CaV1.1-R528H突变小鼠甲亢性低钾型周期性麻痹模型的建立及其机制的研究--《安徽医科大学》2016年硕士论文
CaV1.1-R528H突变小鼠甲亢性低钾型周期性麻痹模型的建立及其机制的研究
【摘要】：背景与目的低钾型周期性麻痹(hypokalemic periodic paralysis,简称HPP)主要分为散发型低钾型周期性麻痹(sporadical hypokalemic periodic paralysis,SHPP)、家族性低钾型周期性麻痹(familial hypokalemic periodic paralysis,简称FHPP)和甲亢性低钾型周期性麻痹(thyrotoxic hypokalemic periodic paralysis,简称TPP)。家族性低钾型周期性麻痹是一种与骨骼肌电压门控L-型钙通道和钠通道异常有关的常染色体显性遗传病,主要涉及的突变基因有CACNA1S、SCN4A和KCNE3,其中CACNA1S基因突变是最常见的。在甲亢性低钾型周期性麻痹中,也发现了相关离子通道基因的突变,如KCNE3、KCNE4基因以及Kir2.6的突变,但除个别报道外,数量极少,阳性率不足1%,但也说明TPP是有离子通道疾病的特点。因此,已发现的低钾型周期性麻痹相关突变可以作为甲亢性低钾型周期性麻痹发病机制研究的借鉴与补充。目前对于离子通道的突变如何导致HPP或TPP的发病,还不是十分清楚,国内外对HPP的相关研究也仅局限于细胞水平及离子通道的电生理改变。前期课题组选择代表性好、发病症状重的Ca V1.1-Arg528His(R528H)突变,运用同源重组和胚胎干细胞技术成功的构建了Ca V1.1-R528H突变小鼠模型。然而在我国,低钾型周期性麻痹主要以甲亢性低钾型周期性麻痹为主。为了方便研究TPP发病机制,我们利用课题组前期构建的钙离子通道缺陷型Ca V1.1-R528H突变小鼠进一步建立甲亢性低钾型周期性麻痹模型并对其相关机制进行研究,期望能从整体动物水平探索相关发病机制,为临床提供更好的诊疗依据。方法部分1 Ca V1.1-R528H突变小鼠鉴定:实验前随机抽取8只Ca V1.1-R528H突变小鼠,提取鼠尾基因组DNA进行PCR鉴定,并在8只小鼠基因组DNA的PCR产物中随机选取5只进行DNA测序。部分2 Ca V1.1-R528H突变小鼠与野生型C57BL/6J小鼠生化指标比较:实验前取8周龄Ca V1.1-R528H突变小鼠雌雄各8只以及8周龄野生型C57BL/6J小鼠雌雄各8只。所有小鼠于当日20:00开始禁食、禁水,次日早晨8:00摘取眼球取血于EP管中送检,检测生化指标包括葡萄糖(GLU)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、血肌酐(Cr)、电解质(Na~+、K~+、Cl-)8项指标。部分3探讨突变、甲状腺素及胰岛素因素对血钾的作用:取8周龄Ca V1.1-R528H突变雄性小鼠及8周龄野生型C57BL/6J雄性小鼠各36只,采用三因素两水平2×2×2析因设计方法,按体重随机原则分为8组,甲状腺素处理组每日腹腔注射左旋甲状腺素钠(按350μg/kg),连续给药12天,制备高甲状腺素毒症,同时其余组给予注射0.9%生理盐水作为对照。末次给药后胰岛素处理组给予腹腔注射短效胰岛素(按0.8U/kg),同时其余组给予0.9%生理盐水作为对照,检测并记录注射前(0min)及注射后各时间点(30mim、60min)的血钾。部分4 FXYD1蛋白在甲亢性低钾型周期性麻痹致病中的作用:小鼠(野生+盐水组、突变+盐水组、突变+甲状腺素+盐水组、突变+甲状腺素+胰岛素组)测完血钾后将其处死,立即取后肢股四头肌,大小约1cm×0.5cm×0.2cm,并快速放入10%中性福尔马林溶液中固定,固定24h后石蜡包埋。4μm连续切片,于65℃温箱烘干,常温保存备用。采用免疫组织化学技术对各组小鼠骨骼肌细胞FXYD1蛋白进行染色,并比较组间表达是否存在差异。结果部分1 Ca V1.1-R528H突变小鼠鉴定:PCR和DNA测序结果验证了该小鼠为Ca V1.1-R528H突变纯合小鼠,DNA扩增片段长度为870bp,而野生对照组为748bp。