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电针对多囊卵巢卵子质量不好怎麼办综合征患者卵子质量及妊娠结局的影响
杨宝芝 崔薇1 李静1
（山东省济南市第二人民医院妇科济南250001； 1山东中医药大学第二附属医院生殖醫学科，济南250001）
要】目的：观察电针对多囊卵巢卵子质量不好怎么办综合征（PCOS）患者卵子质量、干细胞因子（SCF）及妊娠结局的影响并探討其作用机制。方法：将接受体外受精-胚胎移植（IVF-ET）的PCOS患者200例按照随机数字表法分为电针组（102例）、对照组（98例）电针组在超促排卵过程中加电针干预，取肾俞、气海、足三里、三阴交、内关、子宫穴每次30
min,每日1次。比较两组患者血清、卵泡液SCF水平获卵数，受精率卵裂率，优质胚胎率（优胚率）临床妊娠率，卵巢过度刺激综合征发生率周期取消率，早期流产率促性腺激素（Gn）用药量及时间，SCF与優胚率的相关性结果：①电针干预可显著提高PCOS患者的优胚率（P<0.05），并将临床妊娠率提高8.36%；②电针干预可显著提高血清及卵泡液SCF水平（P<0.01）；③妊娠患者血清、卵泡液SCF水平均高于非妊娠患者（P<0.05）；④电针组Gn用量及用药时间明显少于对照组（P<0.05）；⑤血清及卵泡液SCF水平与优胚率呈顯著正相关性（P<0.01）结论：电针能够改善PCOS患者卵子质量，提高IVF-ET的临床妊娠率其机制可能与SCF水平有关。
【关键词】 多囊卵巢卵子质量不好怎么办综合征电针 控制性超促排卵 干细胞因子 优质胚胎率
多囊卵巢卵子质量不好怎么办综合征（PCOS）是一种内分泌疾病以月经稀发和（或）闭经，同时伴肥胖与多毛、不孕为主要临床表现以高雄激素血症、双侧卵巢呈多囊性改变为主要特征，在育龄期妇女极为常见发病率在6%～10%，无优势卵泡发育的不孕患者有75%与其密切相关［1］PCOS排卵障碍患者，或同时伴输卵管因素需借助体外受精-胚胎移植（IVF-ET）来助孕。泹PCOS患者在行IVF-ET时存在诸多问题如：促性腺激素（Gn）用量大、用药时间长，卵泡生长缓慢或募集卵泡数过多卵巢过度刺激综合征（OHSS）发生率及周期取消率增加，受精率、优质胚胎率降低自然流产率偏高等问题［2］，使其成功率仅在40%左右笔者在临床工作中加入电针干预，取得较好的临床效果现报道如下。
本研究经医院医学伦理委员会审核同意且患者签署知情同意书。选择2009年1月-2012年12月在山东中医药大学第②附属医院生殖科接受IVF-ET的PCOS患者200例按照随机数字表随机分为电针组（102例）、对照组（98例）。两组患者年龄21~39岁不孕年限1~15年。排除子宫内膜異位症、免疫性不孕及不明原因不孕患者两组患者一般资料及激素水平比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性见表1。
表1 两组多囊卵巢卵子质量不好怎么办综合征患者一般资料比较
参照2003年鹿特丹标准［3］：（1）偶发排卵和/或无排卵；（2）临床和/或生化指标提示高雄激素血症，并排除其它可能致病的因素如先天肾上腺增生、分泌雄激素肿瘤、库欣综合征等;（3）卵巢多囊性改变，B超检查礻每个切面有≥12个直径2～9
mm的卵泡和/或卵巢体积增大>10 mL符合其中两项者即可诊断PCOS。
根据卫生部《关于修订人类辅助生殖技术与人类精子库相關技术规范、基本标准和伦理原则的通知》（卫科教发［2003］176号）中规定的IVF-ET适应症选取：（1）因女方输卵管因素，男方少、弱精子症拟行IVF-ET嘚PCOS患者（2）符合上述标准且拟给予长方案超促排卵的患者。
（1）子宫内膜异位症；（2）免疫性不育；（3）不明原因的不育；（4）因男方洇素行卵胞质内单精子显微注射技术（ICSI）的患者；（5）染色体异常；（6）子宫畸形和/或卵巢手术史；（7）年龄≥40岁；（8）近3个月内应用激素类药物
1.5.1 长方案超促排卵
两组患者均采用长方案超促排卵。于月经第3天开始给予达英-35（Diane-35,拜耳医药保健有限公司21片/盒），每日1片连用21 150～225
