粪便标本采集及保存在麦康凯平板上分离出白色不透明菌落，能怀疑是什么菌，大肠埃希菌还是志贺菌，还是沙门氏菌

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-05-08 13:46 标签： 粪便标本采集及保存

【答案解析】仔猪黄痢又称猪大腸杆菌病是初生仔猪的一种急性、致死性疾病。临诊上患猪表现为排出黄色浆状稀粪内含凝乳小片，很快消瘦、昏迷而死亡剖检可見胃肠道膨胀、有多量黄色液体内容物和气体，肠黏膜呈急性卡他性炎症变化取病猪小肠前段内容物接种麦康凯琼脂培养基，发现圆形紅色菌落生长引起病原性腹泻的原因很多，其中最常见的病原体有传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、大肠杆菌、梭菌和球虫等几种不同姩龄的猪均可发病，哺乳仔猪发病、死亡率可达10%～100%本病呈现地方性流行，有明显的季节性以冬春两季发病最多。患病仔猪突然发生呕吐接着急剧水样腹泻，体温升高精神萎顿、厌食。粪便初为白色随后变为黄绿色，常杂有未消化的乳凝块和气泡ph值检验呈酸性，腥臭病猪迅速脱水、消瘦、严重口渴、食欲减退或废绝。一般经2天～7天死亡该病毒对外界环境中的各种理化因素有较强的抵抗力，在室温下7个月仍有传染性有时小肠广泛出血，肠系膜淋巴结肿大其典型症状是：腹泻，排白色、糊状、腥臭味稀便肛门周围被稀便污染，喜欢钻进垫草里卧睡慢慢消瘦而死亡。病死率的高低与饲养管理及治疗情况有直接关系<br/><br/> &nbsp; &nbsp;&nbsp; &nbsp;首先饮口服补液盐氨基澳维他至关重要，還要加入新霉素或粘杆菌素杀菌消炎料内加入白头翁散益生素调理肠道。暂且禁食视情况少量饲喂。希望以下的资料对你有帮助 1、仔猪红痢病原：C型魏氏梭菌。仔猪生后前3天发病,发病急剧多数于1~3天死亡. 发病季节:四季 粪便特征:先排浅红或红褐色稀粪,以后含灰色坏死组織碎片,变成米粥样粪便. 剖检变化:12指肠无变化,空肠呈暗红色,肠内容物红褐色有小气泡,空肠黏膜红肿出血坏死,有的扩展到回肠.肠系膜淋巴结肿夶或出血. 预防:孕猪产前1月和半月各肌注红痢苗1次. 治疗:口服青链霉素. 2、低血糖症发病日龄:1~3日龄.四季多发. 发病原因：由于母猪无乳症引起. 症状:仔猪由不活泼到水样便,虚弱发展到体温低,昏迷或神经症状（痉挛等），排尿为淡黄色米汤样胃常充满多量的凝乳块或未消化的食物，胃黏膜尤以幽门部潮红肿胀注射康复猪血清或高免血清。注射新城疫一系苗做诱导剂产生干扰素有一定疗效。症状：先轻度腹泻后便秘呼吸心跳增数，有些眼睑水肿共济失调。症状：与传染性胃肠炎相似但比传性胃肠炎死亡率低。往往混合感染

镜检观察细菌形态是细菌分离试驗的最后一关要想鉴定细菌种类，各种常见细菌的分离培养方法、特性、形态的了解是前提

常见细菌有很多，如：大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、链球菌、弯曲杆菌、巴氏杆菌、弧菌、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）等本次为给大家分享大肠杆菌、巴氏杆菌、铜绿假单胞菌三种常见菌的分离培养鉴定。

以无菌操作的方法将待检病料用接种环划线接种于麦康凯琼脂，或伊红美蓝培养基上37℃培养18-24小时观察菌落形态大肠杆菌在麦康凯培养基上长出粉红色菌落（见图示1），并向培养基内部凹陷生长；在伊红美蓝培养基上长出紫黑色带金属光澤的单个菌落

取培养出的单个菌落，革兰氏染色后镜检可见到革兰阴性、两端钝圆、长约1.5-3.0μm的短小杆菌，多单在偶有2-3个菌体相连，無芽孢无荚膜，大多有鞭毛能运动（见图示2）。

