花鲈免疫球蛋白的分离纯化及部分特性分析--《中国水产科学》2011年01期
花鲈免疫球蛋白的分离纯化及部分特性分析
【摘要】：分离纯化了花鲈(Lateolabrax japonicus)血清免疫球蛋白(Ig),并对其特性进行初步研究与分析。采用山羊-IgG(Goat-IgG)免疫花鲈并制备血清,分别采用硫酸铵分级沉淀法、A蛋白亲和层析法及Goat-IgG偶联亲和层析法提取花鲈Ig,对提取组份进行了蛋白浓度测定、间接ELISA效价测定、SDS-PAGE和Western-blotting分析。结果表明,采用硫酸铵分级沉淀法提取的花鲈Ig主要集中在硫酸铵饱和度为30%~50%的区间,其中45%饱和度硫酸铵富集的的抗体比活最高,ELISA效价为2×104/mg蛋白,比血清ELISA效价提高2.2倍;A蛋白柱亲和层析可得单一蛋白峰,洗脱峰集中在洗脱体积0.8~1.6 mL处,占洗脱蛋白总量的76.2%,峰值的ELISA效价为1.37×105/mg蛋白,抗体得率为2.57%;Goat-IgG偶联Sephrose 4B亲和柱层析也可得单一蛋白峰,洗脱峰集中在洗脱体积1.4~2.8 mL处,占洗脱蛋白总量的72.4%,峰值的ELISA效价为1.39×105/mg蛋白,抗体得率为2.63%。以上3种提取方法均可得到79 kD的重链和29 kD轻链,表明可得到纯化的免疫球蛋白;采用鼠抗花鲈Ig血清和单抗AA5经Western-blotting证实提取成份为花鲈Ig。本研究表明,A蛋白柱和Goat-IgG偶联柱亲和层析均可用于花鲈Ig的提取,其中A蛋白柱法获得的洗脱峰值更为集中,抗体效价高,且提取过程不需要Goat-IgG免疫鱼体,是一种更为有效的免疫球蛋白提取方法。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：S917.4【正文快照】：
花鲈(Lateolabrax japonicus)俗称鲈鱼、七星鲈,分类上属鲈形目(Perciformes)鲈亚目(Percoidei)真鲈科(Percichthyidae)花鲈属,是中国海水养殖高品质的重要品种。近年来花鲈海水网箱集约式养殖迅速发展,高度集约化养殖、近海环境污染、种质退化、养殖场地老化等原因,造成鲈各
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郑州市健康儿童各年龄组血清免疫球蛋白含量测定
【摘要】：对郑州市健康儿童345人,从初生～7岁共分10个年龄组,对这些儿童进行了IgG、A、M的测定,并将成人297人测定结果一并例入,作为郑州市健康人免疫球蛋白的正常值。又将测定结果与上海、北京儿童所测结果进行了对比。结果郑州所测IgG均值,不论是儿童还是成人均较上海、北京为高,推测是地区差异。本组小儿IgG生后的最低水平在7～12月组与上海的低水平为4月组不同。其它各种Ig水平在儿童时期变化增长情况与上海、北京结果相似。
【作者单位】：
【关键词】：
【正文快照】：
血清免疫球蛋白侧定在疾病的诊断治疗中广泛应用着。但目前各地采用的检侧技术和材料尚不统一,以致侧定结果很不一致。因此各地区必需有自己的正常值,才能与异常者作对照。我们于198。年测定询楼病患儿治疗前后免疫球蛋白的同时,对正常儿童345人进行了IgG.A.M的测定。现将侧
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