HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量_图文_百度文库
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HPLC测定复方丹参片中三七总皂苷的含量
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替代对照品法用于丹参和复方丹参片含量测定的研究
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替代对照品法用于丹参和复方丹参片含量测定的研究
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3秒自动关闭窗口复方丹参片检验方法确认方案
浙江优康制药有限公司
复方丹参片质量标准为已验证的法定标准，含量测定方法为HPLC法，其它项目为实验室日常测试步骤。根据2010年版《药品质量管理规范》的要求，需要对含量测定检验方法进行确认，包括专属性、精密度、准确度三个方面。
确认复方丹参片含量测定检验方法在我公司质量控制实验室的适用性。
适用范围：
复方丹参片含量测定检验方法
4.1. 检验操作规程齐全
4.2. 设备相关标准操作规程齐全
4.3. 检验、检测仪器均已校验
5. 确认时间计划：从 年 月 日开始至 年 月 日完成。
6. 含量测定含丹参以丹参酮IIA计检测方法确认
6.1． 确认要求及标准
6.1.1. 色谱条件系统适用性试验(在专属性试验时一并进行)：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-（73∶27）为流动相；检测波长为270nm。理论板数以丹参酮IIA峰计算应不低于2000，分离度大于1.5。
6.1.2. 专属性 空白样品溶液在与丹参酮IIA对照品溶液相同的保留时间处色谱**面积小于对照品峰面积的3%。
6.1.3. 精密度 RSD应不得超过2.0%
6.1.4. 准确度 丹参酮IIA的加样回收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。
6.2. 材料和分析方法
6.2.1. 试剂：
对照品 ：丹参酮IIA 批号 ： 来源：
样品 ：复方丹参片 批号 ： 来源：
试剂名称：甲醇 批号 ： 来源：
空白对照物：按复方丹参片质量标准制法自制（缺丹参）
6.2.2. 仪器：
高效液相色谱仪型号： 编号： 色谱柱编号：
分析天平型号 ： 编号：
超声处理器型号： 编号：
6.2.3．溶液配置：
6.2.3.1.对照品溶液配置 取丹参酮IIA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含40微克的溶液即得。
6.2.3.2供试品溶液 取复方丹参片20片，除去糖衣片，精密称定，研细，
取约1g，精密称定后置具塞棕色瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞称定重量，
超声处理15分钟，放冷，再称定重量并补足，摇匀滤过取续滤液置棕色
瓶中即得。
6.2.3.3. 空白物溶液 取空白物20片，除去糖衣片，精密称定，研细，
取约1g，精密称定后置具塞棕色瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞称定重量，
超声处理15分钟，放冷，再称定重量并补足，摇匀滤过取续滤液置棕色
瓶中即得。
6.2.3.4.储备液A 精密称取丹参酮IIA对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含120微克的溶液即得。
6.2.4 分析方法：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-（73∶27）为流动相；检测波长为270nm；进样量为10 ul。
6.3.检验方法的确认
6.3.1专属性
6.3.1.1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-（73∶27）为流动相；检测波长为270nm。理论丹参酮IIA峰计算应不低于2000，分离度大于1.5。
6.3.1.2. 测定 分别精密吸取对照品溶液与空白样品溶液各10&l，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。
6.3.1.3. 确认合格标准 空白样品溶液在与丹参酮IIA对照品溶液相同的保留时间处色谱**面积小于对照品峰面积的3%。
6.3.2.精密度
6.3.2.1重复性
6.3.2.1.1. 取同一浓度的对照品溶液及供试品溶液分别连续进样6针（10ul），记录色谱图。
6.3.2.1.2. 确认合格标准 6针对照品溶液、供试品溶液峰面积的RSD应不得超过2.0%。
6.3.2.2中间精密度
6.3.2.2.1. 在不同的日期和不同的仪器，不同检验员（3人）按6.2.3.2的方法重新制备样液，分别计算含量。
6.3.2.2.2. 确认合格标准 每人RSD应不得超过2.0%，3人RSD应不得超过2.0%。
6.3.3准确度
加入储备液A（ml）
加入空白对照物（g）
容量瓶（ml）
进样浓度（ug／ml）