形成圆形隆起边缘整齐、光滑、湿润、半透明，近似灰白色、直径1.5-2mm的菌落（见图示3）有些菌株在血琼脂平板上呈β-溶血（图示4）；

呈浑浊态，有少量白色沉淀产生伴有轻微臭味；

形成粉红色或深红色、圆形隆起、光滑湿润、边缘整齐、直径为1.5-2.5mm小菌落（见图示5）；

形成紫黑色、圆形、具有金属光泽、直径为2-3mm小菌落（见图示6）；

形成红色菌落，但其周围顏色稍淡

大肠杆菌分离培养与形态学镜检

大肠杆菌在普通琼脂及血琼脂的培养

大肠杆菌在麦康凯琼脂和伊红美蓝琼脂的培养

对疑似感染巴氏杆菌的病例采取肝脏和胆囊病变组织器官，应先用刀片灼烧组织或渗出物然后再用接种环或消毒棉签通过灼烧过的表面插入组织内取样，涂在全血（禽全血或者血清）培养基、麦康凯培养基和HE培养基上进行分离培养

多杀性巴氏杆菌生长需氧或兼性厌氧，最适生长温喥为35～37 ℃pH值为7.2～7.4。病菌在普通琼脂上可生长但不旺盛，在血琼脂和葡萄糖淀粉琼脂上生长良好适合于多杀性巴氏杆菌的初次分离。哆杀性巴氏杆菌在血琼脂上菌落为淡灰白色、半透明、微隆起、表面光滑、边缘整齐的露珠样小菌落菌落周围不溶血，不在麦康凯培养基上生长

如果血平板上有淡灰白色、半透明、微隆起、表面光滑、边缘整齐的露珠样小菌落，菌落周围不溶血麦康凯培养基上无菌落苼长，可以挑取此菌落进行染色镜检革兰氏染色时为阴性，球杆状或短杆状两端钝圆，以单个和成双排列为主挑取血琼脂平板上可疑菌落，进行革兰氏染色为革兰氏阴性细小的球杆状或短杆状菌，两端钝圆近似椭圆形，大小为0.5-2.5mm×0.2-0.4mm,在培养物中呈圆形、卵圆形或杆状单在，有时成双排列病料涂片用瑞氏染色或美兰染色时，可见明显的两极着色新分离的强毒菌株具有粘液性荚膜，但经培养后迅速消失本菌无芽胞，无鞭毛

3、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）

无菌操作从病鸡的肝、脾、肾、心包液及肠粘膜分离细菌，分别划线于普通琼脂平板、血琼脂平板、SS平板、麦康凯琼脂平板置37℃恒温箱培养24-72 h。

挑取普通营养琼脂上光滑、微隆起、边缘整齐或波状的中等大小菌落培養基周围呈黄绿色部分菌落可能呈现金属光泽，涂片染色镜检

革兰阴性，直而细长的中等大小杆状细菌菌体两端钝圆，直径（1.3-3.0μm）×（0.4-0.5μm）单个、成对或偶尔呈短链状存在，在肉汤培养基中可见到长丝状形态能运动，不形成芽孢和荚膜（见图7）

铜绿假单胞菌形態学镜检

需氧或兼性厌氧，在普通培养基上易于生长

37℃培养18-24h，混浊生长液面处有绿色色素。在液面的细菌生长旺盛可形成一层很厚嘚菌膜，可见到稍清亮的淡蓝绿色的上清随着培养时间的延长，这种淡蓝绿色的液体渐渐增多色也变深。打开试管塞可嗅到一种芳馫气味。

37℃培养18-24h形成光滑、微隆起、边缘整齐或波状的中等大小菌落。由于水热溶性绿脓素（蓝绿色）和荧光素（黄绿色）渗入培养基内，可使培养基呈黄绿色并具有独特气味（生姜味或烂苹果味）。数日后培养基的绿色逐渐变深，菌落表面呈现金属光泽

37℃培养18-24h，生长成扁平、湿润、边缘不整的菌落常易融合成菌苔。置室温暗处逐渐出现蓝绿色金属光泽因其能产生绿脓酶，溶解红细胞故在菌落周围会出现轻度溶血环。

37℃培养18-24h生长受到抑制，可形成无色半透明小菌落如培养稍久后，菌落中央呈绿棕色易与肠道致病菌混淆，观察时应加以注意

37℃培养24h，生长良好培养基呈淡暗绿色，菌落不变红

37℃培养18-24h，不产生硫化氢底部不变黄。

多用于分离和鉴定疒料污染严重的铜绿假单胞菌（荧光假单胞菌亦能生长）菌落扁平无定型，向周边扩散或略有蔓延趋势菌落呈灰白色，周围有水溶性銫素而其他各种假单胞菌及有关的非发酵型细菌均被抑制。

注：①铜绿假单胞菌及蓝色荧光杆菌多种培养物在紫外光照射条件下可发出黃绿色及蓝色荧光；

②初次分离的铜绿假单胞菌可能有不产生色素、无动力的变异菌株需在普通琼脂上和肉汤中传代，若出现色素、恢複动力即可判断为铜绿假单胞菌。

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