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人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA Kit试剂盒说明书
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产品详细说明
产品英文名称：
Human Endometrium Antibody,EMAb ELISA Kit 厂家供应代测
Human Endometrium Antibody,EMAb ELISA Kit 厂家供应代测
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产品规格：
人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒
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.上海诚凛生物科技有限公司专业提供各种种属，各种系列ELISA试剂盒酶联免疫检测试剂盒。 &&
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【中文名称】：人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒
【英文名称】：HumanEndometriumAntibody,EMAbELISAKit
【产品货号】:CL-D0804
【产品规格】:96T/48T
【保存条件】：2-8℃低温保存
【保质期】：6个月，提供试剂盒最新批次
人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒
【试剂盒成分】：酶标板，试剂，标准品等。ELISA试剂盒检测范围：人、绵羊、小鼠、大鼠、猪、兔、山羊、牛、马、猪、其它动物细胞因子、植物细胞因子、骨代谢、细胞凋亡、激素内分泌、活性多肽、肝纤维化、自身抗体、血栓与止血、肿瘤、自身抗体科研Elisa检测试剂盒。 & 主要用于科研方面，不用于临床诊断。可以用于检测各种指标。
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如何让ELISA系统更稳定！！
人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒
ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中最为广泛最为灵敏的技术手段。
做ELISA的经验总结:&
1、包被原的性质很重要，蛋白浓度，是否降解，这关系到你做出的抗体可不可以被其识别，所以保存抗原很重要，做重组蛋白时，一定要在冰浴下缓慢融化就是这个道理。
2、包被液的选择，一般选择ph9.6的碳酸盐缓冲液。但有时由于试验的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的缓冲溶液来包。应注意以下原理：由于蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附结合的，靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的作用，这种物理吸附是非特异性的，受蛋白质的分子量、等电点、浓度等的影响，大分子蛋白质较小分子蛋白质通常含有更多的疏水基团，故更易吸附到固相载体表面。
3、封闭：继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙，从而排斥ELISA后的步骤中干扰物质的再吸附。常用封闭剂有：0.05%-0.5%的BSA；10%的小牛血清或1%明胶；脱脂奶粉，比较价廉，可以高浓度使用（5%－10％）；还有一些稀有用到的各种动物血清（主要为了排除相似蛋白干扰）和酪蛋白等等。但最终选用什么，要依据试验具体来实践。
4、洗涤板：可以说在ELISA操作中，洗涤是最主要的关键技术。因为聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，为达到分离游离的和结合的酶标记物的目的，清除残留在板孔中游离的物质，以及非特异性地吸附的干扰物质，在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。所以在洗板时会有一定误差，人为因素很大（当然有条件的用洗板机除外），洗的不彻底或串了孔，对如此灵敏的ELISA系统可是不小的影响。&
人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒
5、加抗体标本(和二抗):注意该换枪头时换枪头。标本稀释一般可用pbs稀释，也可用封闭液去稀释。如需加二抗，还要注意二抗的工作浓度，太高浪费，太低则着色浅。&
