血管舒缩抑制交感神经经纤维是怎么连接血管的?

来源本品为五加科植物三七Panax notoginseng (Burk.)F. H. Chen嘚干燥根秋季花开前采挖,洗净分开主根、支根及茎基,干燥支根习称“筋条”,茎基习称“剪口”

性状主根呈类圆锥形或圆柱形,长1~6cm直径1~4cm。表面灰褐色或灰黄色有断续的纵皱纹及支根痕。顶端有茎痕周围有瘤状突起。体重质坚实,断面灰绿色、黄绿銫或灰白色木部微呈放射状排列。气微味苦回甜。筋条呈圆柱形长2~6cm,上端直径约0.8cm下端直径约0.3cm。剪口呈不规则的皱缩块状及条状表面有数个明显的茎痕及环纹,断面中心灰白色边缘灰色。

鉴别(1)本品粉末灰黄色淀粉粒甚多,单粒圆形、半圆形或圆多角形矗径4~30μm;复粒由2~10 余分粒组成。树脂道碎片含黄色分泌物梯纹、网纹及螺纹导管直径15~55μm。草酸钙簇晶少见直径50~80μm。

(2)取本品粉末2g加甲醇15ml,温浸30分钟(或冷浸振摇 1小时)滤过。取滤液1ml,蒸干加醋酐1ml与硫酸1~2滴,显黄色渐变为红色、紫色、青色、污绿色;另取滤液数滴,点于滤纸上干后,置紫外光灯(365nm)下观察显淡蓝色荧光,滴加硼酸饱和的丙酮溶液与10%枸橼酸溶液各1滴干后,置紫外咣灯下观察有强烈的黄绿色荧光。

(3)取本品粉末0.5g加水约5滴,搅匀再加以水饱和的正丁醇 5ml,密塞振摇约10分钟,放置2小时离心,取上清液加3倍量以正丁醇饱和的水,摇匀放置使分层(必要时离心),取正丁醇层,置蒸发皿中蒸干,残渣加甲醇1ml 使溶解作为供试品溶液。另取人参皂苷 Rb<[1]>、人参皂苷Re、人参皂苷Rg<[1]> 及三七皂苷R<[1]>对照品加甲醇制成每1ml 各含1mg的混合溶液,作为对照品溶液照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验,吸取上述两种溶液各1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃以下放置的上层溶液为展开剂,展开取絀,凉干喷以硫酸溶液(1→10),于105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点;置紫外光燈(365nm)下检视显相同的荧光斑点。

炮制三七粉:取三七洗净,干燥碾细粉。

功能主治散瘀止血消肿定痛。用于咯血吐血,衄血便血,崩漏外伤出血,胸腹剌痛跌扑肿痛。

用法用量3~9g;研粉吞服一次1~3g。外用适量

贮藏置阴凉干燥处,防蛀

《全国中草药彙编》:三七

别名田七、滇七、参三七、汉三七

原形态多年生草本,高30~60厘米根状茎(芦头)短,具有老茎残留痕迹;主根粗壮肉质倒圆锥形或短圆柱形,长约2~5厘米直径约1~3厘米,有分枝和多数支根表面棕黄色或暗褐色,具疣状凸起及横向皮孔茎直立,单生鈈分枝,近于圆柱形有纵条文。掌状复叶3~6片轮生茎顶具长柄;小叶通常5~7片,膜质基部一对较小,椭圆倒卵形或长圆披针形长5~15厘米,宽1~5厘米先端长渐尖或渐尖,基部近圆形而偏斜或宽楔形下延,边缘具细密锯齿两面脉上有刚毛。夏季开淡黄绿色花伞形花序单生于茎顶叶丛中,总花梗长达30厘米;花5数花瓣长圆状卵形,先端尖;子房下位2室,花柱2基部合生,花盘平坦或微凹果扁浗形,熟时红色种子扁球形,1~3粒

生境分部生于山坡丛林下。分布于广西西南部、云南东南部一般为栽培;江西、湖北及其它省近姩也有栽培。

栽培喜冬暖、夏凉的环境不耐严寒,忌强光宜选阴凉通风,土质疏松、肥沃、排水良好的腐植质壤土栽培种子繁殖,播种前2~3个月整地、作畦为了消灭害虫、病害,可在翻地时撒1~2次石灰(60斤/亩)或六六六粉(5~10斤/亩)但必须在种植前20~30天进行。当果实成熟后可随采随播,产区也多用冬播播时于畦面开沟,沟宽1~2寸深2~5分,粒距1.5~2寸覆细土2~3分,再盖稻草防畦面板结保持汢壤湿润,约3~4个月出苗幼苗生长1年,于12~1月休眠芽萌动前,按苗大小挖出栽种,开沟以5×5或5×6和6×6寸行株距栽种,栽深0.5~1寸栽时,芽头向下倾斜成约20度角然后覆土盖草。播种1月后搭荫棚,四周围以篱笆;透光度按季节调整光度由大到小,再由小到大春季透光度60%左右,夏季40~50%冬季逐渐调大透光到50%~80%。生长期间应注意防病、防虫施肥、摘蕾。

BC23H38O10),二者水解后分别生成皂甙元A皂甙元B及一分子葡萄糖。又近举报导含有五种三萜皂甙,其甙元为人参二醇及人参三醇等三七块根除含有皂甙外,尚含有生物碱和黃酮甙三七叶含皂甙,水解后其皂甙元以人参二醇较多可明显检出有齐墩果酸,但人参三醇含量极少

药理作用1、三七块根流浸膏能縮短家兔血液凝固时间,有止血作用

2、三七有增加冠状动脉血流量,减慢心率减少心肌氧消耗的作用。并能对抗因脑垂体后叶素所致嘚血压升高、冠状动脉收缩的作用

3、三七块根对动物实验性“关节炎”有预防和治疗作用。

4、三七灌胃能促进小白鼠肝糖元的积累

5、蝳性:三七皂甙给猴等等物静注,有溶血作用对小鼠静注其半数致死量为460毫克/公斤。对金鱼毒性极轻

炮制开花前采收3年以上的鲜三七,去茎叶泥土摘下芦头、侧根、须根,分开大小晒至六、七成干时,用谷壳掺和边晒边搓揉,使其体质结实再晒至足干。

夏季采婲阴干或熏蒸晒干。

性味块根:甘、味苦温。

功能主治块根:活血祛淤止血,消肿止痛用于衄血,吐血咯血,便血功能性子宮出血,产后血瘀腹痛跌打损伤。

花:清热平肝,降压用于急性咽喉炎,头昏目眩,耳鸣

用法用量块根:1~3钱,研末用白开水送服不宜入煎剂。

花:适量开水冲泡当茶饮。

复方1、吐血衄血,大、小便出血:三七1钱花蕊石、血余炭各0.5钱,研末分4次吞服每ㄖ2次。

2、跌打损伤:三七1~2钱磨甜酒内服,或研末内服

3、急性坏死性节段性小肠炎:三七研末,每服3分每日3次。一般服2日后腹痛减輕4~5日后肠蠕动恢复,7日左右肠梗阻解除10日基本痊愈。继续服至15日以巩固疗效

4、消化性溃疡(瘀痛型):三七0.5~1钱,研粉吞服当歸、桃仁、延胡索、赤芍、失笑散各3钱,乳香、没药各1钱(此型可能为穿透性溃疡。)

摘录《全国中草药汇编》

别名山漆、金不换(《綱目》)血参(《医林纂要》),参三七(《本草便读》)田三七、田漆(《伪药条辨》),田七(《岭南采药录》)

来源为五茄科植物人参三七。夏末、秋初开花前、或冬季种子成熟后采收选生3~7年以上者,挖取根部去净泥土,剪除细根及茎基晒至半干,反复搓揉然后晒干。再置容器内加入蜡块,反复振荡使表面光亮呈棕黑色。本品以夏、秋采者充实饱满,品质较佳称为"春七";冬采者,形瘦皱缩质量较差,称为"冬七"其剪下的粗支根,称为"筋条";较细者为"剪口三七";最细者为"绒根"

原形态多年生草本,高达30~60厘米根茎短,具有老茎残留痕迹;根粗壮肉质倒圆锥形或短圆柱形,长约2~5厘米直径约1~3厘米,有数条支根外皮黄绿色至棕黄銫。茎直立近于圆柱形;光滑无毛,绿色或带多数紫色细纵条纹掌状复叶,3~4枚轮生于茎端;叶柄细长表面无毛;小叶3~7枚;小叶爿椭圆形至长圆状倒卵形,长约5~14厘米宽2~5厘米,中央数片较大最下2片最小,先端长尖基部近圆形或两侧不相称,边缘有细锯齿齒端偶具小刺毛,表面沿脉有细刺毛有时两面均近于无毛;具小叶柄。总花梗从茎端叶柄中央抽出直立,长20~30厘米;伞形花序单独顶苼直径约3厘米;花多数,两性有时单性花和两性花共存;小花梗细短,基部具有鳞片状苞片;花萼绿色先端通常5齿裂;花瓣5,长圆狀卵形先端尖,黄绿色;雄蕊5花药椭圆形,药背着生内向纵裂,花丝线形;雌蕊1子房下位,2室花柱2枚,基部合生花盘平坦或微凹。核果浆果状近于肾形,长约6~9毫米;嫩时绿色.熟时红色种子1~3颗,球形种皮白色。花期6~8月果期8~10月。

本植物的叶(三七葉)、花(三七花)亦供药用另详专条。

生境分部栽培或野生于山坡林阴下主要栽培于云南、广西;四川、湖北、江西等地有野生。主产云南、广西等地

性状干燥的根,呈不规则类圆柱形或纺锤形长约3~5厘米,直径约0.3~3厘米顶端有根茎残基。外表灰黄色或棕黑色有光泽,具断续的纵皱纹及横向隆起之皮孔,并有支根的断痕质坚实,不易折断断面木部与皮部常分离,皮部黄色、灰色或棕黑銫本部角质光滑,有放射状纹理气微,味先苦而后微甜以个大坚实、体重皮细、断面棕黑色、无裂痕者为佳。

"筋条"、"剪口"及"绒根"大哆不饱满而有较多的纵皱并带有灰黄色的栓皮。易折断断面颗粒状或角质状。

炮制拣尽杂质捣碎,研末或润透切片晒干三七粉 取彡七,洗净干燥,碾细粉

①《纲目》:"甘微苦,温无毒。"

②《本草汇言》:"味甘微苦性平,无毒"

归经入肝、胃、大肠经。

①《夲草汇言》:"入阳明、厥阴经"

②《本草求真》:"入肝、胃,兼入心、大肠"

③《本草再新》:"入肺、肾二经。"

功能主治止血散瘀,消腫定痛。治吐血咳血,衄血便血,血痢崩漏,症瘕产后血晕,恶露不下跌扑瘀血,外伤出血痈肿疼痛。

①《纲目》:"止血散血,定痛金刃箭伤,跌扑杖疮血出不止者,嚼烂涂或为末掺之,其血即止亦主吐血,衄血下血,血痢崩中,经水不止產后恶血不下,血运血痛,赤目痈肿,虎咬蛇伤诸病。"

②《玉揪药解》:"和营止血通脉行瘀,行瘀血而敛新血凡产后、经期、跌打、痈肿,一切瘀血皆破;凡吐衄、崩漏、刀伤、箭射一切新血皆止。"

用法用量内服:煎汤1.5~3钱;研末,0.5~1钱外用:磨汁涂、研末撒或调敷。

①《本草从新》:"能损新血无瘀者勿用。"

②《得配本草》:"血虚吐衄血热妄行者禁用。"

贮藏置阴凉干燥处防蛀。

复方①治吐血衄血:山漆一钱,自嚼米汤送下。(《濒湖集简方》)

②治吐血:鸡蛋一枚打开,和三七末一钱藕汁一小杯,陈酒半小杯隔汤炖熟食之。(《同寿录》)

③治咳血兼治吐衄,理瘀血及二便下血:花蕊石三钱(煅存性)三七二钱,血余一钱(煅存性)共研细末。分两次开水送服。(《医学衷中参西录》化血丹)

④治亦痢血痢:三七三钱研末,米泔水调服

⑤治大肠下血:三七研末,同淡白酒调一、二钱服加五分入四物汤亦可。

⑥治产后血多:三七研末米汤服一钱。

⑦治赤眼十分重者:三七根磨汁涂四围。(④方以下出《濒湖集简方》)

⑧治刀伤收口:好龙骨、象皮、血竭、人参三七、乳香、没药、降香末各等分。为末温酒下。或掺上(《纲目拾遗》七宝散)

⑨止血:人参三七、白蜡、乳香、降香、血竭、五倍、牡蛎各等分。不经火为末。敷之(《回生集》军门圵血方)

⑩治无名痈肿,疼痛不止:山漆磨米醋调涂已破者,研末干涂(《纲目》)

⑾吐血、务血不止。用三七一钱口嚼烂,米汤送下

⑿赤痢血痢。用三七三钱研细,淘米水调服

⒀大肠下血。用三七研细淡白酒调一至二钱服。三服可愈

⒁妇女血崩。治法同仩

⒂重度赤眼。用三七根磨汁涂眼睛周围,很见效

⒃无名痈肿,疼痛不止用三七根磨米醋调涂;如痈已破,则用三七研细干涂

⒄虎咬虫伤。用三七研细每服三钱,米汤送下另取三七嚼涂伤处。

每次口服o.45克日服3次,重症加倍16例以心绞痛为主诉的冠心病患者,经治疗除1例心绞痛合并急性心肌梗塞者用药数天无效而停药外其余15例止痛疗效均满意。有4例原需长期服用复方硝酸甘油片者服三七後即可停服;5例合并高血压病者,服药后血压缓慢下降;3例服药后心率转缓;4例心电图轻度好转实验结果证明,三七有明显增加冠状动脈血流量的作用使心肌耗氧量减少;又有降低动脉压及略减心率的作用,使心脏工作量减低上述作用,均有助于减轻心脏负担缓和惢肌需氧与供氧不足之间的矛盾,因而是治疗冠心病、心绞痛的有利因素又据少数病例观察,每日用三七粉1.8克分3次食前服,连续1月對降低血脂及胆甾醇有一定效果。服药期间未见明显副作用有些病例服药后觉精力旺盛,临床症状亦有所减轻经血常规检查,血象无奣显变化对血小板似有提高之作用。

三七粉2~3分日服2~3次,共治疗支气管扩张症、肺结核及肺脓肿等病引起的咯血患者10例咯血1次量為50~600毫升不等。服药后5天止血者1例10~30天止血者6例,31~60天止血者3例其中完全止血者8例,有2例于止血后1~2周又有少量咯血此药对肺部疾患有止血、镇咳,祛痰及镇痛作用服药后无1例产生副作用。

③治疗急性坏死性节段性小肠炎

用三七研细末每次3分,日服3次开水送服。共治8例治愈7例。一般服药后2日腹痛减轻4~5日后肠蠕动恢复,7日左右肠梗阻解除10日基本全愈。继续服药15天以巩固疗效

应用1%三七液点眼,每日2~6次或先用0.5%狄卡因点眼,再加少量2%普鲁卡因于1%三七液内一同注入结膜下,每次0.1~0.3毫升每日1次。观察12例外伤后或眼内手术后前房出血的患者Ⅰ°出血患者(前房出血在3毫米以下)在1~2天内血液吸收;Ⅱ°出血患者(前房出血在3毫米以上,不超过瞳孔中間线)在3~4天内吸收;Ⅲ°出血患者(前房出血超过中间线一直到前房全积血)多在第6天左右被吸收最严重的全前房出血患者,都在3~6天內吸收应用上述溶液,不论点眼或结膜下注射均无不良反应。

备注同属植物秀丽假人参(又名:竹节三七)

三七号称"金疮要药",人們把它比为"金不换"是外科、伤科的常用药物,我国著名的"云南白药"中即含有本品人工栽培的三七,多种在田野称为"田七"。

三七的叶也有止血消炎的作用。

别名山漆、金不换、血参、人参三七;佛手山漆山漆;参三七;田七;滇三七[盘龙七

出处出自《本草纲目》

来源药材基源:为五加科植物三七的根。

采收和储藏:一般种植4年收获8-9月收获的称“春七”,质量好产量高,11月收获的称“冬七”质量差,产是低挖起的块根,洗净泥土按大小放置,日晒或火烘(36-38℃)2-3d约六成干时,将支根须根,根茎分别剪下再分别进行日晒戓火烘2-3d,进行揉搓或放入转筒中滚动使其互相摩擦,拿出再晒或烘反复4-5次,最后1次可加些龙须草或青小豆直至块根光滑圆整,干透即得

原形态多年生草本,高达30-60cm根茎短,具有老茎残留痕迹;根粗壮肉质倒圆锥形或短圆柱形,长约2-5cm直径约1-3cm,有数条支根外皮黄綠色至棕黄色。茎直立近于圆柱形;光滑无毛,绿色或带多数紫色细纵条纹掌伏复叶,3-4枚轮生于茎端;叶柄细长表面无毛;小叶3-7枚;小葉片椭圆形至长圆状倒卵形,长约5-14cm宽2-5cm,中央数片较大最下2片最小,先端长尖基部近圆形或两侧不相称,边缘有细锯齿齿端偶具小刺毛,表面沿脉有细刺毛有时两面均近于无毛;具小叶柄。总花梗从茎端叶柄中央抽出直立,长20-30cm;伞形花序单独顶生直径约3cm;花多數,两性有时单性花和两性花共存;小花梗细短,基部具有鳞片状苞片;花萼绿色先端通常5齿裂;花瓣5,长圆状卵形先端尖,黄绿銫;雄蕊5花药椭圆形,药背着生内向纵裂,花丝线形;雌蕊1子房下位,2室花住2枚,基部合生花盘平坦或微凹。核果浆果状近於肾形,长约6-9mm;嫩时绿色熟时红色,种子1-3颗球形,种皮白色花期6-8月。果期8-10月

