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肾移植术后患者体内病理生理因素对环孢素血药浓度的影响
摘 要:目的:探讨肾移植术后患者环孢素(CsA)血药浓度与体内病理生理因素的相关性。方法:采用回顾性调查方法在空军总医院收集58例肾移植术后使用CsA的患者病历资料,记录患者性别、年龄、体重、CsA剂量、血药浓度及相应生化检验值。应用SAS软件(6.04版)对数据进行多元线性回归分析。结果:CsA单位剂量血药浓度与总胆红素(TBil)、用药时间(Time)和年龄(Age)之间存在明显正相关性(P〈0.05)。结论:患者体内总胆红素、年龄与用药时间对CsA血药浓度有显著影响。
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来源:未知
作者:未知
发布时间: 17:27:36
环孢素A诱导的大鼠慢性肾毒性变化及与血药浓度的关系
刘奕明1,林爱华2,邓时贵1,杨海峰3
  环孢素A(CsA)作为一种强效免疫抑制剂主要用于器官移植的抗排异治疗,但长期应用可能导致慢性肾毒性损害,严重影响移植受者的长期存活。随着CsA使用时间的延长和应用范围的扩展,对其肾毒性的认识也逐渐增加。然而,对于CsA引起的慢性肾毒性变化与其血药浓度的关系尚未完全阐明。本文在建立大鼠CsA慢性肾毒性动物模型的基础上,观察了CsA诱导的慢性肾毒性变化,并对其与血药浓度的关系进行分析,为更进一步认识CsA的肾毒性提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器 环孢素A,购自杭州中美华东制药有限公司;羧甲基纤维素钠(CMC-Na),上海益壮工贸公司产品;环孢素A血浓检测试剂盒,美国雅培公司。美国Abbott TDX分析仪(荧光偏振免疫分析仪),Modular PPI生化分析仪,AllegraTMX-12R离心机,贝克曼-库尔特公司。
1.2 动物 SD大鼠,雄性,SPF级,体重(219±18)g,广州中医药大学实验动物中心提供。低盐饮食(钠含量0.031%)和普通饮食购自广东省医学实验动物中心。
1.3 实验方法
<font face="楷体_GB.1 CsA慢性肾毒性模型的建立及标本采集 大鼠随机分为4组:正常对照组,低盐对照组,30mg/ks剂量组(CsA-L组),60mg/kg剂量组(CsA-H组),每组6只。采用低盐饮食或普通饮食喂养1周后开始实验。给对照组灌胃等量CMC-Na溶液;CsA-L和CsA-H组,分别按剂量灌胃给予CsA的CMC-Na溶液,每天1次,连续4周。每周称取体重,调整CsA用量。除正常对照组进行普通饮食外,其他各组均采用低盐饮食。
  于给药前、给药后2周和4周,收集16h尿液,记录尿量,并检测尿蛋白;眼眶采血,离心分取血浆,用于检测血肌酐(Crea)和尿素氮(BUN);实验结束时(药后4周),收集全血,用于测定CsA血药浓度,并处死大鼠,取肾脏纵切后固定于10%中性甲醛溶液,用于病理检查。
<font face="楷体_GB.2 指标检测方法 尿蛋白采用干化学法测定,血肌酐Crea采用碱性苦味酸法测定,尿素氮BUN采用尿素酶法测定;CsA血药浓度测定采用荧光偏振免疫分析(FPIA)法;肾组织经10%甲醛固定后作石蜡包埋,常规石蜡切片,作HE和PAS染色。
1.4 统计学方法 采用SPSS 11.0统计软件。多组间比较采用方差分析,两两比较用LSD法。
2 结  果
2.1 体重变化 正常对照组和低盐对照组大鼠在观察期间体重进行性增加,CsA-L组体重增长缓慢,CsA-H组则体重未见增加且略有下降。CsA-L和CsA-H组大鼠在药后2周和4周体重显著低于对照组,且差异均有统计学意义。见表1。
