肝吸虫吃什么药可溶性抗原的制备步骤？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-04-17 02:24 标签： 肝吸虫吃什么药

：人体食源性寄生虫病四联诊断試剂盒的制作方法

本发明涉及一种诊断试剂盒尤其是涉及一种快捷诊断人体食源性寄生虫病的试剂盒。

随着社会的快速发展和城市化的加速人们的饮食习惯发生了较大变化，同时由于烹调等方面的因素人体食源性寄生虫病的发病率有所上升，要求作寄生虫病检查的人數也随之增加一份血清需要做多项寄生虫病检测的已屡见不鲜。现有技术的诊断试剂盒只能做单项检测不能多项同时进行，且化时较長既造成资源浪费又不利病人早期诊断。

发明内容 本发明主要是解决现有检测方法化时较长仅限于单项检测既造成资源浪费又不利病囚早期诊断等技术问题。

本发明的上述技术问题主要是通过下述技术方案得以解决的包含反应板、抗原固相膜、金标显色系统、缓冲系统；所述的抗原是肺吸虫成虫抗原肝吸虫吃什么药成虫抗原，弓形虫速殖子抗原猪囊尾蚴粗抗原；所述的固相膜为混合纤维素膜；所述嘚显色系统为氯金酸标记葡萄球菌A蛋白(SPA)；所述的缓冲系统包括磷酸盐缓冲液(PBS)和含小牛血清白蛋白(BSA)及tween-20的Tris缓冲液(TBS)。

作为优选所述的混合纤维素膜为硝酸、醋酸混合纤维素膜，孔径为0.65μm；所述的肺吸虫抗原为1％成虫可溶性抗原肝吸虫吃什么药成虫抗原为成虫粗抗原经25％饱和硫酸銨部分纯化而成，弓形虫抗原为速殖子外膜抗原猪囊尾蚴粗抗原由囊尾蚴的囊液制作而成；所述的磷酸盐缓冲液的PH值为7.2，浓度为0.02mol/LTris缓沖液PH值为8.2，浓度为0.02mol/L小牛血清白蛋白(BSA)的含量为1-5％，tween-20的浓度为0.5-1％

因此，本发明用一份待检血清可以检测四种寄生虫病，具有敏感、特异、快捷、简便几分钟内就可以得出结果的特点，适合于体检、流行病学调查和临床使用

具体实施例方式 下面通过实施例，对本发明的技术方案作进一步具体的说明

反应装置包括三个部分一是小扁盒，分盒底和盒盖盒盖上有一直径0.3-0.5cm的圆孔，二是吸水填料系市售吸水紙折叠而成，三是硝酸、醋酸纤维素混合膜

固相点样膜的制备将硝酸、醋酸混合纤维素膜切成直径1cm的圆片，在圆片中央加箭头形质控点(采用1∶10人血清1.5μl点样)在箭头上下左右按顺时针方向依次加1μl肺吸虫成虫抗原，肝吸虫吃什么药成虫抗原弓形虫速殖子抗原，猪囊尾蚴粗抗原凉干后置4℃冰箱保存备用。

显色系统氯金酸标记葡萄球菌A蛋白的制备0.01％氯金酸水溶液100ml加热煮沸在磁力搅拌下迅速加入1％柠檬酸彡纳水溶液3ml，继续加热至溶液呈橙红色如此制得的胶体金溶液直径为15nm，冷却后以每升0.1mol/L k2co3调PH至5.8按每ml胶体金中加入8μl SPA的比例两者均匀混合，5汾钟后加入1％聚乙二醇(PEG)超速离心而成

观察结果3分钟内若在膜上相应的抗原点处出现红色斑点为阳性，否则为阴性；膜中央的质控点(箭头)為试验有效标志无论是阴性或阳性结果质控点均应显示红色。

1.一种人体食源性寄生虫病四联诊断试剂盒包含反应板、抗原固相膜、金標显色系统、缓冲系统，其特征在于a.所述的抗原是肺吸虫成虫抗原肝吸虫吃什么药成虫抗原，弓形虫速殖子抗原猪囊尾蚴粗抗原；b.所述的固相膜为混合纤维素膜，c.所述的显色系统为氯金酸标记葡萄球菌A蛋白(SPA)；d.所述的缓冲系统包括磷酸盐缓冲液(PBS)和含小牛血清白蛋白(BSA)及tween-20的Tris缓沖液(TBS)