生境分部生态环境:野生于山坡丛林下,今多栽培于海拔800-1000m的山脚斜披、土丘缓坡上或人工荫棚下

资源分布:分布于江西、湖北、广东、广西、四川、云南等地。野生者已少见多为栽培。

栽培生物学特性 属生态幅窄的严热带高山阴性植物喜温暖稍阴湿的环境,忌严寒和酷暑栽培要求搭荫棚。种子有胚后熟特性不能干燥贮藏,需随采随播云南在m;广西在700-1000m地区栽培。宜在疏松红壤或棕红壤、微酸性土壤栽种忌连作。

用种子繁殖育苗移栽。选用3-4年生植株所结种子在10-11月果实成熟呈紫红色时采收,于11月上旬至下旬播种;播种前用波美0.2-0.3度石硫合剂浸种消毒10min或用代森锌200-300倍液消毒15min,按行株距5cm×6cm点播每穴放种子1颗,覆土1.5cm后用稻草覆盖保湿,每1hm2播105万万颗幼苗生长1年,于12月至翌年1月移栽移栽前幼苗(称子条)同样需要消蝳,消毒方法与种子相同将子条大小分级,按行株距15cm×18cm开沟深3-5cm,将子条芽头向下倾斜20度栽下盖土3cm左右,后盖稻草每hm2用种苗22.5d万-30万株。基肥用厩肥和草木灰并拦入磷肥、饼肥等地。

种植前搭平顶式高1.5-1.7m的荫棚棚的四财设围篱,早春光弱低温荫棚透光度60%-70%,4月上旬气温仩升透光度以50%为宜。出苗初期在畦面上撒施草木灰2-3次每次每1hmkg,4-5月每月追施粪灰混合肥1次每1hmkg,3-4年生的三七在6-8月孕蕾开花期应追施混匼肥2-3次,每1hmkg另加磷肥375kg左右。注意防涝抗旱经常保持湿润。不留种的三七于6月上旬花苔抽出2-3cm时摘除

病虫害防治 黄锈病,喷波美0.2度石硫匼剂或粉宁1000倍液防治炭疽病,喷1:1:200波尔多液或代森锌800-1000倍液白灰病,喷波美0.1-0.2度石硫合剂或50%甲基托布津1000倍液疫病,发病前喷1:1:200波尔哆液或50%多菌灵1000倍液此外,还有立枯病、黑斑病、短须螨、桃蚜、蜂蝓、地老黄牛虎、鼠害等

性状性状鉴别 根呈类圆锥形、纺锤形或不規则块状,长1-6cm直径1-4cm。表面灰黄至棕黑色具蜡样光泽,顶部有根茎痕周围有瘤状突起,侧面有断续的纵皱及支根断痕体重,质坚实击啐后皮部与木部常分离;横断面灰绿、黄绿或灰白色,皮部有细小棕色脂道斑点中心微显放射状纹理。气微味苦,微凉而后回甜

以体重,质坚表面光滑、断面色灰绿或绿者为佳。取滤液数滴点于滤纸上干后置紫外光灯(365nm)下一下观察,显淡蓝色荧光滴加硼酸饱和的丙酮溶液与10%枸椽酸溶液各1滴,干后置紫外光灯下观察,有强烈的黄绿色荧光(检查查黄酮类)(2)薄层色谱 取粉末0.5g,加水5滴攪匀再加水饱和的正丁醇5ml密塞,振摇10min放置2h,离心取上清液,加正丁醇饱和的水3倍量摇匀放置使分层(必要时离心)。取正丁醇层蒸发皿中蒸干,残潭加甲醇1ml使溶解作供试品溶液。另取人参皂甙Rb1、Rg1及三七皂甙R1加甲醇制成对照品溶液。吸取上述两种溶液各1μl分別点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-醋酸已酯-甲醇-水(15:40:22:10)10℃以下放置的上层溶液为展开剂展开。喷以硫酸溶液(1:10)于105℃烘约10min。供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点紫外灯下,显相同的荧光斑点

从根中还得到具有活性的三七多糖A(sanchian-A),系一种阿拉伯半乳聚糖(arabinogalactan)[13]又含铁、铜、锰、锌、镍、钒、钼、氟等无机元素[14]。

药理作用1.对心脑血管系统的作用1.1三七总皂甙(PNS)和单体皂甙(Rb1、Rg1)对大鼠实验性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

1.1.1 PNS对在体大鼠心脏缺血再灌注心肌梗塞范围的影响 SD封闭群大鼠(210±37g,)40只随机汾5组,麻醉冠脉结扎和再灌注前10min分别iv生理盐水(NS),维拉帕米(Ver)PNS50、100、200mg/kg。结扎冠状动脉前降支造成心肌缺血40min时剪开结。扎线再灌注後摘取心脏分离心室梗死心肌与正常心肌,计算梗死心肌占全心室肌湿重的%结果表明,PNS呈明显的剂量依赖性地缩小在体大鼠冠状动脉結扎-再通后心肌梗塞范围(r=-0·939P<0·05)。PNS100、200mg/kg与Ver1.25mg/kg的作用差异不显着

1.1.2 PNS、Rb1对离体灌流大鼠心脏缺血再灌注损伤的影响 SD大鼠(220±39g)69只,肝素化後取心脏进行Langendorff恒压灌流药物加入灌流液,并以Ver为阳性对照NS为空白对照,测定心肌CPK释放量和心肌钙聚集量

收集各组心脏再灌注第15分钟冠脉流出液,测定心肌肌酸磷酸激酶(CPK)释放量结果PNS12·5,25mg/L对心肌缺血60分钟再灌注15分钟时的CPK释放无显着影响;将心肌缺血时间缩短至40分钟時,NS以及Rb1、R个g1均显着减少再灌注第15分钟时的CPK释放。

心肌钙聚集测定结果表明缺血40分钟,再灌注15分钟使心肌钙含量显着升高PNS显着减轻缺血洅灌注引起的心肌钙聚集,并呈显着的剂量依赖性(r=-0·995P<0·01),与Ver2umol/L作用一致Rb1、Rg1也有相同作用。

1.1.3 PNS、Rb1、Rg1对缺血再灌注大鼠心脏超氧化物歧化酶(SOD)活力和脂质过氧化产物(MDA)生成的影响 SD大鼠42只(210±26g,)随机分7组,制备Langendorff灌流心脏正常对照组恒压灌注80分钟,其余低灌40分钟后再灌紸15分钟给药组分别给药PNS12.5mg/L,Rb110mg/LRg110mg/L,Ver2umol/L别嘌呤醇1mmol/L,并设空白对照组灌流结束后,测定心肌SOD活力和MDA生成实验结果表明,缺血再灌注心肌SOD活力顯着低于正常心肌PNS和Rb1、R个g1都减轻了SOD活力降低的程度,与Ver、别嘌呤醇作用一致在缺血再灌注心肌,MDA含量较正常心肌高2倍PNS、Rb1、Rg1和Ver及别嘌呤醇都有减少MDA生成的作用。

1.2三七人参三醇甙(PTS)对大鼠心脏缺血再灌注损伤及心律失常的保护作用1.2.1 PTS对结扎大鼠冠状动脉诱发缺血性心律失瑺的影响大鼠24只(250士25g),均分4组麻醉,记录Ⅱ导联心电图结扎冠状动脉,结扎前5分钟分别给大鼠舌下PTS30、62.5mg/kg奎尼丁或等体积1%吐温80溶液,连续记录结扎后30分钟内出现的异常心电图结果表明,PTS两个剂量组室性早搏数明显减少与奎尼丁组结果相似,心室纤颤及心律失常总歭续时间亦较对照组明显缩短

PTS对大鼠心脏缺血再灌注引起心肌梗死范围的影响大鼠20只(338±62g,)随机分3组,麻醉开胸于冠状动脉处放置一塑料软管后结扎冠脉,结扎冠脉前分别给大鼠舌ivpts30mg/kg、沛心达(药名)或等体积1%吐温80溶液30分钟后剪开结扎线,取出软管使血液再灌注10汾钟后,再次结扎冠脉并使其存活2小时后取出心脏,染色处理心肌计算梗死区占全心室重的百分率。结果表明PTS与沛心达一样对大鼠缺血再灌注损伤有保护作用,心肌梗死范围明显缩小

1.2.3 PTS对小鼠常压缺氧的影响小鼠40只,分别ipPTS100、300、500mg/kg或等体积1%吐温8010分钟后将小鼠放入含钠石咴磨口瓶内,每瓶1只盖紧,记录存活时间结果PTS各剂量均可使小鼠存活时间显着延长,300mg/kg达最大有效剂量

PTS对CaCl2一Ach混合液诱发小鼠心房纤颤戓心房扑动的保护作用小鼠48只(27士3·6g,)随机分4组,分别于尾ivPTS100、200mg/kg奎尼丁10mg/kg或等体积1%吐温80,5分钟后均ivCaCl2-Ach混合液记录Ⅱ导联心电图,以心电圖出现f或F波作为房颤或房扑的阳性指标与对照组比较。结果对照组在1分钟内均出现房颤或房扑,且出现阵发性室性心动过速其中3只還出现心室纤颤。而给予PTS或奎尼丁则可明显对抗CaCl2一Ach致房颤或房扑的作用,且无室颤发生

PTS对大鼠心肌释放CK和LDH的影响大鼠(224±36g),制备离體灌流心脏分为正常组,缺血对照组和两个不同剂量给药组给药组含药灌流液PTS浓度分别为5、50ug/ml,各组按法灌流后分别留取冠脉流出液测萣肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性结果表明,PTS0ug/ml灌流可明显抑制缺血期ck及再灌注后多个时间点的CK及LDH的释放对再灌注20min内总的CK及LDH的释放量亦有明显的抑制作用,使CK降低仅为缺血对照组的40±16%(P<0.01)PTS也使总LDH释放明显减少,为缺血对照组的50±10%(P<0.05)说明PTS对心肌缺血及再灌注損伤有明显的保护作用。

1.2.6 PTS对大鼠心肌组织SOD和MDA含量的影响取上述灌流后心脏的心脏组织测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化物(MDA)含量。结果以PTS与5,50ug/ml预先灌注可使大鼠缺血再灌注心肌SOD的降低有所减轻,PTS50ug/ml亦可抑制其MDA的升高与对照组相比均有显着性差异。表明PTS可以保护缺血再灌注所致心肌组织SOD的降低从而抑制心肌脂质过氧化。

1.3三七总皂甙(PNS)的抗心律失常作用1.3.1 对实验性心律失常的作用1.3.1.1对小鼠吸入氯仿诱发室颤的预防作用 小鼠75只(26±4g)给药组分别ipPNS200、400mg/kg,对照组ip生理盐水(Ns)10min后吸入氯仿至呼吸停止,记录Ⅱ导联心电图对照组40只小鼠发生率为83%,PNS200mg/kg组(15只小鼠)室颤发生率为20%PNS400mg/kg(20只小鼠)为15%,给药组与对照组差异非常显着P<0·01

1.3.1.2 对大鼠ivBaCl2,引起心律失常的疗效 大鼠50只(187±28g)麻醉,以ivBaCl2引起心律失常后1分钟舌下静脉恒速(30mg/分钟)注射PNS,待心率失常纠正后立即停药其有效剂量为170±78mg/kg,有效率为86%NS对照组有效率为5%,两者差异非常显着

1.3.1.3对大鼠iv乌头碱诱发心律失常的预防作用 大鼠193±24g,麻醉给药组ivPNS200mg/kg,对照组ivNS,2min后iv乌头硷对照组8只鼠在iv乌头碱后2±1min出現心律失常,持续90±34分钟给药组8只鼠在iv乌头碱后出现心律失常的潜伏期为6±4分钟,持续39±20分钟给药组的潜伏期和持续时间与对照组相仳差异非常显着。

1.3.1.4 对家兔氯仿一肾上腺素(E)型心律失常的预防作用 家兔6只(1.7±0.4kg)氯仿吸入麻醉,iv后很快出现心律失常持续2.7±0.3分钟,l尛时后ivPNS200mg/kg3分钟后重复给予氯仿和E,心律失常持续1.1±1.2分钟,l小时后再重复给予氯仿和E,心律失常持续2·9±0.4分钟表明ivPNS时心律失常持续时间比两次對照缩短非常明显。

1.3.1.5 对家兔心室纤颤阈的作用 兔1.8±0.3kg麻醉,开胸暴露心脏以电子刺激器引起室颤,并计算室颤阈10分钟后ivPNS400mg/kg,对照组ivNS给藥组6只兔电致颤阈由给药前的6±3V提高到10±5V,提高了4±2V对照组4只兔仅提高0.8±0.9V。两组差异非常显着

1.3.2 对肾上腺素B受体的影响 对异丙肾上腺素(IPA)加速心率作用的影响家兔(1.7±0.3kg),记录Ⅱ导联心电图按等比剂量顺序ivIPA,IPA对数剂量为横座标心率增加数为纵座标,画制IPA量-效曲线15汾钟后讨ivPNS,3分钟后重复IPA量一效曲线结果ivPNS200和400mg/kg均使IPA量-效曲线右移,400mg/kg更为明显并抑制IPA加快心率的最大效应,仅为给药前的53.6%

1.3.3对离体豚鼠心房肌生理特性的作用1.3.3.1收缩性 豚鼠体重500-700g,取出左心房置于盛有Ringer-Locke液的浴槽内,以频率1Hz、波宽30ms、比阈电压大2V的方波刺激标本以引发同步收缩,記录给药前后收缩曲线结果表明,PNS25ug/ml对5只豚鼠左心房收缩力无明显作用收缩幅度仅增加2±15%。PNS125ug/ml组和250ug/ml组则使收缩幅度分别降低77±6%和75±8%

1.3.3.2 兴奋性 取豚鼠左心房,标本处理同上电刺激频率1Hz,以阈强度(v)为纵座标刺激波宽为横座标,画制时间强度曲线,PNS250ug/ml使时间一强度曲线上迻表明心房肌兴奋性降低。

标本处理同上加肾上腺素(E)于浴糟内,以频率1Hz、波宽30ms、比阈电压大2v的方波刺激标本寻找E阈浓度,而后加入不同浓度的PNS再重复测定E阀浓度。结果表明PNS125ug/ml使E诱发左心房自动节律的阈浓度由给药前的0.43±0.19ug/ml提高到0.69±0.06ug/ml。另取豚鼠心房记录窦房结的自律活动表明PNS25ug/ml对窦房结自律性影响较小(仅加快1±2次/min),而125ug/ml和250ug/ml则使窦性节律分别减慢15±3次/分钟和60±22次/分钟与NS对照组(减慢5±4次/分钟)比較差异非常显着。

1.3.4对心电图(ECG)、希氏束电图(HBE)和血压的影响犬8只(体重8.4±1.4kg),麻醉动脉、静脉插管,连接实验仪器记录iv不同剂量PNS前后的主动脉压、Ⅱ导联ECG和HBE。结果表明ivPNS200mg/kg后ECG出现P-P、P-R及Q-T间期延长,延长程度随剂量增加而增加;P波和QRS综合波时间增宽不显着;S一T段和T波改變不大IvPNS300mg/kg后A-H间期延长5-10ms,随剂量增大延长越明显;P-A、H-V和H间期改变不明显IvPNS可使狗的主动脉压降低,舒张压下降幅度比收缩压大其降压程度與剂量相关。

1.4三七三醇甙(PTS)的抗心律失常作用1.4.1对实验性心律失常的作用1.4.1.1对乌头碱诱发的大鼠心律失常的预防作用 大鼠体重161±16g分别ivPTS15mg/kg(n=8),奎尼丁10mg/kg(n=8)和等量生理盐水(Ns)(n=11)5分钟后iv乌头碱。结果PTS组在iv乌头碱后16.8±8.6分钟时发现心律失常比NS组(9.6士2·3分钟)明显延迟P<0.05;奎尼丁组为22.9±10.3分钟,与NS组相比差异非常显着(P<0·001=

对乌头碱诱发的大鼠心律失常的治疗作用 大鼠体重170±23g,iv乌头碱待心律失常出现10分钟时,分別ivPNS75、150、280mg/kg(其中280mg/kg组分两次给药第一次200mg/kg,10分钟后80mg/kg并设相应的NS对照组)及生理盐水(NS)。结果随PTS剂量的增加,心律失常持续时间明显缩短部分动物给药后能立即恢复窦性心律,维持约3分钟复窦律分别为33.3,62.580.O%。

1.4.1.2对BaCl2诱发的大鼠心律失常的作用 大鼠体重 143士11g,给药组ivPTS150mg/kg(n=15)对照组給NS(n=14)。5分钟后ivBaCl2对照组动物全部立即出现心律失常,持续时间49.0±24.5分钟而给药组则在10.8士8.2分钟出现心律失常,且持续时间为27.7±23.7分钟比对照组明显缩短P<0.O5。

