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汉防己碱药理作用及抗埃博拉病毒活性研究进展Progress in Research of Activity of Anti-Ebola Virus and Effect of Pharmacology of Tetrandrine
DOI: , PP. 136-165
Keywords: 埃博拉病毒，双孔通道(TPCs)，汉防己甲素(Tet)，苄基异奎琳，钙离子拮抗剂Ebola Virus,,,,
埃博拉病毒是世界上最具威胁的病原体之一，日始于西非几内亚的埃博拉病(Ebola virus diseases, EVD)，是记载以来最严重的一次爆发。目前缺乏有效的治疗药物，研究发现埃博拉病毒通过胞内钙双孔通道(TPCs)释放基因组来完成病毒复制，汉防己甲素通过阻断胞内钙双孔通道(TPCs)来阻止埃博拉病毒基因组的释放从而阻止了病毒的复制。本文综述汉防己甲素(Tet)的抗埃博拉病毒的药理作用和作用机制及其它方面的药理活性；汉防己碱(Tet)肌松药中的苄基异奎琳的结构改造合成。同时展望了目前几种待进一步研究的钙离子拮抗剂包括钙双孔通道(TPCs)阻断剂如维拉帕米等应用于抗埃博拉病毒药物的可能性，为进一步推进汉肌松类药物深入研究提供重要参考。The Ebola virus is one of the world’s most threatening pathogens. Ebola virus disease (EVD) which began in 13 September 2013 in Guinea, West Africa was the worst breakout since its first outbreak. Up till now we lack effective drugs. Some studies have found the Ebola virus completed virus rep-lication by endosomal calcium channels called two-pore channels (TPCs) release genome, and by blocking endosomal calcium channels TPCs, tetrandrine (Tet) prevented the release of the Ebola virus genome in order to stop the replication of the virus. Pharmacological effect and mechanism of action and other pharmacological activities of Tet in anti-Ebola virus in this review were sum- Tet as muscle loose medicine of the structure of benzylisonicotinamide was transformed and synthesized. At the same time, the prospects of several pending further study of calcium antagonists including blocking calcium TPCs such as verapamil applied for the possibility of anti-Ebola virus drugs were discussed, which provided important references for promoting the in-depth study of those muscle relaxant drugs.
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葛根素、丹参注射液、川芎嗪对MCAO大鼠血浆6-keto-PGF_(1α)、TXB_2、NO、ET的影响
【摘要】：目的：研究ｉｖ 葛根素、川芎嗪 、丹参 注射液对大脑中动 脉结扎（
Ｍ Ｃ Ａ Ｏ） 后大鼠血 浆６?ｋｅｔｏ? Ｐ Ｇ Ｆ１α、 Ｔ Ｘ Ｂ２ 、 Ｎ Ｏ、 Ｅ Ｔ 的影响。方法：大鼠结扎大脑中动脉造成实验性脑缺血，ｉｖ 上述药物 １４ 天，应用 放免法及 硝酸酶还原法测定上述指标。结果：ｉｖ 葛 根素（５０ ｍ ｇ／ ｋｇ） 、丹参注射液（１?５ｇ／ｋｇ） 、川芎嗪（２０ ｍ ｇ／ｋｇ） 均可增加
Ｍ Ｃ Ａ Ｏ 后６?ｋｅｔｏ? Ｐ Ｇ Ｆ１α与
Ｔ Ｘ Ｂ２ 比例，降低血浆
Ｅ Ｔ 的含量，葛根素还可明显降低血浆
Ｎ Ｏ 的浓度。结论： 上述药物 调节脑血流量改善微循环作用，主要与其对６?ｋｅｔｏ? Ｐ Ｇ Ｆ１α、 Ｔ Ｘ Ｂ２ 、 Ｎ Ｏ、 Ｅ Ｔ 的调节有关 。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R277.7【正文快照】：
脑血管疾病是临床上的常见病及多发病，脑血栓及脑出血患者均有血栓素（ＴＸＡ２）的升高和前列环素（ＰＧＩ２）的降低［１，２］及一氧化氮（ＮＯ）和内皮素的升高（ＥＴ）［３，４］。葛根素、丹参注射液、川芎嗪是目前临床治疗脑缺血性疾病的常用药物［５］，但有关静脉注
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丹参川芎嗪注射液合活血安脑汤治疗急性脑梗死36例的疗效观察
目的:观察具有抗凝、抗血小板作用的中药针剂及活血化瘀通络、化痰熄风止痉类中药配伍治疗急性脑梗死的临床疗效.方法:治疗组采用口服活血安脑汤(丹参、川芎、全蝎、水蛭及瓜蒌等)合静点丹参川芎嗪注射液(贵州拜特制药有限公司生产).对照组口服脑血栓片及静点葛根素注射液.结果:治疗组36例,总有效率86.1％,总显效率63.9％；对照组36例,总有效率72.2％,总显效率44.4％,P＜0.05.两组治疗后NFDS评分均较治疗前降低,Barthel指数均较治疗前增高,差异有统计学意义.治疗后治疗组NFDS评分低于对照组,Barthel指数高于对照组,差异有统计学意义.结论:丹参川芎嗪注射液合自拟活血安脑汤治疗急性脑梗死,能显著改善临床症状,提高日常生活活动能力,改善神经功能缺损程度的作用.