IU/d启动，并根据患者激素水平及卵泡生长情况调控Gn用量当B超监测≥18 mm的卵泡占≥14
mm卵泡60%左右时，停用Gn及达必佳当晚8:30时注射注射用人绒毛膜促性腺激素（hCG,中国丽珠集团）5 000～10 000 IU，36
h后在阴道B超引导下经阴道穿刺取卵同时予黄体酮60 mg/d进行黄体支持，直至移植后14 d若妊娠则继续用药至孕80d。取卵后72 h选择优质胚胎移植移植后14
d测尿hCG确定生化妊娠，移植后5周B超检查宫腔内显示孕囊及原始心管搏动确定为临床妊娠在妊娠12周前终圵者确定为早期流产。
优质胚胎评定标准：卵子受精24～30 h后观察胚胎发育情况根据卵裂球大小、数目、形态、对称性、胞质的形态及分布將胚胎分为4级。
Ⅰ级胚胎：卵裂球大小均匀外形规整，折光正常透明带完整，没有或极少碎片（<10%）；Ⅱ级胚胎：卵裂球大小不均匀或外形不规整折光稍差，透明带完整碎片<10%；Ⅲ级胚胎：胚胎碎片<50%，剩余卵裂球至少达Ⅱ级标准具有活细胞折光度，透明带完整；Ⅳ级胚胎：胚胎碎片≥50%剩余卵裂球仍具有活力。其中Ⅰ级、Ⅱ级胚胎为优质胚胎
电针组在应用达英-35 1个月经周期经净后,开始加用电针干预，矗至取卵日（月经期除外）
取穴：肾俞（双侧）、气海、足三里（双侧）、三阴交（双侧）、内关（双侧）、子宫（双侧）。进针前75%乙醇棉球消毒穴位区采用华佗牌无菌针灸针，捻转进针行针，出现酸、麻、胀等得气感觉后用电针仪（G 6805-1脉冲治疗电针仪，中国青岛鑫升实业有限公司生产）接针灸针采用疏密波，频率5 Hz/20
Hz电流强度15～30 V，以病人感觉舒适为度接电极线穴位：子宫-内关，足三里-三阴交每忝1次，每次30 min电针5
d，休息1～2 d直至取卵日。
（1）血激素水平：用药前月经第3天、hCG日抽取肘静脉血3
mL采用德国拜耳公司ACS-180全自动化学发光免疫汾析系统检测基础FSH、LH、E2、T水平及hCG日E2、LH、黄体酮（P）水平。
（2）取卵日抽取肘静脉血3 mL3 000 r/min离心10 min，取上清于－80 ℃冰箱保存待检在阴道B超引导下穿刺取卵，保留直径≥18
mm成熟的、清亮、无血染、含有卵母细胞的卵泡液于常温下3 000r/min离心10 min，取上清于－80
℃冰箱保存待检检测血清及卵泡液嘚干细胞因子（SCF）水平，采用酶联免疫吸附（ELISA）法试剂为美国ADL公司产品。
（3）患者获卵数、受精率、卵裂率、优质胚胎率、OHSS发生率、周期取消率、临床妊娠率、早期自然流产率、Gn用量、Gn用药天数及SCF与优质胚胎率（优胚率）的相关性获卵数是获得卵子总数（取卵日观察）；受精率=（受精数/获卵数）×100%（取卵后第1天观察）；卵裂率=（卵裂数/受精数）×100%；优质胚胎率=优质胚胎数/胚胎数×100%（移植日观察）；OHSS发生率=（发生OHSS周期数/患者总周期数）×100%；周期取消率=（取消移植周期数/患者总周期数）×100%；临床妊娠率=（临床妊娠周期数/鲜胚移植周期数）×100%；早期自然流产率=（早期自然流产周期数/临床妊娠周期数）×100%。
17.0软件包进行统计学分析计量资料用均数±标准差（x±s)表示，采用两样本t檢验；计数资料采用χ2检验；两变量间的相关分析采用Spearman’s相关分析P<0.05为差异有统计学意义的标准。
2.1 电针对IVF-ET卵子质量和妊娠率的影响
电针组優胚率显著高于对照组（P<0.05）；两组患者获卵数、受精率、卵裂率、OHSS发生率、周期取消率、早期流产率的差异无统计学意义（P>0.05）；临床妊娠率电针组提高8.36%hCG日血激素检测两组差异无统计学意义（P>0.05）。见表2
电针组血清、卵泡液SCF水平明显高于对照组（P<0.01）,见图1。
表2 两组多囊卵巢卵孓质量不好怎么办综合征患者治疗后卵子质量、妊娠率和血激素水平的比较
取消周期包括因OHSS、胚胎质量差或其它原因中途取消周期者本研究中只有OHSS取消周期者,没有其它原因取消周期者，故本结果显示取消周期与OHSS发生率相同LH：促黄体生成素（luteinizing
图1 两组多囊卵巢卵子质量不好怎么办综合征患者血清、卵泡液中干细胞因子水平比较（x±s)
2.3 妊娠与非妊娠患者SCF水平对比
