养箱培养的,没有用厌氧培养,长的也都特别好!而且特别方便!做过乳酸菌的活菌计数,用的平板菌落计数法,其中的涂布法和倾注法我都用过,严格上来讲倾注会更准确一些。活菌计数只能用平板菌落计数法,这个方法是非常准确的。国际上都承认的。倾注法如下:(涂布就是先做好琼脂培养基平板,然后取样品用涂布棒涂布,如果涂不均匀会影响结果)用1mL无菌吸管吸取样品(即乳酸菌培养液)1.0mL,注入含9.0mL无菌磷酸盐缓冲液(PBS)的试管内。振摇均匀,即成1:10样品稀释液。另取1.0mL无菌吸管,按上法制备10倍递增样品稀释液。每递增一次,换一只1.0mL无菌吸管。用灭菌吸管吸取待检样液1.0mL, 加入无菌平皿内。每个样品接种三个连续稀释度(事先应该估测好选取那几个稀释梯度,一般37℃培养24h的活菌数都能达到108CFU/mL),每个稀释度接种两个平皿。于每个加样平皿内倾注15mL ~20mL的45oC ~ 50oC MRS琼脂培养基, 迅速轻轻转动平皿,使混合均匀。待琼脂凝固后,放入培养箱内培养20~24h即可。 同时将MRS琼脂培养基倾入加有1mL上述无菌PBS缓冲液的无菌平皿内作空白对照。培养好后选择菌落数在30~300之间的平板进行菌落计数,然后再根据其稀释梯度进行计算活菌数。回复我想从酸奶中分离乳酸菌,可以用LB培养基吗?回复gldgld,我想请教你个问题,你做过从酸奶中提取保加利亚乳酸杆菌的实验吗?怎么分离与鉴定?请回复,谢谢了!回复你做过从酸奶中提取保加利亚乳酸杆菌的实验吗?怎么分离与鉴定?请回复,谢谢了!我做过,如果是市售的酸奶中分离保加利亚乳杆菌,可以取100微升左右的酸奶直接在MRS上涂布就可以了,保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的菌落有明显的区别,能够直接分辨出,一般情况下可以不鉴定的,因为普通酸奶就是用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌发酵的,一个杆菌一个球菌,分离出的杆菌就一定是保加利亚乳杆菌,如果不放心,可以先进行革兰氏染色和过氧化氢酶试验,G+和过氧化氢酶阴性的可确定为保加利亚乳杆菌。如果保守来讲,可以用API法鉴定或16srRNA鉴定,如果没有条件可以用传统的生理生化试验一个个做。回复我想从酸奶中分离乳酸菌,可以用LB培养基吗?最好不用,它是培养大肠杆菌(Escherichia coli)常用的培养基,乳酸菌对营养要求还是比较高的。用MRS就可以,为什么非得用其他的培养基?回复我查得保加利亚乳酸杆菌不是用MRS配养基培养的,所以就用我们实验室常用的培养基试试.还有一个问题我查微保种中心卖的,他给的培养保加利亚乳杆菌不是用MRS培养基?能不能把具体鉴别步骤说一下,谢谢 了!!!回复gldgld还有一个问题,我查的MRS培养基的配方有些出入,能不能把你用的配方说一下,谢谢了!回复gldgld我在LB培养基上从酸奶中分离保加利亚乳酸杆菌和嗜热链球菌(酸奶中共有这两种菌,)41h,培养基上零星的长者黄色和白色的菌,我用镜检看看的不是很明显,好像不像杆菌?回复我没有做过这种,不过涨见识了回复我没有做过这种菌种,不过涨见识了回复gldgld我在LB培养基上从酸奶中分离保加利亚乳酸杆菌和嗜热链球菌(酸奶中共有这两种菌,)41h,培养基上零星的长者黄色和白色的菌,我用镜检看看的不是很明显,好像不像杆菌?最好有相应的图片,否则难以判定!回复gldgld我打算买德氏乳杆菌保加利亚亚种和乳酸乳球菌乳酸亚种,你知道这两种菌如何培养吗,培养多长时间?恒温培养箱也可培养?回复上面说的已经很清楚了,按照买来的说明即可!恒温培养箱培养没有问题!回复gldgld有个问题想请教你:你培养过植物乳酸杆菌吗?用的MRS培养基吧?为什么我查的MRS培养基都不一样呢?你用的配方是什么?可否指教一二!谢谢了!!!回复有这事?我用的MRS是按照 凌代文《乳酸细菌分类鉴定及实验方法》书上介绍的配制的!回复谢谢了!我想从酸奶中分离保加利亚乳酸杆菌用MRS 培养基可以吗?你做过吗?可否指点一二!!!非常感谢!!!回复还有一个问题,柠檬酸二铵,是柠檬酸氢二铵还是柠檬酸二氢铵,好卖吗?我们实验室有柠檬酸氢二铵,请回复,急用!!回复你说的是MRS里面添加的盐吧?用的是柠檬酸氢二铵!回复谢谢了!!回复不客气,祝你成功!回复gldgld请教你一个问题:我按照凌代文书上的mrs培养基配方配的在平板上进行涂菌,只有一种白色的菌落,然而我又在mrs培养基上加入了CaCO3,然而长了白色和黄色两种菌落。这是为什么?回复你涂的菌的来源是什么?