部分2 CaV1.1-R528H突变小鼠与野生型C57BL/6J小鼠生化指标比较:基因敲入Ca V1.1-R528H突变小鼠与野生型C57BL/6J小鼠同性别之间比较,结果无统计学差异(P0.05);基因敲入Ca V1.1-R528H小鼠雌、雄之间比较及野生型C57BL/6J小鼠雌、雄之间比较,结果均无统计学差异(P0.05)。部分3突变、甲状腺素及胰岛素因素对血钾的作用:(1)高甲状腺素毒症状态:甲状腺素处理组小鼠出现烦躁不安、易激怒及毛色枯燥等现象,相比对照组饮食及饮水量明显增多,而体重增加缓慢。T3、T4及TSH检测结果示Ca V1.1-R528H突变小鼠与C57BL/6J小鼠之间并无统计学上差异,而注射左旋甲状腺素钠组小鼠T3、T4均高于相应对照组,TSH低于相应对照组,且均有统计学差异(P0.05)。(2)胰岛素对血钾作用:单独给予甲状腺素或胰岛素处理,突变组与野生组血钾同时间点比较并没有统计学差异,而在高甲状腺素毒症状态下给予胰岛素处理后,突变组与野生组同时间点(30min、60min)比较突变组血钾显著低于野生组(P0.05)。(3)单独突变因素或甲状腺素因素对血钾并没有作用,仅有胰岛素对降低血钾有作用(P0.05);甲状腺素因素和突变因素之间以及胰岛素因素和突变因素之间均有交互作用(P0.05);甲状腺素因素和胰岛素因素之间没有交互作用。部分4 FXYD1蛋白在甲亢性低钾型周期性麻痹致病中的作用:统计结果显示FXYD1蛋白表达水平在野生+盐水组与突变+盐水组二者之间并没有差异;突变+甲状腺素+盐水组、突变+甲状腺素+胰岛素组与突变+盐水组相比FXYD1蛋白表达均无统计学上差异(P0.05)。结论1.通过对Ca V1.1-R528H突变小鼠的鉴定,证实该突变基因在传代中不会发生丢失;2.本研究利用Ca V1.1-R528H突变小鼠首次成功的建立了甲亢性低钾型周期性麻痹模型;3.在甲亢性低钾型周期性麻痹中Na~+,K~+-ATP酶FXYD1亚基蛋白表达水平并没有发生改变。
【关键词】：
【学位授予单位】：安徽医科大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2016【分类号】：R746.3;R-332【目录】：
英文缩略词表5-7中文摘要7-11英文摘要11-161 前言16-212 材料与方法21-26 2.1 材料21-22 2.2 实验方法22-25 2.3 统计学方法25-263 结果26-32 3.1 Ca V1.1-R528H 突变小鼠鉴定结果26 3.2 Ca V1.1-R528H 突变小鼠与野生型 C57BL/6J 小鼠生化指标比较结果26-27 3.3 突变、甲状腺素及胰岛素因素对血钾的作用27-30 3.4 FXYD1蛋白在甲亢性低钾型周期性麻痹致病中的作用30-324 讨论32-375 结论37-38参考文献38-41附录 个人简介41-42致谢42-43综述 胰岛素促进低钾型周期性麻痹机制的研究进展43-51 参考文献50-51
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式
【相似文献】
中国硕士学位论文全文数据库
智红叶;[D];安徽医科大学;2016年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 大众知识服务
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
订购热线：400-819-82499
服务热线：010--
在线咨询：
传真：010-
京公网安备75号正常血钾型周期性麻痹是什么
正常血钾型周期性麻痹是什么
基本信息：男&&43岁
发病时间：不清楚
病情描述及疑问：正常血钾型周期性麻痹是什么？血钾正常性周期性麻痹？周期性血钾麻痹 该怎么治疗？只有找到原因针对性原因治疗才不会复发。才可能根治的。多于晨起四肢无力有酸痛？
您输入的回答少于20个中文字，请补充输入。
擅长：全科
网友满意：
回答速度：
湖州试雅士医院&&&全科