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2.2 尿液学变化 两对照组大鼠各指标无变化;CsA-L组尿量无变化,尿蛋白略降低,但与对照组相比差异无统计学意义;CsA-H组尿量在药后第2周明显增多,与对照组和CsA-L组相比均差异有统计学意义,药后第4周尿量减少;尿蛋白均显著低于对照组。见表2、3。
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2.3 肾功能变化 给大鼠灌胃CsA后,CsA-L组Crea升高,但与对照组对比差异无显著性,BUN升高,在药后第4周明显高于对照组;CsA-H组Crea和BUN明显升高,在药后第4周与对照组和CsA-L组相比差异有统计学意义。见表4、5。
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2.4 肾组织病理改变 正常对照组和低盐对照组大鼠肾脏的形态学未发生明显改变。CsA-L组表现为肾小管上皮细胞浊肿,空泡变性明显,小动脉改变不明显;CsA-H组则可见明显广泛性分布的肾小管上皮细胞空泡变性,坏死和脱落,肾小球系膜细胞增生明显,肾内小动脉管壁增厚,玻璃样变明显增多,肾间质发生纤维化,表现为CsA慢性肾毒性的病变特征,见图1。
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2.5 血药浓度及与肾毒性的关系 给大鼠灌胃CsA 4周后,CsA-L和CsA-H组的血药浓度分别为(3-69±0-53)μg/mL和(8.15±2.82)μg/mL,血药浓度随给药剂量的增加呈比例增加。随血药浓度升高,尿量和尿蛋白分别略有增多和减少,但两组差异无统计学意义。对血药浓度和肾功能指标Crea、BUN进行相关性分析,发现血药浓度和Crea、BUN间呈显著正相关性,r值分别为0.871和0.847(P<0.05)。
3 讨  论
  关于CsA慢性肾毒性动物模型的建立,1990年ROSEN等给大鼠每天皮下注射CsA,同时给予钠缺乏饮食,结果3到4周即复制出CsA慢性肾毒性的特征性变化(间质纤维化),说明钠耗竭是建立模型的重要条件,机制可能在于钠耗竭激活了肾素-血管紧张素系统。国内也有学者报道了该模型的建立方法,但均采用长期皮下注射或灌胃CsA油溶液,操作上存在一定的局限性。在预实验时,我们曾采用灌胃CsA油溶液的方法,但发现4周后包括对照组在内的所有大鼠均出现肝脏异常,且与周围组织粘连严重;另外发现病变在低钠饮食大鼠较正常饮食大鼠明显严重,与文献报道一致,因此本实验采用分散均匀的CsA的CMC-Na混悬液给大鼠灌胃,同时给予低盐饮食,结果4周后成功复制了CsA的肾毒性特征,且高剂量组病变特征比低剂量组更为明显,而两个对照组大鼠的肾功能和形态学均无明显变化,说明CMC-Na和低盐饮食本身对肾功能无影响。
  大鼠在低盐饮食下,给予CsA 2周时尿量明显增多,CsA-H组与对照组和CsA-L组相比差异有显著性,提示2周时CsA已导致肾小管功能出现损伤,使尿浓缩能力下降;在第4周时尿量却呈减少趋势,分析可能由于此时大鼠肾脏出现明显的空泡变性,肾间质发生纤维化,肾功能明显损伤,健存肾单位日渐减少导致尿量减少。血中BUN和Crea能够反映肾小球的滤过功能,BUN反应较敏感,而Crea的变化则较迟缓,但它的增高一般提示肾功能已严重受损。本实验中,CsA-L组在药后2周BUN升高,但与对照组对比差异无统计学意义,药后4同时明显高于对照组,Crea有所增加,但与对照组比较差异无统计学意义;而CsA-H组在药后2周BUN即明显高于对照组,在第4周时继续升高,并明显高于对照组和CsA-L组,Crea不断升高,在第4周时明显高于对照组,表明CsA对肾功能造成了严重损害。