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[菌株的培养和保存(菌株,植物乳酸杆菌,链球菌,乳酸)]延伸阅读:
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频道本月排行 & 乳酸肽(Nisin),又称乳酸链球菌素,是从乳酸链球菌(S.&lactis)发酵产物中提取的一类多肽化合物,食入胃肠道易被蛋白酶所分解,因而是一种安全的天然食品剂。
&&& FAO(世界粮农)和WHO(世界卫生组织)已于1969年给予认可,是目前唯一允许作为防腐剂在食品中使用的细菌素。&  Nisin是一种仅有34个残基的短肽,分子量约为3500Da,正常情况下,以二聚体状态存在,在分子组成中Nisin含有羊硫氨酸(lanthlonine)β-甲基羊硫氨酸(β-methy&llanthionine)、脱氢丙氨酸(dehy&droalanine)、β-甲基脱氢丙氨酸(β-metly&ldehydroa&lanine)四种不常见的氨基酸残基。& &  Nisin的抑菌机制是作用于细菌细胞的细胞膜,可以抑制细菌细胞壁中肽聚糖的生物合成,使细胞膜和磷脂化合物的合成受阻,从而导致细胞内物质的外泄,甚至引起细胞裂解。也有的学者认为Nisin&是一个疏水带正电荷的小肽,能与细胞膜结合形成结构,使小分子和离子通过管道流失,造成细胞膜渗漏。&  Nisin的作用范围相对较窄,仅对大多数革兰氏阳性菌(G+)具有抑用,如金黄色葡萄球菌,链球菌、乳酸杆菌、微球菌、单核细胞增生利斯特菌、丁酸梭菌等,且对芽孢杆菌、梭状芽孢杆菌孢子的萌发抑制作用比对营养细胞的作用更大。但Nisin对真菌和革兰氏阴性菌(G-)没有作用,因而只适用于G+&引起的食品腐败的防腐。最近报道,Nisin&与螯合剂EDTA二钠连接可以抑制一些&G-,如抑制沙门氏菌(Salmonella&)、志贺氏菌(Shigella)和大肠杆菌(E.&cloi)等细菌生长。&  Nisin在中性或碱性条件下溶解度较小,因此添加Nisin防腐食品必须是酸性,在加工和贮存中室温、酸性下是稳定的。&  目前Nisin已成功地应用于高酸性食品(pH&4.,5)的防腐;对于非酸性罐头食品,添加Nisin可减轻罐头的温度和时间,更好地保持产品的营养和风味;用于鱼、肉类,在不影响肉的色泽和防腐效果情况下,可明显降低硝酸盐的使用量,达到有效防止肉毒梭状芽孢杆菌毒素形成目的。&  在酒精中,Nisin对G-酵母和霉菌几乎没有作用,因此在生产啤酒、果酒和烈性乙醇饮料时,加入100&u/ml的Nisin对乳杆菌、片球菌等酸败革兰氏阳性菌细菌均有抑制作用。&  2000年10月,国家“九五”攻关项目――乳链球菌肽(Nisin)的工业化生产通过鉴定,其产品也终于从走向国内外市场。&&&& 另外,也发现其它乳酸菌可产生多种乳酸菌细菌素,具有抑菌特性,但目前仍处于探索阶段。表9-9列出了Nisin在一些国家的应用情况。&&
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