张锁连& 牛剑锋& 孙华君
　　（山东烟台业达医院& 264006）
　　【摘要】 宫颈癌的发病率和死亡率之高令人畏惧，早期发现和早期治疗宫颈癌是降低死亡率和发病率最为有效和必要的手段。目前筛查宫颈癌的方法很多，包括细胞学和病毒学检测等。病毒检测方法包括DNA和mRNA检测，而哪种检测方式能最有效地反应病变发展状态和进展趋势，值得我们深究。本文具体探讨高危型人乳头瘤病毒癌基因E6/E7mRNA检测对宫颈癌筛查的现状和意义。
　　【关键词】 宫颈癌；人乳头瘤病毒；E6/E7 mRNA
　　【中图分类号】R446&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 【文献标识码】A&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 【文章编号】（0-03
　　目前宫颈癌占女性恶性肿瘤的第二位，仅次于乳腺癌。绝大多数宫颈癌是由高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染引起。目前检测HPV感染方法主要以病毒基因组DNA为检测目标，以此判定待测宫颈细胞载有的HPV类型及数量。实际上宫颈细胞的病变程度不仅与HPV类型及数量相关，更和HPV的活动程度关系紧密，而以HPV癌基因组E6/E7 的转录子（mRNA）做为病毒活动程度的指标，其定量检测具有相当重要的临床意义。
　　1.宫颈鳞状细胞癌病因和HPV
　　宫颈鳞状上皮内病变（squamous intraepithelial lesion，SIL） 是与宫颈鳞状细胞癌密切相关的一组癌前病变，反映了宫颈鳞状细胞癌发生发展中的连续过程。20世纪70年代德国病毒学家Zur Hausen 提出HPV与宫颈癌发病密切相关的假设以来，大量研究表明HPV感染，特别是高危型HPV持续感染是绝大多数宫颈SIL和宫颈癌的主要原因[1]。HPV在自然界广泛存在，是一种无包膜的闭环、双链DNA病毒。HPV病毒分为两部分：外围的衣壳和内部的双链环状DNA，DNA早期编码区域的产物为E1、E2、E4、E5、E6、E7蛋白。高危亚型HPV感染宫颈上皮细胞后，病毒癌基因E6/E7 mRNA转录，生成2种癌蛋白E6/E7蛋白。癌蛋白可与宿主细胞的细胞周期调节蛋白p53和Rb蛋白等相结合，导致细胞周期控制失常，发生癌变。但是大多数情况下HPV被宿主清除，只有少数感染者发生SIL或者癌，从SIL发展为癌一般需要10～15年。因此，HPV感染后E6/ E7蛋白的表达与否与后期宫颈癌的形成高度相关，检测高危型HPV E6/E7 mRNA的转录有利于宫颈癌的早期诊断、早期治疗及预后监测。
　　2 宫颈癌筛查方法
　　目前，宫颈液基薄层细胞学检查（TCT）是宫颈癌筛查中应用最为广泛的方法，但是，细胞学是形态学检测，是高危型HPV感染宫颈移行带细胞这一必要因素作用下，综合各种因素最终导致的细胞形态学改变。因此，TCT不能单独用于区分那些小部分可能进展为浸润癌的病变（SIL）和绝大多数可能自然消退的病变[2-3]。HPV检测是病因学检测，可提高高级别SIL及宫颈癌的检出率，对细胞学检查结果可疑患者的分类及癌前病变治疗后随访均具有重要意义[4]。然而，大多数HPV感染都是无症状和一过性的，其可在2年内被清除[5]，这使得HPV DNA检测虽然具有较高的敏感度，但特异度相对较低[6]，意味着HPV DNA检测可能检测出过多临床无意义感染，不能更好地反应出宫颈细胞的病变程度。为了更准确的评估患者病情，还可对高危HPV的E6/E7 mRNA进行检测。E6/E7mRNA检测体现了HPV致癌基因E6/E7的转录情况，反映病毒活动程度。HPV E6/E7mRNA 在宫颈组织中表达，说明HPV表达出癌基因活性，故检测HPVE6/E7 mRNA的表达较之检测HPV DNA能更好地预测宫颈癌前病变进展，是对HPV致癌风险的评估，为临床筛查宫颈癌提供新依据。
　　3.HPV E6/E7 mRNA 检测技术原理及实验过程
　　HPV E6/E7mRNA 定量检测所使用的专利技术--bDNA 技术是利用专利的探针设计捕获待测目标，再经过杂交信号放大即可定量检测病毒，最终通过添加底物产生化学发光，以此对待测核酸做出定量检测。实验使用的标本可以与TCT共用一份取样细胞，避免重复取样，减少成本。实验过程较简易，无需RNA 抽提，无需反转录，无需PCR 扩增，在普通实验条件下简单快速完成目标的特异精确定量，一般1个工作日即可出结果。E6/E7 mRNA检测结果判读简单，以拷贝数&0为阳性，阳性表示：（1）宫颈细胞有高危HPV感染。（2）病毒癌基因E6/E7处于活动期，（3）宫颈细胞正处于病变转化活跃期。（4）患者有一定风险或风险正在增加。阴性表示：（1）宫颈细胞无癌基因E6/E7或E6/E7处于静止期。（2）宫颈细胞无病变转化风险或正处于病变转化静止期。（3）患者无风险或风险正在降低。
