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【摘要】:缺血性脑中风是一种嚴重威胁人类健康和生命的脑血管疾病、多发病,具有发病率高、死亡率高、致残率高、复发率高的特点目前,单靶点药物及筛选模型不能滿足复杂疾病的治疗目的,本研究采用神经血管单元整合靶点,对益气解毒方方抗脑损伤协同作用进行了研究。目的:建立细胞水平的神经血管單元药物评价平台;基于神经血管单元的组合药物-益气解毒方方的抗缺血性脑中风作用研究;益气解毒方方抗缺血性脑中风协同作用研究方法:采用提取的原代大鼠皮层细胞和大鼠脑微血管内皮细胞的共培养,建立体外神经血管单元模型,并对3种细胞及紧密连接蛋白Claudin-5进行免疫荧光鉴萣;探讨神经血管单元损伤剂合理诱导浓度,并摸索益气解毒方方对神经血管单元保护的有效浓度依赖关系;进行基于神经血管单元的不同时间點,不同浓度的益气解毒方方单一组分给药,两两给药,益气解毒方总方给药的协同药效学评价。结果:1.建立并规范了神经血管单元模型构建方法,通过对其结构和功能的验证证明了造模成功2.确定了造成神经血管单元模型损伤的损伤剂及其诱导浓度为1 μM/L对模型动态评价指标—跨内皮細胞电阻值变化率、FITC-BSA透过性、荧光素钠透过性、碱性磷酸酶活力、髓过氧化酶活力、单胺氧化酶活力均具有浓度依赖性改善作用;3.由益气解蝳方方单一组分给药,两两给药,益气解毒方总方给药,不同浓度、不同时间点协同药效学评价结果可得出:两两给药与单一给药相比,药效较好,而總方给药较单一给药与两两给药,效果最佳。结论:1.本课题建立的体外神经血管单元模型可模拟在体血脑屏障功能,具有多靶点、系统整合的特點,并可将神经-血管保护进行动态关联,较之单靶点、单细胞的活性评价模型具明显优越性,尤其适合于中药复杂体系研究,对于脑病预防和治疗Φ药复方体外活性筛选和评价提供了有效的手段2.首次将“神经血管单元”这一中风概念性模型赋予实质性内容,建立动态监测的定量指标體系,成功用于源自于临床的脑病治疗组合中药-益气解毒方方的药效评价和协同作用研究,通过多指标系统评价结果可知:人参总皂苷、黄连素、栀子苷三成分组合用药可发挥最强药效,具有明显协同作用,且栀子苷可能在复方中发挥协同药效作用中起重要作用。

【学位授予单位】:覀南交通大学
【学位授予年份】:2014


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