6.3.3.1溶液1～9:将表2中规定量的储备液A 和空白对照物置于规定量的具塞棕色容量瓶中，用甲醇补足至25ml，密塞称定重量，超声处理15分钟，放冷，再称定重量并补足，摇匀滤过取续滤液置棕色瓶中即得。
6.3.3.2精密吸取9份样液各10ul，注入液相色谱仪，测定，计算回收率。
计算公式：
回收率（%）=
加入的对照品量
6.3.3.3．确认合格标准 丹参酮IIA的加样回收率收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。
7. 含量测定含丹参以丹酚酸B计检测方法确认
7.1． 确认要求及标准
7.1.1. 色谱条件系统适用性试验(在专属性试验时一并进行)：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－甲醇－甲酸－水（10：30：1：59）为流动相；检测波长为286nm。理论板数以丹酚酸B峰计算应不低于4000。
7.1.2. 专属性 空白样品溶液在与丹酚酸B对照品溶液相同的保留时间处色谱**面积小于对照品峰面积的3%。
7.1.3. 精密度 RSD应不得超过2.0%
7.1.4. 准确度 丹参酮IIA的加样回收率大于收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。
7.2. 材料和分析方法
7.2.1. 试剂：
对照品 ：丹参酮IIA 批号 ： 来源：
样品 ：复方丹参片 批号 ： 来源：
试剂名称：乙腈 批号 ： 来源：
试剂名称：甲酸 批号 ： 来源：
试剂名称：甲醇 批号 ： 来源：
空白对照物：按复方丹参片质量标准制法自制（缺丹参）
7.2.2. 仪器：
高效液相色谱仪型号： 编号： 色谱柱编号：
分析天平型号 ： 编号：
超声处理器型号： 编号：
7.2.3．溶液配置：
7.2.3.1.对照品溶液配置 取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含60微克的溶液即得。
7.2.3.2供试品溶液 取复方丹参片20片，除去糖衣片，精密称定，研细，
取约0.15g，精密称定后置50ml具塞量瓶中，加水适量，超声处理30分钟，放冷，加水至刻度，摇匀离心取上清夜即得。
7.2.3.3. 空白物溶液 取空白对照物20片，除去糖衣片，精密称定，研细，
取约0.15g，精密称定后置50ml具塞量瓶中，加水适量，超声处理30分钟，放冷，加水至刻度，摇匀离心取上清夜即得。
7.2.4 分析方法：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－甲醇－甲酸－水（10：30：1：59）为流动相；检测波长为286nm；进样量为10 ul。
7.3.检验方法的确认
7.3.1专属性
7.3.1.1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈－甲醇－甲酸－水（10：30：1：59）为流动相；检测波长为286nm。理论板数以丹酚酸B峰计算应不低于4000。
7.3.1.2. 测定 分别精密吸取对照品溶液与空白样品溶液各10&l，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。
7.3.1.3. 确认合格标准 空白样品溶液在与丹酚酸B对照品溶液相同的保留间
处色谱**面积小于对照品峰面积的3%。
7.3.2.精密度
7.3.2.1重复性
7.3.2.1.1. 取同一浓度的对照品溶液及供试品溶液分别连续进样6针（10ul），记录色谱图。
7.3.2.1.2. 确认合格标准 6针对照品溶液、供试品溶液峰面积的RSD应不得超过2.0%。
7.3.2.2中间精密度
7.3.2.2.1. 在不同的日期和不同的仪器，不同检验员（3人）按7.2.3.2的方法重新制备样液，分别计算含量。
7.3.2.2.2. 确认合格标准 每人RSD应不得超过2.0%，3人RSD应不得超过2.0%。
7.3.3准确度
7.3.3.1取丹酚酸B对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加水制成每1ml含60微克的溶液。取上述（7.2.3.2）研细的复方丹参片样品0.09g，精密称定10份，分别置于50ml具塞量瓶中，并分别加入对照品溶液0、10、10、10、20、20、20、30、30、30ml，加入适量水超声处理30分钟，放冷后用水补足至刻度，摇匀离心取上清夜即得。
7.3.3.2精密吸取10份样液各10ul，注入液相色谱仪，测定，计算回收率。
计算公式：
回收率（%）=
测得值-样品中的量
加入的对照品量
7.3.3.3．确认合格标准 丹酚酸B的加样回收率收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。
8. 含量测定含三七以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷R1、人参皂苷Re计检测方法确认
8.1． 确认要求及标准
8.1.1. 色谱条件系统适用性试验(在专属性试验时一并进行)：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按表1的规定进行梯度洗脱检测波长为203nm。理论板数以人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000，人参皂苷Rg1与人参皂苷Re的分离度应大于1.8.