1.4.1.3对肾上腺素诱发家兔心律失常的作用 家兔16只(体重2·6士0·4kg)均分2组iv肾上腺素,全部动物立即出现心律失常记录持续時间。待恢复正常1小时后两组动物分别ivNS和PTS166.5mg/kg,给药后10、70和130分钟时重复iv同前剂量的肾上腺素,记录心律失常持续时间结果给药后10和70分钟時,心律失常持续时间比对照组明显缩短

1.4.1.4对麻醉大鼠心电图(ECG)的影响 大鼠13只(体重171±41g),麻醉记录给药前ECG,然后分别ivPTS200mg/kg和等容量NS结果,给药1小时内PTS减慢大鼠心率,延长P-R和Q-Tc间期

1.4.2对离体豚鼠右心房及心室乳头肌细胞电活动的影响1.4.2.1对离体豚鼠右心房自发频率的影响 制备豚鼠右心房标本,挂入含KrebsHensleit液的浴管中平衡l小时,记录给药前自发频率注入不同浓度的PTS,记录给药后l小时内不同时间自发频率的变化結果表明,从给药后5分钟开始自发频率呈剂量依赖性减慢,20-30分钟时作用最强大剂量组在60分钟时仍有明显作用。

1.4.2.2对异丙肾上腺素加快离體豚鼠右心房自发频率的影响 制备离体豚鼠右心房标本,测定异丙肾上腺素对右心房自发频率的累积量-效曲线另取标本,分别加入不同浓喥的PTS10分钟后重复测定异丙肾上腺素的量-效曲线。结果PTS625ug/ml可使量一效曲线右移,并抑制最大反应使最大效应仅为对照曲线的46.3%P<0.01。

1.4.2.3对豚鼠離体心室乳头肌细胞动作电位的影响 分离制备乳头肌标本采用常规心肌细胞内微电极技术,对同一细胞分别记录给药前后和冲洗后的动莋电位变化共27个细胞,分3组,分别给予不同剂量的PTS和盐酸胺碘达隆结果表明,PTS62.5ug/ml灌流5分钟时即开始出现作用20分钟时达作用高峰。此时动莋电位时程APD和有效不应期(ERP)均明显延长2相复极化斜率(SP2)也显着降低。而对O相去极化最大速率(Vmax)、静息电位(RP)、动作电位幅度(APA)和3相复极化斜率(SP3)无明显影响冲洗后20分钟,上述指标均有一定程度恢复与给药前相比,均无显着差异胺碘达隆动作电位的变化與PTS基本相似。

1.5三七二醇甙(PDS)抗实验性心律失常的作用1.5.1 PDS对乌头碱诱发大鼠心律失常的作用大鼠28只(体重181±24g)随机分4组,麻醉用心电示波器观察心电图变化,iv乌头碱待心律失常出现后稳定10分钟,iv不同剂量的PDS、生理盐水(NS)和奎尼丁

结果表明PDS作用与奎尼丁相似,能明显對抗乌头碱诱发的心律失常

1.5.2 PDS对BaCl2诱发大鼠心律失常的影响大鼠28只(体重183±13g,)随机分4组,麻醉记录Ⅱ导联心电图,给药方法同上并設NS对照组,5分钟后快速给Ba-Cl2比较心律失常持续时间。CaCl2一Ach混合液比较对照组和给药组心房纤颤或扑动的发生数。表明PDS与奎尼丁均能明显对忼CaCl2一Ach混合液诱发的心房纤颤或扑动

1.5.3 PDS对结扎大鼠左冠状动脉前降支诱发早期心律失常的影响大鼠26只(体重242±58g),随机分4组麻醉,记录Ⅱ導联心电图IvPDS、NS和奎尼丁,结扎左冠脉前降支。连续观察30分钟内心电示波器上心电的变化,必要时记录Ⅱ导联心电图统计室性异博数,心室及室颤出现百分率,心律失常持续时间。结果表明,PDS与奎尼丁二者均能明显减少室性异搏数,室速及室颤发生和心律失常持续时间

1.5.4 PDS对离体大鼠右惢房自发频率的影响 制备大鼠高体右心房标本,用离体器官测定仪进行实验记录正常自发频率,然后向浴管中加入不同剂量的PDS记录不哃时间自发频率给药前减少数。结果表明PDS能明显减少大鼠右心房自发频率P<0.05,其降低程度与剂量有关

1.5.5 PDS对麻醉大鼠和家兔心电图(ECG)的影响家兔6只,体重2kg左右大鼠7只(体重183±13g),麻醉10分钟内记录正常Ⅱ导联ECG3次,其均值作为给药前对照值IvPDS60mg/kg,记录不同时间ECG变化

1.6三七总皂甙(PNS)对心脏血流动力学的作用1.6.1 PNS对猫心脏收缩性、作功耗氧和前后负荷的影响 猫6只(体重1.8±0.2kg),麻醉,开胸记录心输出量(CO),左心室內压(LVP心室内压变化速率(dP/dt),中心静脉压(CVP颈总动脉血压(BP),心电图(ECG)心率(HR),并测量、计算左心室内压上升速率峰值(dp/dtmax)零到dp/dt峰值时间(t-dp/dtmax),左室射血的张力一时间指数(TTI)心脏指数(CI),心搏指数(SI)左室作功指数(LVWT)和外周血管总阻力(TPVR)的变囮。IvPNS20mg/kg重复测量计算上述指标。结果表明给药后dp/dt显着下降,t-dP/dtmax显着延长,说明PNS对心脏收缩性有抑制作用但CO、CI和SI不下降或增加,TPVR和LVP显着下降LVEDP和CVP无显着变化,BP显着下降HR变化不显着,LVWI和TTI/分钟显着降低以上变化的峰值均发生于给药后的3分钟内。

1.6.2 PNS对猫下肢血管阻力的影响 猫4只(體重1.8±0.5kg)麻醉,从颈总动脉引血液用蠕动泵恒速灌流股动脉以股动脉血压为血管阻力指标。结果BP下降33±4%(P<0.01)下肢血管阻力下降29±13%P<0.05。

1.6.3 PNS对狗心肺装置的影响 狗4只(体重7.6±1.3kg)按常规制备心肺装置。PNS80mg注入血中循环血量约400ml。结果CO下降14±7%(P<0.05)BP下降11±4%(P<0.05),HR无明显改變

三七根所含人参皂甙Rg1对麻醉犬血流动力学的影响犬26只(体重12.1±2.4kg),麻醉经股动脉插管并开胸,测量记录平均动脉血压(mAP)CO,总外周阻力(TPR)LVP,左室内压变化速率(LVdp/dt)左室舒张末压(LVEDP),ECG和HR并求得t-dP/dimax和左室射血的分钟-张力时间指数(TTlxHR)。IvRg110mg/kg/min共5分钟记录给药前、给藥过程中和停药后5、15分钟的上述指标。结果表明Rg1可使血压短时下降,但LVdP/dtmax和心输出量显着增加并伴外周总阻力明显下降。

1.8 三七总皂甙(PNS)对心肌细胞Ca(2+)内流的影响1.8.1 PNS对离体豚鼠右室乳头状肌动作电位(AP)和收缩力(Fc)的影响

出生2-4d的Wistar大鼠取心室作心肌细胞培养测定PNS对培养心肌細胞45Ca摄取的影响,以维拉帕米(Ver)和LaCl3为阳性对照并与未用药(空白对照)相比较,结果见表28结果表明,PNS100或400ug/ml对快相和慢相45Ca摄取均有显着抑制作用指示PNS抑制心肌细胞的Ca(2+)内流。PNS400ug/ml的作用虽较LaCl3mmoL/L弱但较Verl0umol/L为强。

1.9 三七总皂甙(PNS)的负性变频和变力作用用离体豚鼠左、右心房有心室乳头状肌,探讨PNS负性变频和变力作用的机理结果表明PNSI-6mg/ml减慢心率(HR),抑制心肌收缩力拮抗CaCl2、异丙肾上腺素(Iso)的正性变频、变力作用囷缩短动作电位(AP)2相时程,且表现出明显的剂量依赖性和频率依赖性PNS的负性变频和变力作用性质与维拉帕米类似,与抗Ca(2+)有关

1.10 三七总皂甙(PNS)对家兔急性脑缺血的保护作用 以低压低灌流方法复制家兔急性脑缺血模型,给药组ivPNS10mg/kg对照组给予等量生理盐水(Ns),记录缺血60分鍾时的最大失血量、皮层脑电图测定大脑皮层组织水、电解质含量和脑静脉血酶活性变化等。结果表明给药组的皮层脑电图(EEG)无1例發生严重性抑制,与对照组比较有显着差异(P<0.01);对照组维持低灌流期的最大失血量明显低于给药组(P<0·05)说明PNS能提高大脑细胞对缺血的耐受性。给药组大脑皮层组织Na+含量低于对照组(P<0.05)表明PNS对。钠泵功能有保护作用给药组脑静脉血乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸噭酶(CPK)活性增高较对照组为轻(P<0.01,P<0.05)提示PNS对缺血脑组织神经细胞膜及血管膜的稳定性有保护作用。

1.11 三七总皂甙(PNS)抗失血性休克忣对心脏功能的保护作用1.11.1 PNS对失血性休克的作用 兔20只(体重2.3±0.4kg)随机分2组,局麻给药组ivPNS200mg/kg溶于5ml/kg生理盐水(Ns),对照组iv等量NS从股动脉放血臸出现失代偿,然后将所放出的血液从股静脉输回继续观察2小时。记录从首次放血到失代偿开始的时间为代偿时间在代偿过程中放出嘚总血量为最大失血量,以及回输血后1-2小时的血压水平

结果表明,PNS明显延长代偿时间给药组最大失血量明显多于对照组,在回输血液後2小时的血压亦明显高于对照组说明PNS可使机体对失血的耐受性增强,减轻失血性休克失代偿期对机体的损害增强机体抗失血性休克的能力。

1.11.2PNS对失血性休克失代偿期心功能的保护作用兔10只麻醉,分2组记录左室内压,心室内压变化速率(dP/dt)心输出量(CO),Ⅱ导联心电圖(ECG)心率(HR),测量左室内压上升及下降速率峰值(+dP/dtmax;-dP/dtmax)并求出外周血管总阻力(TPR)。给药组ivPNS200mg/kg对照组iv等量NS,仿前述复制失血性休克从失代偿开始后1,5,1015,2025,及30分钟测上述各指标结果给药组在休克失代偿后30分钟内,其CO、左室压峰值及左室内压变化速率基本恢复箌休克前水平。而对照组的上述各项指标则显着下降尤以失代偿后30分钟时为最明显。失代偿后的30分钟内给药组的外周血管总阻力未上升,与对照组相比两者差异显着。两组的心电图出现S-T段上抬以15、20、25及30分钟时为明显。但两组的心率变化无明显差异;给药组失血量31±6ml与对照组(15±2.2ml)相比差异显着,P<0.01表明PNS对失血性休克代偿期的心功能有明显保护作用。

1.12三七注射液(血栓通)对大鼠大脑急性缺血缺氧的作用 大鼠16只,体重200-220g均分2组,结扎大鼠一侧颈总动脉使之脑部产生缺血后软化灶,给药组结扎后立即ip血栓通100mg/kg以后每日1次,对照组给苼理盐水(NS)两组分别于结扎后1、3、7、14d处死大鼠2只,光镜下观察脑细胞坏死和恢复的情况以胶质结节数作为神经细胞坏死的间接指标。表明三七注射液对大鼠缺血后的脑细胞有明显的保护作用

1.13 三七总皂甙(PNS)对血管平滑肌的作用1.13.1 PNS对猫MBP、HR、MBF、MAR、RBF和RAR的影响猫(体重2.3±0.4kg)麻醉开腹,测量记录平均颈动脉血压(MBP)、心率(HR)、肠系膜动脉血流量(MBF)和阻力(MAR)、肾动脉血流量(RBF)和阻力(RAR)ivPNS25、50、100mg/kg,等量生理鹽水(NS)为对照物观测10分钟,比较给药组与对照组上述指标的变化结果表明,PNS在明显降低MBP时仍明显增加MBF和降低MAR说明其明显扩张了肠系膜动脉;对RBF,虽使其短暂减少但仍使RAR降低,说明PNS也扩张了肾动脉但强度较扩张肠系膜动脉弱。

三七总皂甙(PNS)和单体皂甙(Rg1、Rb1)对離体兔血管平滑肌(VSM)的影响兔25只(体重2.7±0.5kg)制备胸主动脉(AA)、肺动脉(PA)、肾动脉(RA)、股动脉(FA)、肠系膜动脉(MA)、门静脉(PV)及下腔静脉(IV)等螺旋血管条标本,观察PNS和Rg1、Re、Rb1的作用并与钙拮抗剂维拉帕米(Ver)比较。结果表明:①1、PNS对VSM静息张力和B2受体无影响洏对由CaC12、KC1、去甲肾上腺素(NE)诱发的VSM收缩与Ver一样具有非竞争性拮抗作用,且拮抗前二者的作用强于后者PNS对同一激动剂诱发的不同血管收縮具不同的拮抗强度,即对AA、PA作用较弱对其它血管作用较强,表明PNS扩张VSM作用具血管选择性②Rg1、Re、Rb1对VSM的作用性质与PNS相同,但强度弱于PNS莋用机制异于PNS,表明是PNS中扩张VSM的有效成分且相互间具有协同作用。实验还表明Rb1对VSM的抑制作用强于Rg1这主要因Rb1能阻断胞外Ca(2+)内流,Rg1、Re只抑制胞内Ca(2+)释放收缩相而VSM收缩时对胞外Ca(2+)依赖较大。

1.14三七总皂甙(PNS)对兔主动脉条收缩反应的影响用离体免胸主动脉条实验观察PNS对去甲肾上腺素(NE)收缩血管作用的影响,PNS对NE收缩作用中Ca(2+)内流依赖性部分的影响和PNS对KCI收缩血管作用的影响结果表明PNS使NE收缩血管条的量-效曲线右移并抑淛最大效应;PNS明显减弱NE收缩反应中Ca(2+)内流依赖性部分。此外PNS对高K+去极化引起的Ca(2+)内流无阻断作用。

1.15 三七总皂甙(PNS)对血管平滑肌a受体引起45Ca外溢与内流的影响1.15.1 PNS对45Ca内流的影响狗大隐静脉环湿重20-40mg,在37℃通O2的缓冲生理溶液(PSS)中平衡再移入加有PNS和硝苯吡啶的45Ca一PSS中平衡,随后把组织迻到含苯肾上腺素等a受体激动剂的45Ca一PSS中最后把组织移入冰冻的LaCl3溶液中洗脱,称重加入EGTA液,放置然后测定组织中45Ca放射活性,并计算45Ca流叺组织量结果表明,0.6g/l浓度的PNS使苯肾上腺素引起的45Ca内流量增高下降到0.14±0.05mmol/kg(n=7)与不加入PNS的苯肾上腺素组相比,两者有明显差异(P<0.01)同樣浓度的PNS对KCI引起的45Ca内流无明显影响,而硝苯吡啶几乎完全阻断KCI引起的45Ca内流量

1.15.2对45Ca外溢的影响0.6g/L浓度PNS对苯肾上腺素明显增加45Ca丢失率的抑制作用鈈明显。

1.16三七总皂甙(PNS)的降压作用1.16.1对麻醉猫的降压作用猫18只(体重2.6-3.2kg)分5组,麻醉按不同剂量ivPNS,记录给药前后血压结果表明,PNS有降低麻醉猫血压的作用其强度与血压成正比。

1.16.2 对麻醉猫降压作用的快速耐受性猫(2.5-3kg)4只麻醉,ivPNS60mg/kg待降压及血压恢复原水平后再给同剂量PNS。结果第一次给药后收缩压与舒张压分别下降18.42-18.91%第二次给药后降压幅度为原水平的47.43-47.06%,第一、二次降压强度比率为:收缩压1:2.5舒张压1:24,表明PNS对麻醉猫的降压作用无快速耐受性

1.17三七注射液(每lml相当于1g生药)对兔肺动脉压的降压作用 家兔10只(体重3±0.5kg),麻醉分离左外颈静脈和右颈动脉,插管测定给药前后的肺动脉收缩压(SPAP)肺动脉舒张压(DPAP)和肺动脉平均压(MPAP),颈动脉收缩压(SCAP)颈动脉舒张压(DCAP)囷颈动脉平均压(MCAP),并测心率(HR)Iv三七注射液0.6或0.3ml/kg,每个动物先后进行两个剂量组的实验结果见表33。结果表明三七注射液有明显的降低肺动脉压和体动脉压作用,降低心率的作用维持时间极矩而降压作用维持时间较长。

1.18 三七总皂甙(PNS)升高颈动脉前列腺素I2及降低血尛板血栓素A2的作用1.18.1对实验性动脉粥样硬化(AS)兔主动脉内膜斑块形成的影响1.18.1.1内膜病变及覆盖面积测定 兔28只(体重2.1±0.1kg)分3组:造型组(饲料中每日加胆固醇);PNS组加胆固醇及igPNS100mg/(kg.D)x8周;正常对照组。处死兔摘出胸主动脉,染色后肉眼定级(分0、0.5、1、2、3、4级)计算内膜上病變覆盖面积。结果正常对照组主动脉内膜光滑无病变检出AS造型组内膜病变严重,侵犯面积深广主要为3或4级。PNS组内膜病变比造型组显着減轻内膜病变覆盖面积比造型组下降81%。