　　4.HPV E6/E7 mRNA 检测在宫颈病变中的临床应用
　　2006 年欧洲生殖器感染及肿瘤研究组织认为HPV E6/E7mRNA 检测应作为宫颈癌筛查的重点研究对象[7]。有研究显示，HPV E6/E7 mRNA在宫颈组织中表现癌基因活性[8]。E6/E7 mRNA水平与宫颈病变的严重程度相关[9]。有研究者提出HPV E6/E7 mRNA检测可能更好地预测病情的进展[10-11]。Molden [12]等对宫颈病变患者进行几年随访发现，HPV mRNA较HPV DNA具更高特异性及阳性预测值。徐瑛[13]等发现HPV mRNA拷贝数的均数随着病变等级的升高而明显增加，高拷贝数的病例大部分集中在高级别SIL组。HPV mRNA的高拷贝可能提示高级别SIL的存在或向高级别发展趋势的存在。这一结果显示HPV E6/E7基因对SIL的发生、发展具有促进作用。这与刘桐宇[14]和王华[15]等研究发现基本吻合，即随着细胞学级别增高，E6/E7 mRNA表达相应增加，不同细胞学分组间mRNA拷贝值差异有统计学意义。单独使用HPV E6/E7 mRNA检测，在普通人群筛查中，特异度优于HPV DNA检测[6]。刘佳佳等[16]对25例宫颈TCT结果为ASC-US患者进行分析，结果证实高危型HPV E6/E7 mRNA检测的特异度为91.7%，明显高于HPV DNA分型检测的50.0%。高危型HPV E6/E7 mRNA检测相对更高的特异度决定了其排除可疑或低级别SIL的能力更强，能够把更多可能无进展性的病变重新归入常规的筛查程序中，有效减少对疾病程度的误判，避免过度检查、治疗给患者带来的经济负担和心理负担。此外，研究发现HPV E6/E7 mRNA对今后进展为&CIN2预测能力优于TCT检查，但没有与DNA检测的对比[17]。黄宝英[18]等研究发现，E6/E7 mRNA检测联合TCT极大提高了临床筛查敏感度与阴性预测值，但特异度下降，阳性预测值并无明显提高。该研究认为联合两种指标筛查时，ASC-US患者如果E6/E7 mRNA检测阴性可以不用立即做阴道镜检查，这和赵方辉等[19]提出的观点类似。周星等[20]研究结果显示，40岁以下者高危型HPV DNA的感染率高达50％，但HPV E6/E7 mRNA的检出率较低，说明此年龄段大部分HPV感染可以消退，只有少部分有恶性进展的风险；对于40岁以上妇女的HPV E6/E7 mRNA检测相对更有意义。随着年龄增加，高危型HPV DNA的阳性率有降低趋势，HPV E6/E7 mRNA的阳性率逐渐升高，40岁以上者中二者阳性率相近且差异无统计学意义，说明年龄较大者感染HPV后进展为恶性病变的风险相对较大，应尽早采取措施。
　　5.初步探讨
　　目前的问题是如何在宫颈癌筛查中最好地使用病毒检测这一技术。在临床实践中，存在HPV感染但未发生E6/E7癌基因的复制转录时，HPV DNA阳性但E6/E7mRNA阴性。还存在有些高级别SIL患者HPV检测为阴性，有些宫颈炎患者HPV检测则为阳性。考虑到试验方法的敏感度和特异度，对DNA结果阴性而阴道镜或TCT检查异常的患者也要引起注意。高危HPV阳性的患者在治疗前需在阴道镜下进行仔细评估，尤其是对想生育的育龄期女性，因为她们可能是HPV一过性感染[21]。
熊光武等[22]对宫颈癌标本进行HPV16 E6/E7基因DNA测序，发现E6/E7基因在癌症标本上的突变，这样可导致DNA探针失效，结合多顺反子转录原理，也许可以解释DNA检测阴性而mRNA检测阳性这一现象。bDNA 技术是一种全新的基于杂交信号放大的核酸检测技术，是否应该把E6/E7mRNA当作风险预测的指标，值得进一步研究。但是，有大量研究提出HPV E6/E7 mRNA检测可能更好地预测病情的进展，黄宝英等[23]研究认为E6/E7mRNA检测更适合筛查和随访观察。相信HPV E6/E7 mRNA 检测技术作为国际上HPV检测试剂的最新一代检测靶标，是一项很有前途的、值得推广的检测技术，尤其是对高危型HPV持续性感染者宫颈病变的诊断更具有实际的临床应用价值。随着国内外对HPV E6/E7mRNA 检测技术不断的深入研究，高危HPV E6/E7mRNA检测可能成为宫颈癌筛查的最首选方式之一。
　　【参考文献】
　　[1]Baussano I, Elfstrǒm KM，Lazzarato F,et al.Type-specific human papillomavirus biological features: Validated model-based estimates estimates[J].PLoS One, ): e81171.