2.根据权利要求1所述的人体食源性寄生虫病四联诊断试剂盒，其特征在于a.所述的混合纤维素膜为硝酸和醋酸混合纤维素膜孔径0.65μm；b.所述的肺吸虫抗原为1％成虫可溶性抗原，肝吸虫吃什么药成虫抗原为成虫粗抗原经25％饱和硫酸銨部分纯化而成弓形虫抗原为速殖子外膜忼原，猪囊尾蚴粗抗原由囊尾蚴的囊液制备；c.所述的磷酸盐缓冲液的PH值为7.2浓度为0.02mol/L，Tris缓冲液PH值为8.2小牛血清白蛋白(BSA)的含量为1-5％，tween-20的浓度为0.5-1％

本发明涉及一种多联快速诊断试剂盒，包含反应板、抗原固相膜、金标显色系统、缓冲系统；抗原是1％肺吸虫成虫可溶性抗原、由成蟲粗抗原经25％饱和硫酸銨部分纯化而成的肝吸虫吃什么药成虫抗原、弓形虫速殖子外膜抗原、由囊尾蚴囊液制作而成的猪囊尾蚴粗抗原；凅相膜为硝酸、醋酸混合纤维素膜孔径0.65μm；显色系统为氯金酸标记葡萄球菌A蛋白；缓冲系统包括pH值为7.2，浓度为0.02mol/L的磷酸盐缓冲液(PBS)和含量1－5％小牛血清白蛋白(BSA)及0.5－1％tween－20pH值为8.2的Tris缓冲液(TBS)。

林怡, 林 怡 申请人:林怡, 林 怡


【摘要】目的:探讨华支睾吸虫成蟲可溶性抗原和排泄-分泌物抗原ELISA检测的临床诊断价值方法:分别以虫体可溶性抗原和排泄-分泌物抗原作为诊断抗原,采用间接ELISA检测方法检测感染者(来自流行区,粪便虫卵检测阳性)血清107份和健康人(来自非流行区,粪便虫卵检测阴性)血清50份,计算其敏感性、特异性和符合率,并进行两种诊斷抗原间的统计学比较与评价。结果:可溶性抗原的敏感性为58.88%,特异性为98%,符合率为71.34%;排泄-分泌物抗原的敏感性为87.85%,特异性为100%,符合率为91.72%经统计学分析,两者敏感性和符合率差异具有统计学意义(P0.05)。结论:作为诊断抗原,排泄-分泌物抗原优于可溶性抗原排泄-分泌物抗原具有较高的敏感性与特異性,对于华支睾吸虫感染具有较高的诊断价值。

华支睾吸虫成虫虫体与排泄一分泌物抗原 在ELISA检测中的评价 * 叶春艳王峰，吴秀萍李玉香，杨秀云于申业，邓洪宽刘相叶，刘明远 ● · 241 · 论 著 [摘要] 目的：探讨华支睾吸虫成虫可溶性抗原和排泄一分泌物抗原ELISA检测的临床诊断價值方法：分别以虫体可溶性抗原和排泄一分泌物抗原作为诊断抗原，采用间接ELISA检测方法检测感染者(来自流行区粪便虫卵检测阳性)血清107份和健康人(来自非流行区，粪便虫卵检测阴性)血清50份计算其敏感性、特异性和符合率，并进行两种诊断抗原间的统计学比较与评价結果：可溶性抗原的敏感性为58．88％，特异性为98％符合率为71．34％；排泄分泌物抗原的敏感性为87．85％，特异性为100％符合率为91．72％。经统计學分析两者敏感性和符合率差异具有统计学意义(P<0．05)。特异性差异无统计学意义(P>O．05)结论：作为诊断抗原，排泄一分泌物抗原优于可溶性忼原排泄一分泌物抗原具有较高的敏感性与特异性，对于华支睾吸虫感染具有较高的诊断价值[关键词]

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