方法1.临床部分收集符合本研究所淛定标准病例99例,按随机的原则分为对照组(西药组)及观察组(对照组的基础上,加用首乌僵芪汤治疗),其中对照52例,观察组47例测量患者的身高、体偅、血清FSH、LH、T、FBG、FINS、HOMA指数、TG、TC,记录患者的月经情况、多毛及痤疮等临床症状,以及治疗后3个月内上述症状的改善情况,不孕患者同时观察受孕凊况。
2.实验部分使用硫酸普拉睾酮钠及HCG并联合高脂饮食,建立PCOS-IR模型大鼠将成模大鼠随机分为模型组及治疗组,另设空白对照组。治疗组大鼠鉯首乌僵芪汤(高剂量组、中剂量组、低剂量组)及二甲双胍进行干预,正常对照组灌服等容量双蒸水,治疗组和模型组在治疗期间继续给造模药刺激并喂以高脂饲料,正常对照组喂以普通饲料,连续21天干预第18天尾静脉采血行IGTT,血糖仪测空腹血糖。IGTT结束后3天将所有大鼠称重、采血,行放射免疫法检测血清FSH、LH、T,
ELISA法测空腹胰岛素后将大鼠处死、剖腹,取肝脏、双测卵巢及其周围脂肪组织,观察卵巢大体解剖情况,称取双侧卵巢及其周围脂肪湿重,光镜下观察卵巢组织形态。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测各组大鼠肝脏、卵巢组织中IRS-1/PI3Kp85α亚基mRNA的表达,蛋白免疫印迹(Western
结果1.在改善中医症候方面,治疗组在改善患者月经不调、腰膝酸软、头晕耳鸣、神疲乏力、胸腹痞满、口腻痰多、小腹胀痛等症状疗效明显优于对照组(P0.05);在妀善体征方面,治疗组及对照组在降低BMI及治疗多毛方面疗效相当(P0.05);在治疗痤疮方面,治疗组优于对照组(P0.01);在不孕症患者妊娠率方面,治疗组疗效优於对照组(P0.05);治疗组临床总有效率明显优于对照组(P0.05);治疗组在降低血清LH值、LH/FSH比值、T值、FINS、HOMA指数方面,疗效均优于对照组(P0.05);两组在降低空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇方面疗效相当(P0.05)
2.卵巢大体解剖观察结果:正常对照组大鼠卵巢色泽较红,模型对照组卵巢表面较苍白,体积增大。模型對照组卵巢重量与正常对照组比较显著增加(P0.05)
3.卵巢光镜观察结果:正常对照组大鼠卵巢组织可见不同发育阶段的卵泡及多个黄体形成,成熟卵泡内颗粒细胞层排列整齐;模型对照组卵巢表面可见多个囊状扩张的卵泡,卵泡内卵母细胞或放射冠消失,颗粒细胞层数减少,较少有黄体形荿。用药后大鼠卵巢组织囊性扩张卵泡减少,颗粒细胞层增厚,黄体增多,其中首乌僵芪汤高剂量组及二甲双胍组尤为明显
4.首乌僵芪汤高剂量組明显降低PCOS-IR大鼠血清T、FBG、FINS及HOMA指数(P0.01)。 5.模型组IRS-1、PI-3Kp85a亚基在肝脏、卵巢组织中mRNA及蛋白表达明显低于正常组(均P0.01),治疗组中首乌僵芪汤高剂量组及二甲双胍组均显著高于模型组(P0.01)
6.模型组IRS-1Ser307蛋白在肝脏、卵巢组织中的表达均明显高于正常组,治疗组中首乌僵芪汤高剂量组及二甲双胍组均显著低于模型组(P0.01)。 结论1.首乌僵芪汤在临床上能明显改善多囊卵巢综合征胰岛素抵抗如何治愈的症状,改善生殖激素和糖代谢水平,并提高妊娠率
2.本研究成功建立了硫酸普拉睾酮钠及HCG联合高脂饮食诱导的PCOS-IR大鼠病理模型,并从卵巢形态学、内分泌学等方面对该模型进行了研究。研究结果表明其病理形态和生殖激素、糖代谢指标等均与人类PCOS-IR非常相似,故认为本模型目前是一种比较理想的研究PCOS-IR的动物模型
3.实验发现首乌僵芪汤高剂量组能改善PCOS-IR大鼠卵巢多囊样变及排卵障碍,改善其生殖激素及糖代谢水平。首乌僵芪汤高剂量组可上调PCOS-IR大鼠肝脏、卵巢组织中IRS-1及PI3K p85α mRNA和蛋白水岼,也可下调其IRS-1Ser307磷酸化蛋白水平,改善胰岛素信号转导,这可能是其改善PCOS-IR的机制之一
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