全自动酶免分析HBSAG转氨酶检测方法画..

全自动酶免分析仪
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3 全自动酶免分析仪(ALISEI)的应用评价
3.1 灵敏度的试验评价系列浓度HbsAg定值血清,其测定值如下
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fully automated ELISA workstation
全自动酶免分析仪
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本文阐述了全自动快速微粒子酶免分析仪常用的校准步骤。
This paper introduces the common calibration procedure of automated microparticle enzyme immunoassay analyzer.
全自动酶免分析仪又称全自动酶免分析系统和全自动酶免工作站,可以全自动完成ELISA试验,包括稀释、样本分配、试剂分配、孵育、洗板、酶标判读、结果打印等全步骤。
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影响FAME全自动酶免分析系统检测因素探讨
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影响FAME全自动酶免分析系统检测因素探讨
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血站检验中全自动酶免分析系统FAME的质量控制
来源:《健康世界》2015年21期文/王伟
[导读]常德市中心血站
合理设置加样仪加样高度及洗液温度,可提高全自动酶免检测结果的质量。
常德市中心血站& 湖南常德& 415000
&&&&&&&& 摘要:目的:分析血站检验中全自动酶免分析系统FAME的质量控制。方法:本站采集献血者抗凝血液标本100份,血液标本进行检测,围绕抗-HCV、TP、抗-HIV、HBsAg四个项目,对全自动酶免分析系统FAME的质量控制进行研究,以促使检验结果的准确性和可靠性。结果:本组血样HBsAg、抗-HIV、TP三个项目的检测结果均为阳性,复测后结果为阴性,提示检测结果为假阳性。加样高度<9.1mm时四项指标的CV值较高;加样高度>9.1mm时抗-HCV检测结果显示有假阴性出现。洗液温度<14℃时,HBsAg、抗-HIV、TP三项检测结果为假阳性。结论:合理设置加样仪加样高度及洗液温度,可提高全自动酶免检测结果的质量。
关键词:全自动酶免分析系统;FAME;质量控制
&&&&&&&& 本血站采集抗凝血液标本100份,对全自动酶免分析系统FAME的质量控制进行了研究,提出合理设置加样仪加样高度及洗液温度,可有效控制检测质量,提高结果的可靠性及准确性。现报道具体内容如下。
&&&&&&&& 1材料与方法
&&&&&&&& 1.1仪器与试剂
DD-5M低速离心机、FAME24/20全自动酶免分析系统及Xantus全自动加样仪、Itswell实验室管理软件、免疫检测试剂盒(TP、抗-HCV、HBsAg、抗-HIV)、广州阳普公司提供的EDTA-K2抗凝真空采血管,各个项目的室内质控血清源于北京康彻斯坦公司,其中抗-HCV浓度为0.5NCU/ml、HBsAg浓度为0.2Iu/ml、抗-HIV浓度0.5NCU/ml、TP浓度均为6mIu/ml。
&&&&&&&& 1.2方法
&&&&&&&& (1)采用EDTA-K2真空采血管采集血液标本。室温条件下对血样进行离心,设置转速3000r/min,时间为5min,血浆呈液态。(2)编辑Xantus全自动加样仪参数,对酶标板孔径及高度进行测量,加样定位以确保加样针准确对应微孔中央。根据试剂说明书进行加样步骤的操作,在软件8.1mm缺省值的基础上分别增加高度至8.1mm、8.6mm、9.1mm、9.6mm和10.1mm。选择室内质控血清4个替代检测样本,手工加样对照,对假阴性、OD值的变异系数等结果进行观察。(3)浓缩洗涤液经10℃蒸馏水稀释至20倍,混匀并溶解后加入FAM E洗液桶,加热水浴分别至14、18、22、26℃。选用100份完全抗凝的血样样本,采用同一批号的试剂在不同洗液温度下对抗-HCV、HBsAg、抗-HIV、TP四个项目进行检测,并对假阳性、OD值的变异系数等结果进行观察。
&&&&&&&& 1.3统计学方法
&&&&&&&& 采用统计软件SPSS16.0进行数据分析,采用t和x2进行检验,P<0.05说明具有统计学意义。
&&&&&&&& 2结果
&&&&&&&& 2.1各项指标的检测结果
&&&&&&&& 本组血样HBsAg、抗-HIV、TP三个项目的检测结果均为阳性,复测后结果为阴性,提示检测结果为假阳性,具体见表1。
&&&&&&&& 2.2不同加样高度中各项指标的检测结果
前三种加样高度对检测结果的影响较大,抗-HCV检测结果显示为假阴性。加样高度>9.1mm时,四项指标对检测结果的影响较小,CV&15%。具体见表2。
&&&&&&&& 3讨论
&&&&&&&& 酶联免疫吸附剂测定是血站血液筛查传染病项目的检测方法,ELISA检测标本量较大,一般采用全自动检测系统进行检测。FAME全自动酶免分析系统消除了手工操作的局限性,人为因素造成的误差被有效避免,试验的特异性及灵敏度得以有效提高。但在检验工作中,各实验室的实际情况有所不同,质量控制直接影响检测结果的准确性。因此,需要排除影响因素,标准化进行实验,才能降低系统检测的误差,提高全自动酶免分析系统FAME的质量。
&&&&&&&& 加样仪加样高度的设置十分关键,受厂家不同因素的影响,所生产试剂的酶标板孔径、精密性等参数存在不同差异。总体上讲,加样编程时需要反复对加样高度进行分析,缺省高度用以参考[2]。当加样高度较低时,受血样表面张力作用的影响,加样针尖上会有挂珠的产生,一定程度上使加样产生误差;对加样高度进行合理增加,微孔底部与加样针尖之间的距离就会缩短,血样与样本稀释液接触,受表面张力的影响,样本会完全加入到微孔中。因此,应合理调整加样高度,以确保检测结果的准确和可靠。
&&&&&&&& 在血样标本中,存在有较多脂血样本,一般来说溶血、脂血样本不会影响检测结果。然而经研究发现洗液温度<14℃时,FAME的洗板效果就会受到影响,脂血样本检测结果可能为假阳性[3]。冬季实验室温度<14℃时,需要采取升温措施确保室内温度达到预定数值,同时注意洗液温度上升容易产生滞后现象。此时需要对FAME洗液桶进行预温,适宜检测的温度为18℃,有效提高FAME检测的准确性。
总之,血液检测过程中的质量控制对检测结果的准确性有着重要影响,加强全自动酶免检测结果的质量控制吧,科学设置相关参数,从而有效提高检测结果的质量。
&&&&&&&& 参考文献:
[1]陈宏础.应重视实验室分析前后的质量管理[J].江西医学检验,):1-2
[2]赵飞雪.Microlab FAME全自动酶免分析仪检测的影响因素及质量控制[J].检验医学与临床,):.
[3]李彩霞,史飞,李佳英.全自动酶标仪参数的设置对HBeAb和 HBcAb测定的影响[J].中国医学检验杂志,):98-99.
[4]周萍.溶血标本对ELISA法检测HBsAg结果的影响及消除对策[J].国际检验医学,):668
[5]帅敏,张玲,邓晓琴,等.延长实验温育时间对FAME全自动酶免分析结果的影响[J].临床输血与检验,):28-30.
[6]李慧,惠永庆,刘世荣,等.酶联免疫吸附性试验全自动与手工操作方式比较[J].中国输血杂志,):97-98.
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