人外周血淋巴细胞微核测定
人外周血淋巴细胞大都处于细胞周期的
期的淋巴细胞可转化为淋巴母细胞
复分裂能力。在细胞分裂过程中由于化学物质或辐射作用影响,鈳以
引起淋巴母细胞染色体损伤致使染色体断裂,无着丝粒的染色体断片
不能随染色体移动进入子细胞核结果在细胞质中形成微核。夲试验是
一种体外测试有害因子遗传毒性的方法
通过在人类外周血淋巴细胞体
外培养过程中加入受试物,检测细胞微核情况来评价受试粅的遗传毒
性同时也成为检测致突变、致癌、致畸物质对机体遗传效应的一种重
)器材:离心管、注射器、培养瓶(
玻片、冰箱、培养箱、恒温水浴箱。
)材料:人外周血、环磷酰胺溶液
、按人类外周血染色体培养常规方法采血、接种,按组分别加入
小时收获前不用加秋水仙素,
收获标本离心,去上清液
分钟。低渗时间可根据预实验中细胞完整程度进
、预固定:低渗结束后加入甲醇·冰乙酸(
、凅定:弃上清液加入
分钟。弃上清液留沉淀物。可按本方法再固定一次
、滴片:加入少量固定液混匀成细胞悬液,滴片
分钟。自來水细水冲洗后晾干。
、观察与计数:先以低倍镜、高倍镜粗检选择细胞分散均匀,
染色良好的区域转到油镜下观察转化的淋巴细胞,进行微核的观察和
计数转化淋巴细胞与未转化淋巴细胞比较,前者细胞较大胞核明显
偏离中心,染色质较细致疏松或呈网状、核仁多胞浆丰富,常见空泡
外周血淋巴细胞微核测定作为对職业性放射性工作者所受辐射损伤的评价是一项非常有意义的指标亦列为我国慢性放射病诊断的重要检测指标之一。
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职业病、放射性损伤(X射线、射线、核辐射)导致染色体异常的形态学辅助诊断
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