　　[2]Monsonego J, Hudgens MG, Zerat L,et al. Risk assessment and clinical impact of liquid-based cytology，oncogenic human papillomavirus (HPV)DNA and mRNA testing in primary cervical cancer screening (theFASE study)[J].Gynecologic Oncology, ): 175-180.
　　[3]徐玉萍，苏慧茹，王峰.TCT结合阴道镜检查在宫颈病变中的应用价值[J].河北医药，):2211.
　　[4]Matah M, Sareen S. Detection of HPV by PCR-A novel step in the prevention of cancer cervix [J].The Journal of Obstetrics and Gunecology of India,): 188-191.
　　[5]Jaisamrarn U, Castellsagu& X, garland Sm, et al. Natural history of progression of HPV infection to cervical lesion or elearance: Analysis of the control arm of the large, randomized PATRICIA study [J].PLoS One, ):e79260.
　　[6]Burger EA, Kornor H, Klemp M, et al. HPV mRNA tests for the detection of cervical intraepithelial neoplasia: A systematic review [J]. Gynecologec Oncology, ):430-438.
　　[7] Cuschieri K, Wentzensen N. Human papillomavirus mRNA and p16 detection as biomarkers for the improved diagnosis of cervical Neoplasia [J]. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, ): .
　　[8]Lie AK, Kristensen G. Human papillomavirus E6/E7 mRNA testing as a predictive marker for cervical cancinoma[J].Expert RevMol Diagn, ):405-415.
　　[9]Andersson s, Hansson B,Norman I, et al.Expression of E6/E7 mRNA from high risk human papillomavirus in relation to CIN grade,viral load and p16INK4a[J].Int J Oncol,):705-711.
　　[10]Argyri E, Tsimplaki E, Daskalopoulou D, et al. E6/E7 mRNA xpression of high-risk HPV types in 849 Greek women[J].Anticancer Research, ):.
　　[11]Tjalma WA, Depuydt CE. Cervical cancer screening:which HPV test should be used&L1 or E6/E7 ?[J]. European Journal of Obstetrics ＆Gynecology and Reproductive Biology,):45-46.
　　[12]Molden T，Nygard JF，Kraus I，et al. Predicting CIN2+ when detecting HPV mRNA and DNA by PreTect HPV-proofer and consensus PCR:A 2-year follow-up of women with ASCUS or LSIL Pap smear[J]. Int J Cancer. ):973-976.