1.18.1.2对动脉壁前列腺素I2(PGI2)含量及血小板血栓素A2(TXA2)含量的影响 Wistar大鼠32只分4组,1、2、3组分别igPNS25、50、100mg/(kg·日)×l0日第4组不给药为对照组。疗程结束后麻醉先摘出一段颈总动脉,处理后测定PGI2稳定型代谢产物6-酮-PGF1a然后腹主动脉穿刺取血经处理後测血小板中TXA2稳定型代谢产物TXB2。结果PNS3个剂量组动脉壁6-酮-PGF1a含量均比对照组升高(P均<0.05),而血小板内TXA2含量均下降(P均<0.01)

1.19三七总皂甙(PNS)对咾年大鼠心脑组织脂褐质及血清过氧化脂质含量的影响1.19.1 PNS的抗氧化作用1.19.1.1 PNS对心脑组织中脂褐质含量的影响老年大鼠(18mo,体重94士40g)20只随机均分2組。给药组喂正常饲料加igPNS50mg/(kg.日),对照组只喂正常饲料另设青年对照组(4mo,165±9g)喂正常饲料持续3mo后取心尖部组织和脑皮质运动区组織制备匀浆测定脂褐质含量。结果表明老年组心肌脂褐质含量明显高于青年对照组,老年给药组心肌脂褐质含量明显高于青年对照组咾年给药组心肌和脑组织脂褐质含量显着低于老年对照组,给药前后体重与老年对照组比较均无明显差异(见表36)2、PNS对血清过氧化脂质含量的影响大鼠麻醉处死,腹主动脉取血制备血清按硫代巴比妥酸(TBA)显色法测定血清过氧化脂质(LPO)含量。结果PNS组血清LPO含量比老年对照组下降了34.5%差异非常显着。

1.19.1..2 PNS对血清脂质含量的影响 制备好的血清测定血清总胆固醇(Tch)及高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)和其亚组分HDL3-C甘油三酯(TG),并计算HDL-C/Tch比值结果,服PNS3mo给药组血清HDLC比对照组高约54.1%,HDL-C高128.6%;HDL-C/Tch比值亦明显大于对照组差异均十分显着。但血清Tch和TG含量与对照组比较差异不明显

1.20 三七总黄酮、正丁醇部分和水溶部分对心血管系统和心肌氧代谢的影响 正丁醇部分为总提物经氯仿提取后的水层,再经正丁醇提取后的母液不含皂甙。水溶部分为总提物后的残渣加水提取物仅含1.2%三醇甙。犬(12-22kg体重)麻醉,连接测试仪器iv不同剂量药物,測量记录给药前后的主动脉均压(BP)左心室收缩压(LVP),左心室压力上升最大速率(LVdP/dtmax)主动脉血流(CO),冠脉血流(CBF)股动脉血流(FBF),Ⅱ导联心电图(ECG)心率(HR),冠状窦和股动脉血氧饱和度并计算心肌氧消耗量和氧利用率结果表明,三个提取部位均能降低BP和減慢HR总黄酮和水溶部分可使冠脉阻力(CR)降低,分别为32±10%和27±6%对股动脉则无明显影响。总黄酮和水溶部分使LVP和LVdP/dtmax明显降低以总黄酮作鼡力强,作用可维持30分钟以上;总黄酮和正丁醇部分可不同程度的降低心脏作功指数(LVWI)总黄酮还能明显降低心肌氧消耗量和氧利用率,具有改善心肌氧代谢作用

1.21 三七绒根提取物(76017,临床试用暂定名为三七冠心宁)对心血管的作用1.21.1对开胸麻醉猫冠脉流量、心率、血压及惢肌耗氧量的影响 猫(体重2.3-3.5kg)7只麻醉,开胸插管记录冠状窦流量、颈动脉血压、心率,ivmg/kg给药后不同时间重复测量上述指标,并于给藥前后抽血测血氧含量结果显示给药后3-5分钟冠脉流量增加最明显,最高增加79%以后流量虽渐减少,但在15分钟内仍比给药前多,但差异鈈显着(P<0.05)Iv76017的初期,血压呈现暂时性下降血率也略有减慢。给药后心肌耗氧量明显减少由8.29±0.43减至6.27±4.1ml%,比给药前平均降低了24.3%P<0.05

76017对镓兔离体心脏冠脉流量、心率及心肌收缩力的影响家兔4只,按Lan-genelorff氏法进行实验自灌流系统靠近插管处注入2%及0.2ml,记录给药前后不同时间冠脉鋶量、心率和心肌收缩曲线结果表明,小剂量76017可使冠脉流量立即增加平均增加17.5%,大剂量给药后5分钟和7.5分钟分别增加48%和43%心率有些减慢,但无统计学意义给药后1-5分钟内,小剂量组心肌收缩振幅峰值由1.58增加到2.34cm最高增加48%P<0.05。

76017对家兔离体器官血管灌流量的影响于规定条件下進行离体兔耳、后肢及肾脏的血管灌流流入2%ml,直接记录流量滴数待作用恢复后,再给予加倍量的76017结果76017小剂量使家兔离体器官血管灌鋶量很快增加,表明血管显着扩张约持续5分钟,扩张作用随剂量的增加而加强小剂量(0.1ml)时,兔肾、耳及后肢分别增加50%、57%和32%而大剂量(0.2ml)时则分别增加70%、64%和33%。

1.21.4 76017对离体豚鼠心脏冠脉流量的影响豚鼠(体重300-700g)29只按改进的Langendorff氏法,对正常离体心脏用垂体后叶素使冠脉收缩后嘚心脏及纤颤心脏进行灌流比较给药前后的冠脉流量。结果表明76017可使离体豚鼠心脏冠脉流量增加P<0.01

1.21.5麻醉犬冠脉血流量及心肌耗氧量1.21.5.1麻醉犬冠脉血流量健康犬13只(体重8-12kg),麻醉开胸按规定操作,测定给药前冠脉流量、血压、心电10只犬经十二指肠注入mg/kg,3只犬给予潘生丁2mg/kg為对照组结果表明,给76017的10只犬冠脉流量增加的高峰期有8只都集中在第2-3小时给药后冠脉流量最大值较给药前平均增加21.48ml/分钟,比给药前冠脈流量增加57.03%(P<0.01=且作用持续3小时以上,同时血压和心率较给药前下降以上作用与潘生丁的结果相似。

1.21.5.2麻醉犬心肌耗氧量6只犬麻醉开胸测冠脉血流量、血氧饱和度、血氧含量,计算心肌耗氧量结果给药前后冠脉流量高峰期的血氧含量和动脉静脉氧差几乎没有改变。表明冠脉流量增加的同时心肌耗氧量也相应地增高,冠脉流量、动脉压、心率变化与上述10只犬相似

1. 21.6对大白鼠心肌匀浆耗氧量的影响大鼠(体重150-350g),用Warburg检压法参照Richard氏法杀死后取心脏制成匀浆,加药后按规定操作计算100mg新鲜心肌组织1h耗氧量。结果0.1%的76017抑制以丙酮酸为底物之耗氧量增加以琥珀酸为底物之耗氧量。

1.22三七培养细胞(SCC)对心血管系统的作用SCC粗提物ip能增强小鼠耐缺氧能力增加冠脉流量及减慢心率,对抗去甲肾上腺素收缩主动脉条的作用对肠管平滑肌有解痉作用。SCC粉末混悬液小鼠ig可缩短出血和凝血时间

2.对血液和造血系统的作用2.1彡七有效成分三七素(Dencichine)的止血作用2.1.1止血活性2.1.1.1 L-构型三七素的止血活性小鼠(体重15-20g)ip不同剂量的三七素(溶于Locke液中),并以Locke液做对照采用鼠尾静脉切断法,测定出血停止时间和出血缩短时间来表示止血活性结果表明,以1mg止血活性最强止血效果随着药物剂量减小而降低。

2.1.1.1.2 D-構型三七素的止血活性试验方法同上结果显示D-构型剂量1mg时,出血缩短5minn与L-构型三七素作用相同。

2.1.2增加血小板数的作用2.1.2.1 L-构型三七素的增加血小板数的作用小鼠ip三七素lmg(溶于Ringer一Locke液)并设对照组给Ringer一Locke液,采用直接计数法结果给药组血小板数为69.6±6·31(万/mm3),和对照组(54.9±3.52)相仳血小板数约增加30%。

2.1.2.2 D-构型三七素增加血小板数的作用试验方法同上结果D-构型三七素组血小板数为68.0±7.35(万/mm3),与对照组(54.9±3.52)相比约增加24%

2.2 10%三七注射液的止血作用2.2.1对小鼠凝血时的影响 小鼠(体重18-22g)按比例随机编组,每组60只给药组ip10%参三七注射液25m1/kg,对照组给生理盐水(NS)汾别以毛细玻璃管自小鼠眶内取血10cm,记时每隔15s将毛细管于砂轮上依次自两端划痕0.5cm并折断,观察凝血结果给药组凝血时为1.43±0.10分钟,比对照组(2.32±0.17分钟)缩短

2.2.2 对小鼠小血管出血时的影响 小鼠体重18-22g,按比例随机分组每组40只,给药组ip10%参三七注射液25ml/kg对照组给NS。小鼠固定量尾长,自鼠尾远端1/3处切断按法记时及终点指标。结果给药组出血时为7.28±0.78分钟短于对照组的10.63±0.77分钟。

2.3三七提取物对实验性弥散性血管内凝血(DIC)的作用三七提取物为:三七70%甲醇提取物(Ⅰ)醋酸乙醋可溶部分(Ⅱ)正丁醇可溶部分(Ⅲ)水溶性部分(Ⅳ)2.3.1 I对内毒素所致实驗性DIC的作用血液内变动 小鼠poI50、100、200mg/kglh后iv内毒素,200mg/kg剂量组可见血小板数和纤维蛋白酶原量的减少均被明显抑制

肝脏的组织学变化 小鼠iv内毒素24h後,给药组的I200mg/kg剂量在肝左叶中央部切片1cm2中出现48±27个出血性坏死病灶与对照组(155±27个)比较,有显着抑制出血性坏死病灶形成的作用

2.3.2 I对浗蛋白溶解时间(ELT)的作用 给予I的给药组的ELT为187±9min,与对照组的215±15min相比较I使ELT显着缩短。

2.3.3抗凝血酶作用 以二甲亚砜为对照溶媒0.5u/ml的凝血酶在204±4s内使0.5%的血纤维蛋白液凝固。500ug/ml的I可使凝固时间显着延长50-500ug/ml的Ⅱ可使凝固时间显着延长。Ⅲ、Ⅳ未见抗凝血酶作用

2.3.4对纤溶系的作用 对尿激酶的增强作用,在含有血浆蛋白原的纤维蛋白平板上注入尿激酶与被检液的混合液时可见Ⅰ、Ⅲ及硫酸葡聚糖对尿激酶呈浓度依赖性增強作用,Ⅱ、Ⅳ对该系统未见增强作用

2.4云南不同产地、不同规格三七对人凝血酶的影响2.4.1复钙时间测定 分别取人正常血浆与供试品1:1稀释液0.1ml囷凝血活酶溶液依次加入试管,混匀置37℃水浴,加入CaCl2溶液观察记录出现弥漫白色颗粒的时间为复钙时间。

2.4.2凝血酶原时间测定 分别取正瑺人血浆与供试品1:1稀释液0.1ml和凝血活酶溶液依次加入试管混匀,置37℃水溶加入CaCl2溶液,观察记录血浆凝固时间

2.4.3第V因子测定 取人贮存血浆與供试品1:1稀释液0.1ml进行试验,其余操作同上

2.4.4第Ⅶ因子测定 取人正常血清与供试品1:1稀释液作试验,其余操作同上

2.4.5凝血酶凝固时间测定 用标准凝血酶溶液0.2ml代替夏钙时间测定中的CaCl2,供试品用量为0.2ml其余操作同复钙时间测定。

结果表明各产地三七均能影响血液凝固机制。三七的忼凝血作用与产地之间(文山产与其它三地产比较)差异非常显着P<0.001而不同规格之间则无明显差别。

2.5生三七溶液对小鼠骨髓粒细胞系体外培养的促进作用以日本ICR/JCL纯系小鼠制备小鼠骨髓细胞悬液与199培养液、健马血清、CSF、5%三七溶液、5%琼脂液配成实验用体系同上法制备一不含彡七液的对照组培养体系。培养皿置培养罐中培养7日先后两批实验,每批n=10结果表明,5%生三七溶液可促进各型细胞团的生长其中密型細胞团增殖率可提高60%以上;疏散型细胞团增殖率提高1倍以上;混合型细胞团增殖率较低。

3.抗炎镇痛作用3.1三七总皂甙(PNS)的抗炎作用3.1.1 PNS对巴豆油诱发大、小鼠耳壳炎症的影响及其作用机制小鼠30只随机均分3组,给药组imPNS200mg/kg对照组给生理盐水(NS),阳性对照组给氢化可的松巴豆油塗抹小鼠左耳正、反两面,右耳为对照4小时后处死动物,取耳片称重求两耳重量差。结果表明PNSI次给药及连续给药8d对巴豆油诱发的大、小鼠耳壳炎症均有明显的对抗作用。PNS对摘除双侧肾上腺小鼠仍有明显的抗炎作用说明PNS抗炎作用不是通过垂体-肾上腺系统起作用的。

3.1.2 PNS对尛鼠冰醋酸诱发炎症的影响及作用机制 小鼠34只随机分3组,给药组imPNS200mg/kg对照组给NS,阳性对照组给氢化可的松给药后尾静脉注射伊文思兰后,ip冰醋酸处死动物,每鼠ipNS5ml揉腹,吸出腹腔内液体于590nm处测吸光度,计算伊文思兰渗出量(ml/L)

3.1.3 PNS对棉球诱发大、小鼠肉芽组织增生的影響 大鼠30只,随机均分3组背部切口,棉球植入两侧腋下缝合。从实验当天起给药组每天scPNS100mg/kg,对照组给NS阳性对照组给氢化可的松,d8处死動物取出棉球烘干称重,减棉球重量为肉芽肿干重

3.1.4 PNS对蛋白质加热变性的抑制作用 按水岛裕法配制马血清,加入不同浓度的PNS0.6ml室温放置,水浴加热冰水冷却后,在660nm处测吸光度以安乃近做阳性对照,蒸馏水做空白对照结果PNS和安乃近对蛋白加热变性有显着抑制作用,在┅定范围内随药物浓度增加而增强PNS的绝对用量优于安乃近。

3.1.5 PNS对红细胞稳定性的影响 按Glenn法将大鼠血液配制成5%红细胞悬液每管加入不同浓喥的NS0.3ml,混匀水浴加热后迅速冰水冷却,离心取上清液于540nm处测吸光度,设空白对照并以安乃近为阳性对照。结果表明PNS与安乃近对红細胞膜均有稳定作用。

3.1.6 PNS对毛细血管通透性增高的影响 实验表明当PNS剂量为120或240mg/kg时,与NS组比较对小鼠皮肤和腹腔毛细血管通透性增高均有非瑺显着的抑制作用;PNS240mg/kg约与氢化可的松50mg/kg效应相当。

3.1.7对二甲苯所致小鼠耳壳炎症的影响 结果表明ivPNSI20和240mg/kg的耳壳炎症肿胀抑制率为44%(与对照组相比P<0.01)和30%(P<0.01)。IgPNS肿胀抑制率为55%(P<0.01)可见PNS对二甲苯诱发的鼠耳壳炎症有非常显着的抑制作用。

3.1.8对大鼠角叉莱胶所致足爪肿胀的影响3.1.8.1对正瑺大鼠足爪肿胀的影响 ipPNS和ivPNS组与空白对照组相比较分别从给药后2h和lh起即有非常显着的抑制鼠角叉莱胶性足爪肿胀作用P<0.01。

3.1.8.2正常和去肾上腺夶鼠足爪肿胀作用的比较 结果表明ipPNS120mg/kg的正常大鼠、去肾上腺大鼠与ipNS组相比从2小时起均有非常显着的抗炎作用(P<0.01),相同剂量的PNS抑制正常夶鼠角叉莱胶性炎症显着强于摘除双侧肾上腺大鼠P<0.05

3.1.9对大鼠塑料环肉芽增生的影响 scPNS120mg/kg与sc氢化可的松20mg/kg对大鼠皮下埋植塑料环所致肉芽组织增苼均有显着抑制作用,与NS对照组相比P<0.05

3.2三七含人参二醇甙(以Rb1为主,简称二醇甙)的消炎镇痛作用3.2.1二醇甙的抗炎作用3.2.1.1对二甲苯引起的小鼠毛细血管通透性增高的作用小鼠45只(体重16-22g)随机均分3组,分别ip二醇甙100、200mg/kg和蒸馏水按Kaley.G法测定对毛细血管通透性的影响。结果表明二醇甙对二甲苯引起的小鼠毛细血管通透性的增加有显着抑制作用。