<span id="replyContent_.去除诱因； 2.调整血钾，低钾者补钾，高钾者补钙，正常血钾者补钠。用药原则：1.氯化钾、乙酰唑胺、安体舒通等适用于低钾性周期性麻痹。氯化钾最常用，若对服用钾剂效果欠佳，可联用乙酰唑胺或安体舒通。此外给予大剂量的维生素Ｂ１，改善糖的中间代谢，可能对预防发作有效。 2.高钾型周期性麻痹由于发作时间短，发作程度多不太严重，多数病例不需特殊治疗。对发作严重者可选用葡萄糖、胰岛素、钙剂、碳酸氢钠、乙酰唑胺、氢氯塞嗪、沙丁胺醇等。根据你的情况,建议您去正规医院做一下检查,查清原因再治疗，临床表现为反复发作的驰缓性骨骼肌瘫痪或无力，持续数小时至数周，发作间歇期完全正常。发病机制不清楚，普遍认为与钾离子浓度在细胞内外的波动有关。根据发作时血清钾浓度之不同，可分为低血钾、高血钾和正常血钾三型。
擅长：全科
网友满意：
回答速度：
怀化市泰雅医院&&&全科
治疗与转归 几乎所有患者经口服和(或)静脉补钾，肌力均恢复正常，感觉障碍消失。1例因补钾不及时出现心室纤颤抢救无效死亡。可见对于周期性麻痹患者，除呼吸肌麻痹可以引起死亡以外，低血清钾造成的严重心律紊乱也是一致命危险因素。我们强调一旦确诊低血钾型周期性麻痹，就应静脉和口服同时补钾，尽快纠正低血钾状态，以防病情进一步恶化。继发于内科疾病者应在补钾对症治疗的同时，积极治疗原发病，以期完全终止周期性麻痹发作。甲亢会导致低血钾周期性麻痹吗?甲亢患者会有不同的问题在担心，这种心情我们都理解，得了病人们的一种恐慌心理。对于甲亢能导致低血钾周期性麻痹吗这一问题，我们听专家为大家讲解，系常染色体显性遗传。发作时血钾正常。发病年龄在2～11岁之间，男女均可受累。一般易于清晨或剧烈运动后引起发作。散步或轻微运动有时能预防麻痹发生。本病根据发作性无力及血清钾正常可以诊断。患儿口服氯化钾后可诱发麻痹发生并可使其加重。用氯化钠治疗有效。平日易避免进食含钾多的食物，如肉类、香蕉、菠菜、薯类。防止过劳或过度的肌肉活动，并注意寒冷或暑热的影响。
有关的更多问题，
有关的健康经验
与 有关的更多经验，
疾病百科（别名：甲状腺功能亢进,瘿气）（别名：甲状腺功能亢进,瘿气）　　甲状腺功能亢进症(hyperthyroidism，简称甲亢，是由多种原因引起的甲状腺功能亢进和(或)血循环中甲状腺激素水平增高所致的一组常见的内分泌病，临床...　　甲状腺功能亢进症(hyperthyroidism，简称甲亢，是由多种原因引起的甲状腺功能亢进和(或)血循环中甲状腺激素水平增高所致的一组常见的内分泌病，临床上以高代谢征群、甲状腺肿大、突眼症、神经及心血管系统功能紊乱为特征，病理上甲状腺可呈弥漫性、结节性或混合性肿大等表现。就诊科室：内分泌科典型症状： 多发人群：所有人群检查方法： 发病部位：甲状腺疾病自测：常用药品：
为保障患者权益，我们仅接受有资质的医学专业人士的回答，请您先认证为医生
十万名医在线答疑，千万网友问诊经验分享
5分钟回复，10万医生，免费在线咨询本站已经通过实名认证，所有内容由樊继波大夫本人发表
当前位置：
& 大夫个人网站
& 文章详情
内科疾病康复
甲亢合并低钾型周期性麻痹的治疗原则
1、避免诱发因素，引起低钾型周期性麻痹发作的主要诱因包括（1）精神过度紧张、精神刺激、过度疲劳；（2）寒冷、受凉、发热、大量出汗；（3）饱食（尤其晚餐时）、酗酒或应用无钾高糖、高碳酸饮料；（4）钾盐摄入量少，而排泄量多，如：腹泻等；（5）注射葡萄糖或胰岛素等。
2、积极补钾治疗，氯化钾缓释片或10%氯化钾口服液，急性发作时应及时静脉补钾治疗。
3、伴发低钾型周期性麻痹的甲亢的治疗原则首先要积极治疗甲亢：目前治疗甲亢的方法主要有三种：抗甲状腺药物治疗、手术治疗和放射性131I治疗。相对于服抗甲状腺药物及手术治疗甲亢来说，放射性131I治疗甲亢具有治愈率高，治疗周期短，费用低，患者无痛苦及并发症少等优点。当甲亢治愈后低钾型周期性麻痹症状随之消失。所以放射性131I是公认的治疗伴发低钾型周期性麻痹的甲亢患者的首选治疗方法。
王任飞·天津医科大学总医院
与医生电话交流
网上免费问医生
看更多新文章>>
1.扫码下载好大夫App
2.在知识中添加您关注的疾病
3.添加成功后，最新的医生文章，每天推送给您。
发表于： 17:23
樊继波大夫的信息
樊继波大夫电话咨询