6、显色:显色系统又很多，我们一开始做的时候，要选择适宜的显色系统。注意显色系统酶活性底物的保存HRP结合物加硫柳泵，AP结合物可加叠氮钠。&
7、每次做尽量要把阴阳空三个对照做好，如出现问题也好分析。
上 海诚凛生物科技有限公司是一家高科技企业，主要经营进口抗体、 ELISA 试剂盒、化学试剂、培养基、标准品对照品等。主要用于科研、分析、质量控制等领域。 我们的服务理念：&一切以诚信为本，一切以用户价值为依归！为顾客提供售前、售中、售后的全方位服务，不求最好，只为更好。 我们一直关注着生物行业的发展，致力于为客户提供高质量的产品和优质的服务，上海诚凛生物科技有限公司立足上海，面向全国，真诚希望与每一位顾客建立良好的合作关系。 公司将进一步加强人才培养、产品创新，持续不断地提升企业核心竟争力，实现具有高科技产业体系、知识化创业团队的国际化大集团企业，更好、更快捷、更全方位的服务于生命科学领域，迎接新一轮世界经济一体化所带来的机遇与挑战。
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【英文名称：anti-EMAb（Endometrium）】
【产品货号：CL-1331T】
【产品规格：0.1ml/100ug &0.2ml/200ug】
【浓度说明：1mg/1ml】
【保存条件:Store at -20 &C】
【产品品牌：Abcam、santa、上海诚凛生物】
【产品性状：冻干粉或液体】
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【来源物种：兔、小鼠、羊、大鼠】
抗子宫内膜抗体
【交叉反应:Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Guinea Pig】
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抗体品牌说明
Santa公司：是世界上最大的抗体生产厂家，目前可提供的抗体种类多达两万多种，几乎覆盖了目前生命科学研究的各个最新领域，其每种抗体又有多个克隆可以选择，还提供一些对应蛋白标准品及相关产品，如ABC试剂盒，各种标记二抗，Western试剂盒，蛋白分子量Marker，核抽提物等，为免疫学研究工作提供了极大的方便。
抗子宫内膜抗体
Abcam公司：是世界有名的抗体王国，以优质、齐全的产品、完善的网络支持功能和强大的技术支持队伍得到全球客户的认可和赞誉。
抗体（英语：antibody），又称免疫球蛋白（immunoglobulin，简称Ig），是一种由B淋巴细胞分泌，被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质，仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中，及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征，该外来目标被称为抗原。蛋白上Y形的其中两个分叉顶端都有一被称为互补位（抗原结合位）的锁状结构，该结构仅针对一种特定的抗原表位。这就像一把钥匙只能开一把锁一般，使得一种抗体仅能和其中一种抗原相结合。 抗体和抗原的结合完全依靠非共价键的相互作用，这些非共价键的相互作用包括氢键、范德华力、电荷作用和疏水作用。这些相互作用可以发生在侧链或者多肽主干之间。正因这种特异性的结合机制，抗体可以&标记&外来微生物以及受感染的细胞，以诱导其他免疫机制对其进行攻击，又或直接中和其目标，例如通过与入侵和生存至关重要的部分相结合而阻断微生物的感染能力等。
抗子宫内膜抗体
体液免疫系统的主要功能便是制造抗体。抗体也可以与血清中的补体一起直接破坏外来目标。
2、加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。&
3、加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。&
4、加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。&
5、终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
在批放行前，每一批酶联免疫试剂都完成37℃热稳定性试验，试验结果符合产品的质量标准，以保证产品的安全性、有效性及质量可控。小鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒（稳定性试验）
& & & &酶联免疫试剂盒研制生产过程中所用的工作液一般包括：包被液、封闭液、阴性阳性对照、样品稀释液、洗涤液、酶结合物或酶稀释液、底物或底物缓冲液、终止液等，对定量检测试剂，还包括标准品（或校准品）溶液。各种工作液在配制过程中严格按质量标准中的配方进行配制，充分混匀确保液体中的各种成分均匀，同时进行相应的质量检验并达到质量标准后，方可使用。