时间（分钟）
流动相A（％）
流动相B（％）
8.1.2. 专属性 空白样品溶液在与对照品溶液相同的保留时间处色谱**面积小于对照品峰面积的3%。
8.1.3. 精密度 RSD应不得超过2.0%
8.1.4. 准确度 参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷R1、人参皂苷Re的加样回收率大于收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。
8.2. 材料和分析方法
8.2.1. 试剂：
对照品 ：丹参酮IIA 批号 ： 来源：
样品 ：复方丹参片 批号 ： 来源：
试剂名称：乙腈 批号 ： 来源：
试剂名称：甲醇 批号 ： 来源：
空白对照物：按复方丹参片质量标准制法自制（缺三七）
8.2.2. 仪器：
高效液相色谱仪型号： 编号： 色谱柱编号：
分析天平型号 ： 编号：
超声处理器型号： 编号：
8.2.3．溶液配置：
8.2.3.1.对照品溶液配置 精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷R1对照品、人参皂苷Re对照品适量，加70%甲醇制成每1ml含参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1各0.2mg、人参皂苷R1及人参皂苷Re各0.05mg的混合溶液即得。
8.2.3.2供试品溶液 取复方丹参片10片，除去糖衣片，精密称定，研细，
取约1g，精密称定后置50ml具塞量瓶中，加70%甲醇50ml并称定重量，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液即得。
8.2.3.3. 空白物溶液 取空白物10片，除去糖衣片，精密称定，研细，
取约1g，精密称定后置50ml具塞量瓶中，加70%甲醇50ml并称定重量，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀滤过，取续滤液即得。
8.2.4 分析方法：
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动项A，以水为流动项B，按表1的规定进行梯度洗脱，进样量为20 ul。
8.3.检验方法的确认
8.3.1专属性
8.3.1.1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按表2的规定进行梯度洗脱检测波长为203nm。理论板数以人参皂苷Rg1峰计算应不低于6000，人参皂苷Rg1与人参皂苷Re的分离度应大于1.8.
8.3.1.2. 测定 分别精密吸取对照品溶液与空白样品溶液各20&l，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。
8.3.1.3. 确认合格标准 空白样品溶液在与对照品溶液相同的保留间
处色谱**面积小于对照品峰面积的3%。
8.3.2.精密度
8.3.2.1重复性
8.3.2.1.1. 取同一浓度的对照品溶液及供试品溶液分别连续进样6针，记录色谱图。
8.3.2.1.2. 确认合格标准 6针对照品溶液、供试品溶液峰面积的RSD应不得超过2.0%。
8.3.2.2中间精密度
8.3.2.2.1. 在不同的日期和不同的仪器，不同检验员（3人）按8.2.3.2的方法重新制备样液，分别计算含量。
8.3.2.2.2. 确认合格标准 每人RSD应不得超过2.0%，3人RSD应不得超过2.0%。
8.3.3准确度
8.3.3.1精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷R1对照品、人参皂苷Re对照品适量，加70%甲醇制成每1ml含参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1各0.2mg、人参皂苷R1及人参皂苷Re各0.05mg的对照品溶液。
取上述（8.2.3.2）研细的复方丹参片样品0.6g，精密称定10份，分别置于具塞量瓶中，并分别加入对照品溶液0、10、10、10、20、20、20、30、30、30ml，超声处理30分钟，放冷后用70%甲醇补足至刻度，摇匀离心取上清夜即得。
8.3.3.2精密吸取10份样液各20ul，注入液相色谱仪，测定，计算回收率。
计算公式：
回收率（%）=
测得值-样品中的量
加入的对照品量
8.3.3.3．确认合格标准 人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷R1、人参皂苷Re的加样回收率收率98.0%～102%，回收率的RSD小于2.0%。
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香当网常见帮助HPLC测定复方丹参方中三七皂苷类成分的含量；潘桂湘?，高秀梅，张伯礼(天津中医学院，天津30；摘要:目的建立复方丹参方中三七皂苷类成分的含量测；关键词三七；三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；人参皂；三七的主要成分是三七皂苷[3]，有很多与人参皂苷；～7参片、复方丹参口服液）的质量标准[4]大多仅；典》三七药材的含量测定项下[2]，也只采用TLC；1实验部分；1
