样本分离出变形肠道杆菌的分离鉴定,是否能定位变形肠道杆菌的分离鉴定感染

&如何治疗奇异变形杆菌感染?
如何治疗奇异变形杆菌感染?
发病时间:不清楚
奇异变形杆菌感染脚烂应该如何治疗?脚烂这几年都有在治疗但是一直没有治好,有一段时间好有段时间又开始烂,反反复复的。一直在广东省电白县人民医院治疗在人民医院检查出是奇异变形杆菌感染。也去专业的皮肤病医院看过也不知道是怎么回事。应该如何治疗!有什么药物可以治疗的。合理膳食,应该多吃一点什么,忌吃什么东西?补充什么维生素?
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医生回答(1)
擅长:专业妇科疾病治疗
您好,奇异变形杆菌属于变形杆菌的一种。变形杆菌广泛存在于自然环境中,为条件致病菌。因此提高自身免疫力是关键。您有肝硬化,这本身就造成了您抵抗力较弱,建议您加强营养,主食以细、软、烂为佳,饮食应高维生素(维生素C、B2、K)、高热量、低脂肪、适当多吃蛋白质。对于足部感染的治疗,主要是坚持上药,有效的抗生素主要有庆大霉素、氯霉素,但最好能根据药敏结果来选择。
向医生提问
(湿温、湿瘟)
  副伤寒是副伤寒杆菌甲、乙、丙引起的急性消化道传染病。副伤寒甲、乙的症状与伤寒相似,但一般病情较轻,病程较短,病死率较低。本病分布中国各地,常年散发,以夏秋季最多,发病以儿童,青壮年较多。副伤寒丙的症状较为不同,可表现为轻型伤寒,急性胃肠炎或脓毒血症。
多发人群:所有人群
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阿卡波糖片
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全国三甲医院,主任级名医在线坐诊已有124家三甲医院,828位主任医师在线答疑中华医院感染学杂志2002年第12卷第11期
产超广谱Β2内酰胺酶变形杆菌耐药机制
和分子流行病学研究
贾 宁1,林茂虎2,陈世平1,索继江1,邢玉斌1,江朝光1
(1.解放军总医院,北京.第一军医大学南方医院,广东广州510515)
摘要:目的 对产超广谱Β2内酰胺酶(ESBLs)变形杆菌的耐药机制和分子流行病学进行初步探讨。方法 收集、鉴定菌株,进行ESBLs检测、等电聚焦测定Β2内酰胺酶等电点和染色体PCR扩增blaTEM和blaSHV基因、
DNA的PFGE分析。结果 分离的45株变形杆菌中有7株产ESBLs,blaTEM和blaSHV基因扩增和等电聚焦
结果显示7株产ESBLs变形杆菌全部为TEM型Β2内酰胺酶;PFGE结果时间上和空间上未见有相关菌株的存在或明显的集中趋势。结论 合理使用抗生素对预防耐药菌的产生和控制医院感染十分重要;对患有产ESBLs变形杆菌感染的患者应加强消毒隔离措施,防止医院感染的暴发和流行。关键词:变形杆菌;超广谱Β2内酰胺酶;医院感染;分子流行病学
中图分类号:R278.99  文献标识码:A  文章编号:02)
MechanismofAntibiotic-resistanceandtheMolecular
EpidemiologyofESBLs-producingProteus
JIANing,LINGMao2hu,CHENShi2ping,SUOJi2jiang,XINGYu2bin,JIANGChao2guang
(GeneralHospitalofPLA,Beijing100853,China)
Abstract:OBJECTIVETotrytodeterminethemechanismofantibiotic2resistanceandmolecularepidemiologyofESBLs2producingProteus.METHODSIsolateswhichhadbeencollectedandidentifiedweresubjectedtodrug
2lactamasegenePCR,Β2lactamaseisoelectricfocusingandsusceptibilitytest,ESBLsdetection,TEM2andSHV2Β
chromosomalDNAanalysisbyPFGE.RESULTSSevenESBLspositiveisolatesof45strainsproducedTEM2
2lactamasedeterminedbyPCRandisoelectricfocusing.NocloserelativeisolateswerefoundbyPFGE.typeΒ
CONCLUSIONSItisimportanttouseantimicrobialscorrectlyforpreventingdrug2resistantproducingProteusanddiminishingtheirprevalence.Disinfectionandisolationmeasuresshouldstillbeenhancedtowardsthepa2tientsinfectedbyESBLs2producingProteustopreventnosocomialinfectionoutbreakandprevalence.