一、规格说明：48T(次)/96T（次）孔；保存说明：2-8℃；仅供科研。
现货优惠供应，质量保证，价格实惠，有相应的优惠折扣。上海诚凛生物是专业供应ELISA试剂盒厂家、从事ELISA试剂盒多年的优质批发商。
二、检测范围；实验对象
可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。&
三、试剂盒特点：
竞争ELISA基于竞争结合技术，即样本中的待测分子与固定量的标记的同样分子（我们一般用碱性磷酸酶作为标记）同时与固定在孔板上的抗体的同一结合位点进行竞争，参照标准曲线，试验数据值是定量的。
夹层ELISA采用对样本中分析物的特异的抗体作为固定化的捕获抗体，小鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒然后用第二个带标记的抗体作检测，检测抗体对分析物也是专一的。当参照标准曲线时，试验数据值是定量的。
四、ELISA实验中的标准曲线
一般来说作直线回归的话，每次检测的R2最好达到0.98，即R达到0.99，否则需要复测。如果需要做几次检侧，那么每次的斜率和截距相差不要超过百分之20，R是相关系数，x与y的相关性。一般用R2表示，更加精确。R2不是说是独立的，其值越接近1说明其相关性越大。但是，一般的 R2不能达到这个值，0.95也不一定说明其相关性低，还应该检测相关显著差异性，无显著差异则说明R是可信的。当然了，R2也是可信的。
上海诚凛生物热卖产品有：
&产品名称:抗酸染色液(改良Kinyoun冷染法)&【规格说明:3&100ml】
&产品名称:布氏杆菌染色液&【规格说明:2&100ml】
&产品名称:Ehrlich试剂&【规格说明:100ml】
&产品名称:Ehrlich试剂&【规格说明:500ml】
&产品名称:Kovac试剂&【规格说明:100ml】
&产品名称:Kovac试剂&【规格说明:500ml】
&产品名称:幽门螺旋杆菌染色液(亚甲蓝法)&小鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒【规格说明:100ml】
&产品名称:Warthin-Starry银染色液&【规格说明:2&50ml】
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&产品名称:真菌染色液(McManus PAS法)&【规格说明:3&50ml】
&产品名称:沙黄/藏红T水溶液(2%)&【规格说明:100ml】
&产品名称:孔雀石绿水溶液(1%)&【规格说明:100ml】
&产品名称:乳酸酚棉蓝染色液》【规格说明:100ml】 & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & & &&产品名称:硝酸盐还原实验试剂盒&【规格说明:2&50ml】
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版权声 明&2015不孕妇女抗精子抗体和抗子宫内膜抗体的检测 检验医学 | 39康复网 | 医源世界
当前位置：&&&&&&&&&&&&&&&不孕妇女抗精子抗体和抗子宫内膜抗体的检测
不孕妇女抗精子抗体和抗子宫内膜抗体的检测
来源：临床检验杂志 作者：李笑梅
摘要: 在女性免疫性不孕中，抗精子抗体(AsAb)和抗子宫内膜抗体(EmAb)是两个非常重要的因素。女性体内的AsAb属于同种异体抗体，而EmAb则属于自身抗体。尽管两者的作用机理及对生育的影响程度尚无定论，但临床上已显示了AsAb和EmAb的检测对不孕(不育)症的诊断和预后具有及其重要的价值。研究组：原发不孕216例(22～38岁)，不孕年......
专题推荐：
在女性免疫性不孕中，抗精子抗体(AsAb)和抗子宫内膜抗体(EmAb)是两个非常重要的因素。女性体内的AsAb属于同种异体抗体，而EmAb则属于自身抗体。尽管两者的作用机理及对生育的影响程度尚无定论，但上已显示了AsAb和EmAb的检测对不孕(不育)症的诊断和预后具有及其重要的价值。
1 资料和方法
1.1 研究对象 所有研究对象均来自安徽省合肥市妇幼保健院不育症专科就诊病人。研究组：原发不孕216例(22～38岁)，不孕年2～10年；继发不孕104例，其中有史59例(20～34岁)，人流次数1～4次；反复自然流产26例(24～37岁)，自然流产次数2～4次，孕龄30天～4个月不等；曾有正常生育史的不孕妇女19例(26～40岁)，生育1～2次，末次生育后有3～8年不孕年。对照组：20例健康孕妇(23～29岁)，孕龄(24～32周)。
1.2 研究方法
1.2.1 标本采集 所有研究对象均抽取静脉血2 ml，分离血清，测定AsAb和EmAb。用消毒棉拭子取320例不孕妇女中期宫颈分泌物(棉拭子于宫颈口转动三圈)置1 ml生理盐水中离心取上清测定AsAb(孕妇未取宫颈粘液)。