HPLC测定复方丹参方中三七皂苷类成分的含量
潘桂湘?，高秀梅，张伯礼 (天津中医学院，天津300193)
目的 建立复方丹参方中三七皂苷类成分的含量测定方法，并初步考察复方丹参方溶液的稳定性。方法 采用高效液相色谱法，分别以乙腈-0.05%磷酸（19：81）为流动相，于203nm处检测三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re；以乙腈-水（33：67）为流动相，于203nm处检测人参皂苷Rb1。结果 三七皂苷R1进样量在0.24～3.6μg范围时，相关系数r = 0.9997；人参皂苷Rg1进样量在1.2～18μg范围时，相关系数r = 0.9994；人参皂苷Re进样量在0.08～1.2μg范围时，相关系数r = 0.9997；人参皂苷Rb1进样量在0.25～3.72μg范围时，相关系数r = 0.9998。复方丹参方溶液于4℃放置4个月后三七皂苷类成分的含量无明显变化。结论 本法简便，快速，准确，重现性好，可作为复方丹参方的质量控制标准；复方丹参方中三七皂苷类成分的稳定性良好。
三七；三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；人参皂苷Re；人参皂苷Rb1；HPLC 复方丹参方由丹参、三七及冰片组成，具有活血化瘀，理气止痛之功效，是临床治疗冠心病、心绞痛的常用中药处方[1]。《中国药典》2000年版收载的该方剂型为复方丹参片和复方丹参滴丸[2]，在其含量测定项下，只对丹参中丹参酮ⅡA或丹参素作出要求，而对三七皂苷成分则没有相应的规定。为了较全面评价复方丹参方的质量，我们同时制定复方中三大物质群――丹参水溶性成分、丹参脂溶性成分和三七皂苷类成分的质量控制方法。该文报道的是复方丹参方中三七皂苷类成分的HPLC测定方法。
三七的主要成分是三七皂苷[3]，有很多与人参皂苷相同（如人参皂苷Rg1、Rb1、Re），还有些是三七本身独有的成分（如三七皂苷R1）。现有大部分三七及其相关制剂（如复方丹
～7参片、复方丹参口服液）的质量标准[4]大多仅对三七中的1～2个成分进行定量，《中国药
典》三七药材的含量测定项下[2]，也只采用TLC法测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1两个成分。本文采用HPLC法，选择20(S)-原人参二醇型人参皂苷Rb1、20(S)-原人参三醇型人参皂苷Rg1、人参皂苷Re，及三七独有成分三七皂苷R1作为指标，建立了复方丹参方中三七皂苷类成分的含量测定方法。
1.1 仪器与试药
HP1100高效液相色谱仪，G1311A-四元泵，G1322A-脱气机，G1316A-柱温箱，1314A-UV可变波长检测器，HPRev.A.0501化学工作站；乙腈为色谱纯，水为超纯水，磷酸为分析纯，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re和人参皂苷Rb1对照品（中国药品生物制品检定所）；丹参提取物和三七提取物（自制）。
1.2 色谱条件 Hypersil C18色谱柱（5μm，4.6mm×250mm），Sep-Pak C18固相萃取小柱(60μm，6cc /500mg)，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re以乙腈-0.05%磷酸（19：81）为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长为203nm，色谱图见图1；人参皂苷Rb1以乙腈-水（33：
67）为流动相，流速为1.0mL/min，检测波长203nm，色谱图见图2。
1.3 标准曲线的绘制
1.3.1 标准贮备液配制 精密称取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和人参皂苷Re适量，用甲醇制成系列浓度的对照品混合溶液，进样10μL。
1.3.2 线性关系考察 以峰面积（Y）为纵坐标，进样量（X）为横坐标作图，得三七皂苷R1?基金项目：国家重点基础研究规划项目(G)
作者简介：潘桂湘(1976-)，男，硕士，研究方向为药物分析。Tel：022-
的回归方程为Y = 92.054X＋1.620，线性范围为0.24～3.6μg，相关系数r = 0.9997；人参皂苷Rg1的回归方程为Y = 122.640X＋16.884，线性范围为1.2～18μg，相关系数r = 0.9994；人参皂苷Re的回归方程为Y = 236.882X－1.950，线性范围为0.08～1.2μg，相关系数r = 0.9997；人参皂苷Rb1的回归方程为Y = 221.836X－2.056，线性范围为0.248～3.72μg，相关系数r = 0.9998。
1.4 样品的测定
精密称取丹参提取物和三七提取物适量，配制成6种（按生药量计）不同配比的样品供试液，于3000r/min离心10min，分取上清液1.0mL加于C18固相萃取小柱上，先用1mL水洗涤除杂，再用1mL甲醇洗脱，洗脱液用氮气吹干，残渣加甲醇0.5mL溶解，进样10μL。测定结果见表1。