樊继波大夫已经开通电话咨询服务直接与大夫本人通话，方便！快捷！
网上咨询樊继波大夫
在此简单描述病情，向樊继波大夫提问
樊继波的咨询范围：
1.老年、成人及小儿骨科疾病（颈椎病，腰椎间盘突出，关节炎，脊髓损伤，骨折及关节置换术后，骨化性肌炎）
2.妇科疾病（月经不调，产后恢复）
3.男科疾病（性功能障碍）
4.儿科康复（脑瘫，发育迟缓）
5.神经科康复（脑卒中，颅脑损伤术后）
6.心肺康复（失眠，支气管炎，咳嗽）
樊继波主治疾病知识介绍
康复医学中心好评科室以低钾型周期性麻痹为首发症状的甲亢1例--《中国校医》2016年02期
以低钾型周期性麻痹为首发症状的甲亢1例
【摘要】：正1 病历摘要患者,男,22 岁,飞行学生,因四肢肌无力 1 d 入院。1 d前,患者无明显诱因出现四肢无力,无腹泻,无发热,无心慌、胸闷,无呼吸困难等症状,未予以重视,今晨患者四肢肌无力症状加重,不能起床,无法行走,被同学用担架抬入医院,门诊"周期性麻痹?"收入院。自发病以来,患者精神尚可,食欲欠佳,大小便正常。患者既往体健,否认家族遗传病史,喜甜食。入
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R581.1【正文快照】：
1病历摘要患者,男,22岁,飞行学生,因四肢肌无力1 d入院。1 d前,患者无明显诱因出现四肢无力,无腹泻,无发热,无心慌、胸闷,无呼吸困难等症状,未予以重视,今晨患者四肢肌无力症状加重,不能起床,无法行走,被同学用担架抬入医院,门诊“周期性麻痹?”收入院。自发病以来,患者精神尚
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式，仅支持PDF格式
【相似文献】
中国期刊全文数据库
贾瑞萍;[J];包头医学院学报;2001年04期
江炳源;[J];中国厂矿医学;2001年03期
郭正声,黄振耀,吴健平;[J];医师进修杂志;2002年10期
王玉芬,郭颖兰;[J];哈尔滨医药;2002年01期
沈鲜安,曹臻,左劲夫;[J];苏州大学学报(医学版);2002年02期
,朱大菊;[J];右江医学;2002年02期
张俊香,杜天敏,陈琳瑛,孙耐芳;[J];郑州大学学报(医学版);2002年03期
冯之静;[J];中原医刊;2003年13期
孟帮柱,李洪清,刘会龙;[J];现代中西医结合杂志;2003年01期
王晓敏,王玉梅;[J];中国误诊学杂志;2005年17期
中国重要会议论文全文数据库
王琦;高志民;李洪钧;张娜;李靖;陶新江;;[A];第四届中国核学会省市区“三核”论坛论文集[C];2007年
陈建华;;[A];2006年贵州省医学会神经病学分会学术年会论文汇编[C];2006年
丁波;;[A];中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2012年
方烨;王晓岳;孙清元;张响华;许露;;[A];中华医学会第十次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2011年
王冉;吴晓飞;;[A];中华医学会急诊医学分会第十六次全国急诊医学学术年会论文集[C];2013年
陈森良;;[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
王勤奋;张承刚;施龙宝;赵晓彬;;[A];第三届全国核素治疗学术交流会议论文摘要汇编[C];2003年
中国重要报纸全文数据库
王梅;[N];农村医药报（汉）;2007年
本版编辑?司长河
王海鹰;[N];医药经济报;2008年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
同方知网数字出版技术股份有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 大众知识服务
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
订购热线：400-819-82499
服务热线：010--
在线咨询：
传真：010-
京公网安备75号