  经相关性分析,Crea、BUN和血药浓度呈显著正相关,结合本实验观察到的各指标的变化,我们发现用药剂量越大,用药时间越长,血药浓度越高,CsA诱导的肾毒性越严重。
作者单位:广东省中医院1 1中心实验室,2中药制剂学实验室,3病理科(广州 510120)
来源:《广东医学》2009年1月第30卷第1期
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影响环孢素A血药浓度相关因素分析
冯惠平,李碧峰,陈青青,王绿
  环孢素A(CsA)是一种强效免疫抑制剂,在临床上主要用于器官移植的抗排异反应和移植物抗宿主病,近年来也用于治疗再生障碍性贫血、血小板减少性紫癜、狼疮肾炎等多种难治性自身免疫性疾病。由于CsA的生物利用度和药动学个体差异大、治疗窗窄,血药浓度过高将引起肝肾毒性,过低则发生排异反应,因此监测CsA血药浓度,并调整其浓度在有效范围,具有重要的临床意义。笔者发现,由于药物相互作用因素、制剂因素及患者的生理、病理、食物的变化等多方面的原因,致使患者的CsA血药浓度发生较大波动,这一现象常常迷惑医师及患者,稍不留意便给患者的术后CsA用量调整带来失误。本文即对影响CsA血药浓度因素的文献进行总结分析,以供临床参考。
1 剂型和药品质量
  CsA的生物利用度与其制剂的工艺密切相关,不少患者因换用不同厂家和批号的CsA引起血药浓度的异常变化。新山地明(微乳化环孢素)是CsA的微乳剂,与普通剂型比较,口服吸收良好,可达到更高水平的药物暴露,大大提高了生物利用度,明显降低了个体间和个体内的差异性,具有更高的稳定性和可监测性。有关研究证实,造成稳态时CsA浓度异常波动的因素中剂型和制剂因素占总影响因素的46.09%(n=128)。
2 服药时间与采血时间
  服药时间与采血时间的准确与否直接影响到CsA血药浓度的监测值。CsA的服药方法为q12h,血药浓度监控点为谷浓度(Cmin)及峰浓度(Cmax)。由此,采血时间应在服药前即刻(即服药后12h)及服药后的2.0h。因为Cmax随时间的变异受胃肠功能、制剂质量等的影响较大,目前文献报道的测定值多为Cmin。CsA的Cmin与其曲线下面积(AUC)相关性好,用Cmin估计AUC和调整临床用量,可靠性较大。
3 监测时机
  根据药动学原理,药物进入体内一般经过5个半衰期以后,其血药浓度即可达稳态。CsA的t1/2=10~27h,使用CsA后最长至第6天其血药浓度即可达稳态。因此,对于一般患者,CsA血药浓度监测时间应在调整剂量始起6d后,才能取得准确的CsA血药浓度监测值。
4 采血部位
  CsA静脉给药时,其血药浓度监测样本的采集部位应是输液侧的对侧,以确保样本的血药浓度值能准确反映患者体内的药物浓度值。
5 术后时间
  有人在监测中发现,有许多患者在术后早期应用CsA剂量较大的情况下,其血药浓度与剂量并不相符,而经过一段时间以后在CsA用量基本不变的情况下,其浓度会逐步升高。朱斌对197例肾移植受者术后口服CsA达稳态时CsA血药浓度作回顾性分析,发现本组患者在术后1个月内,其CsA血药浓度仅为(168.4±53.7)ng/mL,而在CsA剂量基本不变的情况下(在术后1.5个月左右),其血药浓度升至(279.8±19.6)ng/mL。国外有人对该现象进行推测:可能是生物节律影响用药后的峰浓度、达峰时间、CsA总清除率等,使CsA浓度值发生改变。
6 性  别
  有人发现在使用相同剂量(5.0~7.0 mg/kg?d)的情况下,男、女CsA全血浓度在术后30~45d有显著性差异(P<0.05),男性患者的csA血药浓度水平要低于女性患者。这可能是CsA受CYP3A4酶活性的影响,在男性患者中CYP3A4酶活性强,药物代谢多,所以CsA浓度低于女性。
7 年  龄