样品中三七皂苷类成分的含量（n=5）
（生药量比）
0/10 三七皂苷R1的浓度 （mg?mL-1） 4个月后 即时 （4℃） 3.93 3.77 6.65 6.10 8.29 9.14 15.52 15.38 18.71 17.43 人参皂苷Rg1的浓度（mg?mL-1） 4个月后 即时 （4℃） 26.17 25.30 35.15 33.00 40.29 44.64 65.25 64.88 79.43 72.14 人参皂苷Re的浓度（mg?mL-1） 4个月后 即时 （4℃） 0.73 0.57 1.15 0.80 1.50 1.64 3.13 2.63 4.29 3.86 人参皂苷Rb1的浓度（mg?mL-1） 4个月后 即时 （4℃） 6.13 6.13 9.15 10.45 13.64 13.43 25.38 25.38 29.57 28.71
1.5 方法学考察
1.5.1 精密度试验 取三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品混合液，重复进样5次，测得三七皂苷R1的RSD = 0.7 % ，人参皂苷Rg1的RSD = 0.9 % ，人参皂苷Re的RSD = 3.0 %；人参皂苷Rb1重复进样6次，测得人参皂苷Rb1的RSD = 1.5 % 。
1.5.2 重现性试验 取样品按测定方法由始至终平行操作5份，测得三七皂苷R1的RSD =
1.8 % ，人参皂苷Rg1的RSD = 1.8 % ，人参皂苷Re的RSD = 1.7 %，人参皂苷Rb1的RSD = 2.1 % 。
1.5.3 回收率试验 取样品加入已知量的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1，按测定方法由始至终平行操作5份，三七皂苷R1回收率为97.6 %，RSD = 2.9 % ，人参皂苷Rg1 回收率为99.9 %，RSD = 2.8 %，人参皂苷Re回收率为98.2 %，RSD = 2.1 %，人参皂苷Rb1回收率为100.3 %，RSD = 3.0 %。
1.5.4 稳定性试验 观测样品液在室温下放置0h、2h、4h、6h、8h三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量变化，三七皂苷R1的RSD = 1.3 % ，人参皂苷Rg1的RSD = 1.0 % ，人参皂苷Re的RSD = 2.3 %，人参皂苷Rb1的RSD = 0.8 %，结果表明样品在8h内含量稳定。
1.5.5 最小检测限 将三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Re、Rb1分别配成浓度很低的溶液进样，以S/N≥10为定量限，S/N≥3为检测限，测得三七皂苷R1最低定量限为0.20μg，最小检测限为0.10μg；人参皂苷Rg1最低定量限为0.36μg，最小检测限为0.12μg；人参皂苷Re最低定量限为60ng，最小检测限为24ng；人参皂苷Rb1最低定量限为0.21μg，最小检测限为0.10μg。
2.1 样品的选择 复方丹参方由丹参、三七和冰片组成，本实验为了更好地从化学角度初步探讨其配伍配比规律，故只选择方中的君药丹参和臣药三七作为样品进行配伍配比研究。所建立的四种皂苷成分的HPLC测定方法，同样适用于加有冰片的复方丹参方（只需在样品预处理中多一步有机溶剂脱脂的过程即可）。
2.2 样品预处理 样品处理过程中，曾比较了乙酸乙酯、水饱和正丁醇及固相萃取小柱的萃取效果，结果表明乙酸乙酯萃取效果差，水饱和正丁醇及固相萃取小柱萃取效果好。考虑到水饱和正丁醇萃取过程繁琐，加之正丁醇挥发性差，样品在挥干过程中可能由于受热时间长发生变化，所以选择固相萃取小柱进行液固萃取处理。
2.3 流动相选择 曾对乙腈-水、乙腈-甲醇-水、乙腈-水-0.5%醋酸、乙腈-0.05%磷酸四种流动相系统分别进行筛选优化，最后以乙腈-0.05%磷酸（19：81）作为流动相，能使三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re达到基线分离，且其他成分对测定无干扰，以乙腈―水（33：
67）作为流动相，能使人参皂苷Rb1不受其它成分的干扰。
2.4 样品中皂苷成分含量 样品的含量测定结果表明：复方丹参方中三七皂苷类成分以人参皂苷Rg1含量为最高，其次是人参皂苷Rb1、三七皂苷R1，再次为人参皂苷Re，与文献[8]报道一致。
2.5 稳定性考察 三七皂苷类成分于4℃放置4个月后，含量无明显变化，表明复方丹参方中三七皂苷类成分的稳定性良好。
[1] 罗晓健，毕开顺，周书余，等.复方丹参片的研究概况[J].中成药，）：371～374
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[8] Hiroyuki Yamaguchi，et al. High-performance Liquid Chromatographic Aanlysis of acidic saponins of
Ginseng and related plants. Chem Pharm Bull，)：3468.