3.2.1.2对角叉菜胶引起大鼠踝关节肿的作用 大鼠21只(体重140-200g)均分3组。分别ip二醇甙100、200mg/(kg·日)×3日,对照组给蒸馏水。未次给药后于踝关节处sc角叉菜胶分别在致炎后1、2、3、5、7小时测定致炎足关节周长,给药前后周长の差为肿胀度。结果表明三七人参二醇甙100mg/kg在致炎后2、7小时有非常显着的对抗作用,200mg/kg在致炎后1-3小时有非常显着的对抗作用

3.2.1.3对磷酸组织胺引起嘚大鼠踝关节肿的作用 大鼠14只(体重135-185g),均分2组给药组ip二醇甙100mg/(kg·日)×3日,对照组给蒸馏水。未次给药后以磷酸组织胺在大鼠一侧关节處皮下致炎致炎后30、60、120、180分钟测踝关节周长,给药前后周长之差为肿胀程度结果三七人参二醇甙在致炎后30-180分钟内对外源性组胺引起的夶鼠踝关节肿有对抗作用,在60-80分钟内对抗作用较显着

3.2.1.4对明胶引起大鼠腹腔白细胞移行的影响 大鼠20只(体重190-250g),分3组分别sc二醇甙100、200mg/kg,对照组给蒸馏水然后ip明胶,处死动物抽取腹腔液稀释,计算白细胞数结果表明三七人参二醇甙200mg/kg对明胶引起的大鼠腹腔白细胞移行(2个/mm3腹腔液)与对照组(4)相比有显着的抑制作用。

3.2.1.5对棉球引起大鼠肉芽肿的影响 大鼠24只(160-215g)随机分3组。棉球植入大鼠左右侧蹊部分别ip二醇甙70和100mg/(kg. 日)×7日,对照组给蒸馏水处死动物,摘出肉芽肿烘干称重。结果三七人参二醇甙100mg/kg对棉球引起的大鼠肉芽肿有非常显着的抑淛作用70mg/kg剂量作用不显着。

抗炎作用机制探讨 ①对大鼠肾上腺内维生素C含量的影响 大鼠24只均分3组,给药组分别ip二醇甙70、100mg/(kg.d)X7d,对照组给蒸餾水D8处死动物,取肾上腺测维生素C含量结果三七人参二醇甙100mg/kg剂量使大鼠肾上腺维生素C含量显着降低。②对摘除肾上腺大鼠的抗炎作用 夶鼠17只摘除肾上腺,分2组给药物ip二醇甙100mg/(kg·日)×3日,对照组给蒸馏水。用角叉菜胶致炎后1、2、5小时分别测踝关节周长比较两组肿胀喥(给药前后周长之差)。结果三七人参二醇甙100mg/kg对摘除肾上腺大鼠的角叉菜胶所致踝关节肿有非常显着的对抗作用以上两实验结果表明,三七人参二醇甙具有直接的抗炎作用同时部分依赖垂体-肾上腺系统。

3.2.2镇痛作用3.2.2.1对醋酸引起小鼠扭体反应的作用 小鼠37只(16-22g)分4组,两個给药组(各10只)分别sc二醇甙100、200mg/(kg·日)×3日,空白对照组(10只)给蒸馏水阳性对照组(7只)给度冷丁。给药后ip醋酸观察小鼠15分钟内扭体次数。结果表明三七人参二醇甙100、200mg/kg与空白对照组比较均有非常显着性差异度冷丁组均不出现扭体反应。

3.3三七皂甙组分(PNS、Rg组、Rb组)鎮痛作用3.3.1扭体法小鼠体重24.2±2.8g(?)随机分组,分别sc受试药对照组给生理盐水(Ns),30分钟后ip醋酸记录15分钟内各组发生扭体反应的鼠数和扭体反应的次数。结果表明PNS组和Rb组与对照组相比能明显抑制扭体反应次数,Rb组还可明显减少发生扭体反应的鼠数

3.3.2热板法小鼠体重25.0±2.5g,隨机分组以小鼠后足接触热板到舔后足为止的时间定为痛阈,挑选反应敏感而稳定的小鼠用于实验比较给药前和给药后不同时间痛阈嘚变化,给药组ip给药对照组给NS。结果表明PNS和Rb组可不同程度地提高小鼠痛阈,Rg组无明显作用

4.对内分泌及代谢系统的作用4.1三七含人参皂甙Rg1(三七皂甙C1,简称Rg1)对小鼠的降血糖作用4.1.1 Rg1对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响 小鼠(体重25±2g)尾iv四氧嘧啶后,取血测血糖水平选用禁喰8小时空腹血糖高于10mmol/L者用于实验。

4.1.1.1不同给药方式的影响 上述空腹高血糖小鼠100只均分10组,分别ip不同剂量Rg1以生理盐水(NS)为对照前5组给药l尛时后测血糖,后5组qd×4日d4测给药前及给药后1小时的血糖。结果表明单剂量Rg1需400mg/kg才能降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖,降糖率为34%;连续给药4ㄖ后各剂量组的血糖均明显降低,且从6.22-100mg/kg呈量一效关系趋势100mg/kg达最大降糖率(35%)。

4.1.1.2 Rg1与胰岛素降血糖作用的时-效关系比较 同上造型空腹高血糖小鼠40只均分4组,分别ipRg1125mg/kg、胰岛素、Rg1.加胰岛素、NS均qd×4日,d4测走给药前后1、2、3、4小时的血糖结果表明Rg1给药d4降血糖作用可维持4小时以上,未见与胰岛素呈协同或拮抗作用

4.1.2 Rg1与胰岛素对大鼠分离肝细胞摄取[3H]-葡萄糖的影响 大鼠禁食24小时后按Berry一Friend灌流法改良得到分离肝细胞,分6瓶分别加入NS胰岛素、Rg10.1ug/ml(相当于整体剂量100mg/kg)、胰岛素加Rg1、较大剂量胰岛素、Rg1加较大剂量胰岛素,加标记物后按时取样测定细胞内cpm值结果表明,Rg1能明显促进肝细胞摄取葡萄糖较大剂量胰岛素与Rg1均能促进肝细胞摄取葡萄糖,但两者合用呈拮抗作用

4.1.3 Rg1与胰岛素对小鼠肝匀浆中葡萄糖和琥珀酸钠代谢耗氧量的影响 小鼠参照Warburg及Richard检压法,取肝制成10%肝匀浆给药Rg15ug/ml(相当于整体剂量50mg/kg),测给药前后耗氧量结果表明,Rg1能奣显增加肝匀浆代谢葡萄糖和琥珀酸钠的耗氧量

4.1.4 Rg1对小鼠肝糖原合成的影响正常小鼠18只,均分2组禁食24小时后po葡萄糖,同时分别ipRg1200mg/kg和等体积NS2h后取肝测定糖原含量(mg/g湿重)。结果表明对照组为29±12,给药组45±7P<0.01说明Rg1能促进小鼠肝糖原合成。

三七提取物(主要含由原人参三醇組成的人参皂甙)对小鼠肝糖、血糖含量的影响4.2.1三七提取物对正常小鼠肝糖原含量的影响健康小鼠34只分2组,给药组ig三七提取物50mg/(kg·日)×15日对照组给等体积1%吐温80,分别在两组动物中随机取部分小鼠测定肝糖原含量余者继续给药,到25日测定肝糖原含量。结果表明正瑺小鼠连续给予三七提取物15日和25日,肝糖原含量明显增加与对照组相比,分别提高80.8%和71%(P均<0.001)

4.2.2 三七提取物对小鼠肝糖原生成的影响 给药組diig300mg/kgl次,对照组给等量l%吐温80两组同时禁食16小时,次日分别再给1次60分钟后ip25%葡萄糖。2小时后处死小鼠取肝测定肝糖原含量。结果给药组肝糖原(95.3±17mg/g·肝重)比对照组(70.3±9.1)提高35.5%(P<0.05)说明三七提取物可促进小鼠利用外源性葡萄糖合成肝糖原。实验同时取小鼠肝脏染色镜丅观察肝细胞糖原分布情况。结果表明给药组肝细胞内多数呈现糖原颗粒粗大饱满,显示组织化学观察与上述生化测定结果一致

4.2.3三七提取物对小鼠空腹血糖的影响 健康小鼠16只,分2组Dl上、下午给药组分别ig100mg/kgl次,对照组给等体积1%吐温80下午两组同时禁食15小时。次日分别再给藥和吐温80末次给药后30分钟,从眼眶取血测血糖含量结果给药组血糖浓度61.7±4.6,比对照组48.2±5.7高28%表明空腹对三七提取物有轻度升高血糖的莋用。

4.2.4三七提取物对小鼠葡萄糖性高血糖的影响 健康小鼠64只分2组,给药组上、下午各igl00mg/kg1次次日上午再给1次。对照组给等体积1%吐温80末次給药后30分钟,两组同时ip25%葡萄糖分别于0.5、2和3小时,每组随机取8只小鼠眼眶取血测血糖结果显示ip葡萄糖后0.5和l小时,给药组血糖值比对照组汾别下降18.O%和22.O%2小时后两组血糖均降至正常水平,3小时降至空腹水平此时给药组血糖含量又比对照组高28%,表明三七提取物对血糖有双向调節作用

4.2.5三七提取物对四氧嘧啶所致小鼠高血糖症的影响 给药组给药100mg/kg,bid×7日对照组给NS。D7两组分别尾静脉取血测血糖同时尾iv四氧嘧啶,兩组继续给药和NS分别于中毒后d6、10、14、18、24取血测血糖。结果表明两组动物注射四氧嘧啶后都形成高血糖症,给药组在各个不同时间点的血糖值都低于对照组显示三七提取物有降低四氧嘧啶所致高血糖症血糖含量的作用。

4.3三七总皂甙(PNS)及三七皂甙C1(Rg1)对实验小鼠胰高血糖素升血糖作用的影响 小鼠40只(体重18-24g,)分4组,A组Rg1加胰高血糖素,B组PNS加胰高血糖素C组为胰高血糖素组(阳性对照),D组为生理盐水加胰高血糖素组(对照组)给药后20、40、60分钟分组断尾取血,末次眼球取血测定血清葡萄糖,结果Rg1有明显的拮抗胰高血糖素的升血糖作用P<0.05;PNS囿显着的协同胰高血糖素升血糖作用P<0.05

4.4三七总皂甙PNS对大鼠肾上腺内抗坏血酸含量的影响4.4.1大鼠10只(体重152±139),按体重匀分2组1次分别ipPNS200mg/kg和等量生理盐水(NS),测定肾上腺组织中抗坏血酸含量结果给药组为301±(SD)38ug/100mg,对照组375±51ug/100mg P<0.05,给药组显着低于对照组

4.4.2大鼠25只,按体重匀分5組按上法不同剂量给药。结果表明PNS在60-240mg/kg剂量范围内均使肾上腺内抗坏血酸含量显着下降。

4.4.3大鼠20只按体重分2批。第一批给药前摘除垂体第二批为正常大鼠。每批再分为二组分别ipPNS200mg/kg或NS。结果去垂体大鼠ipPNS后肾上腺抗坏血酸含量与对照组比较未见显着下降

实验结果表明,ipPNS使囸常大鼠肾上腺抗坏血酸含量显着下降反映肾上腺皮质功能增强。IpPNS使豚鼠血浆皮质类固醇浓度增加但ipPNS不能使去垂体大鼠的肾上腺抗坏血酸含量显着下降,提示PNS增强肾上腺皮质功能的作用是间接的

4.5生熟三七总皂甙(PNS,PPNS)对蛋白质合成的影响 小鼠(19.2±1.5g)按性别体重均匀汾组,给药组每天ig或SC生三七总皂甙(PNS)或者熟三七皂甙(PP-NS)1次连续给药7日,对照组给等容量生理盐水(NS)末次给药后lh,ip3H亮氨酸([3H]Leu)4h后处死小鼠,取肝、肾和血液制备样品分别测定其放射性。结果表明PNS和PPNS每日200mg/(kg·日)×7日ig对肝、肾和血清蛋白质的合成都有促进莋用。在适当剂量时两者作用相似。但两者剂量增加为300mg/(kg·日)×7日ig时,则PNS对肝、肾和血清放射活性无明显影响而PPNS对肾和血清的放射活性明显增加,当sc100mg/(kg·日)×7日时,PNS对肾脏放射活性显着抑制而PPNS则显着增强。

三七皂甙E1(人参皂甙Rb1简称Rb1)对中枢神经系统的抑制作用5.1镇靜作用5.1.1对小鼠自发活动的影响1、小鼠30只,均分3组分别ipRb1100、200mg/kg和生理盐水(NS),采用改良的电感-抖动笼法于给药前后描记自发活动曲线。结果显示Rb1100、200mg/kg均能明显抑制小鼠的自主活动表现为活动曲线频率减少,振幅降低2、小鼠分50、100、200、300mg/kg4个剂量给药,每个剂量用5-8组动物每组2只,采用光电计数法记录给药后小鼠活动数结果可见随Rb1剂量的增加,小鼠活动数递减呈现一定的量效关系。

5.1.2对中枢兴奋药和抑制药的协哃与拮抗关系 ipRb1并分别sc氯丙嗪、苯丙胺、苯甲酸钠、咖啡因、利血平后测小鼠自主活动数结果显示Rb1协同利血平和氯丙嗪对自主活动的抑制莋用;并能明显对抗苯丙胺、咖啡因对自主活动的兴奋作用。

5.1.3对鸽的镇静作用 鸽30只(体重300-450g)均分3组,分别翼ivRb1200、300mg/kg对照组ivNS。结果两个给藥组与对照组相比均出现镇静作用。

5.1.4对戊巴比妥钠诱发小鼠入睡的影响 小鼠80只均分8组,按32.3、42、54.6、71、92.3、120、156mg/kg7个不同剂量ipRb1对照组给等量NS。20分鍾后各组ip戊巴比妥钠,记录翻正反射消失的鼠数结果5个较大剂量的Rb1均能增强戊巴比妥钠的作用,其作用随剂量的增加而增强Rb1协同戊巴比妥钠使小鼠入睡,用寇氏法测定ED50为76.85(64.73-92.22)mg/kg(95%可信限)

5.1.5对硫喷妥钠睡眠时间的影响 小鼠45只,均分3组分别ipRb1100、200mg/kg,对照组ip等量NS20分钟后iv硫喷妥钠。结果显示Rb1l00、及200mg/kg均能显着延长硫喷妥钠的睡眠时间

5.2镇痛作用5.2.1热板法 采用热板法测定小鼠舐后足作为痛反应指标。给药组分别ipRbll00、200mg/kg对照组给NS,并以吗啡和左旋四氢巴马汀为阳性对照结果表明,Rb1可使痛反应时间明显延长强度随剂量的增加而增强,约维持l小时与吗啡囷左旋四氢巴马汀相比,Rb1镇痛作用维持时间短

5.2.2醋酸扭体法 小鼠scRbll00、200mg/kg或等体积NS,并设氨基比林为阳性对照物30分钟后ip醋酸液,记录小鼠扭体佽数结果表明,Rb1明显抑制醋酸所致的小鼠扭体反应Rb1100mg/kg0-15分钟n内对小鼠扭体反应发生的抑制率为71%;200mg/kg时作用强度稍低于氨基比林。

6.对免疫功能嘚作用6.1三七总皂甙(PNS)对小鼠免疫功能的影响6.1.1对溶血空斑形成的影响 CFW纯系小鼠26只(体重20-22g)试验前4日,ip绵羊红细胞悬液随机分3组,给药兩组分别scPNS80和160mg/(kg·日)×4日,另设对照组给生理盐水(NS)测空斑数。结果表明PNSI60mg/kg时可使小鼠溶血空斑数增加92.O%;与对照组相比P<0.01。

6.1.2对小鼠腹腔巨噬细胞的影响6.1.2.1对小鼠腹腔巨噬细胞的影响 615纯系小鼠(体重20-22g)随机分5组,给药3组分别scPNS40、80、160mg/(kg·日)×4日,阳性对照组sc氢化可的松对照组给等量生理盐水(NS)。末次给药后各鼠ip鸡红细胞悬液,处死动物冲洗腹腔,冲洗液滴片染色,镜下检查200个巨噬细胞吞噬鸡红细胞数计算每百个巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数。结果表明PNSI60mg/kg可显着提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数。

6.1.2.2不同给药时间对小鼠腹腔巨噬细胞的影响 615纯系小鼠57只分8组,第1组为对照组,其余各组均scPNS160mg/kg第2、3、4、5组1次给药后30分钟、2小时、4小时、1日同上法进行试验,6、7、8组每ㄖ给药1次连续2、4、6日后同上法进行试验结果1次给药后对小鼠腹腔巨噬细胞无显着作用;连续给药2、4、6日后,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能囿显着增高p<0.01

6.2三七多糖A和多糖B对小鼠免疫功能的影响 应用125I一UD只释放试验、溶菌酶测定、特异性玫瑰花形成细胞(SRFC)测定和溶血空斑形成細胞(PFC)测定方法测定三七多糖A和多糖B在小鼠体内对自然杀伤细胞(NKC)、巨噬细胞、抗原结合细胞和抗体分泌细胞的影响。结果表明多糖A能明显降低NKC活性(P<0.01),药物剂量加大时抑制作用加强多糖B低浓度时能明显促进NKC活性(P<0.01),随浓度增加促进作用减弱多糖A在25mg/kg时使血清溶菌酶含量增加(P<0.05),其它剂量无影响;多糖B对溶菌酶亦有促进作用多糖A在5mg/kg时可使腹腔渗出细胞溶菌酶含量增加(P<0.05),而在25mg/kg以仩时可使胞内酶含量显着增加(P<0.01)多糖B低剂量时可使酶含量增加(P<0·05),高剂量则无影响两种多糖对小鼠抗原结合细胞均有抑制莋用(P<0.01),多糖A的抑制作用随剂量的增加而加强多糖B在25mg/kg以上剂量时抑制作用呈平台现象。三七两种多糖对抗体分泌细胞均有明显抑制莋用(P<0.01=两种多糖对PFC亦均有明显抑制作用P<0.01。

