重组蛋白与蛋白相互作用的研究方法实验对照方法有哪些？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2024-02-07 04:15 标签： 细胞实验
2021-08-20 08:47
来源:
生命科学实验站
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选择合适的重组蛋白产品，对你得到正确的实验结果关重要，可从以下几点进行选择：
1、蛋白来源
对于一些蛋白，需要进行一系列的翻译后修饰才能成为具有活性的成熟蛋白。细菌不能提供这样的修饰，而哺乳动物细胞可以。因此，选购时应注意蛋白的来源。例如，novaprotein的人IL-4是在E. coli中制备的，金斯瑞的人IL-4是在哺乳动物CHO细胞中制备的。
当然除了上面提到的两种表达系统外，还有酵母和昆虫表达系统，四种系统各有优劣，选重组蛋白是一定要注意。
2、种属来源
蛋白的种属来源常见的有人源、小鼠源和大鼠源等。一般来说，不同种属之间的蛋白同源性在80%以上就可视为有交叉活性，可推荐使用。
3、生物活性和稳定性
蛋白的纯度、内毒素水平和批次间稳定性等直接会影响实验结果，因此，高品质的蛋白产品会严格监控这一环节，并且提供详细数据。同时，在选择蛋白产品时还需考虑其生物活性。
一般记得以下五点就行：
· 大多数人类细胞因子对小鼠细胞都有活性。
· 许多小鼠细胞因子对人类细胞也有活性，但比相应人类细胞因子活性低。
· 一些人类的细胞因子（如IL-7）在小鼠细胞中表现出比小鼠细胞因子更高的活性。
· 干扰素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 有物种特异性，对于非人类细胞几乎没有活性。
· 成纤维细胞生长因子和神经营养因子是高度保守的，在其它的动物细胞中也能表现很好的活性。
4、蛋白形式
通常有两种形式：含牛血清白蛋白BSA或不含BSA，不含BSA一般用“CF"表示。加入BSA可以提高蛋白质的稳定性，增加了贮存期限。含BSA的蛋白可以作为细胞组织培养物或者ELISA实验中的理想标准品，而CF形式的蛋白尤其适用于活体实验。以R&D systems的Human IL?4为例，就有两种形式，买之前要先明确自己用来做什么实验的。
5、查阅文献
这个是快捷的方法，怎么去查文献是我们必须要掌握的技能。
虽有万般方法，但是只要你会查阅文献，则万事皆定。返回搜狐，查看更多
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