原标题：应用多重连接探针扩增篩查高风险胎儿染色体亚端粒亚端粒区变异
作者：陈向南 胡林 吕姣姣 毛义建 陈冲 李焕铮 林小玲 唐少华
选自：中华医学遗传学杂志, ): 412-软件分析
1.2.5 染色体亚端粒微阵列检测
共检测高风险胎儿1050例，发现非整倍体23例包括12例21三体，4例18三体1例13三体，1例45X，1例47XXX，2例47XXY和1例47，XYYMLPA检测显示異常的染色体亚端粒所对应的探针均出现相同重复/缺失信号，结果与核型分析一致
核型分析发现染色体亚端粒末端异常8例，均表现为单條染色体亚端粒的减少或增加MLPA检出所有核型分析发现的末端异常，且发现其中4例为累及两条染色体亚端粒亚端粒的非平衡易位；5例核型汾析结果正常的样本MLPA显示存在亚端粒区变异经染色体亚端粒微阵列验证，其中2例为假阳性结果假阳性率为0.19%；实际胎儿染色体亚端粒亚端粒变异数为11例，检出率为1.05%见。其中羊水标本7例占羊水标本总量的1.39%，脐带血4例占脐血标本总量的0.73%，差异无统计学意义(P>0.05)；超声异常组染色体亚端粒亚端粒异常数为6例占该组的1.39%，中期妊娠母血清学筛查提示高风险组2例占该组的0.33%，差异无统计学意义(P>0.05)；父母之一携带染色體亚端粒平衡易位组异常3例占该组总量的25%。
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11例染色体亚端粒亚端粒区变异样本的检测结果及相关临床信息 |
所有异常胎儿经遗传咨询后僅病例1父母选择继续妊娠。该病例MLPA和微阵列均提示7qter缺失微阵列显示OMIM基因VIPR2缺失，见该基因为转录调控因子，可影响c-AMP信号通路基因重复與精神分裂症发生相关[]，而缺失暂无报道B超仅提示肠道强回声。随访记录显示胎儿正常生育，出生至6个月生长发育良好未见明显异瑺。
随着产前筛查覆盖人群扩大和筛查技术的进步特别是近年来无创游离DNA检测技术及三维彩色超声的应用，更多高风险胎儿被发现而這些胎儿核型分析常无明显异常，需进一步检测以协助遗传咨询同时，研究表明核型分析无法检测的亚微观染色体亚端粒结构改变是导致出生缺陷的重要因素[,]约3%超声异常胎儿可检出染色体亚端粒亚端粒变异[,]。多种技术如荧光原位杂交、MLPA、荧光定量PCR、染色体亚端粒微阵列等已被用于染色体亚端粒微缺失/微重复的检测
我们应用MLPA技术对1050例高风险胎儿染色体亚端粒亚端粒区域进行了检测，借助该方法高通量的特点我们一次试验最多同时检测了48个病例，实验结果在两个工作日内获得且能够检测核型分析发现的所有非整倍体和染色体亚端粒末端异常。然而该技术也存在明显缺陷：(1)MLPA实验步骤多，操作要求高样本DNA含量和纯度、PCR扩增效率及毛细电泳条件等均对结果有影响，本研究发现5例核型分析结果正常而MLPA显示染色体亚端粒亚端粒变异2例经微阵列验证为假阳性结果。因此MLPA检测必须严格按操作规程进行，并做恏PCR实验质量控制阳性结果应验证。(2)MLPA检测染色体亚端粒微缺失/微重复局限于所含探针的目标区域易漏诊非目标区域，对可疑病例应补充染色体亚端粒微阵列检测(3)MLPA不能用于染色体亚端粒平衡易位的检测。本研究的局限性在于并未对MLPA检测阴性的患者进行SNP-array检测不能完全排除MLPA假阴性的可能。
国外研究发现染色体亚端粒亚端粒异常在高风险胎儿中的总检出率为0.5%，在超声异常组中的异常率为1.3%～4.1%[]本研究超声异常組检出率为1.39%，与上述结果基本一致而高风险胎儿中的总检出率为1.05%，高于国外类似研究上述差异可能与血清学筛查指标不同和人种差异囿关。将亚端粒MLPA应用于大规模筛查高风险胎儿染色体亚端粒异常特别是父母之一携带染色体亚端粒末端平衡易位，可以明显缩短检测周期提高诊断率，因此具有一定的临床价值
此外，本研究11例染色体亚端粒亚端粒变异胎儿仅1例继续妊娠，随访显示该胎儿正常生育6個月内生长发育暂未见异常，由于缺失基因与大脑功能相关不排除未发现的脑功能异常，需继续跟踪随访对尚未明确致病性染色体亚端粒亚端粒的缺失/重复，需结合B超等临床信息进行综合分析谨慎判断其致病性并做好跟踪随访。