Determination of saponins Content in Compound Danshen
Prescription by HPLC
Pan Guixiang(潘桂湘), Gao Xiumei（高秀梅）, Zhang Boli（张伯礼）
(Tianjin College of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 300193)
Abstrct: Objetive To develop a method for the determination of four saponins of panax notoginseng in compound Danshen Prescription (CDP) by HPLC. Methods The conditions for the experiment were: determination of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re with acetonitrile-0.05% phosphoric acid (19：81) as mobile phase and the detection wave at 203 determination of ginsenoside Rb1 with acetonitrile -water (33：67) as mobile phase and the detection wave at 203nm.Results A good linearity for notoginsenoside R1 was in the range of 0.24～3.6μg (r = 0.9997), 1.2～18μg (r = 0.9994) for ginsenoside Rg1, 0.08～1.2μg (r = 0.9997) for ginsenoside Re and 0.25～3.72μg (r = 0.9998) for ginsenoside Rb1.The stability of the four saponins is well kept at 4℃ for four month. Conclusion This method is simple, rapid, accurate and with good reproducibility and can be used for the quality control of CDP. Keywords：@Compound Danshen Prescription / notoginsenoside R1 / analysis；
ginsenoside Rg1 / analysis；ginsenoside Re / analysis；
VWD1 A, Wavelength=203 nm (PGX\DANS1080.D)
1-三七皂苷R1
2-人参皂苷Rg1
3-人参皂苷Re
A-三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品
三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re
1-人参皂苷Rb1
A-人参皂苷Rb1对照品
B-阴性样品
C-供试样品 图2
人参皂苷Rb1对照品及复方丹参方HPLC图谱
包含各类专业文献、中学教育、生活休闲娱乐、文学作品欣赏、行业资料、19HPLC 测定复方丹参方中三七皂苷类成分的含量等内容。　
　三七茎、叶中皂苷类成分的含量测定实习学生:杨正丹 2009 级中药 3 班 指导老师:* * 摘要 目的:建立三七茎、叶中皂苷类成分的比色测定方法,分析三七茎、 叶中... 　性成分的吸收情况,建立大鼠血清中丹参素的含量测定...[关键词] 复方丹参方;丹参素;高效液相色谱法;体内...丹参水溶性成分、 丹参脂溶性成分和三七皂苷类成分... 　复方丹参滴丸中丹参酚酸类成分和三七皂苷类成分的 ...结论:建立的复 方丹参滴丸多元 HPLC 指纹图谱可用于...根据1995 年版药典规定转篮法测定。 条件: 人工... 　对三七中皂苷类和非皂苷类成分的研究历程 和概况...是复方丹参滴丸、云南 白药、片仔癀、复方三七口服液...张媛等 建立了三七花蕾中 8 种皂苷 HPLC 测定方法... 　为水溶性丹参素, 而不象一般片剂中是用乙醇提取丹参得酯溶主要 成分丹参酮类...2. 提供 HPLC 指 七皂甙 R1 鉴别。三七皂甙 纹图谱。 1. 有含量测定 1. ... 　方法:采用 HPLC 法,以丹参酮ⅡA 为对照品,用外...三七、黄芩、吴茱萸等药材中多种成分的含量测定 [3...二氢丹参酮的回归方 程及相关系数 r,结果表明,各... 　传统中医医药在遣药组方时非常讲究“药之生熟”,...HPLC 法测定了二者中三七皂苷 R1、人参皂苷 Rg1、...中人参皂苷类的 含量,而油炸法可能对该类成分有... 　而不同的三七药用部位及其提取物的主要皂苷类成分的含量 [3] 差别明显 。因此,建立一种三七不同药用部位及其提取物中主要成分的 HPLC 指纹图谱分析 方法,比较不... 　高效液相色谱-紫外检测器法、高效液相色谱-二极管阵列...测 定了人参、 三七和男壮胶囊中三萜皂苷的含量。...因此,越来越多的中草药中皂苷类成分的测定使用 到...