  儿童较成年人清除率高、半衰期短、分布容积大。肾移植患者中,45岁以上者,CsA的清除率低30%,AUC上升50%。其机制尚不十分明确,可能与年龄有关的器官功能的降低以及随着年龄的增长脂蛋白水平的提高有关。因此,老年人应用CsA的剂量可较年轻人低。
8 食  物
  CsA是亲脂性分子,当与某些食物尤其是脂溶性食物同服,会使其生物利用度发生改变。目前已知高脂性食品(如牛奶、巧克力)、苹果汁、桔子汁等均可通过增加CsA在小肠的吸收而增加血中CsA的浓度。近年来报道较多的是一种饮料葡萄柚汁,其可使小肠上皮细胞中CYP3A4含量特异性降低62%,减少了CsA在小肠吸收进入血液前的代谢,因此葡萄柚汁与CsA同服时使血中CsA的浓度增加。有关研究表明,标准早餐对心脏移植、肾脏移植和健康志愿者CsA的AUC无影响。Gupta等报道,健康志愿者服用高脂肪早餐使CsA的生物利用度提高到53%。杨志豪等对食用绿豆食品后CsA的Cmin降低的结果进行了回顾性总结,本组6例肾移植患者食用绿豆食品前CsA浓度为(390±122.21)ng/mL,食用绿豆食品后复查时CsA血药浓度为(278.33±94.23)ng/mL,降低幅度为(26.60±5.85)%,有高度显著性差异(P<0.01)。因此,服用CsA的患者应固定一种饮食方式(服药物前、后4h内饮食固定)。
9 患者的生理病理因素
  CsA主要在小肠吸收,胃肠功能不好,特别是腹泻可影响CsA的吸收,从而使CsA血药浓度下降。CsA主要在肝脏代谢,肝功能异常可导致CsA的代谢及排泄减慢,造成CsA在体内蓄积,从而使CsA血药浓度升高。有关研究证实,肝功能异常患者CsA血药浓度比正常组高1.66倍。大部分轻、中度肝功能异常患者可通过减量及采取护肝措施恢复肝功能,但对胆红素>100μmol/L的患者,一般很难治愈,最后死于肝功能衰竭。
10 排 尿 量
  张春燕等采用回顾性研究方法,以CsA单位剂量血药浓度为因变量,尿量为自变量,对数据进行多元线性回归分析。结果发现,CsA单位剂量血药浓度与尿量呈正相关。可能是因为尿量越多,体液量越少,血液浓缩,导致CSA血药浓度相应升高。
11 药物的相互作用
  CsA主要经肝脏的CYP3A4酶系代谢,因此其它所有经过CYP3A4酶系统代谢的药物,均与之具有潜在的相互作用。诱导CYP3A4酶活性的药物,可以加快CsA的代谢,降低CsA的血药浓度;而抑制CYP3A4酶活性的药物则可以减慢CsA的代谢,提高CSA的血药浓度。其它凡改变CsA体内过程的药物,如改变胃排空的药物,促进胆汁分泌的药物,也可与CsA发生相互作用,增加或降低其临床治疗效应和毒性效应。
11.1 酶促药
  利福平、苯巴比妥、苯妥英钠、卡马西平、扑米酮等强酶促药诱导CYP3A4酶活性,加速CsA的代谢和清除,使其血药浓度显著下降。但丙戊酸钠无此作用。国外曾报道1例心脏移植患者,应用CsA和利福平治疗11d,CsA的血药浓度从478ng/mL下降到31ng/mL,出现严重排异反应。还有2例肾移植患者,应用CsA和利福平治疗,由于利福平使CsA迅速代谢以至于测不出其血药浓度,出现不可逆排异反应,从而导致肾移植失败。CsA与利福平联用时,CsA的剂量应增加,停用利福平时应逐渐减少CsA的剂量,以防止CsA的血药浓度突然升高而发生严重不良反应。奥美拉唑也能通过加速CsA的代谢使cSA的血药浓度降低。
11.2 酶抑药
  酮康唑、氟康唑、伊曲康唑、环丙沙星、依诺沙星、左氧氟沙星、雷尼替丁、西咪替丁、红霉素、乙酰螺旋霉素、交沙霉素、氯霉素、克林霉素、多西环素(强力霉素)、两性霉素B、口服避孕药、克霉唑、尼卡地平、地尔硫卓等能抑制CYP3A酶活性,减少CsA的代谢和清除,使其血药浓度升高,肝肾毒性增强。
11.3 磺胺药