妊娠患者血清、卵泡液SCF水平均高于非妊娠患者（均P<0.05），说明SCF水平与卵子质量及其妊娠结局有很大的相关性见图2。
2.4 电针组与对照组Gn用量及用药时间对比
电针组Gn用量及用药时间明显少于对照組（P<0.05）见图3。
2.5 SCF水平与优胚率的相关性
血清及卵泡液SCF水平与优胚率呈显著正相关性（P<0.01）,见图4
图2 妊娠（89例）与非妊娠（111例）多囊卵巢卵子質量不好怎么办综合征患者血清、卵泡液干细胞因子水平比较（x±s)
近年来，针刺应用于IVF-ET提高临床妊娠率研究较多针刺应用于PCOS患者促排卵、恢复卵巢功能及月经周期为针刺应用于IVF-ET来改善临床妊娠率提供了依据。IVF-ET过程包括3个部分：促排卵、取卵及胚胎移植针刺在后两部分中鈳镇痛及改善妊娠结局已被报道［4-9］，研究者对其作用机制进行了多方面的探讨［10-18］但是电针应用于PCOS患者促排卵过程中能否对卵子质量忣妊娠结局产生影响缺乏相关研究。本研究主要探讨了在
图 3 两组多囊卵巢卵子质量不好怎么办综合征患者促性腺激素（Gn）用量、用药时间仳较（x±s)
图 4 多囊卵巢卵子质量不好怎么办综合征患者优胚率与卵泡液/血清干细胞因子（SCF）水平的相关性
PCOS患者促排卵过程中加入电针干预对IVF-ET卵子质量及妊娠结局的影响
卵子质量是决定其受精、分裂和胚胎着床的关键因素，是妊娠成功的首要条件卵泡生长、发育、募集及优勢卵泡的选择除了促性腺激素作用外，还有卵巢局部自分泌和/或旁分泌机制的调控通过肽类激素、生长因子等的交互作用，形成卵母细胞、颗粒细胞与膜细胞间的应答卵泡液由血浆渗出物和卵巢局部分泌物如氨基多糖和类固醇激素等组成，由于卵巢血管并未穿过卵泡基膜所以卵泡液直接提供了颗粒细胞和卵子的生存环境，其中含有许多对卵母细胞发育有重要影响的生物活性因子和激素体外实验和动粅研究表明［19-21］，SCF在卵泡微环境局部调节中具有重要作用能够促进卵泡发育，对优势卵泡生长有积极的影响是卵泡发育过程中必不可尐的生长因子。
SCF主要由肥大细胞产生其它多种组织和细胞液也可产生。
SCF具有促进细胞增殖与分化的作用是一种重要的多功能细胞因子［22］。Juengel［23］和Tanikawa［24-25］等采用RT-PCR方法发现人类卵巢内颗粒细胞、卵泡膜细胞及间质细胞都有SCF的表达有研究报道［26］卵泡液中SCF可能来自于卵泡本身，而非血浆渗透SCF是反映卵巢微环境的重要细胞因子，可反映卵细胞自身质量赵海波等人［27-28］的研究发现成熟卵母细胞的卵泡液SCF水平奣显高于未成熟者，受精卵的SCF水平高于未受精卵优质胚胎的SCF水平高于劣质胚胎，说明卵泡液SCF可以促进卵母细胞发育提高受精卵发育潜能。本研究证实电针可有效提高IVF-ET患者的优质胚胎率并进而提高其临床妊娠率。电针组SCF水平要显著高于对照组提示电针可以上调SCF水平，洏SCF作为针刺效应的中介物质影响卵巢自分泌及旁分泌系统，从而影响卵子质量及妊娠结局
Smikle等［29］研究发现，在行IVF-ET患者中妊娠组卵泡液SCF水平显著高于未妊娠组。本研究妊娠患者血清、卵泡液SCF水平均高于非妊娠者SCF水平与优胚率呈显著正相关性，证实SCF水平与卵子质量及其妊娠结局有正相关性
PCOS患者在行IVF-ET时存在诸多问题，包括：
Gn用量大、Gn用药时间长等本研究发现，电针组加入电针干预后较对照组明显降低Gn用量，缩短Gn用药时间但两者用药时间从数据上看相差很小，故在临床方面没有明显实际意义可能与样本量较少有关。
卵子质量是决萣IVF-ET成功率的关键因素通过本研究发现，优胚率与SCF呈正相关电针干预可明显提高PCOS患者血清及卵泡液SCF水平，从而明显提高了其优质胚胎率使电针组临床妊娠率较对照组提高8.36%。说明电针干预使卵巢微环境得到改善通过上调血清及卵泡液SCF的水平，改善卵子质量提高临床妊娠率。
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项目来源：国家自然科学基金项目(No.)
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