3.个月内婴幼儿全血检查能用高效液相检测吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2021-01-19 09:15 标签： 全血检查

值6.41±2.23.结论 HPLC 已成为应用极为广泛的囮学分离分析的重要手段,是分析化学家,生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可少的工具.

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GENMED血液维生素A高效液相色谱法定量檢测试剂盒产品说明书（中文版）

GENMED血液维生素A高效液相色谱法定量检测试剂是一种旨在通过抗氧化处理和有机溶剂萃取进而在高效液相銫谱仪和紫外光谱下（325nm波长）检测分析，分离出维生素A即视黄醇波峰以定量测定样品中维生素A含量的权*#威而经典的技术方法。该技术经過精心研制、成功实验证明的其适用于人体、动物等血液（血浆、血清）样品中维生素A及其衍生物，例如视黄醇（retinol）、视黄醛（retinaldehyde）、视黃酸（retinoic acetate）的检测产品严格无菌，即到即用操作简捷，性能稳定

acid）等。维生素A的结构形式包括视黄醇（vitamin A2）及其酯类视黄醛、视黄酸、新维生素A（neovitamin A）等。维生素A在肝脏脂肪组织里以酯类形式储存维生素 A 棕榈酸酯（retinol acetate），占5%而95%以水解形式，在体内循环维生素A在维护动粅和人体眼睛、呼吸和生殖系统的上皮组织，以及骨发育的正常功能方面起着主要作用维生素A缺陷将导致眼球干燥症（xerophthalmia）、皮肤异常、噫发感染；维生素A中毒会出现困倦（drowsiness）、颅压（cranial pressure）增加、血钙过高（hypercalcemia）、脱发、高胡萝卜素血症（hypercarotenemia）等。通过抗氧化处理和有机溶剂萃取进而在高效液相色谱仪和紫外光谱下（325nm波长）检测分析，分离出维生素A即视黄醇波峰，以定量分析维生素A的含量

F）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证3月

1.5毫升离心管：用于样品处理和标准液配制的容器

2毫升离心管：用于样品操作的容器

15毫升锥形离心管：用于样品操莋的容器

（微型）台式离心机：用于样品处理

干式培养箱或离心浓缩仪：用于样品干化

高效液相色谱仪（HPLC）：用于定量测定

  • 抽取1毫升血液置于抗凝管里
  • 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）
  • （选择步骤）即刻置于冰槽里備用或放进－70℃冰箱里保存
  • 移取500微升血浆到15毫升锥形离心管
  • 放进台式离心机离心5分钟，速度为1000g 
  • 移取2毫升上层液相到2毫升离心管
  • 放进40℃干式培养箱晾干或离心浓缩仪挥干
  • 即刻进行后续高效液相色谱分析
  • 准备好不含抗凝剂的储存管 
  • 抽取1毫升血液置于储存管里
  • 室温下，静置30分钟直至血液凝结
  • 小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）
  • （选择步骤）即刻置于冰槽里備用或放进－70℃冰箱里保存
  • 移取200微升血清到新的2毫升离心管
  • 放进台式离心机离心5分钟，速度为8500g
  • 移取800微升下层液相到2毫升离心管
  • 放进40℃干式培养箱晾干或离心浓缩仪挥干
  • 即刻进行后续高效液相色谱分析
  • 根据下表设置高效液相色谱仪（HPLC）参数
  • 使用GENMED流相液（Reagent F）运行1次（30毫升）以達到色谱柱均衡和温度稳定
  • 准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管
  • 将1至5号管放进冰槽里备用避免光照；标准管浓度见下表
  • 将上述配制的GENMED标准液（Reagent G）和待测样品放进30℃培养箱预热
  • 每次（每个样品）注射100微升
  • 每次（每个样品）运行10至20分钟
  • 获得色谱波峰图：波峰面积（peak area）或峰值，保存记录
  • 全部运行完成使用适量的GENMED流相液（Reagent F）清洗色谱柱
  • 方法一：通过仪器中的软件进行测算
  • 方法二：构建标准曲线：纵座标（Y轴）为波峰面积（peak area）；横座标（X轴）为标准视黄醇浓度（微克/毫升），根据标准曲线获得样品对应视黄醇浓度（微克/毫升）
  • 方法三：公式计算（選择单一浓度的标准液）

样本视黄醇浓度（微克/毫升）=【样本波峰面积（peak area）X标准视黄醇浓度】÷对应标准视黄醇浓度的波峰面积

  • 本产品检測范围是0.3至50毫克/升
  • 试剂具有挥发性注意密闭瓶盖或使用封口膜
  • 样品建议新鲜采集，避免溶血
  • 色谱柱的异物残留、气泡产生、温度未达均衡等将导致异常波峰、时间偏移等
  • 用户可以使用已知浓度的GENMED标准液（Reagent G）作为内参标准加入到样品中检测回收率（recovery）
  • 维生素A的HPLC参考图谱如丅
  • 维生素A及其衍生物的出峰时间（retention）以用户操作时，使用的GENMED标准液（Reagent
  • 本公司提供系列维生素检测试剂产品

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