作者单位：
西安市阎良区人民医院,陕西西安,710089
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高效毛细管电泳在中药制剂分析中的应用
作者：张淑蓉　裴香萍
【关键词】& 高效毛细管电泳
&&& 【摘要】& 简要介绍了高效毛细管电泳的分离模式、分析特点及应用前景，详细综述了近年来HPCE在中药制剂分析中的应用。
　　【关键词】& 高效毛细管电泳；毛细管区带电泳；胶束电动毛细管色谱；中药制剂&&& &&& 高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE）是20世纪80年代发展起来的一类新的分离分析方法。由于其具有分析效率高、分析速度快、运行费用低、溶剂消耗小、对环境几乎无污染等突出优点，不仅广泛用于生物大分子如核酸、多肽和蛋白质等的分析，在复杂的中药有效成分分析方面也显示出较强的优势。近年来HPCE在中药制剂分析中的应用也越来越多并取得了令人满意的结果，本文对其综述如下。
　　1& 高效毛细管电泳的分离模式
　　高效毛细管电泳是经典电泳技术和现代微柱分离相结合而形成的分离分析技术。其分离模式主要有毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis，CZE)、胶束电动毛细管色谱（micellar electrokinetic capillary chromatography，MECC）、毛细管等速电泳(capillary iso-tachophoresis，CITP)、毛细管凝胶电泳(capillary gel electrophoresis，CGE)、毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing，CIEF)及毛细管电色谱(capillary electrochromatography，CEC)等。
　　在中药制剂分析中应用较多的是CZE和MECC。CZE是高效毛细管电泳的最基本模式，它是将样品通过充满缓冲溶液的毛细管，依靠样品中不同荷质比大小的组分在外加电场作用下迁移速度的不同而进行分离。CZE只能用于带电离子的分离，不能分离中性粒子。MECC是将一些离子型表面活性剂(如十二烷基硫酸钠，简称SDS) 加到缓冲液中，形成有一疏水内核的胶束，待测组分依据疏水性的不同在水相和胶束之间进行多次分配，依其分配系数的不同而达到分离的目的。MECC是电泳和色谱技术的巧妙结合，不仅能分离带电离子，对中性化合物也有较好的分离效果，在中药制剂分析中有广阔的发展空间。
　　2& 高效毛细管电泳在中药制剂分析中的应用
　　2.1& 丸剂& 张国华等［1］采用CZE测定香连丸、二妙丸、朱砂安神丸、牛黄上清丸和黄连上清丸中小檗碱、巴马汀、药根碱的含量。电泳条件：毛细管57cm（有效长度50cm）×75μm；缓冲液为60mmol/L磷酸氢二钠（磷酸pH 7.0）-甲醇（65∶35）；运行电压14kV；柱温30℃；低压进样2s；检测波长254nm。陈勇川等［2～5］采用CZE测定八珍丸、八珍益母丸、麻仁丸、除湿白带丸、逍遥丸、加味逍遥丸及白芍总苷胶囊中芍药苷的含量。电泳条件：毛细管50cm（有效长度45.5cm）×50μm；缓冲液为50mmol/L硼砂溶液（氢氧化钠调pH 10.6）；运行电压20kV；柱温20℃；压力进样10psi×s；检测波长230nm。
　　2.2& 胶囊剂& 陈勇川等［6］采用CZE测定麻附胶囊中麻黄碱和伪麻黄碱的含量。电泳条件：毛细管50cm(有效长度45.5cm)×50μm；缓冲液为0.01mol/L缬氨酸溶液(氨水调pH 10.5)；运行电压20kV；柱温25℃；压力进样10psi×s；检测波长190nm。张琦等［7］采用CZE测定脑得生胶囊中葛根素的含量。电泳条件：毛细管64.5cm（有效长度56cm）×75μm；缓冲液为硼酸-硼砂缓冲系统（pH 9.24）；运行电压15kV； 柱温20℃；压力进样20kPa?s；检测波长261nm；对羟基苯甲酸乙酯为内标。张琦等［8］采用CZE测定清经胶囊中小檗碱的含量。电泳条件：毛细管58.5cm（有效长度50cm）×75μm；缓冲液为0.2mol/L乙酸钠-甲醇（8：2）；运行电压15kV；柱温25℃；压力进样20kPa?s；检测波长265nm；甲基三苯基磷碘化合物为内标。