6.3三七总皂甙(PNS)提高肺泡巨噬细胞吞噬率的作用 Wistar大鼠(体重146±14g)给药组ipPNS50mg/kg,qd×6日;阳性對照组sc卡介苗(BCG)空白对照组ip生理盐水(NS)。结果表明给药组肺泡巨噬细胞吞噬率为82.3±3.5(%),与阳性对照组(86.6±6.2)相比显着提高(P<0.001)与阳性对照组(86.6±5.8)相比作用相近。给药组血液白细胞总数8.6与空白对照组(1.2)相比提高(P<0.05)。给药组血液淋巴细胞百分比(74.1±6.5)比涳白对照组(64.8±7.2)提高(P<0.05)给药组还减少了白细胞移行指数P<0.02。

7.对延缓衰老的作用7.1三七总皂甙(PNS)清除超氧阴离子自由基(O2)的作用 采用DMSO(二甲亚砜)非酶促体系产生O2以研究PNS的清除O2的作用。将PNS溶于重蒸馏水中得多个浓度梯度,取一定量加入测定管中依次加Luminot与NaOH溶液,以DMSO启动反应6s后测定6秒光子数(CP6s),按抑制率=(对照管CP6s-测定管CP6s)/对照管CP6sx100%计算药物不同浓度下的发光抑制率再求得抑制发光50%的浓度(IC50)。结果PNS的IC50为38.8±4.1ug/mlr=0.932,表明PNS有较强的体外清除自由基能力

7.2三七细粉对大鼠LPO及SOD的影响 大鼠12只(6月龄,340-620g)随机分两组,给药组ig三七粉浆200mg/kg每ㄖ1次,连续4周,对照组给等量蒸馏水采血,处死后取心、肝、肺和脑组织制成匀浆采用八木法测定LPO量,采用改进的邻苯三酚法(微量快速测定法)检测SOD量结果表明,脑组织中的LPO量显着减少肝组织中的LPO量虽有减少但统计学差异不显着。脑组织的SOD活性亦显着升高其它组織差别不大。另给药组大鼠血液中LPO量为4.18±0.38nmol/ml与对照组4.79±0.39nmol/ml相比显着减少(P<0.05)。给药组血液中的SOD活性有升高倾向但无统计学意义(P>0.05)。

7.3彡七醇提物对小鼠记忆的易化作用7.3.1对小鼠樟柳碱千万记忆获得障碍的影响 小鼠30只(体重25±3g)随机分3组,第1组为正常对照组第2组为樟柳堿对照组,第3组为给药组第1、2组每天ip生理盐水(NS),给药组ip三七醇提物3g/kg(以生药计下同),连续给3日末次给药后第1组另侧ipNS,第2、3组ip樟柳碱10分钟后对动物进行跳台法训练,24小时后测验记忆成绩结果给药组可使测验时错误次数显着减少,与樟柳碱组比较P<0.01

7.3.2对小鼠NaNO2造荿记忆巩固障碍的作用 小鼠40只(体重25±3g),随机分3组第1组10只为正常对照组,第2组15只为NaNO2对照组第3组15只为给药组。第1、2组每天ipNS第3组ip三七醇提物2g/(kg,d)x3d,d4先进行跳台法及避暗法训练然后第1组scNS,第2、3组scNaNO2同时第1、2组ipNS,第3组ip三七醇提物2g/kg24小时后进行测验。结果表明三七可使小鼠在跳台法测验中的错误次数显着减少至0.27±0.46次,与NaNO2组比较差异显着(P<0.05)并使避暗法测验反应潜伏期延长为213.1±107·5s,与NaNO2组103.3±121.6s比较P<0.05与正瑺对照组220.3±83.1比较P>0.05。

7.4三七总皂甙(PNS)对抗D-半乳糖所致小鼠虚损的作用 小鼠体重25.2±1.1g每组8只,对照组ig生理盐水(NS)每日1次病理模型组球后紸射D-半乳糖每日1次,给药组每日注射D一半乳糖的同时igPNS60mg/kg各组小鼠连续给药30d,测耗氧量后处死分别测定脾、胸腺重量及脑Na(+)、K(+)-ATP酶、脂褐素和皮肤羟脯氨酸。结果小鼠igPNS60mg/kg可使D-半乳糖致虚损小鼠的耗氧量显着上升、脾脏减轻胸腺增重、脑Na(+)、K(+)-ATP酶活力上升,心、肝组织脂褐素含量显着丅降皮肤羟脯氨酸含量上升。表明三七总皂甙对D-半乳糖所致小鼠虚损有明显的对抗作用

8.其它作用8.1三七绒根总皂甙的药理作用8.1.1三七绒根總皂甙(简称总皂甙)对末成年小鼠体重增长的影响 给药组剂量为10和20mg/kg时,小鼠体重增加数显着超过对照组表明总皂甙有明显促生长作用。

8.1.2对小鼠高温负荷游泳耐力的影响 水温保持在39.5±0.5℃记录动物溺死为止的整个游泳时间。给药100mg/kg(n=32)可显着延长小鼠游泳时间(10.73±1.63分钟)與对照组相比P<0.001。

8.1.3对小鼠耐受常压窒息性缺氧的存活时间的影响 给药组100mg/kg剂量(n=50)存活时间为49.58±1.39分钟比对照组显着延长P<0.001。

8.1.4对小鼠耐高温嘚影响 动物置46±0.5℃恒温箱内记录各组动物死亡数。结果总皂甙25和50mg/kg具有耐高温作用并随剂量的增加而增强。死亡率降低与对照比较P<0.0。

8.1.5对小鼠耐低温的影响 动物置-20±1℃低温冰箱内观察小鼠死亡情况。总皂甙500和100mg/kg可显着降低小鼠死亡率

8.1.6升白作用 对环磷酰胺所致的白细胞減少,总皂甙组的白细胞总数个/mm3比对照组个/mm3显着升高P<0.01。

8.1.7对硝酸士的宁引起小鼠惊厥与死亡的影响 总皂甙25mg/kg有非常明显的降低由硝酸士的寧引起的小鼠惊厥和死亡的作用并随总皂甙剂量的增加而作用更加明显。

8.2三七须根总皂甙(以下简称总皂甙)的药理作用8.2.1促生长作用 幼姩小鼠20只(体重9-11g)均分2组,给药组ig总皂甙500mg/(kg·日)×2周,对照组给等容量蒸馏水末次给药后24小时动物称重,结果给药组体重平均增加值為6.65±0.7g比对照组(4.04±0.4g)明显增加P<0.01。

8.2.2雄激素祥作用 大鼠14只(体重50-80g)随机分2组,切除两侧睾丸给药组sc总皂甙50mg/(kg. 日)×2周,对照组给等容量生理盐水(NS)处死,剖出精囊腺称重结果给药组大鼠精囊重0.149±0.01mg/g体重,比对照组(0.93±0.02)明显增加P<0.05

8.2.3抗溃疡作用 大鼠22只(体重150-200g),随機分3组禁食,麻醉按Shay's等法结扎幽门诱发大鼠胃溃疡。给药组分别sc总皂甙200、400mg/kg对照组给NS。18小时后处死取全胃观察胃溃疡数量及症状,結果表明三七须根总皂甙有抗溃疡作用

8.2.4抗炎作用8.2.4.1对蛋清性足跖肿胀的影响 大鼠14只,均分2组用蛋清造成足肿胀炎症模型,用排水法测量踝关节以下容积以造型前后之差的百分数为关节肿胀程度。给药组ig总皂甙500mg/kg对照组给西黄耆胶液。结果三七须根总皂甙对大鼠蛋清性足腫胀有明显的抑制作用

8.2.4.2对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的影响 小鼠30只,均分3组给药组ip总皂甙100mg/kg,阳性对照组给可的松另设空白对照组。各組给药后20分钟以巴豆油致小鼠耳廓肿胀炎症结果给药组和可的松组耳片肿胀度分别为1.74±0.41和5.54±0.83mg,明显低于对照组的9.35±0.72mgP<0.01

8.2.4.3对棉球肉芽

大麻素及其合成和内源类似物影響广泛的生理功能包括心血管变量,其影响的最重要组成部分是严重的低血压大麻素在体内的心血管作用的机制是复杂的,并且可能涉及调节中枢和外周神经系统中的自主流出以及对心肌和脉管系统的直接作用虽然有几个证据表明大麻素的心血管抑制作用是由外周定位的CB 1介导的受体,最近的研究为尚未定义的内皮细胞和心脏受体的存在提供了强有力的支持所述内皮细胞和心脏受体介导某些内源性大麻素诱导的心血管作用。内源性大麻素系统最近涉及与出血内毒素和心源性休克以及晚期肝硬化相关的低血压机制。此外大麻素被认為是新型抗高血压药。还记载了内源性大麻素在心肌缺血中的保护作用在本章中,我们总结了大麻素对心血管效应的最新信息并强调叻这些效应在各种病理生理条件下的重要性。

大麻素中生物效应的主要精神成分Δ 9 -四氢大麻酚(THC),由特定的介导G蛋白偶联受体(GPCR)(豪利特等人,1990迄今为止,已经通过分子克隆鉴定了两种大麻素(CB)受体:CB 1受体它是迄今为止脑中所有神经递质受体中最丰富的(Matsuda等人,1990)但也存在于各种外周包括心脏和脉管系统在内的组织(Gebremedhin等,1999 ; Liu等2000 ; Bonz等,2003)以及主要通过免疫表达的CB 2受体(Munro等,1993))和造血细胞(Valk和Delwel 1998这些受体的天然配体是内源性脂质样物质,称为内源性大麻素包括花生四烯酰乙醇酰胺或anandamide和2-花生四烯酰甘油(2-AG),作为该组中研究最广泛的两个成员(由Mechoulam等人评论1998)

大麻素及其合成和内源类似物以其突出的精神活性特性而闻名,但其心血管效应早在20世纪60年代僦已得到认可这些效应的最重要组成部分是动脉血压产生深远的下降,心脏收缩和心脏率(湖等人1997年a b ; 希尔拉德2000 ; Kunos等20002002年 ; 。兰德尔等2002 ; Ralevic等,2002 ; Hiley和2004年福特虽然有几个证据表明大麻素的心血管抑制作用是由外周定位的CB 1介导的受体,大麻素也可以影响血管和心脏这些影响与CB 1囷CB 2受体无关,本章后面将详细讨论

本章的目的是总结大麻素的心血管作用,并强调内源性神经元系统在各种病理条件下的药理学操作的獨特治疗潜力

大麻素在体内的心血管效应

anandamide,第一种内源性大麻素(Devane等1992)的发现,提出了一个明显的问题即它是否具有与THC类似的心血管活动。在静脉推注麻醉大鼠和小鼠后发现anandamide引起三相血压反应和心动过缓(Varga等人1995 ; Pacher等人2004 ; Bátkai等人2004b ;见图1),类似于之前报道的THC(Siqueira等1979)。第一階段的反应包括心率和血压的急剧下降仅持续几秒钟。这些影响是迷走神经介导的因为它们在双侧横切颈部迷走神经后或在用甲基阿託品预处理后不存在于动物中(Varga等人,1995这种迷走神经组分之后是短暂的加压反应,其在α-肾上腺素能阻滞的存在下持续存在并且在通过髓室功能消除抑制交感神经经紧张的大鼠中持续存在,因此不是抑制交感神经经介导的(Varga等人1995)。这种加压组分也不受CB 1受体拮抗剂嘚影响并且它在CB 1敲除小鼠中持续存在Járai等人,1999 ;Pacher等人2004),表明缺乏CB 1受体的参与最近在大鼠中使用放射性标记的微球技术的观察表明,这种加压组分可能是由于某些血管床(例如脾)中的血管收缩(Wagner等人2001b)。anandamide作用的第三个也是最突出的一个阶段是伴有中度心动过缓的低血压持续约2-10分钟。有趣的是这种第三阶段在有意识的正常血压大鼠中不存在(Stein等,1996 ; Lake等1997a),但在有意识的自发性高血压大鼠中存茬且更长时间(Lake等,1997b ; Bátkai等2004b))。由于已知抑制交感神经经张力在有意识的未受干扰的正常血压大鼠中较低(Carruba等人,1987)这些观察结果姒乎与anandamide诱导的低血压和心动过缓的抑制交感神经经抑制机制相容,如下面进一步讨论的这一发现? -methanandamide,花生四烯乙醇胺的代谢稳定的类似粅(Abadji等人1994),导致类似但更长时间的低血压和心动过缓(Kunos等人2000)消除了花生四烯酸乙醇胺的降压和心动过缓作用间接介导的可能性通過代谢物。

al.1997a然而,当在麻醉小鼠中进行测试时2-AG的降压作用出乎意料地抵抗SR141716的抑制作用,但可被吲哚美辛拮抗这表明环氧化酶代谢粅的参与(Járai等人,2000))。实际上发现2-AG在小鼠血液中快速(<30秒)降解以产生花生四烯酸。因此当代谢稳定的模拟2-AG醚进行了测试,其降压作用是由拮抗SR141716和它在CB缺席1只表明类似于花生四烯酸乙醇胺,它是低血压CB的有效激动剂缺陷小鼠1受体(Járai等人2000)。最近已将2-AG醚鉴定為内源性脑成分(Hanus等2001),因此它也可能参与心血管调节

用于CB的第二行1受体参与是产生半最大低血压和心动过缓应答(EC各种大麻素激动劑的浓度之间的强,正相关50)和它们的亲和常数结合CB 1个在大脑受体(湖等人1997a)。然而最有力的证据是在缺乏CB 1受体的小鼠中完全没有大麻素诱导的低血压和心动过缓Járai等,1999 ; Ledent等1999)。有趣的是SR141716同样抑制了非慢性吸食大麻的人类志愿者对急性摄入THC的孤立性心动过速(Huestis等。2001在健康的年轻人,心脏是主导下迷走神经张力和THC的心动过速效果是最有可能是由于突触前通过CB从心迷走神经传出乙酰胆碱释放的抑淛1受体(Szabo等,2001

急性药物对血压的影响是外周血管阻力,心输出量或两者的变化的结果最近在作者实验室中未发表的结果,使用体内戊巴比妥麻醉小鼠的压力 - 见下文)这些心脏抑制剂效应可能是使用放射性标记的微球技术在研究中观察到的anandamide和HU-210降低心输出量的能力的基礎(Wagner等人,2001b瓦格纳等人。还证明了HU-210和anandamide在冠状动脉和脑循环中都会产生主要的血管舒张这可能被SR141716所拮抗(Wagner et al.2001b))。总之这些发现表明,大麻素引起经由SR141716敏感CB cardiodepressor效果以及冠状动脉和脑血管扩张1个受体

尽管有证据表明CB 1受体在大麻素的降血压作用中具有独特的作用,但在过去幾年中越来越多的证据表明anandamide诱导的血管舒张在肠系膜,可能还有一些其他血管床中与CB 1或CB 无关。2个受体(见下文第3节)。这种明显的悖论可以通过以下观察来解决:在麻醉的大鼠中异常的大麻二酚(abn-cbd),一种具有血管舒张活性的非精神活性大麻素(Adams等1977 ; Járai等,1999)通過多普勒超声测量,可以引起体内肠系膜血流量的显着增加而不会对血压产生显着影响(S.Bátkai,PPacher,GKunos,未发表的观察结果)通过在某些血管床中局部释放内源性大麻素引起的血管舒张可能通过其他血管收缩中的抑制交感神经经血管收缩得到补偿,导致对血压没有净效应

2.2中枢与外周机制在大麻素心血管效应中的作用

早期使用THC的研究表明,大麻素通过中枢介导的交感抑制机制降低血压(Vollmer等1974)。然而氨基甲酸乙酯麻醉大鼠中anandamide引起的低血压与髓质血管舒缩中枢抑制交感神经经前运动神经元活动或抑制交感神经经节后神经活动的任何变化无關(Varga等,1996)其中集中排除介导的抑制交感神经经抑制或神经节阻滞作为可能的潜在机制,至少对于anandamide而言发现强效合成大麻素WIN55,212-2的兔脑室內给药增加而不是减少抑制交感神经经张力,这也反对降低血压作用的中枢机制(Niederhoffer和Szabo 2000然而,当通过神经节阻滞消除抑制交感神经经张仂并且通过加压素输注恢复血管张力时对强效合成大麻素HU-210的低血压反应保持不变,尽管其心动过缓效应丧失(Wagner等人2001b)。这表明大麻素誘发的心动过缓可能是由于对心脏的抑制交感神经经张力的抑制但是低血压反应是由于直接血管舒张,正如化学抑制交感神经经去神经後其在大鼠中的存在所表明的那样(Vidrio等1996)。

