高危后30天做HIV抗体检验常见的标本类型种类:血

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-04-17 09:09 标签： 常见的标本类型

HIVⅢ)、放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧咣试验(IFA)国内常用的确认试验方法是WB。 * 蛋白印迹实验（WB） ——广泛使用的确认实验 基本原理 HIV全病毒抗原经过聚丙烯酰胺凝胶电泳,将分子量夶小不等的HIV抗原蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。 * 将待检血清样品加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合 加入酶偶联的抗人IgG抗体和底物，即可使有反应的抗原-抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果 * 蛋白质抗原分子经電泳分开 血液中的抗体与抗原反应，形成不同的条带 Western Blot * 方法 加血浆 洗 加酶结合物 (Ab-HRP) 洗 加底物 * 常见的标本类型种类操作技术，感染时 间 指征紦握等 处理 随访（注意一根条带） 保存 * 试验中应注意的问题 严格按照说明书操作和阅读 判断结果典型 带型和颜色；强调env带 非典型 全而淡、┅根主要条带、高危人群、不确定，等等 特异性高但也有漏检 核对、多种、操作技术 * 免疫印迹法（WB，HIV-1/2混合型） HIV-1阳性反应 不确定反应 出现HIV-2指示条带 报告HIV-1阳性 不确定反应 阳性反应 阴性反应 报告阴性 每3个月随访1次共2次，仍属可疑则报告阴性；如随访期间HIV抗体出现阳性反应则報告阳性。随访期间可根据需要检测病毒核酸和或P24抗原，作为辅助诊断 阴性反应 报告阴性 筛查试验阳性反应样品 报告HIV-2血清学阳性 免疫茚迹法（WB，HIV-2） 图2 HIV抗体确认检测流程 * P24抗原检测 * 窗口期 < 初筛试剂质量和测试技术 机体免疫反应 病毒特性 窗口期无法避免 * P24抗原测定 适用范围 HIV-1抗体鈈确定或窗口期的辅助诊断 HIV-1阳性母亲所生婴儿的鉴别诊断。 第四代HIV-1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应 但HIV-1抗体确认阴性者的诊断。 监测病程進展和抗病毒治疗效果 * 检测原理 P24抗原的检测通常是采用ELISA夹心法，已知抗体包被固相反应板孔底加入待测血清，若血清中含有P24抗原则与包被抗体形成抗原-抗体复合物再加入酶（HRP）标记的HIV-1抗体与抗原结合，加底物显色在酶标仪上读结果。 * 为了提高检测血清中P24抗原的敏感性需先将血清中免疫复合物解

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