　　2.3& 片剂& 林梅等［9］采用CZE分离测定颠茄片和颠茄酊剂中莨菪类生物碱的含量。电泳条件： 毛细管40cm×50μm；缓冲液为50mmol/L磷酸盐溶液(pH 8.0)-四氢呋喃（9：1）；运行电压11kV；柱温24℃；电迁移进样5kV×5s；检测波长200nm；麻黄碱为内标。孙立华等［10，11］采用CZE测定脑得生片及正泰胶囊中葛根素的含量。电泳条件：毛细管77cm×75μm；缓冲液为30mmol/L硼砂溶液（pH 9.37）；运行电压30kV；压力进样5s；柱温25℃；检测波长254nm；双氯灭痛为内标。邱涵等［12］采用MECC测定克炎肿片中维脑路通和香豆素的含量。电泳条件： 毛细管柱50.2cm（有效长度40cm）×75μm；缓冲液为25mmol/L硼砂-硼酸缓冲液(pH 9.2)；内含30mmol/L SDS及10%乙腈；运行电压20kV；压力进样3.5kPa×5s；柱温24℃；检测波长214nm；布洛芬为内标。尹茶等［13］采用MECC测定维C银翘片中维生素C、扑尔敏、扑热息痛和绿原酸的含量。电泳条件：毛细管柱60cm（有效长度55cm）×75μm；缓冲液为20mmol/L硼砂溶液(pH 9.11)；内含40mmol/L SDC（脱氧胆酸钠）；运行电压20kV；虹吸进样5s；柱温25℃；检测波长254nm；肉桂酸为内标。
　　2.4& 合剂和口服液& 梁东升等［14］采用CZE测定止咳合剂中甘草酸的含量。电泳条件： 毛细管100cm×75μm；缓冲液为30mmol/L硼砂溶液；运行电压25kV；重力进样10s；柱温25℃；检测波长254nm；双氯灭痛为内标。杨更亮等［15］采用MECC测定安神补脑液中淫羊藿苷的含量。电泳条件：毛细管55cm×75μm；缓冲液为25mmol/L磷酸盐缓冲液-10mmol/L SDS；运行电压15kV；重力进样2s；柱温25℃。
　　2.5& 颗粒剂和冲剂& 茅向军等［16］采用CZE测定热淋清颗粒和胶囊中没食子酸的含量。电泳条件： 毛细管柱80cm（有效长度57cm）×75μm；缓冲液为15mmol/L硼砂溶液（硼酸调pH 9.8）；运行电压20kV；压力进样8s；柱温25℃；检测波长215nm；苯甲酸钠为内标。杨新等［17］采用CZE测定银黄冲剂中黄芩苷和绿原酸的含量。电泳条件：毛细管47cm（有效长度40cm）×50μm， 缓冲液为25mmol/L硼砂溶液(pH 8.5)；运行电压25kV；17kPa?s压力进样；柱温25℃；检测波长310nm；对硝基苯甲酸为内标。郑文捷等［18，19］采用MECC测定决明子茶、青海野生大黄茶中大黄素、芦荟大黄素、大黄酸的含量。电泳条件： 毛细管50cm（有效长度42.4cm）×75μm；缓冲液为15mmol/L硼砂溶液-30mmol/L SDS-10%乙醇（pH 9.6）；运行电压20kV；压力进样5s；柱温25℃；检测波长254nm；苯甲酸钠为内标。
　　2.6& 注射液& 蔡梅等［20］采用CZE测定香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量。电泳条件：毛细管27cm×75μm；缓冲液为20mmol/L硼砂溶液-3mmol/L β-CD（pH 9.0）；运行电压6kV；压力进样5s；柱温25℃；检测波长209nm；苯甲酸为内标。许平波等［21］采用CZE测定川芎注射液中川芎嗪的含量。电泳条件：毛细管57cm（有效长度50cm）×50μm；缓冲液为15mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.6)；运行电压30kV（运行电流25～30μA）；压力进样5s；柱温23℃；检测波长280nm；氨茶碱为内标。