3大麻素的体外心血管效应

3.1大麻素的直接血管舒张作用

关于anandamide对脑血流量影响的早期报告表明吲哚美辛可以抑制观察到的血管舒张反应(Ellis等,1995这一发现的明显暗示是,anandamide通过产生花生四烯酸及其随后的环加氧酶代谢间接引起血管舒张虽然THC也产生吲哚美辛敏感反应,但随后的研究无法证明环氧合酶抑制对anandamide引起的其他血管(包括肠系膜和冠状动脉血管系统)血管舒張的影响(Randall等1996Randall和Kendall,1997 ; Plane等)人,1996 ; 怀特和1997年Hiley)排除前列腺素形成增加作为血管扩张作用的主要机制。

anandamide的血管舒张作用显示组织和种间差异已发现Anandamide可放松大鼠肝脏和豚鼠基底动脉(Zygmunt等,1999)牛冠状动脉(Pratt等,1998)但不是大鼠颈动脉(Holland等,1999)或大鼠主动脉(Darker)等人1998年)。据報道Anandamide通过内皮释放一氧化氮(NO)介导肾传入小动脉的血管舒张(Deutsch等,1997还发现Anandamide在各种人体血管和右心房中释放NO(Bilfinger等人,1998年)相反,在其他研究中anandamide诱导的血管舒张对NO合酶的抑制不敏感(Randall等,1996 ; White和Hiley1997 ; Járai等,1999anandamide和CB激动剂HU-210均引起人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中诱导型NO合酶表达和活性的上调,这不太可能促成急性血管扩张作用但可能起重要作用。通过影响其细胞摄取来终止内源性anandamide的作用(Maccarrone等2000)。

1996年的报告进一步证明了内源性大麻素对血管舒张作用的效果 即由内皮衍生的超极化因子(EDHF)引起的肠系膜血管舒张对SR141716的抑制敏感(Randall等,1996该发现的嶊论是EDHF可能是从血管内皮释放的内源性大麻素,并作用于血管平滑肌细胞上的SR141716敏感性CB受体它会超极化和放松(Randall等,1996有趣的是,发现鉲巴胆碱通过大鼠主动脉内皮诱导2-AG产生(Mechoulam等1998b),其与作为EDHF的2-AG相容

1999年虽然它可以证明anandamide或另一种内源性大麻素作用于血管内皮细胞SR141716敏感受體可能会释放 EDHF(Járai等,1999但也认为anandamide本身就是EDHF 后一种可能性与anandamide在培养的血管内皮细胞中引发钙瞬变的发现相一致(Fimiani等1999 ; Mombouli等,1999)并且anandamide诱導的大鼠肝动脉超极化是内皮依赖性的(Zygmunt等。1997年有趣的是,非精神药大麻素abn-cbd引起的肠系膜血管舒张受到钙激活钾通道毒素(apamin EDHF诱导的血管舒张(Randall和Kendall1998),虽然在大鼠肝动脉中没有观察到这种抑制(Zygmunt等1997),并且在一些其他制剂中anandiotoxin的作用被阻断了不同的(大电导)。 )钙噭活钾通道(Ishioka等人1999 ; Begg等人2001 ; White等人2001abn-cbd的发现表明,大麻素可能通过激活不同于CB 1受体的内皮细胞(即识别abn-cbd参见下文)释放EDHF 实际上真正的CB 1受體的激活可能具有相反的作用,即抑制EDHF的释放如Fleming等人的发现所示(1999)在猪冠状动脉和兔颈动脉和肠系膜动脉中

anandamide引发SR141716敏感的内皮依赖性血管舒张的另一种机制可能是通过间隙连接处的细胞内作用位点。该机制的证据是各种间隙连接抑制剂以及anandamide转运抑制剂AM404拮抗anandamide诱导的肠系膜血管舒张的能力以及SR141716抑制染料通过间隙连接转移的能力(Chaytor等人1999)。总之这些发现构成了anandamide在内皮细胞细胞内部位诱导血管舒张的假设嘚基础,其中它将促进EDHF与血管平滑肌的间隙连接转移(Chaytor等1999)。然而,在其他研究中anandamide的血管舒张作用被一些但不是其他间隙连接抑淛剂抑制,而抑制剂(18α-甘草次酸哇巴因)也在所用浓度下阻断Na   -ATP酶,提示与间隙连接抑制无关的作用机制(Harris等2002)。在通过anandamide以部分内皮依赖性方式放松的兔主动脉环中anandamide反应不受间隙连接抑制剂的影响(Mukhopadhyay等人,2002)并且报道了大鼠分离的冠状动脉的类似发现(White等人。

最后Zygmunt等人。(1999)描述了一种不寻常的间接途径他们证明anandamide通过激活感觉神经元上的TRPV1受体诱导大鼠肠系膜和肝动脉以及豚鼠基底动脉的血管舒張,导致血管扩张肽降钙素基因相关肽(CGRP)的释放(参见第4节)下面,“香草素TRPV1受体在大麻素的心血管作用中的作用”

3.2新型内皮内源性大麻素受体

可能存在大量不同于CB 1或CB 2的大麻素受体,这一发现首先表明强效合成大麻素和THC在相同的大鼠肠系膜血管床制剂中不会引起血管舒张其中anandamide和甲烷酰胺具有强大的血管舒张活性(Wagner等)

最近,非CB 1 /非CB 2位点也假定为在小鼠海马其中它的激活由大麻素抑制谷氨酸能传递和興奋性突触后电位(EPSPS)(上谷氨酸终端存在豪约什等人,2001与内皮部位相似,海马中的部位易受SR141716的抑制但它可被合成的大麻素WIN55,212-2激活(Hájos等,2001在CB 1敲除小鼠中已经鉴定出类似的WIN55,212-2敏感但SR141716不敏感,非CB 1 /非CB 2位点其可以在脑膜中激活鸟苷三磷酸(GTP)γS标记Breivogel等。2001)和星形胶质细胞其刺激抑制环磷酸腺苷(cAMP)的产生(Sagan等,1999由于内皮部位对大鼠肠系膜中的WIN55,212-2(Wagner等人,1999)或兔主动脉(Mukhopadhyay等人2002不敏感,并且abn-cbd不抑制夶鼠海马中的谷氨酸能EPSP(M)

Abn-cbd是行为无活性植物来源的大麻素大麻二酚的合成类似物。几年前据报道abn-cbd在两种非特异性的行为范例中处于非活动状态,用于筛查小鼠中的大麻素但会导致狗的严重低血压(Adams等,1977这促使我们推测abn-cbd可能是推定的血管内皮大麻素受体的选择性噭动剂。对abn-cbd药理学的详细研究支持了这种可能性(Járai等1999)。Abn-cbd不会与大鼠脑中的CB 1受体结合也不会与浓度高达100μM 的人CB 2受体结合(Offertáler等2003)),并且在剂量高达60mg kg的小鼠中的马丁行为四分体中无活性(Járai等人1999)。然而ABN-CBD(20毫克/千克IV)使SR141716敏感低血压在野生型和CB 1受体敲除小鼠。此外abn-cbd在从大鼠或野生型以及CB 1基因敲除小鼠分离的缓冲液灌注的肠系膜血管床中引起内皮依赖性血管舒张,并且这些作用也被1-5μM的SR141716抑制(Járaiet al.1999abn-cbd,大麻二酚(10μM)的母体化合物在大鼠分离的灌注肠系膜血管床制剂中没有血管舒张活性但能够抑制由abn-cbd或anandamide引起的血管舒张(Járai等,1999))。这表明abn-cbd是激动剂而大麻二酚是介导血管舒张的新型内皮大麻素受体的拮抗剂。另外的实验表明血管扩张剂对abn-cbd的反应不受G-硝基-1-精氨酸甲酯(L-NAME) 吲哚美辛的影响表明不涉及内皮NO和前列环素。然而apamin(100 nM)和charybdotoxin(100 nM)的组合,钙激活钾通道的抑制剂显着减弱了由abn-cbd引起的血管舒张。由于钾通道阻滞剂的相同组合抑制EDHF诱导的肠系膜血管舒张(Randall和Kendall 1998))这些发现与通过激活这种新的内皮细胞部位可能释放EDHF相容(Járai等,1999 ;也参见上文)

Capsazepine是一种香草素TRPV1受体的抑制剂,它不会影响肠系膜血管扩张剂对abn-cbd的反应其浓度可以阻断辣椒素的血管舒张作用或血管擴张剂对内皮完整制剂中anandamide的反应(Járai等,1999这些观察结果将内皮大麻素受体与TRPV1受体区分开来,但与后者参与不依赖于内皮细胞的SR161716不敏感嘚anandamide作用成分相容如Zygmunt等人早先所述(1999)

Howlett及其同事研究了anandamide在兔离体主动脉环中的血管扩张作用,得出了类似的结论(Mukhopadhyay et al.2002在那些实验中,anandamide的血管舒张作用具有主要的(80%)内皮依赖性和较小的内皮依赖性成分因此使其成为进一步探索内皮细胞的药理学性质的有吸引力的模型(Mukhopadhyay等2002))。发现内皮依赖性成分对SR141716敏感并且还涉及百日咳毒素(PTX)敏感性G蛋白和NO产生,而内皮依赖性次要成分似乎是通过涉及TRPV1受体嘚CSPP的PTX不敏感机制

内皮大麻素受体是GPCR的可能性得到最近在大鼠分离的肠系膜动脉段(代表直径约200μm的小导管血管)中的发现的支持(Offertáler等囚,2003这些制剂的反应类似于使用灌注肠系膜血管床观察到的反应,其中阻力变化反映了毛细血管前小动脉(直径20-30μm)的反应因为abn-cbd的血管舒张作用与NO无关(抗性)对L-NAME的抑制作用)但对apamin加charybdotoxin的抑制敏感。观察到对NO的不敏感性在同一制剂中也观察到anandamide的情况(Harris等,2002)与兔主動脉(见上文)或大鼠肾动脉(Deutsch等,1997)的情况不同可能反映了物种和/或血管区域的特异性差异。重要的是abn-cbd的血管舒张不受香草素TRPV1受体拮抗剂capsazepine的抑制,并且毒素组合的抑制作用涉及钙激活的钾通道但是,与Mukhopadhyay等人的观察结果一致(2002)使用anandamide,abn-cbd的肠系膜血管舒张可以通过内皮细胞完整而不是内皮剥脱制剂中的PTX抑制这与内皮大麻素受体是相容的,GPCR与G i / G o偶联Offertáler等人2003)。然而Ho和Hiley(2003)报道,abn-cbd的肠系膜血管舒张莋用不受PTX的影响尽管其其他性质,包括其内皮依赖性和化合物O-1918的抑制易感性(见下文)是相似的对于Offertáler等人报道的那些

MAP激酶和Akt磷酸化嘚能力进一步证实了abn-cbd的内皮作用位点(Offertáler等人,2003与使用灌注肠系膜血管床的早期研究一样,在myograph制剂中abn-cbd是完全激动剂,即它完全逆转苯肾上腺素诱导的收缩EC 50为2-3μM。出乎意料的是大麻二酚和SR141716都在肠系膜动脉床制剂的阻力血管中拮抗abn-cbd诱导的血管舒张,在小导管血管中起箌完全激动剂的作用(EC 50)大麻二酚为0.82μMSR141716为6.4μM)。因此后者这些化合物最可能是内皮类大麻素受体的部分激动剂而不是纯拮抗剂。这促使我们开发结构修饰的大麻二酚类似物以寻找纯拮抗剂化合物O-1918在高达30μM的浓度下不会使肠系膜动脉段松弛,但竞争性地抑制血管扩张剂對abn-cbd的反应而不影响对卡巴胆碱或CGRP的血管舒张(Offertáler等人2003)。O-1918的内皮作用位点进一步得到其拮抗pV 44丝裂原活化蛋白(MAP)激酶活化和HUVEC中Akt磷酸化的能力的支持(Offertáler等2003)O-1918也抑制anandamide的肠系膜血管舒张作用的发现强烈表明相同的内皮受体是anandamide的作用位点。与abn-cbd类似O-1918不与CB 1或CB 2受体结合。最近的研究表明O-1918抑制两种推定的新型内源性大麻素,N-花生四烯酰多巴胺(O'Sullivan等人2004)和病毒胺(CR Hiley,个人通讯)的肠系膜血管舒张作用这些发现佷重要,因为anandamide引发肠系膜血管舒张的效力相对较低这表明这些受体的主要内源性配体不是anandamide。

通道参与该作用在最近使用全细胞膜片钳技术的研究中,我们描述了HUVEC中电压依赖性的外向电流其由K  电流缺乏作用进一步支持了这一点,该激动剂缺乏肠系膜血管扩张活性另一方面,O-1918拮抗了abn-cbd诱导的K  电流增加其自身没有产生影响(Begg等人。2003由选择性BK Ca开放剂NS-1619 诱导的iberiotoxin敏感电流不受O-1918影响的发现表明,O-1918对abn-cbd的作用的阻断發生在通道附近的位点最可能发生在受体(Begg等,2003该化合物以及PTX类似地抑制了大鼠分离的肠系膜动脉中abn-cbd的内皮依赖性血管舒张作用(Offertáler等人,2003这提高了BK Ca通道的活化参与由这种新型内皮受体介导的肠系膜血管舒张的可能性

内源性大麻素anandamide也增加了由单个电压步骤引起嘚K  电流; 然而仅在高浓度下观察到其效果。奥丹酰胺的作用被O-1918或PTX部分抑制; 因此anandamide的部分作用可能不会被与abn-cbd相同的途径介导(Begg等,2003Anandamide在大鼠离体肠系膜动脉制剂中作为完全激动剂,其EC 50与abn-cbd相当(Offertáleretal.2003))表明大鼠和人类受体之间可能存在细微差别。anandamide对人内皮细胞受体的低表观效力也表明存在除anandamide之外的内源配体(也参见上文)

在HUVEC中,细胞内环鸟苷酸(cGMP)增加了电压诱导的外向电流与abn-cbd的作用相当。YC-1(可溶性鸟苷酸环化酶的活化剂)也产生类似的外向电流增加abn-cbd和cGMP引起的增加被蛋白激酶G抑制剂KT-5823抑制,abn-cbd的作用而不是cGMP的作用也被鸟苷酸环化酶抑制劑1 H - 阻断- -钳制条件继续增加K  电流,表明其作用不是由于[Ca 2 电流的影响不是累加的这表明这些化合物利用了常见的细胞内途径(Begg等,2003最後,发现abn-cbd增加细胞cGMP水平O-1918可以抑制这种作用(Begg等,2003总之,这些数据表明由abn-cbd激活的新型G i / G o-偶联受体与鸟苷酸环化酶正向偶联以提高细胞内cGMP其激活蛋白激酶G.

进入通道通过其酶促降解有助于anandamide的血管舒张作用,产生花生四烯酸及其随后的P450环氧化酶依赖性代谢(Watanabe等人2003)。TRPV4通道不呔可能参与abn-cbd对外向电流或血管张力的影响因为这些影响对PTX敏感,而TRPV4介导的钙进入则不然此外,在夹紧的细胞内钙存在下abn-cbd对外向电流嘚增强持续存在(Begg等,2003还有,R-methanandamide一种对酶促降解具有抗性并因此不太可能产生P450代谢物的anandamide类似物,具有类似于anandamide的肠系膜血管扩张作用(Wagner等人1999)。

已知细胞外钙具有有效的血管舒张作用特别是在肠系膜循环中,其被认为有助于与肠道营养吸收相关的餐后血管舒张Bukoski及其哃事发现SR141716可通过感觉神经依赖性机制抑制Ca 2 诱导的肠系膜血管舒张,这使他们认为anandamide可能是一种感觉神经来源的血管扩张介质(Ishioka和Bukoski 1999有趣的昰,O-1918还抑制钙诱导的肠系膜血管舒张这在野生型和CB 1受体敲除小鼠中是相似的Bukoski等2002)),提示细胞外钙的血管舒张最可能是由内皮细胞abn-cbd敏感受体介导的

总的来说,上述结果表明合成大麻素配体abn-cbd和O-1918分别作为一种新型血管内皮受体的选择性激动剂和沉默拮抗剂,不同于介导腸系膜血管舒张的CB 1和CB 2通过G i /

3.3大麻素的直接心脏抑制作用

与大麻素对血管作用的认识不断增长相比,人们对大麻素诱导的直接心脏作用知之甚少内源性大麻素anandamide(Felder等人,1996)anandamide酰胺水解酶(Bilfinger等人,1998)以及CB 1受体信息的痕迹Galiegue等人,1995)都在人类心脏中被检测到在最近的一项研究Φ,通过免疫印迹和免疫组织化学在人心房肌细胞中证实了CB 1受体的存在Bonz等人2003)。在同一研究中证实了anandamide,R-methanandamide和HU-210剂量依赖性地降低分离的電节律人体心房肌的收缩性能选择性和有效的CB 1拮抗剂AM251(Gatley等,1997)阻断了所有三种药物的负性肌力作用并且可以排除CB 2受体激活,NO或前列腺素释放的参与Bonz等人 2003)。始终与这些体外结果HU-210降低了在大鼠体内的心输出量在CB 1受体依赖性(Wagner等人。2001年b以前的研究还表明,anandamide在离体灌注的大鼠心脏中引起SR141716敏感的冠状动脉血管舒张(Randall和Kendall 1997 ; Fulton和Quilley 1998)涉及大麻素受体。花生四烯酸不能模拟anandamide的这些作用表明血管舒张作用不是由婲生四烯酸代谢物介导的。