　　[13]徐瑛，黄丽丽.高危人乳头瘤病毒DNA及其E6/E7 mRNA对宫颈病变的影响[J].浙江医学，）：.
　　[14]刘桐宇，谢榕，郑雄伟，等．TCT标本检测高危HPV E6/E7 mRNA及在宫颈病变中的应用研究[J]．中华妇幼临床医学杂志（电子版），):202-205.
　　[15]王华，陈亚宝，叶丽华，等．应用支链DNA技术检测人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA在宫颈疾病筛查中的价值[J]．中华临床医师杂志（电子版），):．
　　[16]刘佳佳,冯姝,瞿全新,等.高危型人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA在宫颈病变筛查中的作用研究[J].中国全科医学，): .
　　[17]S?rbye SW, Arvyn M，Fismen S, et al.HPV E6/E7 mRNA testing is more specific than cytology in post-colposcopy follow-up of women with negative cervical biopsy [J] .PLoS One,):e26022.
　　[18]黄宝英,周伦顺,富显果,等. HPV E6/E7 mRNA检测对宫颈癌筛查意义的初步评价[J].中华肿瘤防治杂志，）：.
　　[19]赵方辉，章文华，潘秦镜等．宫颈癌多种筛查方案的研究[J]．中华肿瘤杂志，):420-424.
　　[20]周星，刘丽华，张金库等.宫颈脱落细胞HPV E6／E7 mRNA、HR&HPV DNA在宫颈病变筛查中的应用[J].山东医药，）：54-56.
　　[21] Liverani Ca, Clavattini A, Monti E, et al. High risk HPV DNA subtypes and E6/E7 mRNA expression in a cohort of colposcopy patients from Northern Italy with high-grade histologically verified cervical lesions[J]. AmJ Transl Res,):452-457.
　　[22]熊光武,袁杨,李萌,等．北京地区宫颈癌HPV16上游调控序列、E6、E7癌基因序列初步分析[J]．遗传,):339-347.
　　[23] 黄宝英，周伦顺，富显果等.HPV E6/E7mRNA检测对宫颈癌筛查意义的初步评价[J].中华肿瘤防治杂志，):.
您可能感兴趣的其他文章
&&站长推荐
&&期刊推荐
&&原创来稿文章
转寄给朋友
朋友的昵称:
朋友的邮件地址:
您的邮件地址:
写信给编辑
您的邮件地址:高危型人乳瘤头病毒是7.3是什么意思
高危型人乳瘤头病毒是7.3是什么意思
基本信息：女&&26岁
发病时间：最近一年
病情描述及疑问：高危型人乳瘤头病毒是7.3是什么意思
您输入的回答少于20个中文字，请补充输入。
擅长：对内儿科的常见病多发病能够做到诊断与治疗。
网友满意：
回答速度：
安徽合肥肥东县人民医院&&&儿科
建议：你好，你目前的检查，主要是由病毒感染，可以用阿昔洛韦等抗病毒，不改善可以行手术治疗处理。
吃过很多的药，也打了针。可是一点效果都没有，这个问题主要有什么症状？
你好，你目前没有效果的话，可以行手术治疗处理。
我注意的很好，是什么原因造成的呢？
你好，你最近有没有不洁性行为？如果有的话，可能是被感染的了。
我知道是由病毒感染的，可高危型人乳瘤头病毒是7.3是什么意思？因为高危型，低危型的数据都不在这里面
你好，说明病毒是属于比较高的，需要及时的抗病毒治疗。
有关的更多问题，
为保障患者权益，我们仅接受有资质的医学专业人士的回答，请您先认证为医生高危型人乳瘤病毒13型是什么意思
高危型人乳瘤病毒13型是什么意思
基本信息：女&&