饶毅等［22］采用CZE测定灯盏花素注射液和灯盏花素片中灯盏花乙素的含量。电泳条件：毛细管57cm（有效长度50cm）×50μm；缓冲液为40mmol/L硼砂溶液(磷酸调节pH 8.5) ，运行电压20kV，压力进样2s；检测波长280nm；柱温25℃；芦丁为内标。施军霞等［23］采用MECC测定甘草注射液中甘草酸的含量。电泳条件：毛细管57cm（有效长度50 cm）×50μm；缓冲液为10mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.0)中含12.5mmol/L SDS；运行电压30kV（运行电流40～50μA）；压力进样10s；检测波长254nm，柱温21℃；氨茶碱为内标。
　　2.7& 其他剂型& 于燕莉等［24］采用CZE测定痹痛宁贴剂中东莨菪碱、乌头碱的含量。电泳条件：毛细管32cm (有效长度23.5cm)×50μm；缓冲液为50mmol/L磷酸盐缓冲液（pH 6.0，含20%无水乙醇)；压力进样2kPa×5s；运行电压8kV；柱温30℃；检测波长200nm。 郭丹等［25］采用CZE测定生发灵酊中阿魏酸和大黄酸的含量。电泳条件：毛细管60cm(有效长度53cm)×75μm；缓冲液为30mmol/L硼砂溶液（pH8.2)；运行电压12kV；压力进样5s；柱温25℃；检测波长313nm；咖啡酸为内标。王桂芳等［26］采用CZE测定夜安洗液中槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱的含量。电泳条件： 毛细管64.5cm×75μm；缓冲液为60mmol/L硼砂溶液（pH 8.13)；压力进样15s；柱温25℃；检测波长200nm；氯霉素为内标。晏媛等［27］采用CZE测定妇洁灌肠液中咖啡酸的含量。电泳条件：毛细管60cm×75μm；缓冲液为20mmol/L硼砂溶液（pH 9.18）；运行电压12kV；柱温25℃；真空进样5s；检测波长313nm。张艳等［28］ 采用MECC测定膀胱冲洗液瞿黄液中大黄素、大黄酚、大黄酸和大黄素甲醚的含量。电泳条件：毛细管56cm×50μm；缓冲液为0.05mol/L SDS、0.1mol/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris)、0.03mol/L磷酸氢二钠，pH 8.2；运行电压25kV；进样量10kPa/s；柱温25℃；检测波长254nm；对氨基苯磺酸为内标。许重远等［29］采用MECC测定甘草栓中甘草酸和甘草次酸的含量。电泳条件：毛细管60cm×75μm，缓冲液为25mmol/L硼砂溶液-100mmol/L SDS；运行电压20kV；重力进样10s；柱温25℃；检测波长为254nm；双氯芬酸钠为内标。
　　3& 展望
　　HPCE在中药制剂分析中的应用虽然起步较晚，但发展非常迅速。与中药制剂分析中广泛使用的HPLC相比，测定结果差异没有显著性［2，4，7，8，9］，但却具有分离效率高、分析速度快、分析时间短、样品前处理简便、进样量少、有机溶剂消耗少、操作简便、分析成本低等优点。另外，HPCE在中药复方制剂复杂成分分析中还具有以下优越性：(1)毛细管柱易于全面清洗，可保持高柱效而使复杂成分较好分离；(2)分离模式多，适合于中药制剂中各类化学成分的分析；(3)不同电泳技术之间及HPCE与HPLC、NMR、MS等多种技术联用可提高分析的精密度，更可拓宽其应用范围。因此，HPCE在中药制剂质量控制及中药现代化进程中必将发挥巨大作用。
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　　作者单位： 030024 山西太原，山西中医学院
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