  磺胺二甲嘧啶(静脉注射剂)、磺胺甲基异f唑(静脉注射剂)、甲氧苄啶、复方新诺明,与CsA同时合用,可使CsA的血药浓度明显降低,其机制尚不清楚。
11.4 胃复安
  胃复安能够加速胃排空,缩短CsA在胃内的滞留时间迅速进入小肠。从而使CsA的吸收增加,CsA血药浓度升高。李明春等报道,胃复安可使CsA的血药浓度提高1.65倍。
11.5 更昔洛韦
  为防治因服用CsA所致的免疫功能低下引起的巨细胞病毒(CMV)感染常合用更昔洛韦。闫正华等报道,更昔洛韦使肾移植患者对CsA的吸收加快,消除减慢,从而提高CsA的血药浓度。
11.6 联苯双酯
  吴家清等报道,联苯双酯可明显降低CsA的血药浓度。本组临床试验中,在CsA剂量不变的条件下,30例术后用联苯双酯护肝治疗的肾移植患者,用药1周后CsA血药浓度明显下降,与20例对照组患者相比,差异有显著性。联苯双酯对CYP3A4酶有明显的诱导作用,可以通过加速CYP3A4酶代谢CsA,导致CsA血药浓度下降。
11.7 甲泼尼龙
  有试验报道,在大剂量甲泼尼龙冲击以控制急性排斥反应时,以放射免疫法(RIA)测定的CsA血药浓度显著增加。3例合用甲泼尼龙的肾移植术后患者,CsA血药浓度分别为原来的225、192、516 ng/mL上升到659、586、709ng/mL,当停用甲泼尼龙1~2周后又降至265、328、364ng/mL。3例均出现CsA的毒性反应 ,此结果与国外的文献报道一致。
11.8 强的松与硫唑嘌呤
  18例肾移植患者口服CsA后在2、4、8 h时采集静脉血于抗凝管中,以荧光偏振免疫(FPIA)法CsA多抗试剂盒测定CsA全血浓度。结果发现,合并用强的松后,CsA消除半衰期延长、Cmin增加,而合并用硫唑嘌呤后,消除半衰期略有缩短,CsA血药浓度降低。
11.9 大黄制剂
  纪松岗等报道,3例肾移植患者因术后便秘口服大黄制剂后引起CsA全血Cmin增高。由于大黄中含有的大黄蒽醌类衍生物具有抑制CYP3A4酶的作用,使CsA代谢减少,因此提高了CsA的全血浓度。试验研究表明,大黄还具有明显促进胆汁分泌的作用,胆汁能促进CsA的吸收,也可提高CsA的全血浓度。
11.10 克拉霉素
  邹素兰等报道,10例肾移植患者因术后感染,用克拉霉素0.25g,bid,10d后测其CsA的血药浓度为(689.5±296.2)ng/mL(FPIA法),停用克拉霉素10d后复测CsA的血药浓度为(199.34±104.5)ng/mL,平均降低71.09%(P<0.01)。可见,克拉霉素可提高CsA的血药浓度。
11.11 黄连素
  吴笑春等研究表明,黄连素与CsA同时口服可增加CsA的生物利用度,提高CsA的血药浓度,而黄连素与CsA静脉注射剂合用时生物利度无显著性差异,两药必须同时服用方可发生相互作用,只有两药均在肠道时,CsA的吸收才会增加。黄连素对CsA影响的作用部位在小肠,影响其经肠吸收或在小肠代谢。
12 结  语
  综上所述,CsA血药浓度受到多种因素的影响,而其浓度与疗效及毒性密切相关。因此,在进行CsA血药浓度监测时,应结合患者的实际情况全面考虑,寻找影响血药浓度变化的可能因素。分析CsA血药浓度治疗的个体差异,对于提高器官移植的成功率,促进CsA在自身免疫性疾病治疗中的合理应用,降低其毒性和不良反应,具有重要临床意义,同时寻找能够提高CsA血药浓度、降低CsA剂量和不良反应的药物合用,具有药物经济学的意义。
作者单位:福建医科大学附属漳州市医院药剂科,漳州市 363000
来源:《中国药房》2008年第19卷第2期
FK506与环孢素A同为CNI类免疫抑制剂,具有与环孢素A相同的吸收代谢特点,因此,本文也基本适用于FK506。
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