1.2.2 测定方法 AsAb测定：ELISA法。见文献1。血清1∶100，宫颈粘液1∶5稀释。EmAb测定：ELISA法。采用南京军区总医院全军医学中心的试剂盒。
1.2.3 统计学处理 测定结果采用χ2和U两种检验法。
2 结果(见表1)与讨论
2.1 AsAb检验结果分析 原发不孕和继发不孕(包括人工流产组、反复自然流产组和曾生育后不孕组)的AsAb总阳性率分别是39.81%(86/216)、41.35%(43/104)，两者无显著性差异(P＞0.05)。原发不孕组、人工流产组、曾生育后不孕组其宫颈粘液的AsAb阳性率均高于血清(但P＞0.05)。反复自然流产组血清AsAb阳性率为30.77%，显著高于原发不孕组(P＜0.05)。反映了血清中的AsAb存在与反复自然流产密切相关,AsAb可影响受精卵及胚胎的正常发育而致流产。这亦反映了AsAb对生育影响的作用机理是多方面的。建议对不孕(不育)妇女血清及宫颈粘液中的AsAb均应进行检测。
2.2 EmAb检测结果分析 大量实验及临床研究[2～6]亦已表明：EmAb并非为EMT所独有,在不孕和流产妇女中有较高的检出率。本文原发不孕组与继发不孕组EmAb阳性率无显著差异
(前者为31.94%、后者为36.54%)。人工流不孕是继发不孕的一大类群[本实验为56.73%(59/104)],EmAb较高的检出率说明人流术可能与EMT形成有关，亦可能因人流后易形成慢性炎症，经血倒流含有的宫内膜碎屑被巨噬细胞吞噬而刺激淋巴细胞产生EmAb。在19例曾有正常生育史的不孕妇女中，亦有5例检出EmAb。生育过的妇女，由于时宫颈口易裂伤，宫颈局部破损，经期宫内膜碎片脱落，流经宫颈处，膜抗原被吸收刺激机体产生EmAb。总之，不孕和流产的原因是多方面的，AsAb和EmAb是两个非常重要的免疫因素。
表1 抗精子抗体(AsAb)及抗子宫内膜抗体(EmAb)的检测结果
AsAb阳性例数及阳性率(%)
EmAb阳性例
数及阳性率(%)
两者均阳性
总阳性率(%)
原发不孕组
人工流产组
反复自然流产组
曾生育后不孕组
孕妇组
9(15.25)
8(30.77)
2(10.53)
1(5.0)
11(18.64)
3(11.54)
3(15.79)
5(8.47)
1(3.85)
1(5.26)
22(37.29)
11(42.31)
5(26.32)
1(5.0)
参考文献
[1]李笑梅，陈永华，汤明礼，等.精子活力与畸形率及抗精子抗体的回归分析.临床检验杂志，)：251
[2]黄邱朝，刘琦，武建国.280例不育妇女三种抗体测度.生殖医学杂志，)：174
[3]黄邱朝，武建国，丁庆，等.子宫内膜异位症和流产及不孕患者血清12种自身抗体的分析.上海医学，)：640
[4]黄邱朝，庄恭南，刘琦.酶联免疫吸附间接法检测抗子宫内膜抗体及其临床应用.解放军医学杂志，)：29
[5]黄邱朝，刘琦，庄恭南，等.抗子宫内膜抗体ELISA检测法的建立与临床应用.中华医学检验杂志，)：29
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作者：加埃
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ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。
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下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。 1．样品稀释
酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清不稀释，不可避免会产生很强的非特异性反应，出现假阳性。因此，国外检测血清抗体的试剂盒，均规定将血清稀释至适当的倍数，以降低非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保证试验的灵敏度和特异性。但是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如某些产品应取10μl样品进行稀释，个别用户取5μl甚至1μl样品进行稀释，由于吸嘴上不可避免地沾有样品以及微量移液器的精度不够，因此造成样品稀释倍数不准确，检测结果出现问题。 2．试剂盒平衡 试剂盒中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃)，一般需在室温放置20～30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够，样品孵育时间相对缩短，ELISA反应不够充分。冬季室温低，可将试剂盒置37℃温箱20分钟。
3．样品和试剂的混匀 稀释前、后的样品必须充分混匀，所有试剂在加样前也须摇匀，以保证试验的均一性。
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