发病时间：最近一个星期
病情描述及疑问：高危型人乳瘤病毒13型是什么意思
您输入的回答少于20个中文字，请补充输入。
副主任医师
擅长：不孕不育，流产
网友满意：
回答速度：
成都市第五人民医院,&&&全科
建议：高危型人乳瘤病毒13型是病毒感染的一种，需要积极抗病毒治疗，可以干扰素抗病毒治疗
擅长：尖锐湿疣、生殖器疱疹
网友满意：
回答速度：
上海73171部队医院&&&
建议：患者您好！人类乳头瘤病毒感染可能是发病率占第一位的性病。此感染的传播方式包括直接与间接传播，但以性接触最为常见，而且越是近期损害越有传染性，一次性接触估计有50%被传染的可能性;其次为直接非性接触，如自体传染以及新生儿经产道受染;再其次为间接接触，通过污染传染。
建议您尽早到正规专科医院详细诊断科学治疗。
&&&皮肤性病科_性病科
擅长：尖锐湿疣，生殖器疱疹
网友满意：
回答速度：
北京美迪皮肤性病医院&&&皮肤性病科_性病科
建议：你好，建议您及时到正规的国家专科医院进行治疗和确诊，以免延误病情，给您的身体健康造成更加严重的危害。一定要选择国家正规专科医院科学有效的新疗法，另辟蹊径，只有科学有效的治疗方法，才能彻底根治。祝您早日康复！
擅长：男女性生殖器疣、男女性病毒疣、宫颈疣、阴道疣等
网友满意：
回答速度：
湖南省交通厅直属医院&&&性病科
建议：性病是由人乳状瘤病毒感染引起的上皮增生性病变，为重要的性传播疾病之一。温暖潮湿的外阴皮肤粘膜利于其生长、繁殖，形成外阴或阴道性病。但是，并非所有的外阴赘生物全为性病，所以临床的病理诊断均需严格掌握标准。因此，如目前无症状，观察三个月以上，则可以判定临床好，不用特殊处理。
有关的更多问题，
有关的健康经验
有关的更多经验，
为保障患者权益，我们仅接受有资质的医学专业人士的回答，请您先认证为医生医院>男科医院
发表时间： 19:48&&
高危型人乳瘤头病毒35,59
年龄：25岁
病情描述及疑问：高危型人乳瘤头病毒dna检测报告结果6.5e+4，是什么意思有时候白带增多，偶尔肚子会疼 。高危型人乳瘤头病毒怎么办啊。
发病时间：不清楚
补充提问（补充提问细节，有助于医生为您详尽解答!）
关于 高危型人乳瘤头病毒35,59 相似问题
发表时间： 19:45
建议：高危型人乳瘤头病毒dna检测报告结果6.5e+4，就是有这样的病毒感染了，检查到的病毒数是65000，不算多的，所以传染性不强的。白带增多，偶尔肚子会疼；这些可能与感染这种病毒有关的。到妇科检查并咨询治疗方案。
评价成功! +1
发表时间： 19:45
建议：HPV感染生殖道是一个长期的过程，尖锐湿疣经过治疗后，如果机体免疫能力足够强大时，病毒经过1年-2年就会自然消失。如果免疫机能比较弱时病毒可潜伏在细胞内若干年，一旦机体免疫力降低，潜伏的病毒可恢复活动。HPV感染过程通常分为潜伏感染期、亚临床感染期、临床症状期和HPV相关的肿瘤期。宫颈癌也有一系列的前驱病变，即宫颈上皮不典型增生，在病理上称宫颈上皮内瘤变（CIN），通常又根据严重程度分成三级：宫颈上皮内轻度瘤变（CIN I）、宫颈上皮内中度瘤变（CIN II）和宫颈上皮内高度瘤变（CIN III），这些癌前病变均有可能发展为宫颈浸润癌。
评价成功! +1
十大 尖锐湿疣 相关搜索
十大 免疫力降低 相关搜索
十大 宫颈癌 相关搜索
想了解提问步骤？请查看　 　
回复内容不能少于20个汉字！
我来回答（您的热心回复将给予患者非常有用的指导）
问题已经结束，欢迎继续讨论！
（Ctrl+Enter快速提交）
最热议的10大问题
高危型人乳瘤... 相关专题
记住我的登录状态
你还可以选择：
还没有帐号？　
经典答案设置提示
成功设置经典答案！
您当前投诉的是网友的提问
投诉类型：
无意义提问
投诉类型：
无意义回答
附加说明：
请放心，您的隐私将得到保护
您的投诉已受理，请耐心等待管理员审核，感谢您对39健康问答的帮助。
系统出错，请稍后再试，谢谢！
问题收藏提示
您成功收藏了该问题！