在分离的灌注的大鼠Langendorff心脏制剂,anandamide和R -methanandamide但不是棕榈酰乙醇酰胺或选择性CB 2受体激动剂JWH015,显着降低左心室发展和冠狀动脉灌注压表明心肌收缩功能下降和冠状动脉舒张(Ford

在与分离的心肌制剂的观察结果一致,我们的使用米勒压力-体积电导系统最近未發表的结果(见下文和也图12)以直接测量在体内的心脏性能强烈建议的至关重要心肌成分对大麻素的血液动力学影响。总之上述研究表明CB 1受体存在于心肌细胞中,并且大麻素可通过CB 1依赖性和CB 1依赖性机制降低心肌收缩性

4类香草素TRPV1受体在大麻素的心血管作用中的作用

anandamide和馫草素化合物(如辣椒素)之间的结构相似性(Di Marzo等,1998)提出了这两种系统之间相互作用的可能性的确,Zygmunt等人(1999)证明,在大鼠肠系膜動脉中anandamide的内皮依赖性血管舒张作用被TRPV1受体拮抗剂capsazepine或CGRP受体拮抗剂抑制。他们进一步证明anandamide以微摩尔亲和力与克隆的TRPV1受体结合,在纳摩尔浓喥下它从位于血管外膜的感觉神经末梢释放免疫反应性CGRP(Zygmunt等,1999))。还提出了TRPV1受体类似地参与甲烷并酰胺的肠系膜血管舒张作用(Ralevic等囚2000)。这些观察结果支持这样的假设:anandamide诱导的血管舒张涉及感觉神经中TRPV1受体的激活以及随后释放强效血管扩张肽CGRP

2003)。有趣的是感觉鉮经末梢似乎也有CB 1受体,通过非常低剂量的anandamide或合成大麻素HU-210刺激它们这两者都不会导致TRPV1受体激活,抑制感觉神经传递(Ralevic等人综述).2002此外,Zygmunt等人最近的一项研究(2002)表明,THC和大麻酚而不是其他精神药大麻素,可以通过不仅独立于CB 1和CB 2受体而且独立于香草素TRPV1受体的机制,从动脉周围感觉神经中引发CGRP释放因此,大麻素的感觉神经依赖性作用是复杂的与CB 1的相互作用并且TRPV1受体似乎具有相反的功能性后果,並且可能存在独立于这两种受体的额外作用TRPV1受体不参与绵羊中的anandamide对分离的冠状动脉的扩张,其中效应是内皮依赖性的(Grainger和Boachie-Ansah 2001)或者是大鼠,其中它是内皮独立的(White et al.2001此外,在大鼠肠系膜动脉床中发现感觉神经和香草素受体在anandamide的扩张器作用中的作用是以NO的存在为条件的(Harris等人,2002

含有TRPV1的传入神经纤维存在于心脏的心外膜表面,通过心外膜注射的辣椒素激活这些受体会引起抑制交感神经经兴奋反应血壓会短暂升高(Zahner等,2003辣椒素输注也会在猪中诱导出适度的升压作用(Kapoor等,2003我们最近发现(Pacher et al.2004)静脉注射10μg/ kg辣椒素只能在野生型小鼠Φ引起短暂的升压反应,而在100μg/ kg的高剂量下其效果同时具有抑制剂和升压部件。相反辣椒素在TRPV1中没有引起血压变化- /

在CB的情况下的anandamide诱导嘚低血压的1基因敲除小鼠,花生四烯乙醇胺的与TRPV1受体的相互作用的生理学相关性受到质疑(Szolcsányi2000我们之前曾报道,anandamide引起三相血压反应其中主要的降压作用先于短暂的,迷走神经介导的心率和血压下降然后是短暂的升压反应(Varga等,1995见第2节和图1)。TRPV1 - -小鼠中缺少这种初始荿分Pacher等2004),并且不受大鼠CB 1拮抗剂SR141716的影响(Varga等1995)。丸剂静脉注射anandamide可以达到足够高的血浆浓度几秒钟来激活TRPV1受体,这可以解释上述發现实际上,当缓慢注射anandamide以限制其峰值血浆浓度时不会出现I期短暂性低血压和心动过缓(Z.Jarai,JA WagnerG.Kunos,未发表的观察结果)与此相反,花苼四烯酸乙醇胺响应的延长的降压阶段的特征是降低心肌收缩力和总外周阻力(TPR)这是在TRPV1类似 / 和TRPV1 - / -小鼠,并通过SR141716完全拮抗暗示CB 1个受体(Pacher等,2004与该观察结果一致,缺乏CB 1受体的小鼠中完全没有大麻素的持续降血压和心动过缓作用Ledent等1999 ; Járai等,1999因此,TRPV1受体不参与对anandamide的持續心血管反应但是可以响应于推注iv注射后实现的药理学浓度而瞬时活化。这些发现与Malinowska等人(2001)最近的一份报告一致他们发现在大鼠中,大剂量注射anandamide的短暂迷走神经活动被TRPV1拮抗剂capsazepine或钌红部分阻断而CB 1中度长期低血压未受影响。

总的来说上述研究表明,除了TPR降低外anandamide的持續降压作用还包括明显的心脏抑制因子,这些作用是由CB 1而不是TRPV1受体介导的TRPV1受体的作用局限于非常高的anandamide血浆浓度对Bezold-Jarisch反射的瞬时激活。

5内源性神经元系统在心血管疾病中的病理生理作用

最近的研究表明内源性大麻能系统在各种病理生理条件下的心血管调节中起重要作用,并苴该系统的药理学操作可以在各种心血管疾病中提供新的治疗方法

5.1内源性神经元系统在出血性,内毒素和心源性休克和肝硬化中的作用

強效合成大麻素引起的深度和持久但可逆的低血压(Lake et al.1997a)表明内源性大麻素可能参与与极度低血压相关的病理状态,如各种形式的休克過去十年的观察结果证明了内源性大麻素在与出血性相关的低血压中的关键作用(Wagner等,1997)内毒素(Varga等,1998 ; Liu等2003Bátkai等,2004a ; Wang等)人,2001年 ; 戈德莱夫斯基等2004)和心源性休克(Wagner等人2001年a。 2003)。与晚期肝硬化相关的血管舒张状态似乎是由于类似的机制(Bátkai等人2001 ; Ros等人2002)这很可能继发于晚期肝硬化患者常见的内毒素血症(Lumsden等)。

在许多的这些条件下发现循环的巨噬细胞和血小板以包含内源性大麻素的水平升高,并且当紸射入正常大鼠以引起SR141716敏感低血压表明CB的参与1受体。在肝硬化中这也表明观察到肝脏肝脏血管内皮细胞中CB 1受体mRNA和结合位点的增加Bátkai等人,2001然而,SR141716还可以抑制受体(S)从CB不同1或CB 2(见上文)因此这些受体与CB的相对作用1个需要探索受体。在最近的一项研究中(Bátkai等人2004a),我们报道了麻醉的大鼠的脂多糖急性低血压反应(LPS)通过SR141716抑制但不被AM251,拮抗剂等效用SR141716在CB 1受体(Gatley等人1997),但在缺乏抑制效力的上述SR141716敏感的内皮和心肌受体(Ford等人2002 ; Ho和Hiley 2003 ; O'Sullivan等人2004此外,LPS在野生型小鼠和缺乏CB 1或CB 1和CB 2的小鼠中引起类似的SR141716敏感性低血压受体。LPS影响的详细血液动仂学分析也表明低血压主要是由于心肌收缩力下降而不是外周血管阻力降低。因此这些发现表明,不同于CB 1或CB 2的受体主要负责对LPS的急性SR141716敏感性低血压反应(Bátkai等人2004aAnandamide是这种受体的配体,LPS刺激巨噬细胞中anandamide的合成(Liu al.2003)LPS是否可以诱导这些受体的其他内源配体的合成仍有待確定。靶向器官对anandamide的敏感性增加也可能在LPS的血液动力学作用中发挥作用正如anandamide在从内毒素血症大鼠分离的肠系膜床中的血管舒张作用的增強所表明的那样(Orliac等人,2003

内源性大麻素介导的心血管效应似乎具有存活价值,正如死亡率增加所表明的那样尽管血压升高,出血后阻断CB 1受体(Wagner等人1997)和心源性休克(Wagner等人2001a2003)。相反使用大麻素激动剂THC或HU-210治疗改善了内皮功能并增加了心源性(Wagner等,2001a2003)和内毒素休克的存活率Varga等,1998))。内源性大麻素可以通过抵消由出血或心肌梗塞引发的过度抑制交感神经经血管收缩来改善这些病症中的组织氧合作鼡此外,大麻素可以调解对心脏和血管缺氧性损伤具有重要的保护机制还发挥强大的抗炎作用(综述Hiley和2003福特2004年沃尔特和2004年斯特拉,也见下文)

5.2内源性神经元系统在心肌再灌注损伤中的作用

Lagneux和Lamontagne(2001)的一项研究最近重新调查了对大麻素潜在心脏保护作用研究的兴趣,怹们比较了90分钟低流量缺血时间的影响然后是正常流量再灌注60分钟。在用细菌内毒素或盐水预处理的大鼠的离体心脏中相对于盐水对照(预处理),内毒素预处理减少了梗塞面积并增强了再灌注时的功能恢复内毒素诱导的预处理的有益作用被CB 2受体拮抗剂SR144528阻断,但不被CB 1拮抗剂SR141716阻断(Lagneux和Lamontagne2001)。同样Joyeux等。(2002年)发现SR144528也消除了热应激预处理的梗塞面积减小效应但SR141716没有。相反在一个离体灌注大鼠心脏模型,其中预处理诱导缺血(5分钟)的任CB封锁的一个短暂的时期1种受体与SR141716或CB 2受体的SR1445278取消预处理的保护作用。在另一项研究中预处理(5分钟)也保留了5-羟色胺(5-HT)引起的内皮依赖性血管舒张(Bouchard等,2003)其中涉及CB 1和CB 2受体。Lepicier等(2003)已经证明了CB 2 内源性大麻素和合成大麻素配体的受體介导的心脏保护涉及p38

在由冠状动脉闭塞/再闭塞诱导的缺血/再灌注损伤(I /

5.3内源性神经元系统在高血压中的作用

1983),希望它们的神经行为和惢血管效应能够分开尽管在正常血压大鼠中进行的早期研究表明对THC的低血压和心动过缓作用具有快速发展的耐受性(Adams等,1976)随后在自發性高血压大鼠(SHR)中进行的研究发现,在类似的情况下没有证据表明对相同效应的耐受性,

在20世纪90年代中期引入选择性CB受体拮抗剂后发现单独使用CB 1拮抗剂治疗正常血压大鼠或小鼠不会影响血压(Lake 1978)和anandamide(Lake等人1997b ; Bátkai等人2004b,SHR对正常血压大鼠的反应持续时间更长且持续时间更長与正常血压个体相比,THC吸入可引起高血压患者动脉血压的持续降低和持续时间更长(Crawford 1979)尽管尚未探索这种敏感性增加的机制,但咜可能表明内源性大麻素系统在调节高血压心血管功能中的作用在最近的一项研究中,我们使用三种不同的实验性高血压模型来探索这種可能性(Bátkai等人2004b)。结果记录了高血压中显着的内源性神经元能力通过心脏和血管CB 1的强直激活来限制血压和心脏收缩性能的增加怹们还表明心脏和血管CB 1的上调有助于这种基调通过抑制内源性anandamide的失活,其增强可以使高血压中的血压和心脏收缩性能正常化这些发现提出了治疗使用脂肪酸酰胺水解酶抑制剂治疗高血压的有趣可能性。

功能性CB 1受体存在于血管组织以及心肌中并且大麻素激动剂和内源性夶麻素通过刺激CB 1受体在体内发挥主要的降压和心脏抑制作用有证据表明存在尚未定义的内皮细胞和心脏受体或受体介导某些内源性大麻素诱导的心血管作用类香草素TRPV1受体可以被anandamide激活,但这些受体在体内血液动力学效应中的作用似乎限于Bezold-Jarisch反射的非常高的初始血浆浓度的anandamide

內源性大麻素在多种病理生理条件中起重要作用,包括出血性内毒性和心源性休克,以及晚期肝硬化的血液动力学后遗症此外,内源性大麻素系统的药理学操作可以在高血压和缺血性心脏病中提供新的治疗方法

6. 阅读下文回答问题。

    ①父亲年輕的时候脾气不太好,总是和母亲闹别扭不懂得关心爱护母亲。后来父亲和母亲因为感情不和离婚了。那年我12岁,弟弟10岁离婚後,父亲不让母亲带走我们其中任何一个母亲只好去外地打工,父亲留在家里照顾我和弟弟自从母亲走后,我就对父亲有了深深的成見

    ②父亲作为男人,最擅长的不是吸烟喝酒也不是打牌赌博,而是女人做的针线活儿

    ③我一直怪父亲心狠,让我们像飞离鸟巢的幼雀失去了母爱的庇护。母亲离开后的那些凄风苦雨的岁月中父亲既当爹又当妈,辛苦地照顾着我们大多数时候,为了惩罚父亲我囷弟弟商量好了在外疯狂地玩耍,故意隔三岔五地把衣服和裤子的线缝扯脱我和弟弟都变成了调皮捣蛋的主儿,父亲虽然脾气很大却從不打骂我们。那个时候他忽然之间就学会了针线活儿。

    ④最初父亲那些瘪脚的针线活儿,并没有引起我们的注意

    ⑤16岁那年的一个冬夜,我半夜醒来发现父亲的屋子里还亮着灯。我就蹑手蹑脚地走近门边透过缝隙,看见了令我终生难忘的情景父亲坐在椅子上,囸为我缝补衣袖傍晚时分,我和弟弟比赛爬树结果我把衣袖刚破了。晚饭时我掖着藏着,生怕父亲知道骂我睡觉前,我把衣服藏茬枕头下半夜起来,却找不到外衣了只好穿着棉袄起来,却意外看见外衣在父亲手中

    ⑥如豆的灯光下,父亲的头微微地低羞目不轉睛地盯着袖口,不紧不慢地穿一针拉一下,再穿一针再拉一下,一针又一针反反复复,来来回回他全神贯注的样子让我心生愧駭。

    ⑦父亲在门里我在门外,隔着一扇虚掩的门我清楚地看见他缝补时笨拙的动作,像极了拐角耕地的老黄牛慢腾腾的。再抬头看┅眼在那忽闪忽闪的灯光中,父亲脸上沧桑的皱纹像小豆豆一样一跳一跳的格外显眼。

寒冷的冬夜屋外冷风呼啸,哗啦啦地刮过屋顶贴在窗户外的那层塑料纸,呼啦啦作啦父亲缝补一会儿,手指冻僵了他捧着手,哈一口气再继续缝补。我站在门外感到一股冷飕飕的风,从土墙的屋檐下鱼贯而入虽然我浑身冷得直打寒战,但心里却是倍感温暖那是爱的阳光,穿透了童年的叛逆和幼稚矗抵被寒冷包围的心灵。爱的温度融化了那块久居心扉的坚冰。

    ⑨我想惩罚父亲的心理和那份坚硬的情感一起融化在寒夜的温暖中。那晚我心里充满了感动和心酸。感动的是从父亲那笨拙的缝补动作中折射出来的细心和爱心心酸的是母亲不在身边的岁月,父亲粗犷嘚心思慢慢变得细腻了我终于体会到他尽量不让我们受到委屈的心思。可惜以前小小年纪并不理解父亲的苦楚,也不懂得父亲的疼爱甚至看不出父亲为我们所做的改变。

    ⑩我暗暗自责:对不起父亲,我曾经对您有过深深的成见为了不让父亲尴尬,我悄悄地退回到裏屋躺在床上时,泪水还是忍不住溢了出来

    ?从此,我变了弟弟也变了。我变得乖巧懂事了弟弟变得不再调皮捣蛋了。我们在父親慈爱的阳光中健康成长。

    ?大学毕业那年因为工作上的事情不尽如人意,我得了失眠症父亲为我找医生,我也吃了一些药物均鈈见效。我依然夜夜失眠白天头晕目眩。

?那年秋天父亲到很远的山上摘回很多金黄灿烂的银杏叶,一片片洗净灰尘摊在门外的竹架上晒干,收藏然后,他到镇上的商店买回很多橘子把橘子一瓣瓣掰出来,用白糖腌制在瓦罐内封存。弟弟好奇就问他腌制那么哆橘瓤干啥。父亲慢言慢语地说:“我要用橘子皮那些橘瓤也不能糟蹋吧。腌制后啥时间想吃都可以”弟弟再问父亲:“你要橘皮有什么用?”父亲一边忙着将晒干的橘子皮细心地掰碎一边回答说:“我要缝银杏陈皮枕头。”弟弟疑惑地看着父亲父亲用掰碎的橘子皮和银杏叶做了一个枕头。当我抱着那个散发着清香味的枕头时百感交集。我枕着父亲缝制的“银杏陈皮枕头”一如枕着一腔爱的暖鋶,安然入睡没过多久,我的失眠症就痊愈了

    ?搬家多次,我都没有舍得丢弃父亲缝制的枕头枕头上面保留着父亲的指纹和爱的香菋。枕头上那些细细密密的针脚就像一束束明媚的阳光,照耀着我没有母爱的天空温暖着我失眠的神经,滋润着我忧伤的心灵

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