2lactamases(ESBLs);NMolecularepidemiologyKeywords:PExtended2spectrumΒ
  超广谱Β2内酰胺酶(ESBLs)是指质粒介导的,能被Β2内酰胺酶抑制剂抑制的,能水解甲氧亚氨基2内酰胺类抗生素如头孢他啶、头孢噻肟及氨曲南Β
等单胺类抗生素Β2内酰胺酶。ESBLs的产生不仅对头孢菌素类和单酰胺类抗生素的作用和地位带来威胁,还对感染性疾病的治疗和医院感染的控制产生严重的影响1。ESBLs主要发现在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,但近年来肠杆菌科其他细菌产ES2
BLs的比率在逐步升高,Saurina等报道变形杆菌中有9.5%产ESBLs,少于肺炎克雷伯菌(44%),但
杆菌进行了ESBLs检测,并对产ESBLs变形杆菌的耐药机制和分子流行病学进行了初步探讨。1 材料与方法
1.1 产ESBLs变形杆菌的筛选 收集解放军总医
院和解放军304医院1998年8月~1999年12月临床分离的45株变形杆菌,按NCCLS(1999年版)3推荐方法,对所有临床分离株进行双纸片协同实验(DDST)筛选产ESBLs变形杆菌,并用纸片确认实验予以确认。药敏纸片购自英国Oxoid公司。1.2 聚合酶链式反应(PCR) 采用煮沸裂解法提取细菌DNA,SHV型Β2内酰胺酶引物:
2GGTTATGCGTTATATTCGCC23′A:5′
2TTAGCGTTGCCAGTGCTC23′B:5′
2内酰胺酶引物:TEM型Β
2TCGGGGAAATGTGCGCG23′C:5′
多于大肠埃希菌(4.7%)。为了更加有效的防止和控制产ESBLs变形杆菌医院感染的暴发和流行,我们对1998年8月~1999年12月临床分离45株变形
收稿日期:; 修订日期:基金项目:自然科学基金资助项目
2TGCTTAATCAGTGAGGCACC23′D:5′
  循环条件为95℃预变性5DNA变性95℃1min,退火58℃1min,延伸72℃2min,共35个循环;72℃延伸10min。以产TEM24、SHV23型产ES2BLs的大肠埃希菌各1株为阳性对照。
1.3 脉冲场凝胶电泳(PFGE) 变形杆菌包埋于低熔点胶(Promega公司)制成胶块,用溶菌酶、蛋白酶K破壁及去蛋白后,于含50U的Not?限制性内切酶(Gibco公司)缓冲液中酶切18h。脉冲电场凝胶电泳装置为Bio2rad公司的Gene2path系统。EB染色,紫外灯下观察并拍照。结果采用MINTS
.12No.112002ChinJNosocomiolVol
2.1 产ESBLs的分离率 从患者分离的45株变
形杆菌中分离出7株医院感染15.5%。产ESBLs变
形杆菌,所有产ESBLs变形杆菌感染的患者在分离前均使用过三代头孢菌素或氨曲南。
2.2 blaTEM和blaSHV基因PCR检测 所有产ESBLs的变形杆菌菌株产生长度均为971bp的TEM型的条带,未扩增出868bp的SHV型条带,
数值分类软件进行平均链锁聚类分析。
1.4 等电聚焦(IEF) 冰浴条件下用超声细胞破碎仪破坏细菌细胞壁,4℃12000转离心1h,取上清提取Β2内酰胺酶。等电聚焦在薄层聚丙烯酰胺胶液上进行,先后用头孢硝噻吩和考马斯亮蓝染色。根据标志物rPI值绘制标准曲线,确定ESBLsPI值。2 结 果
图1 产ESBLs变形杆菌blaTEM基因PCR电泳结果
2.3 Β2内酰胺酶的等电聚焦结果 见表1、图2。
表1 Β2内酰胺酶的等电聚焦结果
1 Pmi2 Pmi3 Pvu4 Pvu5 Pvu5a Pvu5 分离时间
99.9..7.9.8..12.16
分离部位耳分泌物
痰痰脓液痰痰痰
科室耳鼻喉呼吸科呼吸科骨科呼吸科呼吸科呼吸科
DDST+++++++
blaTEM+++++++
blaSHV-------
IEF(PI)5.6
5.2 5.9 6.5-4.8 5.9 6.5 7.355.64.8 5.94.8 5.
