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进行细菌学实验的场所,标本的接种、培养、分离、鉴定、药敏等工作在此完成。
细菌室要防止外界污染,还要避免细菌播散。
配备紫外灯、消毒剂等。注意定期消毒。
对无菌物品和标本应明显分开放于指定位置,同时要对用过的物品及时进行灭菌处理。
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是细菌实验室内用于无菌操作的小室,要求更严格。
完全封闭,应有缓冲区。
用前要用紫外灯消毒30min,定期用甲醛熏蒸消毒。
仅限于分装培养基及传染性强的细菌接种。
要保证本室的无菌状态。
无菌实验室可用超净工作台代替。
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培养基:是指人工配制的适合细菌生长繁殖的综合营养基质。
(1) 营养物质:蛋白胨(氮源)、肉浸液(氮源和碳源)、牛肉膏、糖醇类、血液、鸡蛋和动物血清、生长因子、无机盐类
(3) 凝固剂:琼脂、明胶
(4) 抑制剂:非生长必需,而是选择、鉴定及判断结果的需要
(5) 指示剂:便于观察细菌
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培养基的种类(按用途分类)
基础培养基:培养营养要求不高的细菌,如普通平板
营养培养基:能满足营养需求较高细菌的生长,如血平板
鉴别培养基:含有某些特定的底物,用于鉴别细菌,如克氏双糖培养基(KIA)
选择培养基:具有选择性抑制作用,用于选择性的培养目的菌,如SS平板
增菌培养基:促进目的菌的生长,适用于含菌量较少的标本,如葡萄糖肉汤。
厌氧培养基:用于培养厌氧菌
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培养基的种类(按物理性状分类)
液体培养基:不含凝固剂,用于增菌和接种纯种细菌。
半固体培养基:含转载请标明出处.
关于平板冷凝后要将平板倒置的原因,除了教师用书中给出的参考答案“平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,将平板倒置,既可以防止皿盖上的水珠落入培养基,又可以避免培养基中的水分过快的挥发”外,还有以下原因:
1接种之前平板倒置的原因
避免培养基与培养皿脱离
倒完平板后,由于培养基尚有余温且刚凝固不久,水分较大、湿度较高,皿盖上凝结一些水珠。如果平板正放则冷凝的水滴会流到培养基里,不但易造成污染,还会使培养基与培养皿出现分离,很容易滑动,这是培养基黏附不牢的一个原因;此外,若倒平板时培养基中的水分较大,在接种培养时,培养基中的菌种会四处流动,长成的菌膜连在一起,不能计数。
打开培养箱取放平板时,如果一不小心容易将正放的培养皿的皿盖碰开;而倒置的平板在拿取时能够保持原状,不易出现皿底和皿盖分离的情况,从而避免环境中杂菌的污染。
2接种后培养时平板倒置的原因
当培养条件为必须通风时,倒置的平板可以减少培养基表面的空气流动,减慢培养基中水分蒸发的速度,保持琼脂等固体培养基中的水分,充分的维持琼脂等凝固剂的弹性,延长培养基出现干裂的时间。所以,倒置培养有利于菌种的生长和繁殖。
防止培养过程中杂菌污染平板
倒置培养时,由于平板内的空气不易流动,能尽可能的减少外来杂菌的侵染,避免杂菌污染培养基和培养物。
有利于营养物质富集,方便观察计数
平板倒置进行微生物培养时,受重力的影响,一方面培养基中的营养物质主要会富集在培养基表面及表面以下的次层,有利于微生物生长;另一方面培养基表面生长的菌落相对不会太快扩散,观察时有利于辨别菌落特征。
[1]李洪伟.微生物培养中平板倒置的原因浅析[J].生物学教学,-62.
[2]李洪伟.微生物的培养之平板倒置的原因[J].中学生物教学,-63.
——摘自秦磊,张胜主编《高中生物疑点通》