图2 产ESBLs变形杆菌等电聚焦结果
(左侧为头孢硝噻吩染色,右侧为考马斯亮蓝染色)
图3 产ESBLs变形杆菌PFGE电泳结果
2.4 脉冲电场凝胶电泳(PFGE) 用Not1对7株
产ESBLs的变形杆菌染色体进行酶切后可产生5~10条DNA片段,范围约10~800kbp。7株菌中除5a、5b条带完全相同,5与5a、5b位置不同的条带5条,其他各菌均有位置不同的条带6条以上(图3)
所有产ESBLs变形杆菌感染的患者在分离前均使用过三代头孢菌素或氨曲南。三代头孢菌素和氨曲南等广谱抗生素的大量广泛应用是导致革兰阴性菌产生ESBLs的重要原因之一4,世界范围内不断有
中华医院感染学杂志2002年第12卷第11期
PFGE条带相同,则可被认为是同一菌株;若细菌仅
产ESBLs肠杆菌科细菌的流行报道6,因而合理使用抗生素对预防耐药菌的产生和控制医院感染十分重要。
7株产ESBLs变形杆菌均只扩增出TEM型酶,Β2内酰胺酶等电聚焦实验结果以产PI为5.9的2内酰胺酶居多,可能是TEM24、6、8、27型酶,具体Β
为哪一型还需进一步测定核苷酸序列。2和4号菌还产PI为6.5的Β2内酰胺酶,可能为TEM224(CAZ26),TEM246(CAZ29),TEM261(CAZ2hi),与这两株菌的药敏实验相符,对头孢他啶耐药,而没有含PI为6.5的Β2内酰胺酶的菌株对头孢他啶均敏感。2号菌还产生PI为5.2的Β2内酰胺酶,此等电点的Β2内酰胺酶以耐酶抑制剂的酶为主;4、5a、5b号菌产生的
2内酰胺PI为4.8和4号菌产生的PI为7.35的Β
酶,在已发现的TEM型酶中没有此等电点的酶,由于本实验测定的是Β2内酰胺酶粗提液的等电点,并使用能水解Β2内酰胺酶且变红的Nitrocefin进行显色,故考虑这两条带可能反映的是其他类型的Β2内酰胺酶。5和5a、5b号菌对照资料发现分离自同一患者不同送检时间的标本,5与5a间隔4个月,5a和5b间隔10d;5a、5b等电点完全相同,但与5(PI为5.6)不同。三代头孢菌素的使用可抑制敏感细菌,也有助于产ESBLs细菌的筛选和诱发点突变,使等电点发生改变;3号菌没有测出等电点,考虑可能是在实验操作过程中没有保持好低温(0℃以下),而使2内酰胺酶失活或活性减弱,从而对Nitrocefin不敏Β
感而不显色所致。BlaTEM和blaSHV基因PCR检测与等电聚焦方法结合可初步判断超广谱Β2内酰胺酶的类型。7株产ESBLs变形杆菌的全基因组
1、5a、5b号菌PFGE结果采用平均链锁聚类分析,5、
为A型,4、3号菌为B型,2号菌为C型。其中5a、5b
条带完全一致,相似性系数为100%,5和5a、5b号菌PFGE显示有位置不同的条带5条,相似性系数为71.5%。Tenover等5认为,细菌分离株如果
一个位点发生突变,则有1~3条条带位置不同,可认为是密切相关菌株;若有2个不同的基因位点发生突变,则有4~6个条带不同,则为可能相关菌株,若有6条以上的位置差别,便可确定是不相关菌株。这种标准不考虑不同菌种间不同程度的变异。密切相关菌株和可能相关菌株可被认为是某型菌株的不同亚型(如A1、A2);而不相关菌株可被看作不同型菌株(如B、C)。5a与5b的PFGE条带完全相同,为同一菌株;5与5a、5bPFGE结果有位置不同的条带5条,为不同亚型的菌株,证实了等电聚焦结果。实
验所分离的产ESBLs的变形杆菌以1999年居多,空间上以呼吸科居多,但PFGE结果除5、5a、5b相关性大以外,时间上和空间上未见有相关菌株的存在或明显的集中趋势,提示所选时间内没有发生产ESBLs变形杆菌的流行,但仍应加强消毒隔离制度,
严格遵守无菌操作规程,以防止耐药菌株的播散。参考文献:
1 沈定霞,周贵民.产超广谱Β2内酰胺酶细菌的研究进展[J]国
外医学临床生物化学与检验学分册,):24226.
2 SaurinaG,QualeJM,etal.AntimicrobialresistanceinEnter2
obacteriaceaeinBrooklyn,NY:epidemiologyandrelationtoantibioticusagepatterns[J.45(6):8952898.
3 NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards.Perfor2
mancestandardsforantimicrobialsusceptibilitytesting[S.9thinformation..
4 GarauJ.Beta2lactamases.Currentsituationandclinicalimpor2
IntensiveCareMed,
Interpreting
StandardM1002S9,Pennsylvania:NCCLS,
JAntimicrobChemother,2000,
 TenoverFC,ArbeitRD,GoeringRV,etal.
chromosomalDNArestrictionpatternsproducedbypulsed2fieldgelelectrophoresis:criteriaforbacterialstraintyping[J.
JClinMicrobiol,):.
6 张勇昌,赵桂兰,赖伟忠.产超广谱Β2内酰胺酶病原菌的检测及
耐药性监测[J.中华医院感染学杂志,):4692470.
(接第807页)
1 王枢群.医院感染监测的发展[J.
中华流行病学杂志,1996,
中华医院感
给充足热量及免疫调节剂,缩短住院时间;注意病房
通风换气、消毒和患儿隔离,以减少交叉感染机会。只有加强医院感染的监测,才能有效地降低新生儿医院感染发生率。参考文献:
2 刘泽兰,杨幼英.儿科医院感染的前瞻性监控[J.
染学杂志,):64.
3 杨元芝.医院感染新生儿肠炎20例报告[J.
中华医院感染学
杂志,):1582159.
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10.3784/j.issn.09.05.009
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